Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов
В экспериментах на мышах исследовали аналгетическую активность ряда синтезированных в нашей лаборатории 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов, в том числе 3-пропокси-7-бром-5-(2’-хлор)фенил-1,2-дигидро-3Н-1,4-бензодиазепин-2-она (соединение 6). Данное соединение продемонстрировало выраженны...
Збережено в:
| Дата: | 2013 |
|---|---|
| Автори: | , , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України
2013
|
| Назва видання: | Нейрофизиология |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/148232 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов / В.И. Павловский, О.В. Цимбалюк, В.С. Мартынюк, Т.А. Кабанова, Е.А. Семенишина, Е.И. Халимова, С.А. Андронати // Нейрофизиология. — 2013. — Т. 45, № 5. — С. 463-468. — Бібліогр.: 25 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-148232 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1482322025-02-09T17:00:28Z Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов Аналгетичні властивості та можливі механізми дії 3-заміщених похідних 1,4-бензодіазепінів Павловский, В.И. Цимбалюк, О.В. Мартынюк, В.С. Кабанова, Т.А. Семенишина, Е.А. Халимова, Е.И. Андронати, С.А. В экспериментах на мышах исследовали аналгетическую активность ряда синтезированных в нашей лаборатории 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов, в том числе 3-пропокси-7-бром-5-(2’-хлор)фенил-1,2-дигидро-3Н-1,4-бензодиазепин-2-она (соединение 6). Данное соединение продемонстрировало выраженные противовоспалительные и антиноцицептивные свойства. Об этом свидетельствовали результаты теста уксуснокислотных «корчей» (индукции висцеральной боли у мышей), теста с каррагинановым отеком конечности у крыс и формалинового теста на мышах. На многоклеточных препаратах кольцевых гладких мышц фундального отдела желудка крыс была установлена величина аффинности данного соединения 6 (рКВ = 6.41); величина наклона графика Шилда позволяет полагать, что механизм ингибирования указанным агентом брадикининовых (БК-) рецепторов является в основном конкурентным. Таким образом, соединение 6 можно рассматривать как перспективную основу для разработки и создания фармакологических препаратов-антагонистов БК-рецепторов, которые найдут применение в клинике. В експериментах на мишах досліджували аналгетичну активність низки синтезованих у нашій лабораторії 3-заміщених похідних 1,4-бензодіазепінів, у тому числі 3-пропокси-7-бром-5-(2’-хлор)феніл-1,2-дигідро-3Н-1,4- бензодіазепін-2-ону (сполука 6). Ця сполука продемонструвала виражені протизапальні та антиноцицептивні властивості. Про це свідчили результати тесту оцтовокислотних „корчів” (вісцерального болю у мишей), тесту з карагінановим набряком кінцівки у щурів та формалінового тесту на мишах. На багатоклітинних препаратах кільцевих гладеньких м’язів фундального відділу шлунка щурів була встановлена величина афінності сполуки 6 (рКВ = 6.41), величина нахилу графіка Шилда дозволяє вважати, що механізм інгібування цією сполукою брадикінінових (БК-) рецепторів є в основному конкурентним. Таким чином, сполуку 6 можно розглядати як перспективну основу для розробки і створення фармакологічних препаратів-антагоністів БК-рецепторів, котрі знайдуть застосування в клініці. Работа выполнена в рамках целевой комплексной программы фундаментальных исследований НАН Украины «Фундаментальные проблемы создания новых веществ и материалов химического производства», проект № 15-13/343. 2013 Article Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов / В.И. Павловский, О.В. Цимбалюк, В.С. Мартынюк, Т.А. Кабанова, Е.А. Семенишина, Е.И. Халимова, С.А. Андронати // Нейрофизиология. — 2013. — Т. 45, № 5. — С. 463-468. — Бібліогр.: 25 назв. — рос. 0028-2561 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/148232 547.891.2:615.212+262.1:57.083 ru Нейрофизиология application/pdf Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| description |
В экспериментах на мышах исследовали аналгетическую активность ряда синтезированных в нашей лаборатории 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов, в том
числе 3-пропокси-7-бром-5-(2’-хлор)фенил-1,2-дигидро-3Н-1,4-бензодиазепин-2-она
(соединение 6). Данное соединение продемонстрировало выраженные противовоспалительные и антиноцицептивные свойства. Об этом свидетельствовали результаты теста
уксуснокислотных «корчей» (индукции висцеральной боли у мышей), теста с каррагинановым отеком конечности у крыс и формалинового теста на мышах. На многоклеточных препаратах кольцевых гладких мышц фундального отдела желудка крыс была
установлена величина аффинности данного соединения 6 (рКВ = 6.41); величина наклона графика Шилда позволяет полагать, что механизм ингибирования указанным
агентом брадикининовых (БК-) рецепторов является в основном конкурентным. Таким
образом, соединение 6 можно рассматривать как перспективную основу для разработки
