Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells
We examined what effects are exerted by expression of the bcl-2 gene and by treatment with nerve growth factor (NGF) on the intensity of apoptosis in cultured pheochromocytoma cells (PC12 cells). Half of these cells were transduced with the bcl-2 gene using lentiviral plasmids, and the respective...
Saved in:
| Published in: | Нейрофизиология |
|---|---|
| Date: | 2014 |
| Main Authors: | , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | English |
| Published: |
Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України
2014
|
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/148307 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells / G. Han, W. Wei, X. Zhang, Zh. Lai, Ch. Chen // Нейрофизиология. — 2014. — Т. 46, № 4. — С. 375-380. — Бібліогр.: 11 назв. — англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-148307 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Han, G. Wei, W. Zhang, X. Lai, Zh. Chen, Ch. 2019-02-17T20:12:45Z 2019-02-17T20:12:45Z 2014 Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells / G. Han, W. Wei, X. Zhang, Zh. Lai, Ch. Chen // Нейрофизиология. — 2014. — Т. 46, № 4. — С. 375-380. — Бібліогр.: 11 назв. — англ. 0028-2561 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/148307 612.014.3+576.385.4 We examined what effects are exerted by expression of the bcl-2 gene and by treatment with nerve growth factor (NGF) on the intensity of apoptosis in cultured pheochromocytoma cells (PC12 cells). Half of these cells were transduced with the bcl-2 gene using lentiviral plasmids, and the respective two groups were denoted as bcl-2-PC12 and control (c) PC12. Then the cells were incubated in a serum-free medium in six different modes. One group of c-PC12 cells was incubated in this medium with no additional agents added, another group was incubated with 1.0 mM H₂O₂ , and the third group was incubated with both 1 mM H₂O₂ and 20 ng/ml NGF (groups 1-3). Cells of the another triad were incubated under the same conditions, respectively, but these were bcl-2-PC12 cells (groups 4-6). The apoptosis rate in each group after 1-h-long incubation was measured using a flow cytometry method. A bicinchoninic acid (BCA) technique was used for estimation of expression of Bcl-2 protein in the cultures. As was observed, the action of H₂O₂ significantly increased the apoptosis rate in both c-PC12 and bcl-2-PC12 samplings, while simultaneous action of NGF considerably attenuated such increases. At the same time, values of the apoptosis rate for bcl-2-PC12 cells were much smaller than the respective values for c-PC12 cells under all the three modes of incubation. In H₂O₂ -treated cultures, the amount of Bcl-2 protein dropped, while the treatment with NGF counteracted such shifts. The content of this protein in the bcl-2-PC12 groups was much higher than in the c-PC12 groups. Thus, transduction with the bcl-2 gene significantly inhibits apoptosis in cultured PC12 cells, and a combined influence of expression of this gene and treatment with NGF produces a synergistic effect. Ми досліджували впливи експресії гена bcl-2 та дії нервового фактора росту (NGF) на інтенсивність апоптозу культивованих клітин феохромоцитоми (PC12). У половину таких клітин був трансдукований ген bcl-2; відповідні дві групи зразків були позначені як bcl-2-PC12 та контрольні (с-PC12). Потім шість груп клітин інкубували в безсироватковому середовищі в різних умовах. Перша група клітин с-PC12 інкубувалася без дії будь-яких додаткових агентів, друга група – з додаванням 1 мМ H₂O₂ , а третя – в присутності як 1 мМ H₂O₂ , так і 20 нг/мл NGF. Клітини трьох інших груп (4–6) інкубували в тих самих умовах, але це були клітини bcl-2-PC12. Ступінь апоптозу в кожній групі після одногодинної інкубації вимірювали з використанням методу флоуцитометрії. Методику з використанням біцинхонінової кислоти застосовували для оцінки експресії білка Bcl-2 в культурах. Як було виявлено, дія H₂O₂ істотно збільшувала ступінь апоптозу в зразках як c-PC12, так і bcl-2-PC12, але одночасна дія NGF