Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion

Crystal violet treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue slides greatly reduces the endogenous autofluorescence, and allows immunofluorescence (IF) staining with FITC or Alexa488 conjugated antibodies. Using cold CCD camera to capture the fluorescence images makes this staining method ver...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :	Experimental Oncology
Дата:	2008
Автори:	Buchynska, L., Kashuba, E., Szekely, L.
Формат:	Стаття
Мова:	English
Опубліковано:	Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України 2008
Теми:	Technical advance
Онлайн доступ:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/139927
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion / L. Buchynska, E. Kashuba, L. Szekely // Experimental Oncology. — 2008. — Т. 30, № 4. — С. 327–329. — Бібліогр.: 14 назв. — англ.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-139927
record_format	dspace
spelling	Buchynska, L. Kashuba, E. Szekely, L. 2018-06-21T13:50:01Z 2018-06-21T13:50:01Z 2008 Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion / L. Buchynska, E. Kashuba, L. Szekely // Experimental Oncology. — 2008. — Т. 30, № 4. — С. 327–329. — Бібліогр.: 14 назв. — англ. 1812-9269 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/139927 Crystal violet treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue slides greatly reduces the endogenous autofluorescence, and allows immunofluorescence (IF) staining with FITC or Alexa488 conjugated antibodies. Using cold CCD camera to capture the fluorescence images makes this staining method very sensitive. Here we show that combination of IF with the simultaneous recording of crystal violet induced red and Hoechst 33258 induced blue fluorescence permits the localization of the IF signal over a cytoplasmic: nuclear red:blue stain that visualizes the microscopic anatomy of the underlying tissue. To make the visual interpretation of the IF staining easier for microscopists, who are used to DAB staining over weak hematoxilin-eosin background, we created a simple color conversion procedure that turns the captured three-color fluorescence RGB (red, green, blue) images over a black background into four color CMYK (cyan, magenta, yellow, key color (black)) images. Окраска кристаллическим фиолетовым парафиновых срезов, полученных из ткани, фиксированной в формалине, значительно уменьшает явления аутофлуоресценции и обеспечивает иммунофлуоресцентную (ИФ) окраску антителами, конъюгированными сFITC или Aleхa-488. Использование CCD-камер для регистрации флуоресцентных изображений делает этот метод очень чувствительным. Наша цель — разработать метод трансформации RGB (red, green, blue) — флуоресцентных изображений в CMYC (cyan, magenta, yellow, key color (black) ) изображения. Показано, что комбинация ИФ с одновременной регистрацией красной и голубой флуоресценции, индуцированной соответственно кристаллическим фиолетовым и Hoechst33258, позволяет определять ИФ-сигнал как цитоплазматично-ядерное красно-голубое окрашивание, которое визуализирует морфологические особенности прилегающей ткани. Для упрощения интерпретации ИФ-окраски патологами, привыкшими к окрашиванию ДАБ на фоне гематоксилин-эозина, нами была создана технология простого цветового перехода, который превращает зарегистрированные трехцветные RGB-флуоресцентные изображения на черном фоне в четырехцветные CMYC-изображения на белом фоне, используя программы работы с изображениями. This study was supported by the Swedish Cancer Society (Cancerfonden), the Swedish Reseacrh Council and by Swedish Institute in the frame of Visby program. en Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України Experimental Oncology Technical advance Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion Иммунофлуоресцентное окрашивание парафиновых срезов: создание окрашивания DAB в виде виртуальных цифровых изображений с использованием цветного СMYC-перехода Article published earlier
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
title	Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion
spellingShingle	Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion Buchynska, L. Kashuba, E. Szekely, L. Technical advance
title_short	Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion
title_full	Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion
title_fullStr	Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion
title_full_unstemmed	Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion
title_sort	immunofluorescence staining of paraffin sections: creating dab staining like virtual digital images using cmyk color conversion
author	Buchynska, L. Kashuba, E. Szekely, L.
author_facet	Buchynska, L. Kashuba, E. Szekely, L.
topic	Technical advance
topic_facet	Technical advance
publishDate	2008
language	English
container_title	Experimental Oncology
publisher	Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України
format	Article
title_alt	Иммунофлуоресцентное окрашивание парафиновых срезов: создание окрашивания DAB в виде виртуальных цифровых изображений с использованием цветного СMYC-перехода
description	Crystal violet treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue slides greatly reduces the endogenous autofluorescence, and allows immunofluorescence (IF) staining with FITC or Alexa488 conjugated antibodies. Using cold CCD camera to capture the fluorescence images makes this staining method very sensitive. Here we show that combination of IF with the simultaneous recording of crystal violet induced red and Hoechst 33258 induced blue fluorescence permits the localization of the IF signal over a cytoplasmic: nuclear red:blue stain that visualizes the microscopic anatomy of the underlying tissue. To make the visual interpretation of the IF staining easier for microscopists, who are used to DAB staining over weak hematoxilin-eosin background, we created a simple color conversion procedure that turns the captured three-color fluorescence RGB (red, green, blue) images over a black background into four color CMYK (cyan, magenta, yellow, key color (black)) images. Окраска кристаллическим фиолетовым парафиновых срезов, полученных из ткани, фиксированной в формалине, значительно уменьшает явления аутофлуоресценции и обеспечивает иммунофлуоресцентную (ИФ) окраску антителами, конъюгированными сFITC или Aleхa-488. Использование CCD-камер для регистрации флуоресцентных изображений делает этот метод очень чувствительным. Наша цель — разработать метод трансформации RGB (red, green, blue) — флуоресцентных изображений в CMYC (cyan, magenta, yellow, key color (black) ) изображения. Показано, что комбинация ИФ с одновременной регистрацией красной и голубой флуоресценции, индуцированной соответственно кристаллическим фиолетовым и Hoechst33258, позволяет определять ИФ-сигнал как цитоплазматично-ядерное красно-голубое окрашивание, которое визуализирует морфологические особенности прилегающей ткани. Для упрощения интерпретации ИФ-окраски патологами, привыкшими к окрашиванию ДАБ на фоне гематоксилин-эозина, нами была создана технология простого цветового перехода, который превращает зарегистрированные трехцветные RGB-флуоресцентные изображения на черном фоне в четырехцветные CMYC-изображения на белом фоне, используя программы работы с изображениями.
issn	1812-9269
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/139927
citation_txt	Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion / L. Buchynska, E. Kashuba, L. Szekely // Experimental Oncology. — 2008. — Т. 30, № 4. — С. 327–329. — Бібліогр.: 14 назв. — англ.
work_keys_str_mv	AT buchynskal immunofluorescencestainingofparaffinsectionscreatingdabstaininglikevirtualdigitalimagesusingcmykcolorconversion AT kashubae immunofluorescencestainingofparaffinsectionscreatingdabstaininglikevirtualdigitalimagesusingcmykcolorconversion AT szekelyl immunofluorescencestainingofparaffinsectionscreatingdabstaininglikevirtualdigitalimagesusingcmykcolorconversion AT buchynskal immunofluorescentnoeokrašivanieparafinovyhsrezovsozdanieokrašivaniâdabvvidevirtualʹnyhcifrovyhizobraženiisispolʹzovaniemcvetnogosmycperehoda AT kashubae immunofluorescentnoeokrašivanieparafinovyhsrezovsozdanieokrašivaniâdabvvidevirtualʹnyhcifrovyhizobraženiisispolʹzovaniemcvetnogosmycperehoda AT szekelyl immunofluorescentnoeokrašivanieparafinovyhsrezovsozdanieokrašivaniâdabvvidevirtualʹnyhcifrovyhizobraženiisispolʹzovaniemcvetnogosmycperehoda
first_indexed	2025-12-07T20:34:16Z
last_indexed	2025-12-07T20:34:16Z
_version_	1850883080049393664

Immunofluorescence staining of paraffin sections: creating DAB staining like virtual digital images using CMYK color conversion

Репозитарії

Схожі ресурси