и создания фармакологических препаратов-антагонистов БК-рецепторов, которые найдут применение в клинике. |
| format |
Article |
| author |
Павловский, В.И. Цимбалюк, О.В. Мартынюк, В.С. Кабанова, Т.А. Семенишина, Е.А. Халимова, Е.И. Андронати, С.А. |
| spellingShingle |
Павловский, В.И. Цимбалюк, О.В. Мартынюк, В.С. Кабанова, Т.А. Семенишина, Е.А. Халимова, Е.И. Андронати, С.А. Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов Нейрофизиология |
| author_facet |
Павловский, В.И. Цимбалюк, О.В. Мартынюк, В.С. Кабанова, Т.А. Семенишина, Е.А. Халимова, Е.И. Андронати, С.А. |
| author_sort |
Павловский, В.И. |
| title |
Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов |
| title_short |
Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов |
| title_full |
Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов |
| title_fullStr |
Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов |
| title_full_unstemmed |
Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов |
| title_sort |
аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов |
| publisher |
Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України |
| publishDate |
2013 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/148232 |
| citation_txt |
Аналгетические свойства и возможные механизмы действия 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов / В.И. Павловский, О.В. Цимбалюк, В.С. Мартынюк, Т.А. Кабанова, Е.А. Семенишина, Е.И. Халимова, С.А. Андронати // Нейрофизиология. — 2013. — Т. 45, № 5. — С. 463-468. — Бібліогр.: 25 назв. — рос. |
| series |
Нейрофизиология |
| work_keys_str_mv |
AT pavlovskijvi analgetičeskiesvojstvaivozmožnyemehanizmydejstviâ3zameŝennyhproizvodnyh14benzodiazepinov AT cimbalûkov analgetičeskiesvojstvaivozmožnyemehanizmydejstviâ3zameŝennyhproizvodnyh14benzodiazepinov AT martynûkvs analgetičeskiesvojstvaivozmožnyemehanizmydejstviâ3zameŝennyhproizvodnyh14benzodiazepinov AT kabanovata analgetičeskiesvojstvaivozmožnyemehanizmydejstviâ3zameŝennyhproizvodnyh14benzodiazepinov AT semenišinaea analgetičeskiesvojstvaivozmožnyemehanizmydejstviâ3zameŝennyhproizvodnyh14benzodiazepinov AT halimovaei analgetičeskiesvojstvaivozmožnyemehanizmydejstviâ3zameŝennyhproizvodnyh14benzodiazepinov AT andronatisa analgetičeskiesvojstvaivozmožnyemehanizmydejstviâ3zameŝennyhproizvodnyh14benzodiazepinov AT pavlovskijvi analgetičnívlastivostítamožlivímehanízmidíí3zamíŝenihpohídnih14benzodíazepínív AT cimbalûkov analgetičnívlastivostítamožlivímehanízmidíí3zamíŝenihpohídnih14benzodíazepínív AT martynûkvs analgetičnívlastivostítamožlivímehanízmidíí3zamíŝenihpohídnih14benzodíazepínív AT kabanovata analgetičnívlastivostítamožlivímehanízmidíí3zamíŝenihpohídnih14benzodíazepínív AT semenišinaea analgetičnívlastivostítamožlivímehanízmidíí3zamíŝenihpohídnih14benzodíazepínív AT halimovaei analgetičnívlastivostítamožlivímehanízmidíí3zamíŝenihpohídnih14benzodíazepínív AT andronatisa analgetičnívlastivostítamožlivímehanízmidíí3zamíŝenihpohídnih14benzodíazepínív |
| first_indexed |
2025-11-28T07:49:13Z |
| last_indexed |
2025-11-28T07:49:13Z |
| _version_ |
1850019592386117632 |
| fulltext |
NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 5 463
УДК 547.891.2:615.212+262.1:57.083
В. И. ПАВЛОВСКИЙ1, О. В. ЦИМБАЛЮК2, В. С. МАРТЫНЮК2,
Т. А. КАБАНОВА1, Е. А. СЕМЕНИШИНА1, Е. И. ХАЛИМОВА1,
С. А. АНДРОНАТИ1
АНАЛГЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И ВОЗМОЖНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ
3-ЗАМЕЩЕННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ 1,4-БЕНЗОДИАЗЕПИНОВ
Поступила 27.08.13
В экспериментах на мышах исследовали аналгетическую активность ряда синтезиро-
ванных в нашей лаборатории 3-замещенных производных 1,4-бензодиазепинов, в том
числе 3-пропокси-7-бром-5-(2’-хлор)фенил-1,2-дигидро-3Н-1,4-бензодиазепин-2-она
(соединение 6). Данное соединение продемонстрировало выраженные противовоспали-
тельные и антиноцицептивные свойства. Об этом свидетельствовали результаты теста
уксуснокислотных «корчей» (индукции висцеральной боли у мышей), теста с карраги-
нановым отеком конечности у крыс и формалинового теста на мышах. На многокле-
точных препаратах кольцевых гладких мышц фундального отдела желудка крыс была
установлена величина аффинности данного соединения 6 (рКВ = 6.41); величина на-
клона графика Шилда позволяет полагать, что механизм ингибирования указанным
агентом брадикининовых (БК-) рецепторов является в основном конкурентным. Таким
образом, соединение 6 можно рассматривать как перспективную основу для разработки
и создания фармакологических препаратов-антагонистов БК-рецепторов, которые най-
дут применение в клинике.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: 3-замещенные 1,4-бензодиазепины, аналгезия, гладкие
мышцы желудка, отек, тензометрические исследования, брадикининовые (БК-)
рецепторы.
