Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів

Мета: радіобіологічне обґрунтування первинної профілактики виникнення раку радіаційного генезу у професіоналів (радіологів) із залученням генетичних, біохімічного та клітинного методів. Об’єкт і методи: зразки периферичної крові 62 радіологів (117 спостережень) із різним стажем роботи у...

Full description

Saved in:

Bibliographic Details
Published in:	Онкологія
Date:	2018
Main Authors:	Дьоміна, Е.А., Михайленко, В.М.
Format:	Article
Language:	Ukrainian
Published:	Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України 2018
Subjects:	Оригинальные исследования
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/145576
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів / Е.А. Дьоміна, В.М. Михайленко // Онкологія. — 2018. — Т. 20, № 3. — С. 177-184. — Бібліогр.: 15 назв. — укр.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

_version_	1859629012363509760
author	Дьоміна, Е.А. Михайленко, В.М.
author_facet	Дьоміна, Е.А. Михайленко, В.М.
citation_txt	Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів / Е.А. Дьоміна, В.М. Михайленко // Онкологія. — 2018. — Т. 20, № 3. — С. 177-184. — Бібліогр.: 15 назв. — укр.
collection	DSpace DC
container_title	Онкологія
description	Мета: радіобіологічне обґрунтування первинної профілактики виникнення раку радіаційного генезу у професіоналів (радіологів) із залученням генетичних, біохімічного та клітинного методів. Об’єкт і методи: зразки периферичної крові 62 радіологів (117 спостережень) із різним стажем роботи у сфері дії радіації. Тест-система культури лімфоцитів крові з метафазним аналізом аберацій хромосом. Для визначення індивідуальної радіочутливості використовували хромосомні G₀- та G₂-тести. Апоптоз клітин визначали методом проточної цитометрії. Оцінку вмісту SH-груп у плазмі крові проводили спектрофотометричним методом. Результати: порівняльний аналіз індивідуальної радіочутливості (ІРЧ) хромосом лімфоцитів крові обстежених радіологів показав, що її специфічними показниками є частота хроматидних делецій. Її варіабельність залежить від стажу роботи у сфері дії радіації. Групу підвищеного професійного канцерогенного ризику становили переважно ветерани галузі. У більшості випадків не виявлено кореляції між індивідуальними значеннями спонтанного рівня аберацій хромосом (G₀-тест) та ІРЧ хромосом (G₂-тест). У радіологів з високою ІРЧ спостерігалося пригнічення мітотичного потенціалу клітин до 25,0 ± 1,8‰. При цьому міжіндивідуальної варіабельності цього показника не виявлено. Висновки: аналіз результатів цитогенетичного обстеження професіоналів, що працюють у сфері дії радіації, дозволяє резюмувати: у випадках, коли підвищений спонтанний рівень хромосомних перебудов у лімфоцитах крові збігається з високою ІРЧ, слід очікувати найвищого ризику виникнення радіогенних пухлин. Зниження рівня сульфгідрильних груп білків і пептидів у плазмі крові є свідченням порушень метаболізму та окисно-відновної рівноваги і буде слугувати додатковим об’єктивним біомаркером для оцінки професійного ризику розвитку радіаційно-асоційованого раку. Aim: radiobiological argumentation of primary prevention of cancer with radiation genesis in professionals (radiologists) with the use of genetic, biochemical and cellular methods. Object and methods: samples of peripheral blood of 62 radiologists (117 observations) with different work experience in the field of radiation. A test system of culture of blood lymphocytes with a metaphase analysis of chromosome aberrations. Chromosomal G₀-and G₂-tests were used to determine an individual radiosensitivity. Cell apoptosis was determined by using the method of flow cytometry. The evaluation of SH-groups level in blood plasma was performed by spectrophotometric method. Results: the comparative analysis of individual radiosensitivity (IR) of chromosomes in blood lymphocytes of examined radiologists has shown that its specific indicator is the frequency of chromatid deletions. Its variability depends on the length of work in the field of radiation. The group of increased occupational carcinogenic risk consisted mainly of veterans of the branch. In most cases, no correlation was found between the individual values of the spontaneous level of chromosomal aberrations (G₀-test) and IR chromosomes (G₂-test). The radiologists with a high IR level had a suppression of the mitotic potential of cells up to 25.0 ± 1.8‰. At the same time, the interindividual variability of this indicator was not revealed. Conclusions: an analysis of the results of the cytogenetic survey of professionals working in the field of radiation suggests that in the cases where the increased spontaneous level of chromosomal alterations in blood lymphocytes coincides with high IR, the greatest risk of developing radiogenic tumors should be expected. Decrease of sulfhydryl groups level in proteins and peptides of the blood plasma is evidence of metabolic and redox disturbances and will serve as an additional objective biomarker to assess the occupational risk of radiation-associated cancer.
