Лимфангиогенез и метастазирование опухолей

В лекции проанализированы современные представления о молекулярных и клеточных механизмах, участвующих в регуляции опухольассоциированного образования новых лимфатических сосудов. Особое внимание уделено регуляции лимфангиогенеза цитокинами VEGF-C/D и роли этих факторов в лимфогенном метастазиро...

Full description

Saved in:

Bibliographic Details
Date:	2009
Main Author:	Фильченков, А.А.
Format:	Article
Published:	Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького 2009
Subjects:	Лекция
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/14587
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	Лимфангиогенез и метастазирование опухолей / А.А. Фильченков // Онкологія. — 2009. — Т.11, № 2. — С. 94-103 — Бібліогр.: 64 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

_version_	1859471258895253504
author	Фильченков, А.А.
author_facet	Фильченков, А.А.
citation_txt	Лимфангиогенез и метастазирование опухолей / А.А. Фильченков // Онкологія. — 2009. — Т.11, № 2. — С. 94-103 — Бібліогр.: 64 назв. — рос.
collection	DSpace DC
description	В лекции проанализированы современные представления о молекулярных и клеточных механизмах, участвующих в регуляции опухольассоциированного образования новых лимфатических сосудов. Особое внимание уделено регуляции лимфангиогенеза цитокинами VEGF-C/D и роли этих факторов в лимфогенном метастазировании. Охарактеризованы основные методы оценки уровня VEGF-C, VEGF-D, а также плотности лимфатических сосудов. Обсуждается перспективность определения указанных показателей у больных с различными формами солидных опухолей с целью прогнозирования течения заболевания. Ключевые слова: лимфангиогенные факторы, эндотелиальные клетки, лимфатические сосуды, интегрины, маркерные белки, опухолевые клетки, хемокины, солидные опухоли, лимфатические узлы, метастазирование, прогноз. Current knowledge concerning both molecular and cellular mechanisms controlling tumorassociated de novo formation of lymphatic vessels is analyzed. The special attention is focused on regulation of lymphangiogenesis by VEGF-C/D and their involvement in lymphatic metastasizing. The principal techniques used for the assessment of VEGF-C and VEGF-D content as well as the density of the lymphatic vessels are outlined. The prognostic/predictive potential of the above-mentioned parameters in the patients with different solid tumors is also discussed. Key Words: lymphangiogenic factors, endothelial cells, lymphatic vessels, integrins, marker proteins, tumor cells, chemokines, solid tumors, lymph nodes, metastasis, prognosis.
first_indexed	2025-11-24T10:00:16Z
format	Article
fulltext	лекцИЯ 94 О Н К О Л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 ВВЕДЕНИЕ Первые сведения о существовании лимфатиче ских сосудов появились еще в XVII ст. В 1627 г. была опубликована книга известного итальянского хи рурга Гаспаро Азелли, в которой среди других ана томических данных были впервые описаны лим фатические («молочные») сосуды брыжейки тон кой кишки у собаки. Долгое время лимфатическую систему считали пассивным переносчиком жиров и других веществ, источником клеток, обеспечи вающих иммунитет, а также дренажной системой, способствующей возвращению избытка тканевой жидкости в кровь. Согласно современным представлениям лимф ангиогенез является процессом образования новых лимфатических сосудов, который происходит в нор мальных и патологически измененных тканях и ор ганах под воздействием паракринных регуляторов. Лимфангиогенез активируется во время эмбриональ ного и раннего постнатального периода развития. Во взрослом организме временная инициация это го процесса наблюдается при воспалении, регенера ции тканей и заживлении ран. В отличие от эмбрио генеза, когда первые лимфатические сосуды образу ются из кардиальной вены, во взрослом организме лимфангиогенез осуществляется за счет формирова ния отростков уже имеющихся лимфатических сосу дов. При этом реализация лимфангиогенеза не зави сит от образования новых кровеносных сосудов. От крытие лимфангиогенных факторов и расшифровка механизмов их действия позволили c новых пози ций взглянуть на патогенез ряда воспалительных за болеваний (включая астму), лимфедемы, лимфан гиоматоза, диабета, ожирения и других. Примеча тельно, что даже название капитальной монографии («The Lymphatic Continuum Revisited»), которая уви дела свет в мае 2008 г. [1], свидетельствует о пересмот ре интереса к проблемам лимфологии. В последнее время начали активно раскрывать ся сложные механизмы, регулирующие образова ние и рост лимфатических сосудов. В значительной мере этому способствовало развитие методов, по зволяющих идентифицировать и выделять эндоте лиальные клетки лимфатических сосудов (ЭКЛС). Новейшие успехи молекулярной лимфологии (от крытие лимф ангиогенных цитокинов, рецепторов ЭКЛС, факторов транскрипции, генов и белковых маркеров лимфангиогенеза) свидетельствуют о по добии процессов образования новых лимфатиче ских и кровеносных сосудов. Как оказалось, регуля торами лимф ангиогенеза и ангиогенеза могут высту пать одни и те же молекулы, например фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) или матриксная металло протеиназа2. Более того, недавно было показано, что антиангиогенный препарат рецентин (AZD2171) также ингибирует лимфангиогенез [2]. Феномен диссеминации опухолевых клеток (ОК) по лимфатическим сосудам известен давно, но мно гие аспекты, касающиеся механизмов попадания ОК внутрь сосудов, миграции с лимфотоком и про лиферации в лимфатическом узле, до недавнего вре мени оставались неизвестными. Процесс лимфан гиогенеза имеет решающее значение для инициа ции лимфогенного метастазирования. Многие из недавно открытых лимфангиогенных факторов (как прямого, так и опосредованного действия) способ ны обеспечивать проникновение ОК в интра и/или перитуморальные лимфатические капилляры (ЛК) и стимулировать перемещение ОК по лимфатиче ской системе, блокируя при этом их гибель. Вместе с тем накапливается все больше данных о том, что продукция отдельных лимфангиогенных факторов или высокая плотность ЛК могут служить критери ями, прогнозирующими появление метастазов. Цель данной лекции — дать читателю представ ление об общих принципах формирования опухоль ассоциированных ЛК, о ключевых молекулярных и клеточных компонентах лимфангиогенеза. Будут также рассмотрены особенности лимфогенного ме тастазирования солидных опухолей. За рамками ана лиза остались вопросы разработки лекарственных препаратов, способных блокировать лимфангио генез и развитие лимфогенных метастазов, которые освещены в ряде недавних обзорных работ [3, 4]. ЛИМФАНГИОГЕНЕЗ И МЕТАСТАЗИРОВАНИЕ ОПУХОЛЕЙ Резюме. В лекции проанализированы современные представления о мо лекулярных и клеточных механизмах, участвующих в регуляции опухоль ассоциированного образования новых лимфатических сосудов. Особое вни мание уделено регуляции лимфангиогенеза цитокинами VEGFC/D и роли этих факторов в лимфогенном метастазировании. Охарактеризованы основные методы оценки уровня VEGFC, VEGFD, а также плотности лимфатических сосудов. Обсуждается перспективность определения ука занных показателей у больных с различными формами солидных опухолей с целью прогнозирования течения заболевания. А.