1Физико-химический институт им. А. В. Богатского НАН Украины,
Одесса (Украина).
2Киевский национальный университет им. Тараса Шевченко (Украина).
Эл. почта: victor_pavlovsky@ukr.net (В. И. Павловский).
ВВЕДЕНИЕ
Разработка методов профилактики и лечения за-
болеваний, связанных с развитием острой и хро-
нической боли, представляет собой важную меди-
ко-биологическую задачу. Ее решение связано, в
первую очередь, с поиском высокоактивных и без-
опасных аналгетиков. Опубликованные в литерату-
ре экспериментальные данные свидетельствуют о
выявлении аналгетических свойств как у ряда из-
вестных препаратов [1], так и у новых соедине-
ний – производных класса 1,4-бензодиазепинов
[2, 3]. Некоторые представители этого класса, за-
мещенные по третьему положению, проявляют
значительную аналгетическую активность и высо-
кую аффинность по отношению к брадикининовым
(БК-) рецепторам [4–6].
Калликреин/кининовая система, к которой отно-
сится нонапептид брадикинин (БK) – один из са-
мых сильных природных алгогенов – участвует в
регуляции важных функций в организме челове-
ка (сократительной активности и тонуса гладких
мышц сосудов и желудочно-кишечного тракта) и
обеспечении болевой чувствительности [7, 8]. Она
также является ключевым звеном, анормальная ак-
тивация которого обусловливает развитие острого и
хронического воспаления соответствующих тканей
[9–11]. Клеточный ответ, который лежит в осно-
ве этих реакций, опосредуется активацией БК-
рецепторов двух подтипов (В1 и В2) [12, 13].
У гладких мышц дыхательных путей, желудоч-
но-кишечного тракта и миометрия активация БК-
рецепторов вызывает сокращение. И наоборот,
основной реакцией гладких мышц сосудов на воз-
действие БК является расслабление [14].
В течение последних десятилетий работа над
созданием антагонистов БК-рецепторов ведется
весьма активно. В настоящее время стали извест-
ными ряд ингибиторов калликреинкининовой си-
NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 5464
В. И. ПАВЛОВСКИЙ, О. В. ЦИМБАЛЮК, В. С. МАРТЫНЮК и др.
стемы пептидной и непептидной природы (НОЕ
140, desArg9 [Leu8] BK, R-954 и др.) [14, 15], одна-
ко дальнейшая разработка, синтез и анализ свойств
соединений, способных селективно подавлять пато-
логические (болевые и воспалительные) процессы,
которые опосредованы активацией БК-рецепторов,
не теряют актуальности. Можно полагать, что со-
здание новых высокоэффективных аналгетиков, яв-
ляющихся антагонистами БК-рецепторов, поможет
решить многие проблемы, связанные с облегчением
различных болевых состояний.
Мы исследовали аналгетические свойства
ряда новых 3-алкокси-1 ,2-дигидро-3Н-1 ,4-
бензодиазепин-2-онов (рис. 1), структура молекул
которых указывает на их потенциальную способ-
ность взаимодействовать с БК-рецепторами. Про-
верка антагонистического действия наиболее ак-
тивного соединения («лидера») на эти рецепторы
была проведена на многоклеточных препаратах
кольцевых гладких мышц фундального отдела же-
лудка крыс.
МЕТОДИКА
Эксперименты были выполнены на нелинейных бе-
лых крысах массой 240–260 г и нелинейных белых
мышах массой 20–25 г; животные содержались в
стандартных условиях вивария и получали воду и
стандартизированный корм ad libitum. Выведение
животных из опыта осуществляли путем инъекции
пропофола (средство для наркоза; «Sigma», США)
в летальной дозе.