first_indexed	2025-12-07T13:09:06Z
format	Article
fulltext	ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 177ОНКОЛОГИЯ • Т. 20 • № 3 • 2018 177 Підвищення рівня онкологічної захворюванос ті в Україні значною мірою пов’язане зі збільшенням екологічного, в тому числі радіаційного, навантажен ня на населення [1]. ВООЗ визначила ХХІ століття як століття превентивної медицини та індивідуалізації за хисту здоров’я людини. Відповідно до канонів дока зової медицини первинна профілактика (ПП) спря мована на запобігання виникненню злоякісних пух лин як за рахунок усунення причин, так і мінімізації канцерогенної дії деяких чинників довкілля, зокре ма іонізуючих випромінювань (ІВ) (рис. 1). Тому сві тові тенденції у профілактиці раку, в тому числі раді аційного генезу, за останній час змістилися та зосе редилися на ПП. За останні 20 років відмічається інтенсивне зрос тання кількості медичних радіологічних процедур, які на сьогодні є головним джерелом дії ІВ на лю дину [2]. Відповідно збільшується і чисельність пер соналу, задіяного у їх виконанні. Це зобов’язує до слідників, лікарів та організаторів охорони здоров’я населення країни зайняти чітку позицію щодо ПП розвитку онкологічних захворювань радіаційно го генезу. Наразі вона проводиться не повною мі рою, а існуючі окремі етапи її реалізації характе ризуються фрагментарністю, відсутністю наукової бази та недосконалістю реєстрації онкологічних за хворювань професійного генезу. Головна проблема полягає у відсутності контролю за індивідуальною радіочутливістю (ІРЧ) професіоналів, діяльність яких пов’язана із використанням джерел ІВ, в пер шу чергу променевих діагностів, радіаційних онко логів, а також персоналу атомних підприємств. Усе це зумовлює несвоєчасне забезпечення профілак тичних заходів, наслідком чого є відсутність цілісно го уявлення про шляхи запобігання розвитку радіо генного раку та недосконалість організації його ПП. ОБҐРУНТУВАННЯ ПРОФІЛАКТИКИ РАДІОГЕННОГО РАКУ У ПРОФЕСІОНАЛІВ, ЩО ПРАЦЮЮТЬ У СФЕРІ ДІЇ ІОНІЗУЮЧИХ ВИПРОМІНЮВАНЬ, ІЗ ЗАЛУЧЕННЯМ БІОЛОГІЧНИХ МЕТОДІВ Мета: радіобіологічне обґрунтування первинної профілактики виникнен- ня раку радіаційного генезу у професіоналів (радіологів) із залученням гене- тичних, біохімічного та клітинного методів. Об’єкт і методи: зразки пери- феричної крові 62 радіологів (117 спостережень) із різним стажем роботи у сфері дії радіації. Тест-система культури лімфоцитів крові з метафазним аналізом аберацій хромосом. Для визначення індивідуальної радіочутливості використовували хромосомні G0- та G2-тести. Апоптоз клітин визначали методом проточної цитометрії. Оцінку вмісту SH-груп у плазмі крові про- водили спектрофотометричним методом. Результати: порівняльний ана- ліз індивідуальної радіочутливості (ІРЧ) хромосом лімфоцитів крові обсте- жених радіологів показав, що її специфічними показниками є частота хро- матидних делецій. Її варіабельність залежить від стажу роботи у сфері дії радіації. Групу підвищеного професійного канцерогенного ризику становили переважно ветерани галузі. У більшості випадків не виявлено кореляції між індивідуальними значеннями спонтанного рівня аберацій хромосом (G0-тест) та ІРЧ хромосом (G2-тест). У радіологів з високою ІРЧ спостерігалося при- гнічення мітотичного потенціалу клітин до 25,0 ± 1,8‰. При цьому між- індивідуальної варіабельності цього показника не виявлено. Висновки: ана- ліз результатів цитогенетичного обстеження професіоналів, що працюють у сфері дії радіації, дозволяє резюмувати: у випадках, коли підвищений спон- танний рівень хромосомних перебудов у лімфоцитах крові збігається з висо- кою ІРЧ, слід очікувати найвищого ризику виникнення радіогенних пухлин. Зниження рівня сульфгідрильних груп білків і пептидів у плазмі крові є свід- ченням порушень метаболізму та окисно-відновної рівноваги і буде слугува- ти додатковим об’єктивним біомаркером для оцінки професійного ризику розвитку радіаційно-асоційованого раку. Е.А. Дьоміна В.М. Михайленко Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України, Київ, Україна Ключові слова: радіогенний рак, радіологи, периферична кров, індивідуальна радіочутливість, хромосомні G0- та G2-тести, апоптоз, SH-групи плазми крові. ОНКОЛОГИЯ • Т. 20 • № 3 • 2018 ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 178 Згідно з сучасними уявленнями, ініційовані ра діацією сублетальні та потенційно летальні пошко дження можуть зберігатися у клітинах тривалий час аж до наступної дії промотора. Отже, накопичення хромосомних мутацій у клітинній популяції вважа ється потенційно онкогенним, а малі (надфонові) дози іонізуючої радіації (ІР) визнані канцерогенно небезпечними [3, 4]. Суттєва відмінність дії ІР від ін ших канцерогенів полягає у тривалості формування кінцевих індукованих ефектів. Зазначимо, що завдяки впровадженню в практи ку цифрових технологій рентгенодіагностики про меневе навантаження на персонал останнім часом має виражену тенденцію до зниження. При цьому проблема професійного раку без перебільшення є складною саме серед професійних захворювань, що зумовлено мультифакторним характером його етіо логії. Тому розробці способів оцінки радіаційних ри зиків у осіб, зайнятих у сфері дії ІВ, приділяється все більше уваги. Вихід із ситуації, що склалася, а також з урахуванням хронічної дії радіаційного фактора Чорнобильської катастрофи ми вбачаємо у персо ніфікації ПП раку, заснованої на визначенні ІРЧ; контролі застосування медичних препаратів із ко мутагенною активністю, які можуть потенціювати ефекти надфонових доз ІВ, та призначенні неток сичних ефективних радіопротекторів професіона лам із високорадіочутливим генотипом. Важливим висновком раніше нами виконаних цитогенетич них досліджень є доказ вирішальної ролі інтенсив ності процесів репарації у формуванні ІРЧ люди ни до опромінення в широкому діапазоні доз [5]. Сьогодні ми вважаємо, що для об’єктивної оцінки ІРЧ з метою виявлення