Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами

Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами

Мета: дослідити наявність цитомегаловірусу (ЦМВ) та вірусу Епштейна — Барр (ВЕБ) в гліальних пухлинах головного мозку та деякі імунологічні показники хворих цієї категорії залежно від особливостей вірусної інфекції. Об’єкт і методи: досліджено 25 біоптатів гліальних пухлин, 64 зразк...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Дата:2017
Автори: Бєльська, Л.М., Лісяний, М.І., Ключникова, А.І.
Формат: Стаття
Мова:Ukrainian
Опубліковано: Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України 2017
Назва видання:Онкологія
Теми:
Оригинальные исследования
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/145296
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами / Л.М. Бєльська, М.І. Лісяний, А.І. Ключникова // Онкологія. — 2017. — Т. 19, № 1. — С. 29-32. — Бібліогр.: 21 назв. — укр.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-145296
record_format dspace
spelling nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1452962025-02-09T09:57:41Z Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами Іmmunological parameters of glioma patients depending on herpesvirus infection of tumor Бєльська, Л.М. Лісяний, М.І. Ключникова, А.І. Оригинальные исследования Мета: дослідити наявність цитомегаловірусу (ЦМВ) та вірусу Епштейна — Барр (ВЕБ) в гліальних пухлинах головного мозку та деякі імунологічні показники хворих цієї категорії залежно від особливостей вірусної інфекції. Об’єкт і методи: досліджено 25 біоптатів гліальних пухлин, 64 зразки сироватки крові, 63 зразки периферичної крові (36 — нейроонкологічних хворих, 20 — інфікованих ЦМВ або ВЕБ без пухлинної патології, 7 — донорів). Проведено визначення наявності вірусів за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР); фенотипу лімфоцитів периферичної крові методом цитофлюориметрії з використанням відповідних комбінацій МкАТ; рівня циркулюючих імунних комплексів (ЦІК). Результати: у хворих з гліомами в тканині пухлин методом ПЛР виявлено ДНК ЦМВ у 16%, ВЕБ — 44%, ЦМВ + ВЕБ — 8% зразків. Персистенцію цих вірусів найчастіше визначали (у 75% випадків) в гліомах III–IV ступеня анаплазії. До оперативного втручання у хворих виявили лейкоцитоз, зменшення відносної кількості лімфоцитів, тенденцію до зниження вмісту CD8⁺ Т-лімфоцитів, статистично вірогідні зміни відносної та абсолютної кількості В-лімфоцитів (збільшення) та CD16⁺ клітин (зменшення), а також підвищення рівня ЦІК. Зазначені зміни найбільшою мірою були виражені у хворих з інфікованими герпесвірусами пухлинами. Висновок: інфікування герпесвірусами асоційоване в основному з високим ступенем анаплазії гліальних пухлин головного мозку, а також із більш вираженими змінами імунологічних показників, які свідчать про пригнічення Т-клітинної ланки імунної системи та активацію гуморальної імунної відповіді Summary. Aim: to explore the presence of cytomegalovirus (CMV) and Epstein — Barr virus (EBV) in glial tumors and some immunological parameters of this category patients depending on the characteristics of viral infection. Object and methods: 25 biopsies of glial tumors were investigated, 64 serum samples, 63 samples of peripheral blood (36 — neuro-oncological patients, 20 — patients infected with CMV or EBV without tumor pathology, 7 — donors). A virus determination was carried out using polymerase chain reaction (PCR); phenotype of peripheral blood lymphocytes determined by flow cytofluorometry using appropriate combinations of monoclonal antibodies; and levels of circulating immune complexes (CIC). Results: in tumors’ tissue of patients with brain gliomas DNA CMV by PCR detected in 16%, EBV — 44%, CMV + EBV — 8% of the samples. The persistence of these viruses was determined (in 75% of cases) in glioma anaplasia III–IV degree. Before surgery patients showed leukocytosis, reducing the relative amount of lymphocytes, a tendency to decrease of CD8 ⁺ T-lymphocytes, statistically significant changes relative and absolute number of B-lymphocytes (increase) and CD16+ cells (reduction) and increasing the level of CIC. These changes were most pronounced in patients infected with herpesvirus tumors. Conclusion: herpesvirus infection associated mainly with a high degree of anaplasia glial brain tumors, and with more pronounced changes in immunological parameters that indicate suppression of T-cell level and activation of the immune system humoral immune response. 2017 Article Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами / Л.М. Бєльська, М.І. Лісяний, А.І. Ключникова // Онкологія. — 2017. — Т. 19, № 1. — С. 29-32. — Бібліогр.: 21 назв. — укр. 1562-1774 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/145296 uk Онкологія application/pdf Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Ukrainian
topic Оригинальные исследования
Оригинальные исследования
spellingShingle Оригинальные исследования
Оригинальные исследования
Бєльська, Л.М.