Тест уксуснокислотных «корчей» (индукция вис-
церальной боли, вызванная внутрибрюшинным вве-
дением раствора уксусной кислоты). Аналгетиче-
скую активность исследовали с использованием
экспериментальной модели висцеральной боли. Хи-
мическое раздражение болевых рецепторов брюш-
ной полости мышей обеспечивалось путем вну-
трибрюшинного введения 0.75 %-ного раствора
уксусной кислоты, что вызывало возникновение
непроизвольных сокращений мышц живота („кор-
чей”), сопровождающихся вытягиванием задних ко-
нечностей и выгибанием спины. Инъекции раство-
ра уксусной кислоты осуществляли через 40 мин
после внутрибрюшинного введения тестируемых
соединений в дозах от 0.03 до 3.00 мг/кг. За жи-
вотными наблюдали в течение 20 мин, подсчитывая
количество «корчей» у каждой мыши. Аналгетиче-
скую активность (АА) оценивали по способности
соединений уменьшать число таких корчей в пре-
делах тест-периода в опытной группе животных по
сравнению с контролем и выражали в процентах,
рассчитывая ее нормированную величину:
АА = (Nк - Nо/ Nк ) ∙ 100 %,
где Nк и Nо –среднее количество корчей в контроль-
ной и опытной группах соответственно.
Активность исследуемых соединений сравнива-
ли с таковой эталонного препарата – натрия дикло-
фенака, используемого в найденной для него дозе
ED50 = 10 мг/кг. Значения ED50 рассчитывали по ме-
тоду Прозоровского [16].
Каррагинановый отек конечности. Антиэкссу-
дативную активность изучали на модели карра-
гинанового отека задней конечности крыс. Отек
вызывали путем введения 0.1 мл 1 %-ного водно-
го раствора λ-каррагинана под плантарный апо-
невроз стопы животных опытных и контрольных
групп [17, 18]. Тестируемое соединение и препарат
сравнения натрия диклофенак вводили внутрибрю-
шинно за 40 мин до индукции воспаления. Крысы
контрольной группы получали эквивалентное коли-
чество эмульсии Твин-80 в физиологическом рас-
творе. Степень отека оценивали путем измерения
объема стопы с помощью механического онкоме-
Р и с. 1. Структура молекул тестированных
соединений 1–15 – 3-алкокси-1,2-дигидро-3Н-
бензодиазепин-2-онов.
Р и с. 1. Структура молекул тестованих
сполук 1–15 – 3-алкокси-1,2-дигідро-3Н-
бензодіазепін-2-онів.
NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 5 465
АНАЛГЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И ВОЗМОЖНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ
тра [19] до введения флогогена и через 2 и 4 ч по-
сле его введения. Антиэкссудативную активность
определяли по способности исследуемого соеди-
нения подавлять воспалительную реакцию у опыт-
ных животных по сравнению с контрольными. Рас-
чет проводили по формуле:
А = (ΔVк – ΔVо/ΔVк) · 100 %,
где А – антиэкссудативная активность; ΔVо и ΔVк –
разница между объемами отечной и нормальной
стоп в опыте и контроле соответственно.
Формалиновый тест. Антиноцицептивную ак-
тивность в отношении соматической боли изучали
с использованием стандартного формалинового те-
ста на мышах. Поведенческим проявлением боли
при этом является лизание конечности, в которую
инъецировали раствор формалина. Болевая реакция
в данном случае включает в себя две фазы – ран-
нюю, продолжающуюся 5 мин после введения фло-
гогена, и вторую, более длительную, которая начи-
нается приблизительно с 11-й мин и заканчивается
примерно через 40–50 мин. Фаза I связана с непо-
средственной стимуляцией ноцицепторов формали-
ном, а фаза II индуцируется воспалительными фак-
торами, представляя собой, в сущности, первичную
гипералгезию.
Тест выполняли с помощью подкожного введе-
ния 0.01 мл 3 %-ного водного раствора формалина
в стопу животных опытной и контрольной групп.
Тестируемые соединения и препарат сравнения на-
трия диклофенак вводили внутрибрюшинно за 40
мин до индукции болевой реакции. Мыши кон-
трольной группы получали эквивалентное количе-
ство физиологического раствора с эмульгирован-
ным Твин-80. После инъекции раствора формалина
животное помещали в одиночную клетку размером
8×8×8 см и наблюдали за ним в течение 40 мин,
фиксируя суммарное время, затраченное животным
на лизание пораженной конечности. Об антиноци-
цептивной активности тестируемых соединений су-
дили по их способности уменьшать длительность
данного поведенческого проявления болевой реак-
ции.
Сократительная активность мышц желудка.
Эксперименты проводили на свободных от слизи-
стой оболочки препаратах кольцевых гладких мышц
антрального отдела желудка. Полоски мышц (сред-
ний размер 10 × 1.5 мм) помещали в термостатиру-
емую (37 оС) рабочую камеру объемом 2 мл, пер-
фузируемую раствором Кребса (скорость перфузии
5 мл/мин). Препарат подвергали пассивному ста-
ционарному растяжению с усилием 10 мН и остав-
ляли на 1 ч (до появления спонтанных сокращений
постоянных амплитуды и частоты и сокращений с
постоянными механокинетическими параметрами,
вызванных действием БК и гиперкалиевого раство-
ра). Сократительную активность исследовали в изо-
метрическом режиме с применением датчика силы
и электронного потенциометра.
