Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев
В работе показана возможность увеличения количества быстрых спермиев, получаемых методом всплывания (“swim up”) из эякулята человека при нормоспермии и нарушениях сперматогенеза для вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), путем добавления в среду выделения активно-подвижных гамет 20%-й фолл...
Gespeichert in:
| Datum: | 2004 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України
2004
|
| Schriftenreihe: | Проблемы криобиологии и криомедицины |
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/139849 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев / Е.А. Яковлева, Г.Г. Юрченко, М.И. Крамар, А.Г. Геродес // Проблемы криобиологии. — 2004. — № 4. — С. 51–55. — Бібліогр.: 3 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-139849 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1398492025-02-09T12:40:51Z Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев Effect of Cryopreserved Human Follicular Fluid on Spermatozoa Kinetic Activity Яковлева, Е.А. Юрченко, Г.Г. Крамар, М.И. Геродес, А.Г. Теоретическая и экспериментальная криобиология В работе показана возможность увеличения количества быстрых спермиев, получаемых методом всплывания (“swim up”) из эякулята человека при нормоспермии и нарушениях сперматогенеза для вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), путем добавления в среду выделения активно-подвижных гамет 20%-й фолликулярной жидкости (ФЖ), криоконсервированной по одноэтапной программе. Установлено, что эффективность метода одинакова при использовании ФЖ, хранившейся в жидком азоте 1 и 6 мес. Это открывает возможность создания криобанка ФЖ для применения в репродуктологии при лечении бесплодия методами ВРТ. У роботі показана можливість збільшення кількості швидких сперміїв, одержаних методом спливання (“swim up”) з еякуляту людини при нормоспермії та порушеннях сперматогенезу для допоміжних репродуктивних технологій, шляхом добавлення в середовище спливання активно-рухомих гамет 20%-ї фолікулярної рідини (ФР), кріоконсервованої за одноетапною програмою. Встановлено, що ефективність методу однакова при використанні ФР, що зберігалася в рідкому азоті 1 або 6 міс. Це відкриває можливості створення кріобанку ФР для застосування в репродуктології при лікуванні безплідності методами ВРТ. The research deals with the possibility of increasing the number of active rapidly moving spermatozoa, derived by swim-up method from human ejaculate at normospermia and spermatogenesis disorders for assisting reproductive technologies (ART) by adding 20% follicular fluid (FF) into swim-up medium for active rapidly moving gametes. FF was cryopreserved by one-stage program. It was established that the method efficiency was equal both when using FF been kept in liquid nitrogen during 1 and 6 months period. This provides the possibility to establish the FF cryobank for using in reproductology during infertility treatment by ART methods. 2004 Article Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев / Е.А. Яковлева, Г.Г. Юрченко, М.И. Крамар, А.Г. Геродес // Проблемы криобиологии. — 2004. — № 4. — С. 51–55. — Бібліогр.: 3 назв. — рос. 0233-7673 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/139849 615.014.41:611.65.15:612.616 ru Проблемы криобиологии и криомедицины application/pdf Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Теоретическая и экспериментальная криобиология Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| spellingShingle |
Теоретическая и экспериментальная криобиология Теоретическая и экспериментальная криобиология Яковлева, Е.А. Юрченко, Г.Г. Крамар, М.И. Геродес, А.Г. Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев Проблемы криобиологии и криомедицины |
| description |
В работе показана возможность увеличения количества быстрых спермиев, получаемых методом всплывания (“swim up”) из эякулята человека при нормоспермии и нарушениях сперматогенеза для вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), путем добавления в среду выделения активно-подвижных гамет 20%-й фолликулярной жидкости (ФЖ), криоконсервированной по одноэтапной программе. Установлено, что эффективность метода одинакова при использовании ФЖ, хранившейся в жидком азоте 1 и 6 мес. Это открывает возможность создания криобанка ФЖ для применения в репродуктологии при лечении бесплодия методами ВРТ. |