Лісяний, М.І.
Ключникова, А.І.
Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами
Онкологія
description Мета: дослідити наявність цитомегаловірусу (ЦМВ) та вірусу Епштейна — Барр (ВЕБ) в гліальних пухлинах головного мозку та деякі імунологічні показники хворих цієї категорії залежно від особливостей вірусної інфекції. Об’єкт і методи: досліджено 25 біоптатів гліальних пухлин, 64 зразки сироватки крові, 63 зразки периферичної крові (36 — нейроонкологічних хворих, 20 — інфікованих ЦМВ або ВЕБ без пухлинної патології, 7 — донорів). Проведено визначення наявності вірусів за допомогою полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР); фенотипу лімфоцитів периферичної крові методом цитофлюориметрії з використанням відповідних комбінацій МкАТ; рівня циркулюючих імунних комплексів (ЦІК). Результати: у хворих з гліомами в тканині пухлин методом ПЛР виявлено ДНК ЦМВ у 16%, ВЕБ — 44%, ЦМВ + ВЕБ — 8% зразків. Персистенцію цих вірусів найчастіше визначали (у 75% випадків) в гліомах III–IV ступеня анаплазії. До оперативного втручання у хворих виявили лейкоцитоз, зменшення відносної кількості лімфоцитів, тенденцію до зниження вмісту CD8⁺ Т-лімфоцитів, статистично вірогідні зміни відносної та абсолютної кількості В-лімфоцитів (збільшення) та CD16⁺ клітин (зменшення), а також підвищення рівня ЦІК. Зазначені зміни найбільшою мірою були виражені у хворих з інфікованими герпесвірусами пухлинами. Висновок: інфікування герпесвірусами асоційоване в основному з високим ступенем анаплазії гліальних пухлин головного мозку, а також із більш вираженими змінами імунологічних показників, які свідчать про пригнічення Т-клітинної ланки імунної системи та активацію гуморальної імунної відповіді
format Article
author Бєльська, Л.М.
Лісяний, М.І.
Ключникова, А.І.
author_facet Бєльська, Л.М.
Лісяний, М.І.
Ключникова, А.І.
author_sort Бєльська, Л.М.
title Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами
title_short Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами
title_full Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами
title_fullStr Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами
title_full_unstemmed Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами
title_sort імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами
publisher Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України
publishDate 2017
topic_facet Оригинальные исследования
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/145296
citation_txt Імунологічні показники пацієнтів з гліомами залежно від інфікування пухлин герпесвірусами / Л.М. Бєльська, М.І. Лісяний, А.І. Ключникова // Онкологія. — 2017. — Т. 19, № 1. — С. 29-32. — Бібліогр.: 21 назв. — укр.