гіперчутливих до дії ІВ осіб, у першу чергу тих, які працюють у сфері дії ІВ, ви користання тільки хромосомних тестів недостатньо. Необхідно визначити та надати радіобіологічне об ґрунтування комплексу біомаркерів, що відобража ють не лише генетичні, але й метаболічні порушен ня, які можуть створювати передумови для підви щення генетично детермінованої ІРЧ та передують виникненню радіаційного канцерогенезу. Такий сценарій вирішення проблеми ПП радіаційноасо ційованого раку є актуальним, оскільки має сприяти зниженню канцерогенного ризику, передусім серед осіб репродуктивного віку, зайнятих у сфері дії ІВ. Мета дослідження: радіобіологічне обґрунтуван ня ПП виникнення раку радіаційного генезу у про фесіоналів (радіологів) із залученням генетичних, біохімічного та клітинного методів. ОБ’ЄКТ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ Співробітники Інституту експериментальної па тології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України протягом багатьох років займаються біоіндикацією променевих уражень із використан ням тестсистеми культури лімфоцитів периферич ної крові (ЛПК) людини і метафазним аналізом ра діаційноіндукованих перебудов хромосом. Обґрунтування використання тест-системи куль- тури ЛПК відповідно до мети дослідження. ЛПК лю дини — унікальний за своїми властивостями об’єкт для проведення радіаційногенетичних досліджень, оскільки є найчутливішим і специфічним показни ком променевої дії та рекомендований всесвітніми міжнародними організаціями (ВООЗ, МАГАТЕ, НКДАР ООН) для виконання медикобіологічної індикації ступеня променевого ураження [6, 7]. Згід но із загальноприйнятою класифікацією, ЛПК на лежать до першого класу — вегетативних інтерміто тичних, тобто найбільш радіочутливих, клітин орга нізму людини. Це дозволяє реєструвати достовірне підвищення радіаційноіндукованого рівня абера цій хромосом над спонтанним (середньопопуляцій ним) навіть при малих дозах опромінення. У радіа ційній цитогенетиці прийнято положення, що се редньопопуляційний рівень спонтанних аберацій хромосом у ЛПК здорових осіб становить 3%. У за значеній тестсистемі ЛПК досліджують хромосоми головних функціональних клітин імунної системи, а саме Тлімфоцитів, відповідальних за протипух линний захист організму. Встановлено приблизно однаковий вихід хромосомних аберацій при опромі ненні лімфоцитів в умовах in vitro та in vivo. Це озна чає, що на опромінення лімфоцит реагує як авто номна біологічна система. Висока мобільність лім Рис. 1. Рівні профілактики захворювань ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 179ОНКОЛОГИЯ • Т. 20 • № 3 • 2018 179 фоцитів у кров’яному руслі, розподіл лімфатичних вузлів по всьому організму, їх здатність акумулюва ти перебудови хромосом дозволяють оцінювати ра діочутливість організму людини в цілому. У перифе ричній крові лімфоцити не діляться, перебуваючи в стадії спокою (G0), і являють собою синхронізо вану популяцію клітин. Встановлено, що серед них максимум лише 0,3% здійснюють синтез ДНК. Під впливом мітогену починається трансформація біль шості лімфоцитів, що забезпечує їх проліферацію. Сьогодні існує два головні хромосомні тести для визначення ІРЧ людини з використанням культу ри ЛПК та метафазним аналізом аберацій хромо сом. Перший — це оцінка спонтанного рівня абера цій хромосом в ЛПК (G0тест), який є інтегральним показником дії на людину канцерогенних чинників не тільки променевої, а й хімічної природи, і тому недостатньо специфічний для оцінки ІРЧ. Другий — оцінка цитогенетичного ефекту в ЛПК, індуковано го тестуючим опроміненням в найбільш радіочут ливій G2стадії клітинного циклу (G2тест). Залеж ність виходу аберацій хромосом у ЛПК при одній дозі опромінення у різних осіб розрізняється, що дає підстави розглядати кількісні цитогенетичні дані як об’єктивні показники ІРЧ людини. У дослідженнях ми використовували цільну ве нозну кров 62 радіологів (117 спостережень) із різ ним стажем роботи у сфері дії ІВ. Вони обіймали посади лікаря, рентгенолаборанта, рентгенотехніка у відділеннях променевої діагностики та терапії лі кувальнопрофілактичних закладів. Вивчено інди відуальні дані щодо їх віку, посади, трудового стажу, анамнезу із переліком супутніх захворювань, спад кової онкологічної обтяженості. При цьому керува лися положенням Гельсінської декларації Всесвіт ньої медичної асоціації (2008), яка передбачає ін формовану згоду донорів на участь у дослідженні, а також загальними етичними принципами, прийня тими на Першому національному конгресі України з біоетики (2001). Культивування клітин здійснювали відповід но до стандартного протоколу [8] протягом 52 год при 37 °С. До складу культуральної суміші входили: живильне середовище RRMI 1640 («Gibko», США), ембріональна бичача сироватка, гентаміцину суль фат (4% розчин), мітоген Тлімфоцитів фітогем аглютинін (ФГА; «Gibko», США). Для накопичен ня метафазних пластинок хромосом використову вали колцемід («Sigma», США). Цитогенетичний аналіз. Відбір метафазних плас тинок здійснювали за загальноприйнятими вимога ми. Метафазна пластинка має містити 46 ± 1 хромо сому. Усі хромосоми повинні бути чітко пофарбова ні і рівномірно розподілені у метафазній пластинці (рис. 2). На одне спостереження аналізували в серед ньому 200–300 метафаз. Для оцінки загальної радіо чутливості хромосом (G0тест) визначали частоту аберантних клітин (%), загальну частоту аберацій хромосом, частоту аберацій хроматидного та хро мосомного типів, частоту окремих видів аберацій на кожні 100 проаналізованих метафаз. Рис. 2. Метафазна пластинка лімфоцита крові людини На відміну від методичного підходу, що зазви чай використовується для визначення ІРЧ хво рих онкологічного профілю [9–11], ми пропону ємо виконувати метафазний аналіз у період, коли більшість лімфоцитів ділиться у культурі уперше, оскільки у наступних мітозах частота аберацій зни жується за рахунок елімінації аберантних