| format |
Article |
| author |
Яковлева, Е.А. Юрченко, Г.Г. Крамар, М.И. Геродес, А.Г. |
| author_facet |
Яковлева, Е.А. Юрченко, Г.Г. Крамар, М.И. Геродес, А.Г. |
| author_sort |
Яковлева, Е.А. |
| title |
Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев |
| title_short |
Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев |
| title_full |
Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев |
| title_fullStr |
Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев |
| title_full_unstemmed |
Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев |
| title_sort |
влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев |
| publisher |
Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України |
| publishDate |
2004 |
| topic_facet |
Теоретическая и экспериментальная криобиология |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/139849 |
| citation_txt |
Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости человека на кинетическую активность спермиев / Е.А. Яковлева, Г.Г. Юрченко, М.И. Крамар, А.Г. Геродес // Проблемы криобиологии. — 2004. — № 4. — С. 51–55. — Бібліогр.: 3 назв. — рос. |
| series |
Проблемы криобиологии и криомедицины |
| work_keys_str_mv |
AT âkovlevaea vliâniekriokonservirovannojfollikulârnojžidkostičelovekanakinetičeskuûaktivnostʹspermiev AT ûrčenkogg vliâniekriokonservirovannojfollikulârnojžidkostičelovekanakinetičeskuûaktivnostʹspermiev AT kramarmi vliâniekriokonservirovannojfollikulârnojžidkostičelovekanakinetičeskuûaktivnostʹspermiev AT gerodesag vliâniekriokonservirovannojfollikulârnojžidkostičelovekanakinetičeskuûaktivnostʹspermiev AT âkovlevaea effectofcryopreservedhumanfollicularfluidonspermatozoakineticactivity AT ûrčenkogg effectofcryopreservedhumanfollicularfluidonspermatozoakineticactivity AT kramarmi effectofcryopreservedhumanfollicularfluidonspermatozoakineticactivity AT gerodesag effectofcryopreservedhumanfollicularfluidonspermatozoakineticactivity |
| first_indexed |
2025-11-26T00:11:21Z |
| last_indexed |
2025-11-26T00:11:21Z |
| _version_ |
1849809577059549184 |
| fulltext |
51ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №4
УДК 615.014.41:611.65.15:612.616
Влияние криоконсервированной фолликулярной жидкости
человека на кинетическую активность спермиев
Е.А. ЯКОВЛЕВА, Г.Г. ЮРЧЕНКО, М.И. КРАМАР, А.Г. ГЕРОДЕС
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, г. Харьков
Effect of Cryopreserved Human Follicular Fluid
on Spermatozoa Kinetic Activity
E.A. YAKOVLEVA, G.G. YURCHENKO, M.I. KRAMAR, A.G. GERODES
Institute for Problems of Cryobiology and Cryomedicine of the National Academy
of Sciences of the Ukraine, Kharkov
В работе показана возможность увеличения количества быстрых спермиев, получаемых методом всплывания (“swim up”)
из эякулята человека при нормоспермии и нарушениях сперматогенеза для вспомогательных репродуктивных технологий
(ВРТ), путем добавления в среду выделения активно-подвижных гамет 20%-й фолликулярной жидкости (ФЖ),
криоконсервированной по одноэтапной программе. Установлено, что эффективность метода одинакова при использовании
ФЖ, хранившейся в жидком азоте 1 и 6 мес. Это открывает возможность создания криобанка ФЖ для применения в
репродуктологии при лечении бесплодия методами ВРТ.
Ключевые слова: фолликулярная жидкость, криоконсервирование, эякулят, спермии, метод всплывания, нормоспермия,
астеноспермия, олигоастеноспермия, вспомогательные репродуктивные технологии.
У роботі показана можливість збільшення кількості швидких сперміїв, одержаних методом спливання (“swim up”) з еякуляту
людини при нормоспермії та порушеннях сперматогенезу для допоміжних репродуктивних технологій, шляхом добавлення в
середовище спливання активно-рухомих гамет 20%-ї фолікулярної рідини (ФР), кріоконсервованої за одноетапною програмою.
Встановлено, що ефективність методу однакова при використанні ФР, що зберігалася в рідкому азоті 1 або 6 міс. Це відкриває
можливості створення кріобанку ФР для застосування в репродуктології при лікуванні безплідності методами ВРТ.
Ключові слова: фолікулярна рідина, кріоконсервування, еякулят, спермії, метод спливання, нормоспермія, астеноспермія,
олігоастеноспермія, допоміжні репродуктивні технології.