series Онкологія
work_keys_str_mv AT bêlʹsʹkalm ímunologíčnípokaznikipacíêntívzglíomamizaležnovídínfíkuvannâpuhlingerpesvírusami
AT lísânijmí ímunologíčnípokaznikipacíêntívzglíomamizaležnovídínfíkuvannâpuhlingerpesvírusami
AT klûčnikovaaí ímunologíčnípokaznikipacíêntívzglíomamizaležnovídínfíkuvannâpuhlingerpesvírusami
AT bêlʹsʹkalm ímmunologicalparametersofgliomapatientsdependingonherpesvirusinfectionoftumor
AT lísânijmí ímmunologicalparametersofgliomapatientsdependingonherpesvirusinfectionoftumor
AT klûčnikovaaí ímmunologicalparametersofgliomapatientsdependingonherpesvirusinfectionoftumor
first_indexed 2025-11-25T14:35:31Z
last_indexed 2025-11-25T14:35:31Z
_version_ 1849773351316226048
fulltext ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 29ОНКОЛОГИЯ • Т. 19 • № 1 • 2017 29 ВСТУП На сучасному етапі досліджень у галузі нейроонко­ логії велику увагу дослідники приділяють вивченню ролі вірусів (зокрема герпесвірусів) у розвитку пухлин головного мозку в зв’язку з їх високою нейротропніс­ тю і випадками поєднання вірусного ураження голов­ ного мозку з розвитком гліом. Активно вивчаються наявність та можливий зв’язок з виникненням пух­ лин головного мозку інфікування цитомегаловіру­ сом (ЦМВ), проте це питання залишається дискусій­ ним [1–3]. На сьогодні відомі дані щодо виявлення антигенів ЦМВ за допомогою методів імуногістохі­ мічного (ІГХ) дослідження та гібридизації в 67–100% зразків гліобластом [3–5, 8]. Проте інші дослідники не встановлювали наявність ЦМВ у зразках гліоблас­ том методами полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) та ІГХ дослідження [1]. Нині з’явилися поодинокі ро­ боти стосовно наявності та ролі вірусу Епштейна — Барр (ВЕБ) в генезі пухлин головного мозку. Так, при дослідженні 75 зразків гліом методом ПЛР пока­ зано, що 11 (14,7%) з них є позитивними на ВЕБ [6]. У наших дослідженнях ДНК ВЕБ виявлено в 29,4% пухлин головного мозку різного гістогенезу, найчас­ тіше (41,4%) в гліомах І–ІV ступеня анаплазії [10]. Інфікування ЦМВ може зумовлювати більш агре­ сивний перебіг пухлинного процесу [7–9]. Пока­ зано, що ЦМВ індукує численні молекулярні змі­ ни в інфікованих клітинах, які можуть призводити до формування онкогенного фенотипу. Наявність ЦМВ створює умови для утворення хронічного за­ пального середовища, спричиняє підвищення клі­ тинної міграції, інвазії, адгезії до ендотелію, ангіо­ генезу, а також інгібіції апоптозу й імуногенності ракових клітин [3, 11, 12]. Продемонстровано [13], що за наявності ЦМВ моноцити, які інфільтрують гліобластоми, продукують інтерлейкін­10 і мають М2 супресорний фенотип. Крім того, в тестах in vitro показано, що продукція інтерлейкіну­10 внаслідок інфікування ЦМВ посилює низку молекулярних ефектів, які відіграють важливу роль в імуносупре­ сії та перебігу пухлинного процесу: спостерігають пригнічення експресії молекул головного комплек­ су гістосумісності класу ІІ та костимулючої молеку­ ли CD86, підвищення експресії В7­H1, збільшення рівнів внутрішньоклітинного TGF­β (transforming growth factor β), VEGF (vascular endothelial growth factor) та фосфорильованої форми STAT3 (signal transducer and activator of transcription 3) [14]. Наведе­ ні дані свідчать про певну роль герпесвірусів (ЦМВ та ВЕБ) в онкогенезі та їх вплив на імунокомпетент­ ні клітини. Проте недостатньо дослідженими зали­ шаються багато питань, пов’язаних з персистенцією ІМУНОЛОГІЧНІ ПОКАЗНИКИ ПАЦІЄНТІВ З ГЛІОМАМИ ЗАЛЕЖНО ВІД ІНФІКУВАННЯ ПУХЛИН ГЕРПЕСВІРУСАМИ Мета: дослідити наявність цитомегаловірусу (ЦМВ) та вірусу Епштей- на — Барр (ВЕБ) в гліальних пухлинах головного мозку та деякі імунологічні показники хворих цієї категорії залежно від особливостей вірусної