клітин, їх репродуктивної загибелі, радіаційної затримки мі тозів, а можливо, і змін просторового розташування хромосомних перебудов. Крім того, швидкість про ходження мітотичних циклів лімфоцитів у культурі суттєво залежить від індивідуальної імунореактив ності людини. Оцінка ІРЧ. Відповідно до розробленого нами алгоритму [12] при визначенні ІРЧ доцільно вико нувати такі етапи: • тестуюче опромінення культури ЛПК здійсню вали на 46й годині інкубації клітин, тобто в кін ці G2періоду, оскільки в цей термін спостеріга ється найбільш повне виявлення розбіжностей ІРЧ хромосом; • для тестуючого опромінення використовували джерела рідкоіонізуючих випромінювань (рент генівські, або гаммапромені); доза опромінен ня становила 1,5 Гр, що дозволяє реєструвати ін дивідуальні розбіжності чутливості каріотипу об стежених осіб до опромінення; • метафазний аналіз препаратів виконували в пер шому післяпроменевому мітозі; для визначення ІРЧ застосовували «провокативне» опромінення культури клітин у G2стадії, для спектра абера цій якої притаманні аберації хроматидного типу. Дослідження мітотичної активності лімфо- цитів крові. Здатність Тлімфоцитів до ФГА стимульованої бласттрансформації є критерієм функціональної активності імунокомпетентних клі ОНКОЛОГИЯ • Т. 20 • № 3 • 2018 ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 180 тин людини. В якості показника проліферативної активності клітин використовували значення мі тотичного індексу (МІ) лімфоцитів за таких умов: • із аналізу виключали ядра поліморфноядерних клітин, нестимульовані ФГА або мертві клітини; • підраховували кількість клітин в стадії метафа зи (М1); • підраховували кількість стимульованих (бласт них) клітин (М2). МІ визначали в проміле за формулою 1: МІ = М1 /M2 • 1000, ‰. (1) Виділення плазми та ЛПК. Зразки крові до їх ви користання для отримання плазми. Периферичну кров збирали в стерильну ємність з антикоагулян том (гепарином — 0,01%) та зберігали при 3–5 °С до отримання плазми і лімфоцитів. Плазму кро ві отримували центрифугуванням протягом 15 хв при 3000 об./хв та кімнатній температурі. Виді лення ЛПК виконували на FicollPague PLUS згід но з інструкцією виробника (GE Healthcare Bio Sciences AB). Підрахунок кількості життєздатних клітин проводили за стандартною методикою, ви користовуючи суправітальне фарбування трипано вим синім. Дослідження апоптозу. Вміст гіподиплоїдних клі тин у зразках ЛПК, що зазнавали або не зазнава ли опромінення, визначали методом проточної ци тометрії з фарбуванням у розчині пропідію йодиду («Sigma», США) [13]. Флуоресценцію клітин оці нювали на проточному цитофлуориметрі FACScan («Becton Dickinson», США). У кожній пробі підра ховували не менш ніж 10 тис. клітин. Мертві кліти ни та їх фрагменти вилучали з кінцевого аналізу. Для кількісного аналізу даних застосовували програму CELLQuest («BD Biosciences Pharmingen», США). Дослідження рівня SH-груп у плазмі крові. Оцінку вмісту сульфгідрильних груп білків і пептидів (СГБ) в плазмі крові проводили спектрофотометрич ним методом за реакцією із 5,5дитіобіс(2нітро бензоатом) (ДТНБ) [14]. Вміст СГБ виражали в мкМ забарвленого аніона 2нітро5тіобензоату на 1 мг білка і обчислювали з урахуванням молярного ко ефіцієнта екстинції (ε = 1,86 • 105 моль1 • см1) за формулою 2: с = (1,86 • 10 5 моль-1 • см-1/ ε /Vплазми • Сб) • 10 6, (2) де ε — поглинання при 412 нм; V — об’єм плазми, мл; Сб — концентрація білка, мг/мл; 106 — коефіці єнт перерахунку у мкМ. РЕЗУЛЬТАТИ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ Цитогенетичні дослідження радіочутливості лім- фоцитів крові професіоналів, що працюють у сфері дії ІР. Одержані результати представлено окремо для першої групи обстеження радіологів, стаж роботи яких у сфері дії ІВ не перевищує 1,5 року, та дру гої — стаж роботи яких становить понад 1,5 року. На рис. 3 наведено дані цитогенетичного обсте ження професіоналів першої групи. Середньогру пова частота спонтанних аберацій хромосом у ЛПК осіб цієї групи за хромосомним G0тестом стано вила 3,8 ± 0,3 аберації/100 метафаз (від 1 до 13 абе рацій/100 метафаз). Це незначно перевищує ве личину середньопопуляційного показника (3 абе рації/100 метафаз), який є стандартом для оцінки спонтанного та індукованого рівня генетичних по шкоджень у радіаційній цитогенетиці. Але у 40% випадків індивідуальна частота аберацій хромосом у лімфоцитах обстежених радіологів у 1,5–2,0 раза перевищувала значення середньопопуляційного по казника. У спектрі хромосомних перебудов перева жають аберації хроматидного типу, в основному де леції, а у трьох випадках спостерігали стабільні абе рації хромосомного типу — транслокації (аномальні хромосоми), які вважаються променевими маркера ми. Підвищений рівень аберацій хроматидного типу свідчить про нестабільність геному обстежених осіб. Виходячи із парадигм радіаційного канцерогенезу, додаткове професійне опромінення цих осіб буде ускладнювати нестабільність їх геному і потенційно сприяти підвищенню канцерогенного ризику. Таке тлумачення підтверджується далі даними цитогене тичного обстеження радіологів другої групи (рис. 4). 