В опытах использовали раствор Кребса следую-
щего состава (в миллимолях на 1 л): NaCl – 20.4,
KCl – 5.9, NaHCO3 – 15.5, NaH2PO4 – 1.2, MgCl2 –
1.2, CaCl2 – 2.5, глюкоза – 11.5; рН раствора состав-
лял 7.4. Гиперкалиевый раствор, который содержал
в себе ионы К+ в концентрации 80 мМ, готовили
путем изотонической замены в исходном растворе
Кребса необходимой части Na+ эквимолярным ко-
личеством К+. При использовании БК изначально
готовили его концентрированный водный раствор
(добавляя 1 %-ный раствор вещества к конечно-
му объему), аликвоты которого вносили в раствор
Кребса до получения концентраций от 1 нМ до
10 мкМ.
Регистрировали кумулятивные кривые «концен-
трация–эффект» для указанных концентраций БК
(1 нМ – 10 мкМ). После регистрации контрольной
кривой «концентрация–эффект» препараты отмыва-
ли раствором Кребса (в среднем в течение 20 мин),
после чего их подвергали предварительной инкуба-
ции в течение 60 мин в растворе Кребса с добавле-
нием тестируемого вещества (использованные кон-
центрации 1, 10 и 50 мкМ). Поскольку исследуемые
вещества гидрофобны, их предварительно раство-
ряли в ДМСО и добавляли 1 %-ный маточный рас-
твор к конечному объему. Аналогичные контроль-
ные растворы также содержали в себе 1 % ДМСО.
Для установления характера взаимодей -
ствия исследуемого вещества с БК использова-
ли уравнение регрессии Шилда [20]: индуци-
рованный антагонистом параллельный сдвиг
кривых «концентрация–эффект» определяли
как соотношение эквиэффективних концентра-
ций (CR) агониста, обеспечивающих 50 %-ное
сокращение, в контроле и в присутствии анта-
гониста. Аффинность антагониста (рКВ) рас-
считывали по уравнению: pKB = lg [CR – 1] –
– lg [Ca], где Са – концентрация антагониста.
Экспериментальные данные обрабатывали с при-
менением программы «OriginPro 8». Проверку вы-
борок на соответствие нормальному распределению
осуществляли с помощью критерия Шапиро–Уилка.
Для определения достоверности различий средних
величин сравниваемых выборок использовали пар-
NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 5466
В. И. ПАВЛОВСКИЙ, О. В. ЦИМБАЛЮК, В. С. МАРТЫНЮК и др.
ный t-тест Стьюдента; различия считали достовер-
ными при Р < 0.05. Анализ достоверности аппрок-
симации данных линейной функцией выполняли с
применением F-критерия Фишера; коэффициенты
детерминации (R2) были не ниже 0.9. Числовые ре-
зультаты представлены ниже как средние арифме-
тические ± ошибка среднего; n – количество опы-
тов.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Принимая во внимание данные литературы о том,
что некоторые 3-замещенные 1,2-дигидро-3Н-1,4-
бензодиазепины проявляют значительную анал-
гетическую активность [1–6], с целью поиска но-
вых аналгетиков мы ранее синтезировали ряд
3-алкокси-1,2-дигидро-3Н-1,4-бензодиазепин-2-
онов (соединения 1–15) [21–23].
Все соединения 1–15 проявляли высокую ан-
алгетическую активность в опытах in vivo в усло-
виях теста уксуснокислотных «корчей» (висцераль-
ной боли у мышей, вызванной внутрибрюшинным
введением раствора уксусной кислоты). Интенсив-
ность аналгезии во всех случаях значительно пре-
вышала аналогичный эффект препарата сравне-
ния натрия диклофенака. Диапазон значений EД50
у исследуемых соединений составлял от 0.03 до
1.77 мг/кг; для натрия диклофенака соответствую-
щее значение EД50 равнялось 10.00 ± 1.80 мг/кг.
Наибольшую степень аналгезии активность с по-
казателем ЕД50 = 0.030 ± 0.007 мг/кг обеспечивало
соединение 6; таким образом, его аналгетическая
эффективность превосходила таковую препарата
сравнения натрия диклофенака более чем на два
порядка.
Спектр фармакологического действия многих
аналгетических препаратов включает в себя также
противовоспалительную активность. В связи с этим
нами проведены опыты по выявлению противовос-
палительной и антиноцицептивной активности со-
единения 6.
Результаты выполненных нами исследований по-
казали, что введение соединения 6 (3-пропанокси-
7-бром-5-(2̕ -хлор)фенил-1 ,2-дигидро-3Н-1,4-
бензодиазепин-2-она) обеспечивало умеренное, но
достоверное снижение размеров отека, вызванного
введением каррагинана в лапку (на 36.7 и 25.0 %
через 2 и 4 ч соответственно).
Данные, полученные на основе формалинового
теста, продемонстрировали наличие высокой ан-
тиноцицептивной активности у 3-пропанокси-1,2-
дигидро-3Н-1,4-бензодиазепин-2-она (соединение 6).