інфек- ції. Об’єкт і методи: досліджено 25 біоптатів гліальних пухлин, 64 зраз- ки сироватки крові, 63 зразки периферичної крові (36 — нейроонкологічних хворих, 20 — інфікованих ЦМВ або ВЕБ без пухлинної патології, 7 — доно- рів). Проведено визначення наявності вірусів за допомогою полімеразної лан- цюгової реакції (ПЛР); фенотипу лімфоцитів периферичної крові методом цитофлюориметрії з використанням відповідних комбінацій МкАТ; рівня циркулюючих імунних комплексів (ЦІК). Результати: у хворих з гліомами в тканині пухлин методом ПЛР виявлено ДНК ЦМВ у 16%, ВЕБ — 44%, ЦМВ + ВЕБ — 8% зразків. Персистенцію цих вірусів найчастіше визна- чали (у 75% випадків) в гліомах III–IV ступеня анаплазії. До оперативно- го втручання у хворих виявили лейкоцитоз, зменшення відносної кількос- ті лімфоцитів, тенденцію до зниження вмісту CD8+ Т-лімфоцитів, ста- тистично вірогідні зміни відносної та абсолютної кількості В-лімфоцитів (збільшення) та CD16+ клітин (зменшення), а також підвищення рівня ЦІК. Зазначені зміни найбільшою мірою були виражені у хворих з інфікованими герпесвірусами пухлинами. Висновок: інфікування герпесвірусами асоційо- ване в основному з високим ступенем анаплазії гліальних пухлин головно- го мозку, а також із більш вираженими змінами імунологічних показників, які свідчать про пригнічення Т-клітинної ланки імунної системи та акти- вацію гуморальної імунної відповіді. Л.М. Бєльська М.І. Лісяний А.І. Ключникова ДУ « Інститут нейрохірургії ім. акад. А.П. Ромоданова НАМН України», Київ, Україна Ключові слова: пухлини головного мозку, герпесвіруси, периферична кров, імунофенотип лімфоцитів, циркулюючі імунні комплекси. ОНКОЛОГИЯ • Т. 19 • № 1 • 2017 ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 30 герпесвірусів у хворих з пухлинами головного мозку та станом клітинної і гуморальної ланок імунної сис­ теми у пацієнтів з вірусасоційованими пухлинами. Метою роботи було дослідити наявність ЦМВ та ВЕБ у гліальних пухлинах головного мозку та ви­ значити деякі імунологічні показники хворих цієї ка­ тегорії залежно від особливостей вірусної інфекції. ОБ’ЄКТ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ Матеріалом дослідження слугували біоптати (25 зразків) гліальних пухлин різного ступеня зло­ якісності, отримані у хворих під час нейрохірургічних операцій; сироватка крові (64 зразки); периферична кров пацієнтів нейроонкологічного профілю (36 зраз­ ків), інфікованих герпесвірусами хворих без пухлин (20 зразків) та умовно здорових донорів (7 зразків). Гістологічну діагностику пухлин головного мозку про­ водили відповідно до Міжнародної гістологічної кла­ сифікації пухлин центральної нервової системи [15]. Детекцію інфікування герпесвірусами пухлинної тканини здійснювали за допомогою ПЛР. Для виді­ лення ДНК використовували зразки біоптату пухли­ ни розміром 3–4 мм, готували суспензію пухлинних клітин, яку обробляли згідно з інструкцією наборів «ДНК­сорб А» для виділення ДНК («АмпліСенс», Ро­ сія). Детекцію вірусів і подальший аналіз отриманих результатів виконували з використанням програмно­ го ампліфікатора з системою детекції флуоресцент­ ного сигналу в режимі реального часу «BioRad» від­ повідно до інструкції виробника тест­системи («ДНК­ технологія», Росія). Кількісний аналіз субпопуляцій лімфоцитів пе­ риферичної крові проводили на проточному цито­ флюориметрі «FC­500» («Beckman Coulter», США) за програмою Cytomics CXP Software з використан­ ням подвійних комбінацій МкАТ виробництва фірми «Beckman Coulter» (США) і антитіл фірми «Сорбент» (Росія). Оцінювали параметри Т­ та В­клітинного ряду: загальну кількість Т­лімфоцитів (СD3+), кіль­ кість Т­хелперів (СD4+), цитотоксичних Т­лімфоцитів (СD8+), природних