0 2 4 6 8 10 12 14 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 ×à ñò îò à àá åð àö ³é õ ðî ì îñ îì í à 10 0 ì åò àô àç ¹ îáñòåæåíîãî Рис. 3. Загальна радіочутливість лімфоцитів крові профе сіоналів першої групи (хромосомний G0тест) ×à ñò îò à àá åð àö ³é õ ðî ì îñ îì í à 10 0 ì åò àô àç ¹ îáñòåæåíîãî 0 2 4 6 8 10 12 14 16 1 4 7 10 13 16 19 22 25 28 31 34 37 Рис. 4. Загальна радіочутливість лімфоцитів крові профе сіоналів другої групи (хромосомний G0тест) У рамках виконаного дослідження показано, що, на відміну від першої групи, при цитогене ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 181ОНКОЛОГИЯ • Т. 20 • № 3 • 2018 181 тичному обстеженні радіологів із більшим стажем роботи середньогрупова частота спонтанних абе рацій за хромосомним G0тестом становила вже 8,3 ± 0,6/100 метафаз. Значення дослідженого по казника більше ніж у 2 рази перевищує величину се редньопопуляційного, а також спонтанних аберацій, визначених для радіологів першої групи. Встановле но, що приблизно в 90% випадків реєструється інди відуальний підвищений рівень аберацій хромосом. У 38% обстежених осіб у спектрі генетичних пошко джень відмічали променеві маркери (дицентричні та аномальні хромосоми) від 0,5 до 6,0/100 метафаз, що свідчить про радіаційну навантаженість геному обстежених професіоналів (рис. 5, 6). Рис. 5. Дицентрична хромосома та супроводжувальний парний фрагмент Рис. 6. Транслокація (аномальна хромосома) На рис. 7 та 8 наведено цитогенетичні дані інди відуальної радіаційної чутливості лімфоцитів кро ві радіологів із різним стажем роботи у сфері дії ІВ. Ці дані одержано із використанням хромосомного G2тесту, ключовим етапом якого є «провокативне» опромінення культури клітин у пізній G2період мі тотичного циклу. Діапазон варіабельності значень загальної кіль кості радіаційноіндукованих структурних перебу дов хромосом (за G2тестом) в лімфоцитах крові про фесіоналів першої групи обстеження становив від 19 до 67 аберацій/100 метафаз (див. рис. 7). Серед них у близько 50% спостережень реєструються індуковані аберації у межах від 25 до 40 хромосомних перебудов на кожні 100 проаналізованих клітин. Аналіз спектра радіаційноіндукованих перебудов показав, що істот ний внесок у формування генетичної нестабільнос ті роблять аберації хроматидного типу, а саме деле ції. Частота хроматидних розривів, які представлені у вигляді делецій у метафазних клітинах при тестую чому опроміненні у G2період мітотичного циклу, ві дображає рівень нерепарованих подвійних розривів молекул ДНК, а індивідуальні розбіжності в радіо чутливості хромосом формуються за рахунок гене тичноконтрольованої роботи системи репарації ра діаційноіндукованих пошкоджень [15]. ×à ñò îò à àá åð àö ³é õ ðî ì îñ îì í à 10 0 ì åò àô àç ¹ îáñòåæåíîãî 0 10 20 30 40 50 60 70 80 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 Рис. 7. ІРЧ лімфоцитів крові професіоналів першої групи (хромосомний G2тест) ×à ñò îò à àá åð àö ³é õ ðî ì îñ îì í à 10 0 ì åò àô àç ¹ îáñòåæåíîãî 0 25 50 75 100 125 150 4 10 16 22 28 34 Рис. 8. ІРЧ лімфоцитів крові професіоналів зі стажем ро боти у сфері дії ІВ понад 1,5 року (хромосомний G2тест) На відміну від цитогенетичних даних, одержаних при обстеженні професіоналів першої групи, у фахів ців другої групи із більшим стажем роботи у сфері дії ІВ діапазон варіабельності значень загальної частоти хромосомних перебудов становив від 45 до 140 абера цій/100 метафаз (див. рис. 8). Майже у 90% спосте режень реєструються радіаційноіндуковані аберації у межах від 50 до 100 перебудов на кожні 100 проана лізованих клітин. Поряд із реєстрацією хроматидних делецій особливістю спектра індукованих генетич них змін у лімфоцитах крові представників цієї групи є формування обмінів як хроматидного, так і хромо ОНКОЛОГИЯ • Т. 20 • № 3 • 2018 ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 182 сомного типів. Це суттєво ускладнює нестабільність геному обстежених осіб та потенційно підвищує ризик виникнення радіаційноасоційованого раку. Таким чином, порівняльний аналіз ІРЧ хромосом лімфоцитів крові обстежених радіологів показав, що специфічними показниками ІРЧ є частота хроматид них делецій, а її варіабельність залежить від стажу ро боти у сфері дії ІВ. Групу підвищеного професійного радіаційного ризику формували переважно ветерани галузі. У рамках виконаного дослідження встановле но, що у більшості випадків не виявлено кореляції між індивідуальними значеннями спонтанного рів ня аберацій хромосом (G0тест) та ІРЧ хромосом (G2 тест); коефіцієнт кореляції становив 0,1 при p = 0,05. Зазвичай цитогенетична оцінка ІРЧ людини здійснювалася на основі аналізу спонтанного рів ня аберацій хромосом та пошуку в його спектрі про меневих маркерів (хромосомний G0тест). Як зазна чено вище, такий метод оцінки ІРЧ, без сумніву, є менш інформативним, оскільки спонтанний рівень аберацій хромосом є інтегральним показником дії на організм різноманітних мутагенних та канцеро генних чинників довкілля. На відміну від нього, хро мосомний G2тест оцінює генетично детермінова ну чутливість індивідуума саме до радіаційного чин ника, яку фактори довкілля при певних обставинах можуть модифікувати [12]. Однак на основі одержа них результатів вважаємо, що у тих випадках, коли підвищений спонтанний рівень хромосомних пере будов збігається з високою ІРЧ, слід очікувати най вищого ризику виникнення радіогенних пухлин. Раніше нами встановлено, що в контрольній групі умовно здорових осіб (УЗО) МІ лімфоцитів становить 63,7 ± 3,2‰ [12]. У цьому досліджен ні у радіологів з високою ІРЧ також спостеріга лося пригнічення мітотичного потенціалу клітин до 25,0 ± 1,8‰. При цьому міжіндивідуальної варі абельності цього показника не виявлено. Визначення кількості апоптотичних клітин в ЛПК. У ЛПК радіологів визначали рівень спон танного або індукованого рентгенівським опромі ненням в дозі 2 Гр апоптозу клітин, який оцінювали за відсотком гіподиплоїдних клітин, використову ючи стандартний метод проточної цитометрії після фарбування ДНК клітин пропідію йодидом. Отри мані результати порівнювали із групою УЗО — до норів. Репрезентативні гістограми розподілу інтен сивності флуоресценції ЛПК у цих групах наведено на рис. 9. Результати визначення відсотка гіподипло їдних клітин за даними цитометрії в ЛПК радіо логів та УЗО наведено на рис. 10. Середні значення вмісту апоптотичних клітин в популяції ЛПК суттєво від різнялися між дослідженими групами. Так, відсоток гіподиплоїдних клітин у групі УЗО суттєво переви щував (у 1,72 раза) їх значення у групі радіо логів, що може свідчити про посилення елімінації пошкодже них клітин у осіб, які професійно зазнають постій ного впливу ІВ. Відмінність між дослідженими гру пами також проявилася у