А. Фильченков Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, Киев, Украина Ключевые слова: лимфангиогенные факторы, эндотелиальные клетки, лимфатические сосуды, интегрины, маркерные белки, опухолевые клетки, хемокины, солидные опухоли, лимфатические узлы, метастазирование, прогноз. лекцИЯ 95О Н к О л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 МОЛЕкУЛы И кЛЕТкИ, УчАСТВУющИЕ В ЛИМФАНГИОГЕНЕЗЕ Начало изучению механизмов лимфангиогене за было положено установлением факта, что специ фическим рецептором для VEGF Cтипа является белок VEGFR3, который у взрослого человека экс прессируется преимущественно в ЭКЛС [5]. Позже был выявлен еще один лиганд VEGFR3 — VEGF Dтипа, а также показана способность VEGFC и VEGFD специфически связываться с рецептор ным белком VEGFR2 [6]. Опыты по блокированию лигандиндуцированной активации VEGFR3 в пе риод эмбриогенеза убедительно свидетельствуют о необходимости VEGFR3 для образования новых лимфатических сосудов [7]. Долгое время главным медиатором образования новых ЛК считался рецеп тор VEGFR3, а не VEGFR2, который опосредует стимуляцию ангиогенеза. Однако теперь установ лено, что VEGFR2 и VEGFR3 принимают участие в регуляции как ангиогенеза, так и лимфангиогене за (рис. 1). Оба фактора VEGFC и VEGFD спо собны инициировать лимфангиогенез in vivo [8, 9]. Причем для реализации их лимфангиогенных эф фектов необходим двухэтапный процессинг про VEGFC и проVEGFD с участием плазмина и про протеинконвертаз. Рис. 1. Лигандрецепторные взаимодействия различных представителей семейства VEGF и их возможное участие в стимуляции ангиогенеза и лимфангиогенеза в опухолях. PlGF — плацентарный фактор роста Помимо VEGFR3 и VEGFR2, VEGFC спосо бен специфически взаимодействовать с нейропили ном2 и α9β1интегрином, которые также присут ствуют на поверхности ЭКЛС [10, 11]. Считается, что нейропилин2 может поддерживать миграцию ЭКЛС, образуя комплексы с рецепторами VEGFR3 и VEGFR2. Антитела против нейропилина2, ко торые препятствуют связыванию VEGFC, подав ляют миграцию, но не пролиферацию ЭКЛС [12]. Следует отметить, что такое действие антител про тив нейропилина2 лишь частично зависит от акти вации рецептора VEGFC. Роль интегринов, в частности гетеродимера α9β1, в регуляции лимфангиогенеза связывают с адге зией, миграцией и выживанием ЭКЛС. В отличие от рецепторов факторов роста, интегрины лише ны собственной киназной активности, но способ ны активировать регуляторные сигналы, образуя комплексы фокальной адгезии с внутриклеточ ными киназами и адаптерными белками. Как ока залось, белки внеклеточного матрикса, такие как коллаген и фибронектин, способны через актива цию β1интегрина существенно усиливать фосфо рилирование киназы VEGFR3. Интересно, что все животные,«нокаутированные» (то есть лишен ные обеих аллелей гена) по α9интегрину, погибают в первые 2 нед после рождения с признаками лимфе демы и хилоторакса [13]. Активация специфичного для ЭКЛС фактора транскрипции PROX1 приводит к повышению экспрессии α9β1интегрина, VEGFR3 и подвижности ЭКЛС in vivo. Более того, данный интегрин способствует миграции клеток, индуци рованной VEGFC и VEGFD, путем прямого свя зывания с указанными цитокинами [11]. При этом антитела против α9β1интегрина подавляют клеточ ную подвижность, индуцированную VEGFC, что подтверждает значимость α9β1интегрина для реа лизации процессов лимфангиогенеза. Аналогичную роль играют некоторые другие интегрины (α1β1, α2β1 и α4β1). Вместе с тем получены свидетельства разли чий в интегринопосредуемой регуляции лимфан гиогенеза и ангиогенеза. Установлено, например, что αVинтегрины, которые, как известно, являют ся значимыми регуляторами ангиогенеза, не уча ствуют в образовании новых ЛК [14]. В результате связывания специфических лиган дов с VEGFR3 активируется киназа этого рецеп тора, что приводит к стимуляции пролиферации и миграции ЭКЛС, опосредованной MAPкиназой p42/p44 [15]. При опухолевом лимфангиогенезе от мечается выбрасывание филоподий ЭКЛС в на правлении ОК, которые продуцируют VEGFC, и таким образом осуществляется миграция ЭКЛС. Кроме того, в результате активации рецептора VEGFR3 происходит фосфорилирование и ак тивация киназ Akt и JNK1/2, которые блокиру ют апоптоз и поддерживают жизнеспособность ЭКЛС [15, 16]. Выживанию клеток, опосредован ному VEGFR3, может также содействовать кина за MKK4 [16]. Следует отметить, что на поверхно сти ЭКЛС выявляются гетеродимерные комплексы VEGFR3/VEGFR2, что в значительной степени затрудняет идентификацию внутриклеточных ре гуляторных сигналов, иници ируемых собственно VEGFR3. К индукторам лимфангиогенеза также относят ся VEGFA, щелочной фактор роста фибробластов (bFGF), инсулиноподобные факторы роста (IGFI и IGFII), фактор роста гепатоцитов (HGF), тромбо цитарный фактор роста (PDGF) и некоторые другие (табл. 1). J.A. Nagy и соавторы [17] сообщили о фор мировании новых лимфатических сосудов у бести мусных животных после трансфекции геном VEGFA в составе аденовирусного вектора. Следовательно, лекцИЯ 96 О Н К О Л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 VEGFA является не только главным стимулятором ангиогенеза, но и лимфангиогенным фактором. Таблица 1 Лимфангиогенные факторы и их специфические рецепторы Лиганд Рецептор VEGF-C/D VEGFR-3, VEGFR-2, нейропилин-2 VEGF-A VEGFR-2, нейропилин-1 bFGF FGFR-3 IGF-I/II IGF-1R HGF c-Kit Aнгиопоэтин-1/2 Tie2 Интерлейкин-7 IL-7R Эфрин В2 EphB4 PDGF-BB PDGFRα/β Гормон роста GHR Адреномедуллин CALCRl FGFR-3 — рецептор bFGF 3 типа; IGF-1R – рецептор IGF 1 типа; IL-7R — ре- цептор интерлейкина-7; GHR – рецептор гормона роста; CALCRl – рецеп- тор, подобный рецептору кальцитонина; другие сокращения см. в тексте. В то же время между указанными биологически ми эффектами этого цитокина существуют опреде ленные отличия. Например, для образования у бести мусных животных новых кровеносных сосудов необ ходимо постоянное присутствие VEGFA, тогда как для последующего развития сформированных ЛК это не обязательно [17]. Кроме того, действие VEGFA на ЛК может быть опосредованным (см. рис. 1), на пример, при участии макрофагов, которые проду цируют лимфангиогенные факторы, либо путем по вышения экспрессии VEGFC. Вывод об участии VEGFA в реа лизации механизмов лимфангиогене за подтверждают также данные, полученные на моде ли рака молочной железы (РМЖ) [18]. Оказалось, что нейтрализующие антиVEGFAантитела способны существенно снижать плотность ЛК в опухоли и об разование метастазов в лимфатических узлах. PDGF, как известно, высвобождается тромбо цитами и регулирует пролиферацию и миграцию клеток мезенхимального происхождения. Кроме того, этот фактор роста повышает проницаемость сосудов. Опыты с использованием «нокаутирован ных» мышей показали абсолютную необходимость PDGF для нормального эмбрионального развития. Приводятся [19] следующие доказательства прямо го участия PDGF в лимфангиогенезе: 1) антагонисты VEGFC/D или VEGFR3 не могут блокировать об разование новых лимфатических сосудов, индуциро ванное PDGFBB; 2) PDGF способствует миграции ЭКЛС; 3) на поверхности ЭКЛС выявляются рецеп торы PDGF (α и βPDGFR); 4) PDGFBB стимули рует фосфорилирование киназ Akt, Src, Erk в ЭКЛС и 5) ЛК, формирующиеся при действии PDGF, так же экспрессируют PDGFR. Следует остановиться на двух важных моментах. Вопервых, понятно, что лим фангиогенные факторы не функцио нируют изолиро ванно, а способны модулировать действие друг друга, в том числе через трансактивацию соответствующих рецепторов. Вовторых, существование такой слож ной системы регуляции