клітин­кілерів (ПКК) (СD16+), В­лімфоцитів (СD19+). Визначення субпопуляційно­ го складу лімфоцитів за допомогою МкАТ проводили згідно з інструкцією виробників антитіл і методични­ ми рекомендаціями [16] з цілісною кров’ю та подаль­ шим лізисом еритроцитів. Визначення вмісту циркулюючих імунних комп­ лексів (ЦІК) у сироватці периферичної крові про­ водили за методом [17], який ґрунтується на селек­ тивній преципітації комплексів антиген­антитіло в поліетиленгліколі з наступним фотометричним ви­ значенням щільності преципітації. Математичну обробку отриманих результатів про­ водили на персональному комп’ютері з використан­ ням пакета програм «Statistica 6.0». РЕЗУЛЬТАТИ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ Дослідження методом ПЛР наявності ЦМВ та ВЕБ у зразках гліальних пухлин різного ступеня злоякіснос­ ті показало, що ці віруси в фазі активації процесу ви­ значалися в пухлинах окремо (ЦМВ — в 16%, ВЕБ — в 44% випадків) або в комбінації (ЦМВ + ВЕБ — в 8% зразків) (табл. 1). При дослідженні наявності віру­ сів у пухлинній тканині залежно від ступеня злоякіс­ ності встановлено, що ВЕБ визначався в зразках гліо­ бластом (5/11; 45,5%) та анапластичних гліом (4/11; 36,4%), ЦМВ у фазі активації процесу — в 75% зраз­ ків гліом III–IV ступеня злоякісності. Отримані нами дані щодо частоти виявлення ЦМВ збігаються з діапа­ зоном аналогічних показників, наведених в інших пу­ блікаціях [2–5, 8]. Таблиця 1 Персистенція ЦМВ та ВЕБ у хворих з гліальними пухлинами (n = 25) Тип вірусу Частота виявлення n % ЦМВ 4 16 ВЕБ 11 44 ЦМВ + ВЕБ 2 8 Дослідження стану імунної системи у хворих з глі­ альними пухлинами показало, що до оперативно­ го втручання визначалися певні зміни в фенотипіч­ ному складі лімфоцитів, а саме, була вдвічі (р < 0,05) збільшена загальна кількість лейкоцитів, в середньо­ му в 1,5 раза (р < 0,05) зменшена відносна кількість лімфоцитів, при цьому у 44,4% пацієнтів відмічали зменшення відносної та абсолютної кількості лімфо­ цитів у 3 рази. У нейроонкологічних хворих до опе­ ративного втручання статистично вірогідно (р < 0,05) зменшена також відносна і абсолютна кількість ПКК та підвищений вміст В­клітин. Слід зазначити, що у 12 із 36 пацієнтів відносна кількість В­клітин зрос­ тала втричі, а кількість ПКК у 17 з 36 випадків змен­ шувалася в 2,5–3,0 раза (табл. 2). Таблиця 2 Відносні й абсолютні показники периферичної крові хворих з гліальними пухлинами до оперативного втручання Показник Хворі з пухлинами (n = 36) Контроль (умовно здорові донори) (n = 7) Лейкоцити, •109/л 10,36 ± 0,52* 5,71 ± 0,52 Лімфоцити, % 22,02 ± 13,1* 33,76 ± 2,04 Лімфоцити, •109/л 1,86 ± 0,59 1,92 ± 0,18 Субпопуляційний склад лімфоцитів CD3, % 68,52 ± 7,53 65,78 ± 1,63 CD3, •109/л 1,28 ± 0,48 1,23 ± 0,11 CD4, % 40,05 ± 8,82 36,27 ± 0,24 CD4, •109/л 0,75 ± 0,32 0,65 ± 0,05 CD8, % 29,07 ± 5,73 30,51 ± 0,41 CD8, •109/л 0,54 ± 0,26 0,57 ± 0,03 CD4/CD8 1,5 ± 0,72 1,21 ± 0,09 CD19, % 17,03 ± 5,61* 8,21 ± 0,52 CD19, •109/л 0,32 ± 0,09* 0, 15 ± 0,02 CD16, % 14,56 ± 1,84* 20,3 ± 1,43 CD16, •109/л 0,29 ± 0,03* 0,38 ± 0,03 *р < 0,05 порівняно з контролем. При порівнянні досліджених показників у хворих із віруспозитивними (ЦМВ, ВЕБ або ЦМВ + ВЕБ) пухлинами з показниками пацієнтів без вірусного інфікування пухлинної тканини встановлено, що до оперативного втручання у першої підгрупи паці­ єнтів відмічається тенденція до лейкоцитозу, змен­ ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 31ОНКОЛОГИЯ • Т. 19 • № 1 • 2017 31 шення абсолютної кількості лімфоцитів, збільшення (на 25%) кількості В­клітин та зменшення (в серед­ ньому на 30–35%) відносної та абсолютної кількос­ ті ПКК, що свідчить про більш виражені порушення в клітинній ланці