Интенсивность антиноцицептивной активности ис-
следуемого соединения находилась в достаточно
четкой зависимости от введенной дозы. Так, при
уменьшении дозы с 3.0 до 0.1 мг/кг степень ин-
гибирования болевой реакции снизилась от 91.1 и
98.4 % до 76.0 и 54.0 % для І и ІІ фаз соответствен-
но. С уменьшением дозы в 300 раз, т. е. в случаях
введения соединения 6 в дозе всего 0.01 мг/кг, спо-
собность заметно подавлять болевую реакцию все
еще сохранялась, и показатели для І и ІІ фаз в усло-
виях формалинового теста составляли 15.0 и 32.1 %
соответственно.
Для анализа вероятной антагонистической актив-
ности в отношении БК-рецепторов из производных
1,2-дигидро-3Н-1,4-бензодиазепин-2-онов было вы-
брано именно соединение 6.
Чтобы охарактеризовать взаимодействие тести-
руемого соединения с БК, была исследована со-
кратительная активность гладких мышц желудка
нелинейных белых крыс с использованием тензо-
метрической методики. Полумаксимальное значе-
ние силы сокращений указанных мышц наблюда-
лось в присутствии (1.78 ± 0.14) · 10-8 М БК; это
значение ЕС50 в целом согласуется с данными Кар-
бини и соавт., полученными на фундальной части
желудка [24].
Действие соединения 6 в концентрации 1.0 мкМ
сопровождалось угнетением БК-индуцированных
сокращений гладких мышц желудка в среднем на
37 %. В аналогичных условиях сокращения гладких
мышц слепой кишки (caecum) ингибировались в
среднем на 45 % (n = 3). Поскольку амплитуда БК-
опосредованных сокращений мышц caecum обыч-
но была весьма малой (развивались усилия около
5–7 мН), дальнейшие эксперименты на этих препа-
ратах не проводили.
Для установления характера ингибирования БК-
рецепторов соединением 6 были построены куму-
лятивные кривые «концентрация–эффект» в при-
сутствии 1, 10 и 50 мкМ исследуемого соединения
(рис. 2).
На основании полученных результатов был по-
строен график Шилда (рис. 3) и установлены зна-
чения наклона (1.28) и коэффициента R2 (0.93), по
которым была оценена величина аффинности ис-
следуемого соединения (рКВ = 6.41). Так как вели-
чина наклона графика Шилда оказалась близкой к
единице, следует полагать, что антагонизм соеди-
нения 6 по отношению к БК носит в основном кон-
NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 5 467
АНАЛГЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И ВОЗМОЖНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ
курентный характер. Сродство исследуемого со-
единения к БК-рецепторам соответствует высше-
му диапазону показателей аффиннитета таких ан-
тагонистов, как D-Arg-[Hyp3,D-Phe7]-БK и D-Arg-
[Hyp3,Thi5,8,D-Phe7]-БK. Для taenia caeci морских
свинок рКВ составляет 5.89 и 5.81 [25]. Вместе с
тем следует отметить относительно небольшую ве-
личину аффинности этого соединения по сравне-
нию, например, с таковой известного селективно-
го антагониста БК1-рецепторов des-Arg
9-NPC 17761
(рКВ = 8.47, хотя в данном случае наклон графика
Шилда был достоверно меньше единицы) и анта-
гониста БК2-рецепторов НОЕ 140 (рКВ = 9.05). Эти
значения были получены [24] для гладких мышц
фундального отдела желудка крыс, исследованных
в нашем эксперименте.
Таким образом, очевидно, что 3-пропокси-
7-бром-5-(2’-хлор)фенил-1,2-дигидро-3Н-1,4-
бензодиазепин-2-он можно считать перспективной
основой для разработки и создания фармакологи-
ческих препаратов-антагонистов БК-рецепторов,
обладающих аналгетическими и противовоспали-
тельными свойствами и пригодных для применения
в клинике.
Исследования выполнялись в соответствии с положениями Меж-
дународной конвенции по защите животных, используемых в экспери-
ментальных и других научных целях (Страсбург, 1985), а также Закона
Украины «О защите животных от жестокого обращения» (Киев, 2006).
Авторы настоящей работы – В. И. Павловский, О. В. Цимба-
люк, В. С. Мартынюк, Т. А. Кабанова, Е. А. Семенишина,
Е. И. Халимова и С. А. Андронати – подтверждают, что у
них отсутствует конфликт интересов.
Работа выполнена в рамках целевой комплексной программы фун-
даментальных исследований НАН Украины «Фундаментальные про-
блемы создания новых веществ и материалов химического производ-
ства», проект № 15-13/343.
В. І. Павловський1, О. В. Цимбалюк2, В. С. Мартинюк2,
Т. А. Кабанова1, К. О. Семенішина1, О. І. Халімова1,
С. А. Андронаті1
АНАЛГЕТИЧНІ ВЛАСТИВОСТІ ТА МОЖЛИ-
ВІ МЕХАНІЗМИ ДІЇ 3-ЗАМІЩЕНИХ ПОХІДНИХ
1,4-БЕНЗОДІАЗЕПІНІВ
1Фізико-хімічний інститут ім. А. В. Богатського НАН
України, Одеса (Україна).