різній чутливості ізольо ваних ЛПК до тестуючого опромінення крові in vitro в дозі 2 Гр. У групі радіологів опромінення ЛПК при зводило до збільшення (в 1,34 раза) кількості клітин в стані апоптозу, на відміну від групи УЗО, де опро мінення не викликало збільшення відсотка гіподи плоїдних клітин. Аналіз статистичних показників вмісту апоптотичних клітин в ЛПК досліджених груп свідчить про значні відмінності в їх чутливості до ІВ. Так, порівняльний аналіз диспе́рсії, яка є мі рою відхилення значень випадкової величини від се реднього значення розподілу, показав, що дисперсія в групах УЗО та радіологів без тестуючого опромі нення мало відрізнялася між групами (в 1,15 раза). При опроміненні дисперсія значень досліджувано го показника достовірно збільшувалася в 2,73 раза в групі УЗО та 3,7 раза в групі радіологів. При цьо му коефіцієнт варіації в обох групах збільшувався на 61–70% при опроміненні ЛПК in vitro, що вказує на значну мінливість цього показника. Fl3 Рис. 9. Гістограми розподілу інтенсивності флуоресцен ції ЛПК, помічених пропідію йодидом: а — інтактні ЛПК групи УЗО; б — інтактні ЛПК групи радіологів. Зазначено відсоток гіподиплоїдних клітин за кількістю ДНК на клі тину в діапазоні, виділеному як М1 0 2 4 6 8 ÓÇÎ Ðàä³îëîãè ÓÇÎ Ðàä³îëîãè % Áåç îïðîì³íåííÿ Îïðîì³íåííÿ 2 Ãð Рис. 10. Рівень спонтанного або індукованого тестуючим рентгенівським опроміненням в дозі 2 Гр апоптозу в ЛПК груп УЗО та радіологів Таким чином, зареєстровано відмінності вмісту клітин в стані апоптозу в популяції ЛПК, виділених із крові донорів контрольної та дослідної груп. Від соток гіподиплоїдних клітин у групі УЗО на 58% пе ревищував їх значення у групі радіологів, що може свідчити про посилення елімінації пошкоджених ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 183ОНКОЛОГИЯ • Т. 20 • № 3 • 2018 183 клітин в осіб, які працюють у сфері впливу ІВ. Вста новлено, що ЛПК дослідної та контрольної груп мають різну чутливість до тестуючого опромінен ня крові. Опромінення ЛПК призводило до збіль шення на 35% кількості клітин в стані апоптозу, на відміну від групи УЗО, де опромінення не спри чиняло підвищення відсотка гіподиплоїдних клі тин. Отримані дані свідчать про активацію апопто тичного шляху елімінації радіаційно пошкоджених ЛПК у професіоналів, робота яких пов’язана із ви користанням джерел ІВ. Визначення рівня СГБ. Науковий інтерес до до слідження вмісту СГБ у плазмі крові переважно пов’язаний з їх значенням у регуляції окисновід новної рівноваги і метаболічних процесів. Це по служило основним критерієм при відборі цього по казника як маркера для оцінки ІРЧ серед професі оналів, що працюють у сфері впливу ІВ, дія яких призводить до порушень окисновідновної рівно ваги в організмі. Результати спектрофотометричного визначення рівня СГБ в плазмі крові у групах УЗО та радіоло гів наведено на рис. 11. Виявлено, що в плазмі кро ві осіб контрольної групи середнє значення вмісту СГБ становило 0,252 ± 0,007 мкМ. У групі донорів, які працюють у сфері дії ІВ, кількість SHгруп була достовірно зменшеною (р ≤ 0,05) в 1,7 раза порів няно із їх значенням в крові групи УЗО і становила 0,146 ± 0,006 мкМ. 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 ÓÇÎ Ðàä³îëîãè Âì ³ñ ò SH -ã ðó ï, ì êÌ Рис. 11. Вміст SHгруп (мкМ) в плазмі крові УЗО та ра діологів Аналіз статистичних показників вмісту SHгруп в плазмі крові УЗО та радіологів свідчить про до стовірні відмінності між ними. Порівняльний ана ліз диспе́рсії в групах УЗО та радіологів не виявив значних відхилень між групами. Однак коефіцієнт варіації в групі радіологів збільшувався в 1,9 раза порівняно зі значенням в групі УЗО, що свідчить на значну мінливість цього показника в осіб, які працюють у сфері дії ІВ. З урахуванням важливості підтримання вмісту SHгруп в плазмі крові на пев ному рівні, зокрема для утримання окисновіднов ної рівноваги в організмі, наявність значної варіа бельності показника не тільки потребує подальшо го вивчення, а і вказує на необхідність враховувати рівень СГБ у плазмі крові при роботі в умовах під вищеного рівня ІВ. Таким чином, встановлено достовірне зниження (на 60%) вмісту СГБ в плазмі крові осіб, які на ро бочому місці зазнають впливу ІВ, що є додатковим фактором професійного ризику в плані розвитку радіаційноасоційованого раку. Даний показник може слугувати додатковим при формуванні груп підвищеного канцерогенного ризику серед профе сіоналів, діяльність яких пов’язана із використан ням джерел ІВ. ГОЛОВНІ ВИСНОВКИ ТА ПРАКТИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ Аналіз результатів цитогенетичного обстежен ня професіоналів, що працюють у сфері дії радіа ції, дозволяє резюмувати: у випадках, коли підви щений спонтанний рівень хромосомних перебу дов у лімфоцитах крові збігається з високою ІРЧ, слід очікувати найвищого ризику виникнення ра діогенних пухлин. Зниження рівня СГБ у плазмі крові є свідченням порушень метаболізму та окис новідновної рівноваги і буде слугувати додатко вим об’єктивним біомаркером для оцінки про фесійного ризику розвитку радіаційноасоційо ваного раку. Таким чином, підвищена радіаційноіндукована дестабілізація геному соматичних клітин (хромосом ні G0 і G2тести) та зміни метаболізму і порушень окисновідновної рівноваги (рівень SHгруп білків і пептидів в плазмі крові) є підставою для комплекс ного застосування цих тестів в якості прогностич них показників підвищеного ризику виникнення радіогенного раку та своєчасного вживання профі лактичних засобів. Робота проведена в рамках Державного замовлен- ня МОН України, НДР (договір ДЗ/27–2017) «Радіо- біологічне обґрунтування первинної індивідуальної про- філактики радіаційно-асоційованого раку» (№ держ- реєстрації 0117U006899, 2017–2018 рр.). СПИСОК ВИКОРИСТАНОЇ ЛІТЕРАТУРИ 1. National Report of Ukraine: Twentyfive Years of the Cher nobyl Disaster. Safety of the Future (Ministry of Emergencies of Ukraine, AllUkraine Institute of Civil Protection of Population), 2011. Kyiv: KIM. 356 p. 2. OECD Health Data: Health care resources: OECD Health Statistics (database). DOI: 10.1787/ctexamstot table2013–1en. 3. Radford IR. Chromosomal rearrangements as the basis for human tumorogenesis. Int J Radiat Biol 2004; 80 (8): 543–57. 