імунної системи у хворих із вірус­ асоційованими пухлинами головного мозку (табл. 3). Необхідно зазначити, що у пацієнтів із вірус­ асоційованими пухлинами визначається збільшення кількості В­клітин та зменшення вмісту ПКК не тіль­ ки порівняно з відповідними показниками у пацієн­ тів з пухлинами без інфікування герпесвірусами, але й стосовно хворих з вірусною інфекцією в фазі акти­ вації, без пухлин головного мозку (див. табл. 3). Так, у пацієнтів з активною вірусною інфекцією без онко­ логічної патології кількість CD19+ клітин становить 13,58 ± 5,51%, тоді як у хворих з вірусною інфекцією та пухлинами мозку зазначений показник в середньо­ му був більший на 30,0%. У пацієнтів з вірусасоційова­ ними пухлинами порівняно з хворими без онкологіч­ ного процесу визначається зменшення як відносної, так і абсолютної кількості CD16+ клітин в 1,4–1,5 раза. Таблиця 3 Відносні й абсолютні показники периферичної крові хворих з гліомами залежно від інфікування пухлинної тканини герпесвірусами Показник Хворі, у яких пухлинна тканина Хворі без пухлин з вірусною інфекцією в фазі активації (n = 20) не інфікова- на герпесві- русами (n = 20) інфікована герпесвіру- сами (n = 16) Лейкоцити, •109/л 11,92 ± 4,89 8,12 ± 3,18 6,73 ± 3,21 Лімфоцити, % 20,21 ± 14,35 24,92 ± 12,08 30,3 ± 0,38 Лімфоцити, •109/л 1,94 ± 0,66 1,74 ± 0,49 1,79 ± 0,38 Субпопуляційний склад лімфоцитів CD3, % 68,39 ± 8,42 68,22 ± 6,49 68,53 ± 6,87 CD3, •109/л 1,35 ± 0,55 1,17 ± 0,36 1,22 ± 0,29 CD4, % 38,53 ± 9,28 41,73 ± 8,24 43,27 ± 5,17 CD4, •109/л 0,76 ± 0,34 0,74 ± 0,31 0,79 ± 0,20 CD8, % 31,42 ± 9,02 24,71 ± 6,64 27,94 ± 5,68 CD8, •109/л 0,62 ± 0,30 0,42 ± 0,12 0,49 ± 0,11 CD4/CD8 1,38 ± 0,12 1,83 ± 0,45 1,61 ± 0,38 CD19, % 15,15 ± 4,91 18,53 ± 5,20 15,58 ± 5,51 CD19, •109/л 0,27 ± 0,14 0,35 ± 0,16 0,26 ± 0,11 CD16, % 16,4 ± 1,17 12,27 ± 4,29 17,61 ± 4,87 CD16, •109/л 0,32 ± 0,27 0,22 ± 0,06 0,31 ± 0,12 Дослідження рівня ЦІК у сироватці крові хворих із вірусасоційованими пухлинами показало, що цей показник був підвищеним та змінювався залежно від ступеня злоякісності пухлин (рисунок). Більш доброякісний перебіг гліоми (гліома І–ІІ ступеня) супроводжувався підвищенням рівня ЦІК в 1,4 раза. У пацієнтів зі злоякісним перебігом гліом рівень ЦІК збільшувався в 2 рази (р < 0,05) відносно відповід­ них контрольних показників. Таким чином, у результаті проведених досліджень встановлено, що в пухлинній тканині хворих з гліо­ мами наявні герпесвіруси: ЦМВ, ВЕБ або комбінація ЦМВ + ВЕБ. Персистенція цих вірусів визначається в 75% зразків гліом III–IV ступеня анаплазії, що, мож­ ливо, свідчить про певну роль описаних вірусів у роз­ витку злоякісних гліом. У пацієнтів із вірусасоційова­ ними внутрішньомозковими пухлинами центральної нервової системи до оперативного втручання визна­ чаються певні зміни в клітинній ланці імунітету: лей­ коцитоз, зменшення відносної кількості лімфоцитів, тенденція до зменшення кількості CD8+ Т­лімфоцитів, статистично вірогідне (р < 0,05) підвищення віднос­ ної та абсолютної кількості В­лімфоцитів, зменшен­ ня вмісту ПКК. Це свідчить про виражені порушення в клітинній ланці імунної системи у хворих з вірусасо­ ційованими пухлинами. Відомо [18], що регуляторні В­клітини можуть пригнічувати проліферацію CD8+ Т­клітин, а також індукувати Т­регуляторні лімфоци­ ти, які мають імуносупресорний вплив на CD8+ ефек­ торну Т­клітинну проліферацію. Крім того, В­клітини можуть пригнічувати протипухлинну Т­клітинну від­ повідь і через антигеннеспецифічні механізми [19]. Бі­ лок р65 ЦМВ зумовлює пригнічення активності ПКК та синтез інтерферону γ [20, 21]. Рисунок. Рівень ЦІК у сироватці крові пацієнтів нейро­ онкологічного профілю з вірусасоційованими