образования новых ЛК ука зывает на то, что ингибирование активности только одного из группы лимфангиогенных факторов вряд ли будет достаточным для блокирования лимфангио генеза с терапевтической целью. Поскольку ЛК фактически не содержат перицитов или гладкомышечных клеток, главной мишенью для лимфангиогенных факторов служат ЭКЛС. В процес се лимфангиогенеза, помимо ЭКЛС, участвуют ОК и клетки стромы, которые продуцируют VEGFC/D, а также ассоциированные с опухолью макрофаги [20]. Кстати, макрофаги, с одной стороны, могут стимули ровать пролиферацию ЭКЛС, а с другой — способны к трансдифференцировке и последующему встраива нию в стенку образующегося ЛК [21]. Обсуждая вопрос о клеточных механизмах фор мирования новых ЛК, следует отметить участие в этом процессе предшественников ЭКЛС, которые могут с периферической кровью поступать в опухо левые очаги из костного мозга. Впервые о существо вании таких клетокпредшественников сообщили P. Salven и соавторы [22]. Они показали, что суб популяция СD34положительных клеток содержит клетки, которые коэкспрессируют маркер стволо вых клеток CD133 и рецептор VEGFR3. В присут ствии лимфангиогенных факторов происходит диф ференцировка предшественников ЭКЛС в зрелые VEGFR3+CD133– ЭКЛС. Субпопуляцию СD14 положительных моноцитов также можно рассмат ривать в качестве клетокпредшественников, по скольку после стимуляции in vitro на них появля ются маркеры ЭКЛС. МЕТОДы ВыяВЛЕНИя ЛИМФАНГИОГЕННыХ ФАкТОРОВ И ЭкЛС Не останавливаясь на инструментальных неин вазивных методах исследования лимфатических сосудов и лимфатических узлов1, рассмотрим ла бораторные методы, применяемые для выявления лимфангио генных факторов и ЭКЛС. Для оценки по казателей лимфангиогенеза у онкологических боль ных чаще всего используется ряд методов, основан ных на взаимодействии антиген — антитело (имму ногистохимия, твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) и проточная цитометрия (ПЦ)), а так же метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Высокочувствительные варианты иммуногисто химического анализа позволяют с помощью моно клональных антител выявлять VEGFC, VEGFD, VEGFR3, а также характерные для ЭКЛК антиге ны в срезах опухолевой ткани, в отпечатках и маз ках, полученных при тонкоигольной аспирацион ной биопсии. При этом удается не только иденти фицировать указанные молекулы, но и установить их тканевую и клеточную локализацию. Сегодня в мире используется много коммерческих препара тов антител против VEGFC, VEGFD или VEGFR3 с разной чувствительностью и специфичностью, что не позволяет стандартизировать метод. 1Особенности методов лимфосцинтиграфии, магнитно-резонансного ис- следования, компьютерной томографии, ультразвукового сканирования, инфракрасной спектроскопии и лимфангиографии детально обсуждают- ся в уже цитируемой монографии [1] на стр. 13–36. лекцИЯ 97О Н к О л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 Биомаркер LYVE1, позволяющий дифферен цировать лимфатические и кровеносные капилля ры, был открыт в 1999 г. [23]. Большая часть иссле дований, посвященных изучению лимфангиогенеза в опухолевой ткани, была проведена с применени ем антиLYVE1 антител. Однако снижение экспрес сии LYVE1 в некоторых тканях при воспалительных реак циях, а также отсутствие этого маркера в отдель ных опухольассоциированных ЭКЛС показывает, что для более адекватной оценки лимфангио генеза необ ходимо использовать LYVE1 в комбинации с другими маркерами ЭКЛС [24]1. В последнее время выявлено более 30 белков, экспрессия которых является харак терной для клеток, формирующих эндотелий лимфа тических или кровеносных сосудов. Некоторые из этих маркерных молекул приведены в табл. 2. Для оценки плотности ЛК чаще других (поми мо LYVE1) используют такие биомаркеры, как по допланин2 и Prox1 либо их комбинации с другими специфическими для ЭКЛС молекулами в зависи мости от типа исследуемой ткани. Их выявление мо жет иметь прогностическое значение для онкологи ческих больных (см. следующий раздел). В то же вре мя, использование биомаркеров лимфангио генеза и ангиогенеза позволило получить из кожи челове ка культуры ЭКЛС и эндотелиальных клеток кро веносных сосудов (ЭККС). Поскольку ЭКЛС со храняют свои фенотипические признаки при дли тельном культивировании и их можно выращивать в виде трехмерных культур, стало возможным из учать интимные механизмы лимфангиогенеза без применения экспериментальных животных. 1В указанной работе приведено много других полезных рекомендаций по использованию иммуногистохимического анализа для оценки лимфангио- генеза у онкологических больных. 2Рекомендуется использовать антитела D2-40, которые выявляют рези- стентный к фиксации эпитоп подопланина с высокой специфичностью и чувствительностью (соответственно 98,8 и 97,3%) [25]. К существенным недостаткам метода иммуно гистохимии следует отнести субъективизм оцен ки конкретного врачаморфолога и использование различных критериев учета антигенположительных клеток, что затрудняет сравнение результатов, по лученных разными исследователями. Метод ELISA позволяет проводить точную коли чественную оценку содержания исследуемого бел ка в биологических пробах. Достаточно информа тивным показателем в оценке прогноза заболевания считается определение (как правило, дооперацион ное) уровня лимфангиогенных факторов в сыворот ке крови онкологических больных. Например, по казано, что повышенный уровень VEGFC в крови пациентов с немелкоклеточным раком легкого, па пиллярной карциномой щитовидной железы или ра ком пищевода коррелирует с наличием метастазов в лимфатических узлах [26–28]. Имеется сообщение о выявлении подобной коррелятивной зависимости в отношении сывороточного VEGFD у больных ра ком предстательной железы [29]. Более того, в слу чаях рака пищевода или желудка у больных с высо кой концентрацией VEGFC в крови прогноз более неблагоприятен, а риск рецидивирования повышен [30, 31]. Интересно, что средний уровень VEGFC в сыворотке крови больных с меланомой кожи [32], у которых метастазы были выявлены вблизи пер вичного очага, оказался намного меньше такового у больных с отдаленными метастазами. Применительно к лимфангиогенезу метод ПЦ позволяет выявлять популяции клеток, экспресси рующих антигены ЭКЛК либо антигены, которые специфичны для предшественников таких клеток. Получение суспензии одиночных клеток из солид ных опухолей связано с определенными (хотя и пре одолимыми) трудностями. При этом не представля ется возможным отдифференцировать интра и пе ритуморальные ЛК. Наиболее перспективным, на Таблица 2 Биомаркеры ЭКЛС и ЭККС Маркер Синоним Функция Наличие/отсутствие ЭКЛС ЭККС LYVE-1 CRSBP-1 Рецептор гиалуронана ++ – Подопланин Gp38, T1α, AGGRUS, D2-40 Трансмембранный гликопротеин ++ – Prox1 Prospero-related homeobox protein-1 Фактор транскрипции ++ – VEGFR-3 Flt-4 (fms-like tyrosine kinase 4) Рецептор VEGF-C и VEGF-D + –/+ Нейропилин-2 Корецептор VEGF-C и семафорина-IIIF + –/+ CCL21 6Ckine, SLC, Exodus-2 Хемокин + – α9-интегрин Молекула адгезии + – LyP-1 Пептидный маркер ЭКЛС опухолевой ткани + – Десмоплакин Белок, взаимодействующий с кадгеринами + – FOXC2 FKHL14, MFH-1 Фактор транскрипции + – D6 Рецептор-«ловушка» для хемокинов + – 5’-нуклеотидаза 5’-nase, CD73 + – CD34 Сиаломуцин Рецептор α-селектина; молекула адгезии +* +** CD44 Рецептор гиалуронана, остеопонтина, фибронектина – + CD54 Молекула адгезии – + CD105 Эндоглин Низкоаффинный