4. Hagmar L, Stromberg U, Bonassi S. Impact of types of lymphocytes chromosomal aberrations on human cancer risk: re sults from Nordic and Italian cohorts. Cancer Res 2004; 64 (6): 2258–63. 5. Domina EA, Ryabchenko NM, Barylyak IR. A study of the contribution of repair processes to the formation of individual ra diosensitivity in human beings at the chromosome level. Cytol Genet 2008; 2 (2): 107–10. 6. Biological dosimetry: chromosomal aberrations analysis for dose assessment. Technical Reports series № 260 1986; Vienna: Int Atom Energy Agency. 69 p. ОНКОЛОГИЯ • Т. 20 • № 3 • 2018 ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 184 7. United Nations. Ionizing Radiation. Sources and Biologi cal effects. UNSCEAR 1982. Report to the General Assembly with annexes 1982; New York: United Nations publ. 82 p. 8. Cytogenetic Dosimetry: Applications in Preparedness for and Response to Radiation Emergencies 2011; Vienna: IAEA. 232 p. 9. West CM, Barnett GC. Genetics and genomics of radiother apy toxicity: Towards prediction. Genome Med 2011; 3 (8): 52. 10. Borgmann K, Haeberle D, Doerk T, et al. Genetic deter mination of chromosomal radiosensitivities in G0 and G2phase human lymphocytes. Radiother Oncol 2007; 83 (20): 196–202. 11. Brzozowska K, Pinkawa M, Eble MJ, et al. In vivo versus in vitro individual radiosensitivity analyses in healthy donors and in prostate cancer patients with and without severe sidi effects af ter radiotherapy. Int J Radiat Biol 2012; 38 (5): 405–13. 12. Domina EA. Radiogenic Cancer: Epidemiology and Pri mary Prevention. «Scientific Book» Project. Kyiv: Naukova Dum ka, 2016. 196 p. (in Russian). 13. Riccardi C, Nicoletti I. Analysis of apoptosis by propidi um iodide staining and flow cytometry. Nature Protocols 2006; 1 (3): 1458–61. 14. Verevkin IV, Tochilkin AI, Popova NA. Colorimetric me thod for determining of SHgroups and SSbonds in proteins using 5,5’dithiobis (2nitrobenzoic acid). Modern methods in biochem istry. VN Orekhovich (ed.). Moskow: Medicine, 1977. p. 223–31. 15. Smart V. Chromosomal radiosensitivity: a study of the chro mosomal G2assay in human blood lymphocytes indicating vari ability. Mutat Res 2003; 528: 105–10. THE ARGUMENTATION OF THE PREVENTION OF RADIOGENIC CANCER IN PROFESSIONALS THAT WORK IN THE FIELD OF IONIZING RADIATION USING BIOLOGICAL METHODS E.A. Domina, V.M. Mykhailenko R.E. Kavetsky Institute of Experimental Pathology, Oncology and Radiobiology, NAS of Ukraine, Kyiv, Ukraine Summary. Aim: radiobiological argumentation of pri- mary prevention of cancer with radiation genesis in professionals (radiologists) with the use of genetic, bio- chemical and cellular methods. Object and methods: samples of peripheral blood of 62 radiologists (117 ob- servations) with different work experience in the field of radiation. A test system of culture of blood lymphocytes with a metaphase analysis of chromosome aberrations. Chromosomal G0- and G2-tests were used to determine an individual radiosensitivity. Cell apoptosis was deter- mined by using the method of flow cytometry. The evalu- ation of SH-groups level in blood plasma was performed by spectrophotometric method. Results: the comparative analysis of individual radiosensitivity (IR) of chromo- somes in blood lymphocytes of examined radiologists has shown that its specific indicator is the frequency of chromatid deletions. Its variability depends on the length of work in the field of radiation. The group of increased occupational carcinogenic risk consisted mainly of vet- erans of the branch. In most cases, no correlation was found between the individual values of the spontaneous level of chromosomal aberrations (G0-test) and IR chro- mosomes (G2-test). The radiologists with a high IR le- vel had a suppression of the mitotic potential of cells up to 25.0 ± 1.8‰. At the same time, the interindividual variability of this indicator was not revealed. Conclu- sions: an analysis of the results of the cytogenetic survey of professionals working in the field of radiation suggests that in the cases where the increased spontaneous level of chromosomal alterations in blood lymphocytes coin- cides with high IR, the greatest risk of developing radio- genic tumors should be expected. Decrease of sulfhydryl groups level in proteins and peptides of the blood plas- ma is evidence of metabolic and redox disturbances and will serve as an additional objective biomarker to assess the occupational risk of radiation-associated cancer. Key Words: radiogenic cancer, radiologists, peripheral blood, individual radiosensitivity, chromosomal G0 and G2tests, apoptosis, SHgroups in blood plasma. Адреса для листування: Дьоміна Е.А. 03022, Київ, вул. Васильківська, 45 Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України Email: edjomina@ukr.net Одержано: 26.09.2018
id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-145576
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn	1562-1774
language	Ukrainian
last_indexed	2025-12-07T13:09:06Z
publishDate	2018
publisher	Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України
record_format	dspace