The research deals with the possibility of increasing the number of active rapidly moving spermatozoa, derived by swim-up
method from human ejaculate at normospermia and spermatogenesis disorders for assisting reproductive technologies (ART) by
adding 20% follicular fluid (FF) into swim-up medium for active rapidly moving gametes. FF was cryopreserved by one-stage
program. It was established that the method efficiency was equal both when using FF been kept in liquid nitrogen during 1 and 6
months period. This provides the possibility to establish the FF cryobank for using in reproductology during infertility treatment by
ART methods.
Key-words: follicular fluid, cryopreservation, ejaculate, spermatozoa, swim-up method, normospermia, asthenospermia,
oligoasthenospermia, assisting reproductive technologies.
UDC 615.014.41:611.65.15:612.616
Адрес для корреспонденции: Юрченко Г.Г., Институт проблем
криобиологии и криомедицины НАН Украины, ул. Переяславская,
23, г. Харьков, Украина 61015; тел.:+38 (057) 772-11-19, факс: +38
(057) 772-00-84, e-mail: cryo@online.kharkov.ua
Address for correspondence: Yurchenko G.G., Institute for Problems
of Cryobiology&Cryomedicine of the Natl. Acad. Sci. of Ukraine, 23,
Pereyaslavskaya str.,Kharkov, Ukraine 61015; tel.:+380 57 772 1119,
fax: +380 57 772 0084, e-mail:cryo@online.kharkov.ua
Эффективность ВРТ определяется прежде
всего биологической полноценностью как женских,
так и мужских гамет. Для лечения бесплодия, в
том числе и в случаях, когда в браке оно связано с
мужским фактором (концентрация спермиев в
эякуляте – 10-15 млн и общий пул гамет менее 40
млн; отсутствие или незначительное содержание
спермиев с быстрым поступательным движением,
а также при наличии антиспермальных ауто-
антител), применяется один из методов ВРТ –
искусственная внутриматочная инсеминация спер-
мой мужа.
При этом используются различные методы
повышения биологической полноценности спер-
миев. В частности, методом всплывания (swim up)
[2] выделяется подвижная фракция спермиев из
эякулята мужа для последующего проведения
внутриматочной инсеминации жене. Получив
ART efficiency is determined first of all by biological
integrity of both female and male gametes. During
infertility treatment, including the cases when in
marriage it is assocoated with male (spermatozoa
concentration in ejaculate of 10-15 mln and total
gametes’ pool is less than 40 mln; absence or low
content of spermatozoa with fast forward movement,
presence of antispermal autoantibodies as well), one
of the ART methods is used, artificial intrauterine
insemination by husband’s sperm.
Various methods are used to increase the sper-
matozoa biological integrity. In particular, by swim-up
method [2] motile spermatozoa fraction is isolated from
husband’s ejaculate for further intrauterine insemination
to wife. During centrifugation of cellular ejaculate
sediment, the nutrient medium is arranged on it in layers
for the swimming up of motile gametes. To increase
the isolation efficiency of motile spermatozoa fraction
52ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №4
путем центрифугирования клеточный осадок
эякулята, наслаивают на него питательную среду
для всплывания подвижных гамет. Для повышения
эффективности выделения подвижной фракции
спермиев применяют различные фармакологи-
ческие препараты: пентоксифиллин, кофеин, цито-
хром С и другие. Однако проблема получения
достаточного количества быстрых спермиев для
внутриматочной искусственной инсеминации спер-
мой мужа остается актуальной.
Было предложено в среду всплывания спер-
миев добавлять 50% ФЖ человека, криоконсер-
вированной с применением двухэтапного режима
замораживания [1].
Учитывая, что ФЖ является дефицитным
материалом, который можно получить только в
программе экстракорпорального оплодотворения,
целью данной работы было выяснить возмож-
ность снижения концентрации ФЖ в среде выде-
ления подвижных спермиев из эякулята без
снижения эффективности метода swim up и
упрощения способа её криоконсервирования.
Материалы и методы
Материалом исследования служили эякуляты
мужчин из бесплодных супружеских пар с нормо-,
астено- и олигоастеноспермией.
Эякуляты получали путем мастурбации после
3-5 дней сексуального воздержания. При исследо-
вании эякулятов руководствовались рекомен-
дациями ВОЗ [3]. После полного разжижения в
термостате при 37°С исследование проводили с
помощью оптического микроскопа с увеличением
в 200, 400, 1000. При определении концентрации и
подвижности спермиев использовали счётную
камеру Makler. Для выделения подвижной фракции
спермиев из эякулята применяли метод всплывания
в нашей модификации, позволяющей получить пул
подвижных гамет, состоящий преимущественно из
клеток с быстрой подвижностью.