рецептор β1- и β3-TGF – + VEGFR-1 Рецептор VEGF-A, VEGF-B и PlGF – + α5-интегрин Рецептор фибронектина и инвазина; молекула адгезии – + Версикан Хондроитинсульфат протеогликан – + Нейропилин-1 Корецептор VEGF165 и семафорина-IIIА – + N-кадгерин Молекула адгезии – + PAL-E Pathologische anatomie Leiden-endothelium Гликопротеин, ассоциированный с кавеолой – + Экспрессия в опухоль-ассоциированных, но не нормальных ЭКЛС. Экспрессия в предшественниках ЭККС. лекцИЯ 98 О Н К О Л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 наш взгляд, является выявление с помощью ПЦ раз личных предшественников ЭКЛК, циркулирующих в периферической крови, хотя с данной целью метод пока используется редко. Однако практическое зна чение ПЦ может возрасти, если будет установлена корреляция между уровнем циркулирующих пред шественников ЭКЛК и клиникопатологическими характеристиками опухоли либо выживаемостью онкологических больных. ПЦР предназначена для выявления в образце тка ни заданной мРНК, а модификация этого метода, на зываемая «ПЦР в реальном времени», позволяет опре делять содержание мРНК количественно. Следует отметить высокую специфичность выявления продук тов амплификации за счет использования специаль но подобранных праймеров, а также быстроту мето да. С помощью метода ПЦР в реальном времени была выявлена корреляция между экспрессией VEGFC в опухолевой ткани пищевода и наличием метаста зов в лимфатических узлах [33]. Следует, однако, за метить, что анализ методом ПЦР не позволяет опре делить, в каких именно клетках экспрессируется вы являемый ген (ОК или примыкающие к ним клетки нормальных тканей). Кроме того, как известно, экс прессия гена на уровне мРНК не всегда отражает ре альное содержание его белкового продукта. ЗНАчЕНИЕ ЛИМФАНГИОГЕНЕЗА ДЛя МЕТАСТАЗИРОВАНИя Процесс метастазирования включает в себя кас кад последовательных и взаимосвязанных этапов: инвазию злокачественных клеток вглубь окружаю щих тканей, стимуляцию лимфангиогенеза и ан гиогенеза, проникновение ОК в лимфатические и кровеносные сосуды (интравазация), продвиже ние ОК с током лимфы или крови, задержку в бли жайших или в отдаленных органах и тканях в ре зультате адгезии к сосудистому эндотелию, выход ОК из сосудов (экстравазация), адаптацию к усло виям нового микроокружения, образование и рост вторичного (метастатического) опухолевого узла. Приблизительно 80% солидных опухолей форми руют метастазы преимущественно путем проник новения ОК в лимфатическую сис тему, и только 20% — через кровеносные сосуды. Как правило, карциномы метастазируют лимфогенным (и зна чительно реже — гематогенным) путем, тогда как саркомы образуют вторичные опухолевые узлы главным образом после попадания ОК в кровенос ное русло. Через лимфатические сосуды чаще всего распространяются клетки при таких формах злока чественных новообразований как рак предстатель ной железы, меланома, РМЖ, рак желудка и тонкой кишки, а также опухоли головы и шеи [34]. Извест но, что задержка ОК, которые мигрируют лимфо генным путем, чаще всего происходит в одном или нескольких регионарных лимфатических узлах, на зываемых «сторожевыми» (СЛУ), первых на пути оттока лимфы. Более того, образование метастазов в регионарных лимфатических узлах считается од ним из прогностических маркеров и важным кри терием для выбора стратегии лечения [35]. На рис. 2 представлены основные этапы лимфо генного метастазирования. Рис. 2. Основные этапы лимфогенного метастазирования: А — образование первичного опухолевого узла; Б — рост опухоли и секреция лимфогенных факторов; В — лимф ангиогенез в интра и перитуморальной зоне; Г — отделе ние ОК от первичной опухоли и их миграция в направлении лимфатических капилляров; Д — интравазация ОК в лим фатическую систему; Е — циркуляция ОК в лимфатическом сосуде с током лимфы; Ж — оседание ОК в субкапсулярном синусе лимфатического узла (1, 2 — приносящие и вынося щие лимфатические сосуды); З — формирование и рост ме тастазов в лимфатическом узле (адаптировано по [36]). Как можно видеть, они подобны соответствую щим этапам гематогенного метастазирования. Однако, сравнивая 2 способа диссеминации ОК, следует отме тить, что лимфогенный путь представляется более бла гоприятным для распространения и колонизации ОК. Вопервых, при отсутствии перицитов, гладкомышеч ных клеток и базальной мемб раны характерным при знаком новых ЛК является повышенная проницае мость стенки капилляра [37]. Вовторых, миграция по сосудистому руслу одиночных ОК и их кластеров осу ществляется намного эффективнее, благодаря больше му диаметру ЛК по сравнению с кровеносными капил лярами (20–120 vs 7–9 мкм). И, втретьих, в лимфати ческих сосудах практически отсутствуют стрессовые эффекты так называемой силы гидродинамического сдвига, которая действует в системе циркуляции кро ви. Благодаря этому значительно повышается выжи вание клеток с метастатическим фенотипом в услови ях их субстратнезависимой диссеминации. Ранее считалось, что лимфогенное метастазирова ние представляет собой лишь пассивный процесс, при котором ОК, случайно попав в лимфатические сосу ды, имеющиеся вблизи первичного опухолевого оча га, с током лимфы заносятся в лимфатические узлы. Однако данные последних лет убедительно свидетель ствуют, что стимуляция лимфангиогенеза и последую щая интравазация ОК в лимфатические сосуды яв ляются важным условием для метастазирования ОК в лимфатические узлы. Существенную роль в этих лекцИЯ 99О Н к О л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 процессах играют, соответственно, лимфангиогенные факторы и протеиназа MMP2. Эксперименты с ис пользованием рекомбинантного белка sVEGFR3Ig, вектора с малыми интерферирующими РНК против гена VEGFC или антител против VEGFD свидетель ствуют о непосредственной связи между экспресси ей VEGFC или VEGFD и образованием метастазов [38–40]. Кроме того, экспрессия VEGFC в клетках хирургически удаленных опухолей желчного пузыря достоверно (p < 0,001) коррелирует с образованием лимфогенных метастазов и худшей выживаемостью после операции [41]. Выявлена связь между уровнем мРНК и белка VEGFC в ткани рака желудка и инва зией ОК в лимфатические сосуды, а также формиро ванием метастазов в лимфатических узлах [42]. Боль ные с высоким уровнем экспрессии VEGFC имели значительно худший показатель 5летней выживае мости. Более того, уровень VEGFC оказался неза висимым прогностическим фактором риска смерти у больных раком желудка [42]. В другой работе [43] экспрессия VEGFC была зарегистрирована у 72,3% пациентов с немелкоклеточным раком легкого, а ре цептора VEGFR3 — в 52,6% случаев. При этом ко экспресия VEGFC и VEGFR3 достоверно (p < 0,05) коррелировала с выявлением ОК в лимфатических со судах и метастазов в лимфатических узлах. У больных с VEGFCпозитивными опухолями легкого прогноз был более неблагоприятным по сравнению с теми, у кого VEGFC в ткани опухоли отсутствовал. Резуль таты экспериментов по изучению прогностического значения VEGFC или VEGFD при разных формах солидных опухолей суммированы в табл. 3. Другой механизм участия лимфангиогене за в процессах метастазирования состоит в стиму ляции образования новых ЛК в СЛУ [44] (рис. 3). Рис. 3. Лимфогенное и гематогенное метастазирование опухолей: 1 — лимфангиогенез в первичном опухолевом узле; 2 — лимфангиогенез в регионарном лимфатическом узле; 3 — сторожевой лимфатический узел; 4 — отдален ный лимфатический узел; 5 — правый лимфатический