spelling	Дьоміна, Е.А. Михайленко, В.М. 2019-01-24T08:43:28Z 2019-01-24T08:43:28Z 2018 Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів / Е.А. Дьоміна, В.М. Михайленко // Онкологія. — 2018. — Т. 20, № 3. — С. 177-184. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. 1562-1774 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/145576 Мета: радіобіологічне обґрунтування первинної профілактики виникнення раку радіаційного генезу у професіоналів (радіологів) із залученням генетичних, біохімічного та клітинного методів. Об’єкт і методи: зразки периферичної крові 62 радіологів (117 спостережень) із різним стажем роботи у сфері дії радіації. Тест-система культури лімфоцитів крові з метафазним аналізом аберацій хромосом. Для визначення індивідуальної радіочутливості використовували хромосомні G₀- та G₂-тести. Апоптоз клітин визначали методом проточної цитометрії. Оцінку вмісту SH-груп у плазмі крові проводили спектрофотометричним методом. Результати: порівняльний аналіз індивідуальної радіочутливості (ІРЧ) хромосом лімфоцитів крові обстежених радіологів показав, що її специфічними показниками є частота хроматидних делецій. Її варіабельність залежить від стажу роботи у сфері дії радіації. Групу підвищеного професійного канцерогенного ризику становили переважно ветерани галузі. У більшості випадків не виявлено кореляції між індивідуальними значеннями спонтанного рівня аберацій хромосом (G₀-тест) та ІРЧ хромосом (G₂-тест). У радіологів з високою ІРЧ спостерігалося пригнічення мітотичного потенціалу клітин до 25,0 ± 1,8‰. При цьому міжіндивідуальної варіабельності цього показника не виявлено. Висновки: аналіз результатів цитогенетичного обстеження професіоналів, що працюють у сфері дії радіації, дозволяє резюмувати: у випадках, коли підвищений спонтанний рівень хромосомних перебудов у лімфоцитах крові збігається з високою ІРЧ, слід очікувати найвищого ризику виникнення радіогенних пухлин. Зниження рівня сульфгідрильних груп білків і пептидів у плазмі крові є свідченням порушень метаболізму та окисно-відновної рівноваги і буде слугувати додатковим об’єктивним біомаркером для оцінки професійного ризику розвитку радіаційно-асоційованого раку. Aim: radiobiological argumentation of primary prevention of cancer with radiation genesis in professionals (radiologists) with the use of genetic, biochemical and cellular methods. Object and methods: samples of peripheral blood of 62 radiologists (117 observations) with different work experience in the field of radiation. A test system of culture of blood lymphocytes with a metaphase analysis of chromosome aberrations. Chromosomal G₀-and G₂-tests were used to determine an individual radiosensitivity. Cell apoptosis was determined by using the method of flow cytometry. The evaluation of SH-groups level in blood plasma was performed by spectrophotometric method. Results: the comparative analysis of individual radiosensitivity (IR) of chromosomes in blood lymphocytes of examined radiologists has shown that its specific indicator is the frequency of chromatid deletions. Its variability depends on the length of work in the field of radiation. The group of increased occupational carcinogenic risk consisted mainly of veterans of the branch. In most cases, no correlation was found between the individual values of the spontaneous level of chromosomal aberrations (G₀-test) and IR chromosomes (G₂-test). The radiologists with a high IR level had a suppression of the mitotic potential of cells up to 25.0 ± 1.8‰. At the same time, the interindividual variability of this indicator was not revealed. Conclusions: an analysis of the results of the cytogenetic survey of professionals working in the field of radiation suggests that in the cases where the increased spontaneous level of chromosomal alterations in blood lymphocytes coincides with high IR, the greatest risk of developing radiogenic tumors should be expected. Decrease of sulfhydryl groups level in proteins and peptides of the blood plasma is evidence of metabolic and redox disturbances and will serve as an additional objective biomarker to assess the occupational risk of radiation-associated cancer. Робота проведена в рамках Державного замовлення МОН України, НДР (договір ДЗ/27–2017) «Радіобіологічне обґрунтування первинної індивідуальної профілактики радіаційно-асоційованого раку» (№ держреєстрації 0117U006899, 2017–2018 рр.). uk Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України Онкологія Оригинальные исследования Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів Тhe argumentation of the prevention of radiogenic cancer in professionals that work in the field of ionizing radiation using biological methods Article published earlier
spellingShingle	Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів Дьоміна, Е.А. Михайленко, В.М. Оригинальные исследования
title	Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів
title_alt	Тhe argumentation of the prevention of radiogenic cancer in professionals that work in the field of ionizing radiation using biological methods
title_full	Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів
title_fullStr	Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів
title_full_unstemmed	Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів
title_short	Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів
title_sort	обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів
topic	Оригинальные исследования
topic_facet	Оригинальные исследования
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/145576
work_keys_str_mv	AT dʹomínaea obgruntuvannâprofílaktikiradíogennogorakuuprofesíonalívŝopracûûtʹusferídíííonízuûčihvipromínûvanʹízzalučennâmbíologíčnihmetodív AT mihailenkovm obgruntuvannâprofílaktikiradíogennogorakuuprofesíonalívŝopracûûtʹusferídíííonízuûčihvipromínûvanʹízzalučennâmbíologíčnihmetodív AT dʹomínaea theargumentationofthepreventionofradiogeniccancerinprofessionalsthatworkinthefieldofionizingradiationusingbiologicalmethods AT mihailenkovm theargumentationofthepreventionofradiogeniccancerinprofessionalsthatworkinthefieldofionizingradiationusingbiologicalmethods

Обґрунтування профілактики радіогенного раку у професіоналів, що працюють у сфері дії іонізуючих випромінювань, із залученням біологічних методів

Institution

Similar Items