Фолликулярную жидкость получали путём
трансвагинальной пункции фолликулов яичников
под контролем УЗИ в программе экстракорпо-
рального оплодотворения и использовали после
выделения из нее яйцеклеток и последующего
однократного центрифугирования в течение 10 мин
при 1500 об/мин. Все образцы использованной ФЖ
соответствовали по биологическим характеристи-
кам жидкости овуляторного периода организма
пациенток.
Результаты и обсуждение
Работа состояла из 3-х серий экспериментов.
В первой серии изучали возможность повысить
эффективность выделения подвижных спермиев с
various pharmacological preparations: pentoxifylline,
caffeine, cytochrome C, etc. are used. But the problem
of receiving sufficient number of fast spermatozoa for
artificial intrauterine insemination by husband’s sperm
has remained as actual.
The cryopreserved under two-stage freezing
regimen human FF of 50% was proposed to be added
into sperm swimming up medium [1].
Taking into account that FF is deficit material, which
can be obtained only in IVF program, the aim of this
work is to investigate the possibility to decrease FF
concentration in the isolation medium of fast sper-
matozoa ejaculate without a decrease of swim-up
method efficiency and its cryopreservation way simp-
lification.
Materials and methods
Ejaculates of men from infertile couples with
normoastheno- and oligoasthenospermia served as a
research material.
Ejaculates were obtained by masturbation after 3-5
days of sexual abstention. The WHO recommen-
dations were followed during the ejaculates examining
[3]. After full rarefaction in thermostat at 37°C the
investigation was performed by optical microscope with
×200, 400, 1000 magnification. When determining the
spermatozoa concentration and motility we used Makler
counting chamber. For motile fraction isolation from
ejaculate swim-up method in our modification was
used, which allows to obtain motile gametes pool, mainly
consisting of cells with fast motility.
Follicular fluid was received by transvaginal punc-
ture of ovary follicles under ultrasound control in the
IVF program and was used after isolation of ova from
it with further single centrifugation for 10 minutes at
1500 rpm. All the samples of used FF corresponded to
biological characteristics of ovulatory period fluid of
patients’ organism.
Results and discussion
The work consisted of 3 experimental series. In
the first one there was studied the possibility to increase
the fast spermatozoa isolation efficiency by means of
FF adding into the swim-up medium under concen-
tration lower than 50%. Ejaculates of 4-6 ml were used,
each of them was divided into 4 sample groups, equal
on volume.
During isolation of motile gametes fraction from
the 1st group samples we did not add FF into the
isolation medium, for the 2nd group samples we added
10% FF, for the 3rd group there were added 20% FF
and to the 4th group we added 50% FF. The inves-
tigation results are presented in the Table 1.
Table 1 shows that, FF adding into isolation medium
of motile gametes in all the cases significantly increased
53ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №4
помощью добавления в среду всплывания ФЖ в
концентрации менее 50%. Использовали эякуляты
объемом 4-6 мл, каждый из которых разделяли на
4 равных по объему группы образцов.
При выделении подвижной фракции гамет из
образцов 1-й группы в среду выделения ФЖ не
добавляли, при работе с образцами 2-й группы
добавляли 10%, 3-й группы – 20% и 4-й группы –
50% ФЖ. Результаты исследования приведены в
табл.1.
Как видно из табл. 1, добавление ФЖ в среду
выделения подвижных гамет во всех случаях
достоверно повышало содержание быстрых
спермиев в среде. При этом содержание подвиж-
ных спермиев в 3-й и 4-й группах было достоверно
выше, чем в 1-й и 2-й.
При сравнении показателей 3-й и 4-й групп
достоверных различий между ними выявлено не
было (р>0,05), т.е. эффективность метода выде-
ления кинетически активных гамет при добав-
лении в среду выделения 20 или 50% нативной ФЖ
одинакова. Поэтому в дальнейших исследованиях
применяли ФЖ в конечной концентрации 20%.