проток; 6 — печень; 7 — кость; 8 — головной мозг; 9 — легкие; 10 — ангиогенез в первичном опухолевом узле. Тонкими стрелками указано направление тока лимфы, толстыми стрелками — тока крови Таблица 3 Примеры корреляции между уровнем VEGF-C/-D, плотностью лимфатических капилляров, выявлением метастазов в лимфатических узлах и прогнозом Тип опухоли Экспрессия Вы со ка я пл от но ст ь ЛК М ет ас та зы в ли мф ат ич ес ки х уз ла х Не бл аг оп ри ят ны й пр ог но з VE GF -C VE GF -D РМЖ + + + – “ – + + + – “ – + + + Рак шейки матки + + + + Рак эндометрия + + + – “ – + + + – “ – + + Рак яичника + + + + Немелкоклеточный рак легкого + + + – “ – + + + Мелкоклеточный рак легкого + + Плоскоклеточный рак ротовой полости + + + – “ – + + + Рак языка + + + Рак пищевода + + + – “ – + + + Рак желудка + + + – “ – + + + – “ – + + + Рак толстой и прямой кишки + + + + – “ – + + + Рак поджелудочной железы + + + + – “ – + + + + Гепатоцеллюлярная карцинома + + + Холангиокарцинома + + + Рак желчного пузыря + + + Рак мочевого пузыря + + + – “ – + + – “ – + + + Рак предстательной железы + + – “ – + + – “ – + + Папиллярный рак щитовидной железы + + – “ – + + Опухоли головы и шеи + + – “ – + + Меланома + + – “ – + + + + + *При одновременном определении с плотностью кровеносных микрососудов. На экспериментальных моделях было показано, что процесс может активироваться еще до момента по падания ОК в лимфатический узел, и в роли основ ных инициаторов лимфангиогенеза в СЛУ высту пают лимфангиогенные факторы, продуцируемые клетками первичной опухоли. Образование новых ЛК внутри и вокруг подмышечных лимфатических узлов у больных РМЖ было подтверждено недавно в одной из работ [45]. Предполагается, что активация лимфангиогене за в СЛУ благоприятствует дальнейшему метастази рованию в отдаленные органы и ткани. Однако этот вопрос продолжает оставаться малоизученным. Ис следования в эксперименте свидетельствуют, что индукция новых ЛК способствует появлению мета стазов не только в лимфатических узлах, но и в лег ком [46, 47]. На основании этих и некоторые дру гих данных справедливо заключить, что формиро лекцИЯ 100 О Н К О Л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 вание метастазов в лимфатических узлах может быть плацдармом для последующей колонизации мета статическими ОК легкого, печени, мозга и других органов. Более того, при солидных опухолях опре деленных локализаций резекция опухоли, прове денная одновременно с удалением региональных лимфатических узлов (в случае выявления в них метастатических очагов), является стандартом ле чения, которое обеспечивает повышение продол жительности жизни больных без рецидивов и отда ленных метастазов. Общеизвестно, что определенные типы опухо лей преимущественно метастазируют в определен ные органы или ткани. Например, метастазы РМЖ чаще всего выявляют в костях, печени, легком или мозге, метастазы меланомы — в легком, метастазы рака толстой и прямой кишки — в печени, а мета стазы опухолей предстательной железы — в костях. Остается неясным, зависит ли такая избиратель ность от путей диссеминации ОК в организме. В он кологии уже больше столетия существует теория «се мян и почвы», согласно которой опухоль метаста зирует в органы с наиболее благоприятными для ее роста условиями. Альтернативная точка зрения при дает решающее значение анатомическим особен ностям локализации первичного опухолевого оча га. Например, у больных раком толстой и прямой кишки ОК чаще всего проникают именно в печень по портальной системе (более чем у 55% больных) [48]. Скорее всего оба представления о преимуще ственном месте расположения метастазов следует признать обоснованными. В последнее время получены данные, проливаю щие свет на один из механизмов реализации теории «семян и почвы». Оказалось, что органоспецифи ческому метастазированию содействуют рецепто ры хемокинов, экспрессирующиеся на поверхности ОК. Как известно, хемокины представляют собой семейство секретируемых цитокинов, необходи мых для активации нейтрофилов и моноцитов и их привлечения в очаг воспаления. Установлено, что клетки РМЖ человека экспрессируют рецептор хе мокинов CXCR4, тогда как его специфический ли ганд CXCL12 продуцируется клетками тканей (кост ный мозг, легкое и лимфатические узлы), в которых чаще всего выявляют метастазы РМЖ [49]. При этом в системе in vitro клетки РМЖ способны мигриро вать по направлению к CXCL12, а антитела, нейтра лизующие CXCR4, ингибируют образование мета стазов в лимфатических узлах у экспериментальных животных. Клетки СЛУ продуцируют и другие (на пример CCL21) специфические хемокины, привле кающие к ним ОК из первичной опухоли, что кор релирует с наличием метастазов в СЛУ [50]. Важные аспекты механизма, связанного с хемотаксической активностью хемокинов, были недавно раскрыты J.D. Shields и соавторами [51]. Показано, что секре тируемые клетками перевиваемых опухолевых ли ний хемокины CCL19 и CCL21 способствуют при влечению ОК к эндотелию лимфатических сосудов. Такая направленная миграция ОК обеспечивается за счет распознавания градиента концентрации хе мокинов их рецептором CCR7, имеющимся на ОК. Следовательно, клетки первичной опухоли (то есть «семена») способны участвовать в подготовке «поч вы» для формирования будущих метастазов. Такой вывод подтверждается данными клинических ис следований. Установлена связь между повышенной экспрессией хемокинового рецептора CCR7 на клет ках опухолей толстой и прямой кишки, метастазиро ванием в лимфатические узлы и снижением у таких больных показателей выживаемости [52]. Взаимодействие ОК с ЭКЛС не ограничивается только секретируемыми факторами, как, например VEGF, хемокины или другие цитокины. Молекулы адгезии, экспрессирующиеся на апикальной поверх ности ЭКЛС, усиливают способность ОК мигриро вать внутри сосуда по направлению к лимфатиче ским узлам [53]. Среди структур, непосредственно участвующих в таких межклеточных взаимодействи ях, особый интерес вызывает рецептор маннозы, специфичный для ЭКЛС, а также CLEVER1, при сутствующий как на ЭКЛС, так и на ЭККС. Меха низмы узнавания ЭКЛС, способствующих миграции ОК, заслуживают дальнейшего исследования. Состояние лимфатических узлов — наиболее важный критерий для определения категории рис ка у больных c I/II стадией солидных новообразо ваний. При этом отсутствие метастазов в регио нарных лимфатических узлах (включая СЛУ) рас сматривается как особенно значимый фактор для отнесения случая к низкой категории риска. Выяв ление микрометастазов в регионарных лимфатиче ских узлах имеет неблагоприятное прогностическое значение в случаях РМЖ, меланомы, рака толстой и прямой кишки, пищевода, желудка, легкого, го ловы и шеи, органов женской половой сферы и не которых других (цит. по [54]). Другим ухудшающим прогноз фактором является инвазия лимфатических сосудов, особенно у больных с отсутствием мета стазов в лимфатических узлах. Выявление инвазии лимфатических сосудов коррелирует с выживаемо стью больных РМЖ, раком желудка, мочевого пу зыря и предстательной железы. В последнее время плотность лимфатических сосудов также стали рас сматривать в качестве фактора прогноза, на чем мы остановимся детальнее. Поскольку при увеличении плотности ЛК по вышается вероятность проникновения ОК в лим фатическую систему, следует ожидать, что суще ствует корреляция между плотностью ЛК и часто той образования метастазов в лимфатических узлах. Например, Q. Li