пухлинами Підвищення рівня ЦІК у сироватці крові хворих з вірусасоційованими пухлинами, можливо, також можна розглядати як один із факторів, що спричи­ няють негативні зміни в протипухлинному імунному захисті при розвитку гліальних пухлин. Відомо, що імунні комплекси сприяють вивільненню супресор­ них факторів із В­клітин. За рахунок ЦІК забезпечу­ ється блокада рецепторів антигенного розпізнавання імунокомпетентних клітин і антигенів пухлинних клі­ тин, що, з одного боку, захищає останні від цитолітич­ ної дії Т­кілерів і реакцій антитілозалежного клітин­ ного імунітету; з другого — перешкоджає формуванню адекватного рівня протипухлинних реакцій організму. Таким чином, герпесвіруси можуть не тільки зумовлювати формування онкогенного фенотипу за рахунок молекулярних змін в інфікованих клі­ тинах, а й сприяти більш вираженій імуносупресії при розвитку пухлин головного мозку. ВИСНОВКИ 1. У хворих з гліомами головного мозку в ткани­ ні пухлин методом ПЛР виявлено ДНК герпесвіру­ сів, а саме: ЦМВ — в 16%, ВЕБ — в 44%, комбіна­ ції ЦМВ + ВЕБ — у 8% випадків. Персистенція цих вірусів визначалася в 75% випадків у пухлинах глі­ ом III–IV ступеня анаплазії. ОНКОЛОГИЯ • Т. 19 • № 1 • 2017 ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 32 2. У хворих із внутрішньомозковими пухлина­ ми до оперативного втручання виявлено певні змі­ ни в клітинній ланці імунітету: збільшення кількос­ ті лейкоцитів; зменшення відносної кількості лім­ фоцитів та порушення їх субпопуляційного складу; статистично вірогідне (р < 0,05) підвищення рівня В­лімфоцитів та зниження рівня ПКК. У хворих з ЦМВ­ або ВЕБ­інфікуванням внутрішньомозко­ вих пухлин такі зміни виражені найбільшою мірою. 3. У пацієнтів нейроонкологічного профілю з ві­ русасоційованими пухлинами визначається статис­ тично вірогідне підвищення рівня ЦІК, який зміню­ ється залежно від ступеня злоякісності внутрішньо­ мозкових пухлин. Найвищий рівень ЦІК виявлено при гліомах зі злоякісним перебігом. СПИСОК ВИКОРИСТАНОЇ ЛІТЕРАТУРИ 1. Taha MS, Abdalhamid BA, El-Badawy SA, et al. Expression of cytomegalovirus in glioblastoma multiforme: Myth or reality? Br J Neurosurg 2016; 30 (3): 307–12. 2. Wakefield A, Pignata A, Ghazi A, et al. Is CMV a target in pe­ diatric glioblastoma? Expression of CMV proteins, pp65 and IE1– 72 and CMV nucleic acids in a cohort of pediatric glioblastoma pa­ tients. J Neurooncol 2015; 125 (2): 307–15. 3. Michaelis M, Doerr HW, Cinatl J. The story of human cy­ tomegalovirus and cancer: increasing evidence and open questions. Neoplasia 2009; 11 (1): 1–9. 4. Harkins L, Volk AL, Samanta M, et al. Specific localisation of human cytomegalovirus nucleic acids and proteins in human colorectal cancer. Lancet 2002; 360: 1557–63. 5. Mitchell DA, Xie W, Schmittling R, et al. Sensitive detection of human cytomegalovirus in tumors and peripheral blood of pa­ tients diagnosed with glioblastoma. Neuro Oncol 2008; 10: 10–8. 6. Sao P, Fonseca RF, Rosas SL, et al. Frequency of Epstein­Barr virus DNA sequences in human gliomas. Med J 2015; 133 (1): 51–4. 7. Luo MH, Fortunato EA. Long­term infection and shedding of human cytomegalovirus in T98G glioblastoma cells. J Virol 2007; 81: 10424–36. 8. Cobbs CS, Soroceanu L, Denham S. Modulation of oncogen­ ic phenotype in human glioma cells by cytomegalovirus IE1­medi­ ated mitogenicity. Cancer Res 2008; 68: 724–30. 9. Maussang D, Verzijl D, van Walsum M, et al. Human cyto­ megalovirus­encoded chemokine receptor US28 promotes tumori­ genesis. Proc Natl Acad Sci USA 2006; 103: 13068–73. 10. Лисяный НИ, Ключникова АИ, Лисяный АН, Кот ЛА. Изучение инфицированности герпесвирусами (ЦМВ, ВЭБ) различных по природе опухолей головного мозга. Онкология 2016; 18 (2): 118–22. 