2Київський національний університет ім. Тараса Шевченка
(Україна).
120
%
100
80
60
40
20
0
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
–6.5 –6.0 –5.5 –5.0 –4.5 –4.0
–10 –7–9 –6
1
2
3
4
–8 –5
Р и с. 2. Кумулятивные кривые «концентрация–эффект» для
брадикинин(БК)-индуцированных сокращений в контроле
(1) и в присутствии 3-пропокси-7-бром-5-(2’-хлор)фенил-
1,2-дигидро-3Н-1,4-бензодиазепин-2-она (соединение 6) в
концентрациях 1.0 (2), 10 (3) и 50 (4) мкМ.
По оси абсцисс – десятичный логарифм концентрации БК, М;
по оси ординат – нормированная амплитуда сокращений, %.
Р и с. 2. Кумулятивні криві „концентрація–ефект” для
брадикінініндукованих скорочень у контролі (1) та в
присутності 3-пропокси-7-бром-5-(2’-хлор)феніл-1,2-дигідро-
3Н-1,4-бензодіазепін-2-ону (сполука 6) у концентраціях 1.0 (2),
10 (3) и 50 (4) мкМ.
Р и с. 3. График Шилда для действия 3-пропокси-7-бром-
5-(2’-хлор)фенил-1,2-дигидро-3Н-1,4-бензодиазепин-2-она
(соединение 6) в концентрациях 1, 10 и 50 мкМ на гладкие
мышцы фундального отдела желудка крыс.
По оси абсцисс – логарифм концентрации соединения, М; по
оси ординат – значение lg (DR-1).
Р и с. 3. Графік Шілда для дії 3-пропокси-7-бром-5-(2’-хлор)
феніл-1,2-дигідро-3Н-1,4-бензодіазепін-2-ону (сполука 6) у
концентраціях 1, 10 та 50 мкМ на гладенькі м’язи фундального
відділу шлунка щурів.
NEUROPHYSIOLOGY / НЕЙРОФИЗИОЛОГИЯ.—2013.—T. 45, № 5468
В. И. ПАВЛОВСКИЙ, О. В. ЦИМБАЛЮК, В. С. МАРТЫНЮК и др.
Р е з ю м е
В експериментах на мишах досліджували аналгетич-
ну активність низки синтезованих у нашій лабораторії
3-заміщених похідних 1,4-бензодіазепінів, у тому числі
3-пропокси-7-бром-5-(2’-хлор)феніл-1,2-дигідро-3Н-1,4-
бензодіазепін-2-ону (сполука 6). Ця сполука продемонстру-
вала виражені протизапальні та антиноцицептивні власти-
вості. Про це свідчили результати тесту оцтовокислотних
„корчів” (вісцерального болю у мишей), тесту з карагінано-
вим набряком кінцівки у щурів та формалінового тесту на
мишах. На багатоклітинних препаратах кільцевих гладень-
ких м’язів фундального відділу шлунка щурів була встанов-
лена величина афінності сполуки 6 (рКВ = 6.41), величина
нахилу графіка Шилда дозволяє вважати, що механізм інгі-
бування цією сполукою брадикінінових (БК-) рецепторів є
в основному конкурентним. Таким чином, сполуку 6 можно
розглядати як перспективну основу для розробки і створен-
ня фармакологічних препаратів-антагоністів БК-рецепторів,
котрі знайдуть застосування в клініці.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. H. U. Zeilhofer, D. Benke, and G. E. Yevenes, “Chronic
pain states: pharmacological strategies to restore diminished
inhibitory spinal pain control,” Annu. Rev. Pharmacol.
Toxicol., 52, 111-133 (2012).
2. E. Lattmann, P. Lattmann, Y. Boonprakob, et al., “In vivo
evaluation of substituted 3-amino-1,4-benzodiazepines as
anti-depressant, anxiolytic and anti-nociceptive agents,”
Arzneimittelforschung, 59, No. 2, 61-71 (2009).
3. Н. Наджафа, М. Пирали, Р. Даулатобади и др., “Синтез,
аналгетическая и противовоспалительная активность
новых производных бензодиазепина”, Хим.-фармакол.
журн., 30, № 12, 21-23 (2005).
4. M. R. Wood, J. J. Kim, W. Han, et al., “Benzodiazepines as
potent and selective bradykinin B1 antagonists,” J. Med.
Chem., 46, 1803-1806 (2003).
5. WO/2006/071775 US, A2 С07D 403/14, Novel Compounds
Useful for Bradykinin B1 Receptor Antagonism, J. S. Tung,
D. D. Dressen, R. J. Netiz, and M. A. Pleiss, publ. 07.06.06.
6. WO/02/099388 US, A2 G01N, Benzodiazepine Bradykinin
Antagonists, M. R. Wood, M. G. Bock, Dai-shi Su, et al., publ.