и соавторы [43] выявили достовер ную зависимость между плотностью ЛК в ткани опу холи (немелкоклеточный рак легкого) и стадией за болевания, проникновением ОК в лимфатические сосуды, а также образованием лимфогенных мета стазов. Для больных немелкоклеточным раком лег лекцИЯ 101О Н к О л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 кого с метастазами в лимфатических узлах и с худ шим показателем общей выживаемости, количество ЛК в зоне, которая окружает опухоль, значительно превышало таковое у больных без метастазов и с бо лее благоприятным прогнозом [55]. Другие приме ры выявления коррелятивной связи между повы шенной плотностью ЛК и негативным прогнозом приведены в табл. 3. Возможны 2 пути лимфогенной диссеминации ОК: либо через ЛК, предсуществующие в окруже нии опухолевого узла, либо через ЛК, которые фор мируются внутри него. Вопрос о функциональной значимости интратуморальных ЛК до сих пор оста ется дискуссионным. Предполагалось, что инт ратуморальные ЛК не могут участвовать в транс порте ОК с лимфотоком, поскольку они находятся в сдавленном состоянии изза повышенного гид ростатического давления внутри опухоли. Однако в ряде работ сообщается о выявлении четкой кор реляционной зависимости между плотностью инт ратуморальных ЛК и наличием метастазов в лимфа тических узлах и/или неблагоприятным прогнозом. В частности, при опухолях головы и шеи, раке под желудочной железы, папиллярном раке щитовидной железы, раке почки или меланоме образование ЛК происходит внутри опухолевого узла. Пролифера тивная активность ЭКЛС, которая оценивалась с по мощью моноклональных антител против ядерного антигена Ki67, а также наличие внутри ЛК опухоле вых эмболов свидетельствуют об участии новых ЛК в диссеминации ОК. Более того, у пациентов с плос коклеточным раком головы и шеи плотность интра туморальных (но не перитуморальных) ЛК рассмат ривается в качестве независимого фактора небла гоприятного прогноза [56]. В то же время, согласно данным, полученным M.I. Koukourakis и соавтора ми [57], интратуморальные ЛК отсутствуют при раке легкого. Хорошо развитые ЛК у таких больных, а так же при раке эндометрия, выявляют лишь в зоне, ко торая окружает опухоль [57, 58]. Вырабатывая лимфогенные факторы, ОК ини циируют лимфангиогенез не только внутри опухо ли, но и в ее ближайшем окружении. Лимфоген ные факторы также обладают сосудорасширяющи ми свойствами в отношении перитуморальных ЛК [38]. Все это свидетельствует о важности перитумо рального лимфангиогенеза для распространения ме тастатических ОК. Такая ситуация характерна для больных РМЖ, меланомой, раком желудка, шейки матки и предстательной железы. Причем в послед нем случае [59] была установлена корреляция между плотностью перитуморальных ЛК и уровнем 5лет ней безрецидивной выживаемости. Напротив, ряд авторов [60, 61] показали, что активация перитумо рального лимфангиогенеза является маркером бо лее благоприятного течения заболевания и боль шей продолжительности жизни онкологических больных. Таким образом, проблема участия интра и перитуморальных ЛК в метастазировании окон чательно не решена и продолжает оставаться пред метом интенсивных исследований. Что касается становления локального иммун ного ответа на антигены оседающих в СЛУ ме тастатических ОК, то существенная роль в этих процессах отводится СЛУ. Известно несколько иммуносупрессирую щих механизмов, реализую щихся на разных этапах метастазирования. Один из них связан с поступлением в СЛУ ряда цитокинов, продуцируемых клетками первичного опухолевого узла. Важно, что перенесенные с током лимфы ци токины проявляют свои эффекты еще до колониза ции лимфатических узлов ОК. В частности, показа но, что у больных РМЖ или с меланомой содержание IL10 в СЛУ значительно превышает таковое в других регио нарных лимфатических узлах у тех же больных [62, 63]. При этом IL10 может ингибировать про тивоопухолевую активность моноцитов, в том чис ле за счет подавления продукции IL12. IL10 также способен блокировать секрецию Th1клетками та ких цитокинов как гаммаинтерферон и TNFальфа и предохранять ОК от лизиса, вызванного цитоток сическими Тлимфоцитами. Кроме того, IL10 спо собствует увеличению локальной продукции других регуляторов иммунного ответа, например, TGFβ и простагландина E2, которые участвуют в подавле нии антигенпрезентирующей активности дендрит ных клеток. Другой механизм индуцированной им муносупрессии в СЛУ связан с лимфоцитами, ин фильтрирующими ткань опухоли. Оказалось, что CD8+CD28– Тлимфоциты способны ингибировать пролиферацию и цитотоксическое действие цитоток сических Тлимфоцитов [64]. Причем CD8+CD28– Тлимфоциты выявляют только в СЛУ, которые со держат микрометастазы и не обнаруживают в ин тактных лимфатических узлах. Таким образом, иммуносупрессию, которая имеет место в СЛУ, сле дует рассматривать в качестве важного фактора, спо собствующего формированию метастазов в лимфа тических узлах. ОК не только стимулируют лимфан гионез в опухоли и дренирующих ее лимфатических узлах, но и обеспечивают в последних эффективное подавление локального иммунного ответа. При этом образование новых лимфатических сосудов и имму носупрессия нередко происходят до выявления ме тастатических очагов в регионарных лимфатических узлах, что согласуется с гипотезой о формировании первичной опухолью в СЛУ так называемой предме тастатической ниши. ЗАкЛючЕНИЕ Анализ приведенных в лекции данных свидетель ствует о том, что за последнее десятилетие достиг нут определенный прогресс в раскрытии механиз мов, которые регулируют образование новых лим фатических сосудов. В частности, были выявлены основные цитокины, которые непосредственно или опосредованно стимулируют миграцию, пролифера цию и выживание ЭКЛС (VEGFC/D, bFGF, IGF, лекцИЯ 102 О Н К О Л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 HGF, PDGF), а также маркерные белки (LYVE1, подопланин, Prox1 и другие), с помощью которых можно дифференцировать ЭКЛС и ЭККС. Важно, чтобы биомаркеры ЭКЛС определялись в комбина ции, а ЛК учитывались как внутри, так и по пери ферии опухолевого узла. Были также получены дан ные об участии лимфангиогенеза в диссеминации ОК в регионарные лимфатические узлы и отдален ные органы или ткани. Более того, была установле на корреляционная связь между высоким уровнем VEGFC/D или плотностью ЛК и выявлением мета стазов, а также меньшей продолжительностью жиз ни больных с солидными опухолями разного гене за. Дальнейшее выяснение роли лимфангиогенеза в метастазировании опухолей важно как для прогно за онкологического заболевания, так и для разработ ки новых лекарственных препаратов, обладающих антиметастатической активностью. ЛИТЕРАТУРА 1. The Lymphatic Continuum Revisited. Rockson SG, Ed. Ann N Y Acad Sci 2008; 1131, 243 pp. 2. Heckman CA, Holopainen T, Wirzenius M, et al. The tyrosine kinase inhibitor cediranib blocks ligandinduced vascular endothelial growth factor receptor3 activity and lymphangiogenesis. Cancer Res 2008; 68: 4754–62. 3. Stacker SA, Hughes RA, Williams RA, Achen MG. Current strategies for modulating lymphangiogenesis signalling pathways in human disease. Curr Med Chem 2006; 13: 783–92. 4. Facchetti F, Monzani E, La Porta CA. New perspectives in the treatment of melanoma: antiangiogenic and anti lymphangiogenic strategies. Recent Patents Anticancer Drug Discov 2007; 2: 73–8. 