11. Soderberg-Naucler C. Does cytomegalovirus play a causative role in the development of various inflammatory diseases and can­ cer? J Intern Med 2006; 259: 219–46. 12. Barami K. Oncomodulatory mechanisms of human cyto­ megalovirus in gliomas. J Clin Neurosci 2010; 17: 819–23. 13. Dziurzynski K, Wei J, Qiao W, Hatiboglu MA, et al. Glio­ ma­associated cytomegalovirus mediates subversion of the mono­ cyte lineage to a tumor propagating phenotype. Clin Cancer Res 2011; 17: 4642–9. 14. Yu H, Kortylewski M, Pardoll D. Crosstalk between cancer and immune cells: role of STAT3 in the tumour microenvironment. Nat Rev Immunol 2007; 7 (1): 41–51. 15. Louis DN, Ohgak H, Wiestler OD. WHO classification of tu­ mours of the central nervous system. International Agency for Re­ search on Cancer, Lyon, 2007. 16. Пинегин БВ, Ярилин АА, Симонов АВ и др. Примене­ ние проточной цитометрии для оценки функциональной ак­ тивности иммунной системы человека. Пособие для врачей. М: Медицина, 2001. 57 с. 17. Гашкова В, Мате Н. Чехословацкая медицина 1978; 2: 117. 18. Ye ZP, He HY, Wang H, et al. Glioma­derived ADAM10 in­ duces regulatory B cells to suppress CD8+ T cells. PLoS One 2014; 15: 9. 19. Zhang Y, Morgan R, Podack ER, Rosenblatt J. B cell reg­ ulation of anti­tumor immune response. Immunol Res 2013; 57: 115–24. 20. Kalejta R. Tegument proteins of human cytomegalovirus. Microbiol Mol Biol Rev 2008; 72: 249–65. 21. Popkin DP, Watson MA, Karaskov E. Murine cytomega­ lovirus paralyzes macrophages by blocking IFN gamma­induced promoter assembly. Proc Natl Acad Sci USA 2003; 100: 14309–14. IMMUNOLOGICAL PARAMETERS OF GLIOMA PATIENTS DEPENDING ON HERPESVIRUS INFECTION OF TUMOR L.M. Belska, N.I. Lisyanyi, A.I. Kliuchnykova Summary. Aim: to explore the presence of cytomegalovi- rus (CMV) and Epstein — Barr virus (EBV) in glial tu- mors and some immunological parameters of this category patients depending on the characteristics of viral infection. Object and methods: 25 biopsies of glial tumors were inves- tigated, 64 serum samples, 63 samples of peripheral blood (36 — neuro-oncological patients, 20 — patients infected with CMV or EBV without tumor pathology, 7 — donors). A virus determination was carried out using polymerase chain reaction (PCR); phenotype of peripheral blood lymphocytes determined by flow cytofluorometry using appropriate com- binations of monoclonal antibodies; and levels of circulat- ing immune complexes (CIC). Results: in tumors’ tissue of patients with brain gliomas DNA CMV by PCR detected in 16%, EBV — 44%, CMV + EBV — 8% of the samples. The persistence of these viruses was determined (in 75% of cases) in glioma anaplasia III–IV degree. Before surgery patients showed leukocytosis, reducing the relative amount of lymphocytes, a tendency to decrease of CD8+ T-lympho- cytes, statistically significant changes relative and absolute number of B-lymphocytes (increase) and CD16+ cells (re- duction) and increasing the level of CIC. These changes were most pronounced in patients infected with herpesvi- rus tumors. Conclusion: herpesvirus infection associated mainly with a high degree of anaplasia glial brain tumors, and with more pronounced changes in immunological pa- rameters that indicate suppression of T-cell level and ac- tivation of the immune system humoral immune response. Key Words: brain tumors, herpesvirus, peripheral blood, lymphocytes immunophenotype, circulating immune complexes. Адреса для листування: Бєльська Л.М. 04050, Київ, вул. П. Майбороди, 32 ДУ «Iнститут нейрохірургії ім. акад. А.П. Ромоданова НАМН України» E­mail: adsg@ukr.net Одержано: 18.01.2017

Схожі ресурси