Во второй серии экспериментов использовали
ФЖ, хранившуюся в жидком азоте. В ранее
предложенном методе [1] применяли двухэтапный
режим замораживания с охлаждением на 1-м этапе
со скоростью 3°С/мин, на 2-м – со скоростью
400°С/мин с последующим хранением в жидком
азоте (–196°С). В данном исследовании применяли
одноэтапный режим с использованием прямого
погружения в жидкий азот (скорость 400°С/мин).
С этой целью ФЖ делили на два образца. Первый
образец замораживали по одноэтапному режиму,
Таблица 1. Эффективность выделения подвижной фракции спермиев из эякулята в среде, содержащей нативную ФЖ
Table 1. Efficiency of motile spermatozoa fraction isolation from ejaculate in the medium, containing native FF.
еиняотсоС
азенеготамрепс
вотнеицап
'stneitaP
etatssisenegotamreps
атялукяэакитсиреткараХ
sсitsiretcarahcetalucajE
йортсыбстемагиицкарфйоннеледывеинажредоС
%,юьтсонживдопйоньлетапутсоп
detalosiniytilitomdrawroftsafhtiwsetemagfotnetnoC
%,noitcarf
яицартнецнок
,веимрепс
лм/нлм
aozotamreps
,noitartnecnoc
lm/nlm
еонраммус
темагеинажредос
%,"б"и"а"
fotnetnoclatot
%,'b'dna'a'setemag
овтсечилок
вотялукяэ
forebmun
setalucaje
вотялукяэыппурГ
setalucajefospuorG
1 2 3 4
яимрепсомроН
aimrepsomroN 8,5+7,15 9,4±8,35 73 5,3+8,57 1,4±5,48
1 2,6±4,79 2,1 б,5±8,59 2,1
яимрепсонетсА
aimrepsonehtsA 4,3+6,23 3,3±2,73 14 2,3+1,66 3,5±8,17
1 1,6±2,58 2,1 2,7±9,48 2,1
яимрепсонетсаогилО
aimrepsonehtsaogylO 3,1+2,41 7,2+3,92 33 8,3±2,65 6,4±1,66
1 2,7+3,67 2,1 1,6+2,77 2,1
Примечания: 1 – р<0,05 при сравнении с показателями 1-й группы; 2 – р<0,05 при сравнении с показателями 2-й группы;
гаметы “а” – с быстрой поступательной подвижностью, “б”– с медленной.
Notes: 1 – p <0.05 when comparing with data of 1st group; 2 – p<0.05 when comparing with data of 2nd group indices; “a” means
gametes with fast forward motility, “b” means gametes with slow forward motility.
motile spermatozoa content in the medium. In this case
the content of motile spermatozoa in 3rd and 4th groups
was statistically and significantly higher than in 1st and
2nd ones.
Comparing to the indices of 3rd and 4th groups no
statistically significant differences between them
(p>0.05) revealed, that is the efficiency of the isolation
method of kinetically active gametes when adding into
isolation medium of 20 or 50% native FF is equal.
Therefor in further investigations we used FF under
final concentration of 20%.
In the second series of experiments there was used
FF, cryopreserved in liquid nitrogen. In previously pro-
posed method [1] there was used two-stage freezing
regimen with cooling at the first stage with the rate of
3°C/min, with the rate of 400°C/min and further storage
in liquid nitrogen (–196°C) at the second one. In this
study we used one-stage regimen with direct immersion
into liquid nitrogen (400°C/min rate). With this aim FF
was divided into two samples. First sample was frozen
according to one-stage regimen, the second sample
was treated at two-stage one. It was thawed on water
bath at 38°C. Ejaculates were also divided into two
groups.
For isolation of first group gametes’ motile fraction
there was used the medium with 20% FF, frozen
according to one-stage regimen, for the second group
it was two-stage one.
Table 2 demonstrates that the efficiency of sper-
matozoa motile fraction isolation and ejaculate using
the FF, frozen according to one-stage and two-stage
regimens, was equal ( p>0.05 for all the cases).