12.12.02.
7. A. H. Schmaier, “Assembly, activation, and physiologic
influence of the plasma kallikrein/kinin system,” Int.
J. Immunopharmacol., 8, No. 2, 161-165 (2008).
8. J. W. Bryant and Z. Shariat-Madar, “Human plasma kallikrein-
kinin system: physiological and biochemical parameters,”
Cardiovascul. Hematol. Agents Med. Chem., 7, No. 3, 234-250
(2009).
9. M. E. Moreau, N. Garbacki, G. Molinaro, et al., “The
kallikrein-kinin system: current and future pharmacological
targets,” J. Pharmacol. Sci., 99, 6-38 (2005).
10. A. Stadnicki, “Intestinal tissue kallikrein-kinin system in
inflammatory bowel disease,” Inflamm. Bowel. Dis., 17,
No. 2, 645-654 (2011).
11. A. Riad, J. L. Zhuo, H. P. Schultheiss, et al., “The role of
the renal kallikrein–kinin system in diabetic nephropathy,”
Current Opin. Nephrol. Hypertens., 16, No. 1, 22-26 (2007).
12. F. Kuhr, J. Lowry, Y. Zhang, et al., “Differential regulation of
inducible and endothelial nitric oxide synthase by kinin B1 and
B2 receptors,” Neuropeptides, 44, No. 2, 145-154 (2010).
13. J. B. Calixto, R. Medeiros, E. S. Fernandes, et al., “Kinin B1
receptors: key G-protein-coupled receptors and their role in
inflammatory and painful processes,” Br. J. Pharmacol., 143,
803-818 (2004).
14. L. M. F. Leeb-Lundberg, F. Marceau, W. M. U. Ller-Ester, et
al., “International union of pharmacology. XLV. Classification
of the kinin receptor family: from molecular mechanisms to
pathophysiological consequences,” Pharm. Rev., 57, No. 1,
27-77 (2005).
15. F. J. Hock, K. Wirth, U. Albus, et al., “Hoe 140, a new potent
and long-acting bradykinin antagonist: in vitro studies,” Br. J.
Pharmacol., 102, 769-773 (1991).
16. В. Б. Прозоровский, “Статистическая обработка результатов
фармакологических исследований”, Психофармакология и
биол. наркология, 7, № 3/4, 2090-2120 (2007).
17. Ф. П. Тринус, Н. А. Мохорт, Б. М. Клебанов, Нестероидные
противовоспалительные средства, Здоров’я, Киев (1975).
18. C. A. Winter, E. A. Risely, and G. W. Nuss, “Carrageenan
induced oedema in hind paw of the rat as an assay for anti-
inflammatory drugs,” Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 3, 544-547
(1962).
19. А. С. Захаревский, Влияние некоторых производных индола
на нервную систему, Дис. … канд. мед. наук, Минск (1969).
20. P. Cucchi, S. Meini, A. Bressan, et al., “MEN16132, a novel
potent and selective nonpeptide antagonist for the human
bradykinin B2 receptor. In vitro pharmacology and molecular
characterization,” Eur. J. Pharmacol., 528, 7-16 (2005).
21. В. И. Павловский, Е. А. Семенишина, И. А. Кравченко и
др., “3-Алкокси-1,2-дигидро-3Н-1,4-бенздиазепин-2-оны:
синтез, структура, противосудорожная активность”, Хим.-
фармакол. журн., 46, № 9, 20-25 (2012).
22. Y. Simonov, P. Bourosh, V. Kravtsov, et al., “A comparative
analysis of the crystal structure of R,S-racemate and
R-enantiomer of 7-bromo-3-(2-methoxy)ethoxy-5-phenyl-
l,2-dlhydro-3H-l,4-benzodiazeplne-2-one exhibiting a high
analgesic activity,” Zh. Organ. Farm. Khimii, 9, No. 4 (36),
70-73 (2011).
23. S. Andronati, E. Semenishyna, V. Pavlovsky, et al., “Structure
and affinity of 3-alkoxy-1,2-dihydro-3Н-1,4-benzodiazepine-
2-ones for central benzodiazepine receptors,” Eur. J. Med.
Chem., 45, No. 4, 1346-1351 (2010).
24. D. Cabrindi, D. J. Kyle, and J. Calixto, “A pharmacological
analysis of receptor subtypes and the mechanisms mediating
the biphasic response induced by kinins in the rat stomach
fundus in vitro,” J. Pharmacol. Exp. Ther., 277, No. 1,
299-307 (1996).
25. J. L. Field, J. M. Hall, and I. K. M. Morton, “Bradykinin
receptors in the guinea-pig taenia caeci are similar to proposed
BK3 receptors in the guinea-pig trachea, and are blocked by
HOE 140,” Br. J. Pharmacol., 105, 293-296 (1992).
|