5. Joukov V, Pajusola K, Kaipainen A, et al. A novel vascular endothelial growth factor, VEGFC, is a ligand for the Flt4 (VEGFR3) and KDR (VEGFR2) receptor tyrosine kinases. EMBO J 1996; 15: 290–8. 6. Taipale J, Makinen T, Arighi E, et al. Vascular endothelial growth factor receptor3. Curr Top Microbiol Immunol 1999; 237: 85–96. 7. Makinen T, Jussila L, Veikkola T, et al. Inhibition of lymphangiogenesis with resulting lymphedema in transgenic mice expressing soluble VEGF receptor3. Nat Med 2001; 7: 199–205. 8. Enholm B, Karpanen T, Jeltsch M, et al. Adenoviral expression of vascular endothelial growth factorC induces lymphangiogenesis in the skin. Circ Res 2001; 88: 623–9. 9. Rissanen TT, Markkanen JE, Gruchala M, et al. VEGFD is the strongest angiogenic and lymphangiogenic effector among VEGFs delivered into skeletal muscle via adenoviruses. Circ Res 2003; 92: 1098–106. 10. Karpanen T, Heckman CA, Keskitalo S, et al. Functional interaction of VEGFC and VEGFD with neuropilin receptors. FASEB J 2006; 20: 1462–72. 11. Vlahakis NE, Young BA, Atakilit A, Sheppard D. The lymphangiogenic vascular endothelial growth factors VEGFC and D are ligands for the integrin alpha9beta1. J Biol Chem 2005; 280: 4544–52. 12. Caunt M, Mak J, Liang WC, et al. Blocking neuropilin2 function inhibits tumor cell metastasis. Cancer Cell 2008; 13: 331–42. 13. Huang XZ, Wu JF, Ferrando R, et al. Fatal bilateral chylothorax in mice lacking the integrin alpha9beta1. Mol Cell Biol 2000; 20: 5208–15. 14. Garmy-Susini B, Makale M, Fuster M, Varner JA. Methods to study lymphatic vessel integrins. Methods Enzymol 2007; 426: 415–38. 15. Makinen T, Veikkola T, Mustjoki S, et al. Isolated lymphatic endothelial cells transduce growth, survival and migratory signals via the VEGFC/D receptor VEGFR3. EMBO J 2001; 20: 4762–73. 16. Salameh A, Galvagni F, Bardelli M, et al. Direct recruitment of CRK and GRB2 to VEGFR3 induces proliferation, migration, and survival of endothelial cells through the activation of ERK, AKT, and JNK pathways. Blood 2005; 106: 3423–31. 17. Nagy JA, Vasile E, Feng D, et al. Vascular permeability factor/ vascular endothelial growth factor induces lymphangiogenesis as well as angiogenesis. J Exp Med 2002; 196: 1497–506. 18. Whitehurst B, Flister MJ, Bagaitkar J, et al. Anti VEGFA therapy reduces lymphatic vessel density and expression of VEGFR3 in an orthotopic breast tumor model. Int J Cancer 2007; 121: 2181–91. 19. Cao Y. Direct role of PDGFBB in lymphangiogenesis and lymphatic metastasis. Cell Cycle 2005; 4: 228–30. 20. Schoppmann SF, Birner P, Stockl J, et al. Tumor associated macrophages express lymphatic endothelial growth factors and are related to peritumoral lymphangiogenesis. Am J Pathol 2002; 161: 947–56. 21. Maruyama K, Ii M, Cursiefen C, et al. Inflammation induced lymphangiogenesis in the cornea arises from CD11b positive macrophages. J Clin Invest 2005; 115: 2363–72. 22. Salven P, Mustjoki S, Alitalo R, et al. VEGFR3 and CD133 identify a population of CD34+ lymphatic/vascular endothelial precursor cells. Blood 2003; 101: 168–72. 23. Banerji S, Ni J, Wang S-X, et al. LYVE1, a new homologue of the CD44 glycoprotein, is a lymphspecific receptor for hyaluronan. J Cell Biol 1999; 144: 789–801. 24. Van der Auwera I, Cao Y, Tille JC, et al. First international consensus on the methodology of lymphangiogenesis quantification in solid human tumours. Br J Cancer 2006; 95: 1611–25. 25. Evangelou E, Kyzas PA, Trikalinos TA. Comparison of the diagnostic accuracy of lymphatic endothelium markers: Bayesian approach. Mod Pathol 2005; 18: 1490–7. 26. Tamura M, Oda M, Tsunezuka Y, et al. Chest CT and serum vascular endothelial growth factorC level to diagnose lymph node metastasis in patients with primary nonsmall cell lung cancer. Chest 2004; 126: 342–6. 27. Yu XM, Lo CY, Lam AK, et al. Serum vascular endothelial growth factor C correlates with lymph node metastases and high risk tumor profiles in papillary thyroid carcinoma. Ann Surg 2008; 247: 483–9. 28. Krzystek-Korpacka M, Matusiewicz M, Diakowska D, et al. Upregulation of VEGFC secreted by cancer cells and not VEGFA correlates with clinical evaluation of lymph node metastasis in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). Cancer Lett 2007; 249: 171–7. 29. Kaushal V, Mukunyadzi P, Dennis RA, et al. Stagespecific characterization of the vascular endothelial growth factor axis in prostate cancer: expression of lymphangiogenic markers is associated with advancedstage disease. Clin Cancer Res 2005; 11: 584–93. 30. Kimura H, Kato H, Tanaka N, et al. Preoperative serum vascular endothelial growth factorC (VEGFC) levels predict recurrence in patients with esophageal cancer. Anticancer Res 2008; 28: 165–9. 31. Wang TB, Deng MH, Qiu WS, Dong WG, et al. Association of serum vascular endothelial growth factorC and lymphatic vessel density with lymph node metastasis and prognosis of patients with gastric cancer. World J Gastroenterol 2007; 28: 1794–8. 32. Vihinen PP, Hilli J, Vuoristo MS, et al. Serum VEGFC is associated with metastatic site in patients with malignant melanoma. Acta Oncol 2007; 46: 678–84. 33. Loges S, Clausen H, Reichelt U, et al. Determination of microvessel density by quantitative realtime PCR in esophageal cancer: correlation with histologic methods, angiogenic growth factor expression, and lymph node metastasis. Clin Cancer Res 2007; 13: 76–80. лекцИЯ 103О Н к О л О Г И Я • Т. 1 1 • № 2 • 2 0 0 9 34. Kaiserling E, Krober S, Geleff S. Lymphatic vessels in the colonic mucosa in ulcerative colitis. Lymphology 2003; 36: 52–61. 35. Pepper MS, Tille JC, Nisato R, Skobe M. Lymphangiogenesis and tumor metastasis. Cell Tissue Res 2003; 314: 167–77. 36. Nathanson SD. Insights into the mechanisms of lymph node metastasis. Cancer 2003; 98: 413–23. 37. Ji RC, Kato S. Lymphatic network and lymphangiogenesis in the gastric wall. J Histochem Cytochem 2003; 51: 331–8. 38. He Y, Rajantie I, Pajusola K, el al. Vascular endothelial cell growth factor receptor 3mediated activation of lymphatic endothelium is crucial for tumor cell entry and spread via lymphatic vessels. Cancer Res 2005; 65: 4739–46. 39. Chen Z, Varney ML, Backora MW, el al. Downregulation of vascular endothelial cell growth factorC expression using small interfering RNA vectors in mammary tumors inhibits tumor lymphangiogenesis and spontaneous metastasis and enhances survival. Cancer Res 2005; 65: 9004–11. 40. Stacker SA, Caesar C, Baldwin ME, et al. Vascular endothelial growth factorD promotes the metastatic spread of cancer via the lymphatics. Nature Med 2001; 7: 186–191. 41. Nakashima T, Kondoh S, Kitoh H, et al. Vascular endothelial growth factorC expression in human gallbladder cancer and its relationship to lymph node metastasis. Int J Mol Med 2003; 11: 33–9. 42. Duff SE, Li C, Jeziorska M, et al. Vascular endothelial growth factors C and D and lymphangiogenesis in gastrointestinal tract malignancy. Br J Cancer 2003; 89: 426–30. 43. Li Q, Dong X, Gu W, et al. Clinical significance of co expression of VEGFC and VEGFR3 in nonsmall cell lung cancer. Chin Med J (Engl) 2003; 116: 727–30. 44. Achen MG, Stacker SA. Molecular control of lymphatic metastasis. Ann NY Acad Sci 2008; 1131: 225–34. 45. Van den Eynden GG, Van der Auwera I, Van Laere SJ, et al. Induction of lymphangiogenesis in and around axillary lymph node metastases of patients with breast cancer. Br J Cancer 2006; 95: 1362–6. 