In the third series of experiments the comparative
investigation biological activity keeping for FF, frozen
54ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №4
еиняотсоС
азенеготамрепс
вотнеицап
'stneitaP
sisenegotamreps
etats
атялукяэакитсиреткараХ
sсitsiretcarahcetalucajE
йоннеледывеинажредоС
йортсыбстемагиицкарф
йоньлетапутсоп
%,юьтсонживдоп
tsafhtiwsetemagfotnetnoC
detalosiniytilitomdrawrof
%,noitcarf
яицартнецнок
,веимрепс
лм/нлм
aozotamreps
,noitartnecnoc
lm/nlm
еонраммус
еинажредос
и"а"темаг
%,"б"
tnetnoclatot
'a'setemagfo
%,'b'dna
овтсечилок
вотялукяэ
forebmun
setalucaje
вотялукяэыппурГ
setalucajefospuorG
1 2
яимрепсомроН
aimrepsomroN 2,4±8,54 3,5±7,45 91 2,7±8,49 7,8±1,29 *
яимрепсонетсА
aimrepsonehtsA 7,2±5,82 9,3±6,33 52 3,8±6,18 7,7+3,97 *
-онетсаогилО
яимрепс
-onehtsaogylO
aimreps
8,3±3,51 4,2±9,72 92 9,6+9,47 1,7±8,27 *
Таблица 2. Эффективность выделения подвижной фракции спермиев из
эякулята в среде, содержащей криоконсервированную фолликулярную
жидкость
Table 2. Efficiency of motile spermatozoa fraction isolation from the ejaculate in
the medium, containing cryopreserved FF
Примечание: * – р>0,05 при сравнении показателей 1-й и 2-й групп; гаметы “а” – с
быстрой поступательной подвижностью, “б” – с медленной.
Notes: * – p >0.05 when comparing the indices of 1st and 2nd group; “a” means gametes
with fast forward motility, “b” means gametes with slow forward motility.
второй − по двухэтапному.
Отогревали на водяной бане при
38°С. Эякуляты также разде-
ляли на две группы.
Для выделения подвижной
фракции гамет из первой груп-
пы использовали среду с до-
бавлением 20% ФЖ, заморо-
женной по одноэтапному режи-
му, из второй – по двухэтапному.
Как видно из табл. 2, эффек-
тивность выделения подвижной
фракции спермиев и эякулята
при использовании ФЖ, замо-
роженной по одно- и двухэтап-
ному режиму, была одинаковой
(во всех случаях р>0,05).
В третьей серии экспери-
ментов провели сравнительное
изучение сохранности биологи-
ческой активности ФЖ, замо-
роженной по одноэтапному ре-
жиму в зависимости от срока
хранения. Фолликулярную жид-
кость, полученную у пациенток,
разделяли на два образца, кото-
еиняотсоС
азенеготамрепс
вотнеицап
'stneitaP
sisenegotamreps
etats
атялукяэакитсиреткараХ
sсitsiretcarahcetalucajE
йоннеледывеинажредоС
йортсыбстемагиицкарф
йоньлетапутсоп
%,юьтсонживдоп
tsafhtiwsetemagfotnetnoC
detalosiniytilitomdrawrof
%,noitcarf
яицартнецнок
,веимрепс
лм/нлм
aozotamreps
,noitartnecnoc
lm/nlm
еонраммус
еинажредос
и"а"темаг
%,"б"
tnetnoclatot
'a'setemagfo
%,'b'dna
овтсечилок
вотялукяэ
forebmun
setalucaje
вотялукяэыппурГ
setalucajefospuorG
1 2
яимрепсомроН
aimrepsomroN 9,3±1,24 1,5+2,65 52 9,7±2,19 2,8+3,78 *
яимрепсонетсА
aimrepsonehtsA 5,2+3,42 6,3±1,53 12 1,7±2,08 9,6±8,77 *
-онетсаогилО
яимрепс
-onehtsaogylO
aimreps
5,1±4,21 7,2±2,52 53 3,6±1,66 7,6±3,86 *
Примечание: * – р>0,05 при сравнении показателей 1-й и 2-й групп; гаметы “а” – с
быстрой поступательной подвижностью, “б” – с медленной.
Notes: * – p >0.05 when comparing the indices of 1st and 2nd group; “a” means gametes
with fast forward motility, “b” means gametes with slow forward motility.
рые замораживали по одноэтапному режиму. Один
образец размораживали через 1 мес, второй –
через 6 мес после пребывания в криобанке.
Таблица 3. Эффективность выделения подвижной фракции спермиев из
эякулята в среде, содержащей криоконсервированную ФЖ
разного срока хранения при –196°С
Table 3. Efficiency of motile spermatozoa fraction isolation from the ejaculate in
the medium, containing cryopreserved FF of various storage terms at –196°C
according to one-stage regimen, depending on the
storage period was performed. Follicular fluid, derived
from the patients was divided into two samples, which
were frozen according to one-
stage regimen. One sample was
thawed in a month, in 6 months
of their storage in cryobank the
second one.
Each ejaculate, under inves-
tigation was divided into two
groups. During isolation of the
first group spermatozoa motile
fraction 20% of FF, stored into the
liquid nitrogen during one month
was added into the isolation me-
dium and for the second group it
was of 6 months’ storage.
Table 3 shows, that there we-
re no significant differences in
the efficiency of FF, stored in
liquid nitrogen for 1 and 6 months,
both at normospermia, and at
astheno- and oligoasthenosper-
mia. In all the cases p>0.05, that
is the stimulation effect of kinetic
activity of gametes with FF was
similar.
Литература
Геродес А.Г., Юрченко Г.Г., Крамар М.И. Применение
фолликулярной жидкости в методиках повышения
фертильности спермы // Бесплодие: Вспомогательные
репродуктивные технологии. Сб. науч. трудов симпо-
зиума с международным участием.– Киев, 1997.–
С. 154-157.
Lopata A., Patullo M.J., Chang A.A. A Method for collecting
motile spermatozoa from human semen // Fertil. Steril.– 1976.–
Vol. 27.– P. 667-684.
World Health Organization. Laboratory manual and sperm-
cervical mucus interaction.– Cambridge: University Press,
2000.–128 p.
Поступила 12.10.2004
55ПРОБЛЕМЫ
КРИОБИОЛОГИИ
2004, №4
PROBLEMS
OF CRYOBIOLOGY
2004, №4
Каждый исследуемый эякулят делили на две
группы. При выделении подвижной фракции спер-
миев из первой группы в среду выделения
добавляли 20% ФЖ, хранившейся в жидком азоте
один месяц, второй − 6 мес.
Как видно из данных табл. 3, достоверных
различий в эффективности применения ФЖ,
хранившейся в жидком азоте 1 и 6 мес, не было
как при нормоспермии, так и при астено- и
олигоастеноспермии. Во всех случаях р>0,05, т.е.
эффект стимуляции кинетической активности
гамет с помощью ФЖ был одинаков.
Выводы
Таким образом, результаты проведенных иссле-
дований свидетельствуют о том, что добавление
в среду выделения подвижной фракции спермиев
из эякулятов с нормо-, астено- и олигоастеноспер-
мией 20% ФЖ человека, криоконсервированной по
одноэтапному методу замораживания, достоверно
повышает эффективность метода всплывания.
При этом результативность метода одинакова
при использовании ФЖ, хранившейся в жидком
азоте как один, так и 6 мес.
Полученные данные представляют интерес для
врачей-исследователей и гинекологов, занимаю-
щихся проблемами репродуктологии, а также для
криобиологов, создающих криобанки биологически
активных жидкостей организма человека.
1.
2.
3.
Conclusions
Adding of 20% human FF, cryopreserved according
to one-stage freezing, into the isolation medium of
spermatozoa motile fraction from ejaculates with
normo-, astheno- and oligoasthenospermia, consi-
derably increases the swim-up method efficiency.
In this case the method effectiveness is similar
when using FF, stored in liquid nitrogen both during
one and six months period.
Obtained data are of interest for research physi-
cians and gynecologists, dealing with reproductology
problems, and as well as for cryobiologists, establish-
ing cryobanks of human biologically active fluids.
References
Gerodes A.G., Yurchenko G.G., Kramar M.I. Follicular fluid
usage in sperm fertility increasing methodology // Infertility:
Assisting reproductive technologies. Collection of scientific
papers of symposium with international participation.– Kiev,
1997.– P. 154-157.
Lopata A., Patullo M.J., Chang A.A. A Method for collecting
motile spermatozoa from human semen // Fertil. Steril.– 1976.–
Vol. 27.– P. 667-684.
World Health Organization. Laboratory manual and sperm-
cervical mucus interaction.– Cambridge: University Press,
2000.–128 p.
Accepted in 12.10.2004
1.
2.
3.
|