46. Skobe M, Hawighorst T, Jackson DG, et al. Induction of tumor lymphangiogenesis by VEGFC promotes breast cancer metastasis. Nat Med 2001; 7: 192–8. 47. Krishnan J, Kirkin V, Steffen A, et al. Differential in vivo and in vitro expression of vascular endothelial growth factor (VEGF)C and VEGFD in tumors and its relationship to lymphatic metastasis in immunocompetent rats. Cancer Res 2003; 63: 713–22. 48. Scheele J, Stangi R, Altendorf-Hofmann A. Hepatic metastases from colorectal carcinoma: impact of surgical resection on the natural history. Br J Surg 1990: 77: 1241–6. 49. Muller A, Homey B, Soto H, et al. Involvement of chemokine receptors in breast cancer metastasis. Nature 2001; 410: 50–6. 50. Takeuchi H, Fujimoto A, Tanaka M, et al. CCL21 chemokine regulates chemokine receptor CCR7 bearing malignant melanoma cells. Clin Cancer Res 2004; 10: 2351–8. 51. Shields JD, Fleury ME, Yong C, et al. Autologous chemotaxis as a mechanism of tumor cell homing to lymphatics via interstitial flow and autocrine CCR7 signaling. Cancer Cell 2007; 11: 526–38. 52. Günther K, Leier J, Henning G, et al. Prediction of lymph node metastasis in colorectal carcinoma by expression of chemokine receptor CCR7. Int J Cancer 2005; 116: 726–33. 53. Farnsworth RH, Achen MG, Stacker SA. Lymphatic endothelium: an important interactive surface for malignant cells. Pulm Pharmacol Ther 2006; 19: 51–60. 54. Takeuchi H, Kitajima M, Kitagawa Y. Sentinel lymph node as a target of molecular diagnosis of lymphatic micrometastasis and local immunoresponse to malignant cells. Cancer Sci 2008; 99: 441–50. 55. Renyi-Vamos F, Tovari J, Fillinger J, et al. Lymphangiogenesis correlates with lymph node metastasis, prognosis, and angiogenic phenotype in human nonsmall cell lung cancer. Clin Cancer Res 2005; 11: 7344–53. 56. Kyzas PA, Geleff S, Batistatou A, et al. Evidence for lymphangiogenesis and its prognostic implications in head and neck squamous cell carcinoma. J Pathol 2005; 206: 170–7. 57. Koukourakis MI, Giatromanolaki A, Sivridis E, et al. LYVE1 immunohistochemical assessment of lymphangiogenesis in endometrial and lung cancer. J Clin Pathol 2005; 58: 202–6. 58. Stefansson IM, Salvesen HB, Akslen LA. Vascular proliferation is important for clinical progress of endometrial cancer. Cancer Res 2006; 66: 3303–9. 59. Kuroda K, Horiguchi A, Asano T, et al. Prediction of lymphatic invasion by peritumoral lymphatic vessel density in prostate biopsy cores. Prostate 2008; 68: 1057–63. 60. Straume O, Jackson DG, Akslen LA. Independent prognostic impact of lymphatic vessel density and presence of low grade lymphangiogenesis in cutaneous melanoma. Clin Cancer Res 2003; 9: 250–6. 61. Wong SY, Haack H, Crowley D, et al. Tumorsecreted vascular endothelial growth factorC is necessary for prostate cancer lymphangiogenesis, but lymphangiogenesis is unnecessary for lymph node metastasis. Cancer Res 2005; 65: 9789–98. 62. Woo SU, Bae JW, Yang JH, et al. Overexpression of interleukin10 in sentinel lymph node with breast cancer. Ann Surg Oncol 2007; 14: 3268–73. 63. Lee JH, et al. Quantitative analysis of melanomainduced cytokinemediated immunosuppression in melanoma sentinel nodes. Clin Cancer Res 2005; 11: 107–12. 64. Filaci G, Fenoglio D, Fravega M, et al. CD8+CD28– T regulatory lymphocytes inhibiting T cell proliferative and cytotoxic functions infiltrate human cancers. J Immunol 2007; 179: 4323–34. LYMPHANGIOGENESIS AND TUMOR METASTASIS A.A. Philchenkov Summary. Current knowledge concerning both molecular and cellular mechanisms controlling tumor associated de novo formation of lymphatic vessels is analyzed. The special attention is focused on regulation of lymphangiogenesis by VEGFC/D and their involvement in lymphatic metastasizing. The principal techniques used for the assessment of VEGFC and VEGFD content as well as the density of the lymphatic vessels are outlined. The prognostic/predictive potential of the abovementioned parameters in the patients with different solid tumors is also discussed. Key Words: lymphangiogenic factors, endothelial cells, lymphatic vessels, integrins, marker proteins, tumor cells, chemokines, solid tumors, lymph nodes, metastasis, prognosis. Адрес для переписки: Фильченков А.А. 03022, Киев, ул. Васильковская, 45 Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины
id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-14587
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn	1562-1774,0204-3564
last_indexed	2025-11-24T10:00:16Z
publishDate	2009
publisher	Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького
record_format	dspace
spelling	Фильченков, А.А. 2010-12-27T09:04:48Z 2010-12-27T09:04:48Z 2009 Лимфангиогенез и метастазирование опухолей / А.А. Фильченков // Онкологія. — 2009. — Т.11, № 2. — С. 94-103 — Бібліогр.: 64 назв. — рос. 1562-1774,0204-3564 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/14587 В лекции проанализированы современные представления о молекулярных и клеточных механизмах, участвующих в регуляции опухольассоциированного образования новых лимфатических сосудов. Особое внимание уделено регуляции лимфангиогенеза цитокинами VEGF-C/D и роли этих факторов в лимфогенном метастазировании. Охарактеризованы основные методы оценки уровня VEGF-C, VEGF-D, а также плотности лимфатических сосудов. Обсуждается перспективность определения указанных показателей у больных с различными формами солидных опухолей с целью прогнозирования течения заболевания. Ключевые слова: лимфангиогенные факторы, эндотелиальные клетки, лимфатические сосуды, интегрины, маркерные белки, опухолевые клетки, хемокины, солидные опухоли, лимфатические узлы, метастазирование, прогноз. Current knowledge concerning both molecular and cellular mechanisms controlling tumorassociated de novo formation of lymphatic vessels is analyzed. The special attention is focused on regulation of lymphangiogenesis by VEGF-C/D and their involvement in lymphatic metastasizing. The principal techniques used for the assessment of VEGF-C and VEGF-D content as well as the density of the lymphatic vessels are outlined. The prognostic/predictive potential of the above-mentioned parameters in the patients with different solid tumors is also discussed. Key Words: lymphangiogenic factors, endothelial cells, lymphatic vessels, integrins, marker proteins, tumor cells, chemokines, solid tumors, lymph nodes, metastasis, prognosis. Iнститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р. Є. Кавецького Лекция Лимфангиогенез и метастазирование опухолей Lymphangiogenesis and tumor metastasis Article published earlier
spellingShingle	Лимфангиогенез и метастазирование опухолей Фильченков, А.А. Лекция
title	Лимфангиогенез и метастазирование опухолей
title_alt	Lymphangiogenesis and tumor metastasis
title_full	Лимфангиогенез и метастазирование опухолей
title_fullStr	Лимфангиогенез и метастазирование опухолей
title_full_unstemmed	Лимфангиогенез и метастазирование опухолей
title_short	Лимфангиогенез и метастазирование опухолей
title_sort	лимфангиогенез и метастазирование опухолей
topic	Лекция
topic_facet	Лекция
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/14587
work_keys_str_mv	AT filʹčenkovaa limfangiogenezimetastazirovanieopuholei AT filʹčenkovaa lymphangiogenesisandtumormetastasis

Лимфангиогенез и метастазирование опухолей

Institution

Similar Items