помітно зменшувала таке зростання. В той же час інтенсивності апоптозу клітин bcl-2-PC12 були значно меншими, ніж відповідні значення у клітин c-PC12 при всіх трьох режимах інкубації. В культурах, підданих впливу H₂O₂ , кількість протеїну Bcl-2 була зменшеною, тоді як вплив NGF протидіяв таким зрушенням. Вміст згаданого протеїну в групах bcl-2-PC12 був значно вищим, ніж у групах c-PC12. Отже, трансдукція гена bcl2 істотно гальмує апоптоз культивованих клітин PC12, а комбінований вплив експресії цього гена та аплікації NGF забезпечує сінергічні ефекти. en Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України Нейрофизиология Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells Впливи трансдукції гена bcl-2 та дії нервового фактора росту на апоптоз культивованих клітин pc12 Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells |
| spellingShingle |
Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells Han, G. Wei, W. Zhang, X. Lai, Zh. Chen, Ch. |
| title_short |
Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells |
| title_full |
Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells |
| title_fullStr |
Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells |
| title_full_unstemmed |
Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells |
| title_sort |
effects of transduction of the bcl-2 gene and of nerve growth factor on apoptosis of cultured pc12 cells |
| author |
Han, G. Wei, W. Zhang, X. Lai, Zh. Chen, Ch. |
| author_facet |
Han, G. Wei, W. Zhang, X. Lai, Zh. Chen, Ch. |
| publishDate |
2014 |
| language |
English |
| container_title |
Нейрофизиология |
| publisher |
Інститут фізіології ім. О.О. Богомольця НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Впливи трансдукції гена bcl-2 та дії нервового фактора росту на апоптоз культивованих клітин pc12 |
| description |
We examined what effects are exerted by expression of the bcl-2 gene and by treatment
with nerve growth factor (NGF) on the intensity of apoptosis in cultured pheochromocytoma
cells (PC12 cells). Half of these cells were transduced with the bcl-2 gene using lentiviral
plasmids, and the respective two groups were denoted as bcl-2-PC12 and control (c) PC12.
Then the cells were incubated in a serum-free medium in six different modes. One group of
c-PC12 cells was incubated in this medium with no additional agents added, another group
was incubated with 1.0 mM H₂O₂
, and the third group was incubated with both 1 mM H₂O₂
and 20 ng/ml NGF (groups 1-3). Cells of the another triad were incubated under the same
conditions, respectively, but these were bcl-2-PC12 cells (groups 4-6). The apoptosis rate
in each group after 1-h-long incubation was measured using a flow cytometry method. A
bicinchoninic acid (BCA) technique was used for estimation of expression of Bcl-2 protein
in the cultures. As was observed, the action of H₂O₂ significantly increased the apoptosis rate
in both c-PC12 and bcl-2-PC12 samplings, while simultaneous action of NGF considerably
attenuated such increases. At the same time, values of the apoptosis rate for bcl-2-PC12 cells
were much smaller than the respective values for c-PC12 cells under all the three modes of
incubation. In H₂O₂
-treated cultures, the amount of Bcl-2 protein dropped, while the treatment
with NGF counteracted such shifts. The content of this protein in the bcl-2-PC12 groups was
much higher than in the c-PC12 groups. Thus, transduction with the bcl-2 gene significantly
inhibits apoptosis in cultured PC12 cells, and a combined influence of expression of this gene
and treatment with NGF produces a synergistic effect.
Ми досліджували впливи експресії гена bcl-2 та дії нервового фактора росту (NGF) на інтенсивність апоптозу
культивованих клітин феохромоцитоми (PC12). У половину
таких клітин був трансдукований ген bcl-2; відповідні дві
групи зразків були позначені як bcl-2-PC12 та контрольні
(с-PC12). Потім шість груп клітин інкубували в безсироватковому середовищі в різних умовах. Перша група
клітин с-PC12 інкубувалася без дії будь-яких додаткових
агентів, друга група – з додаванням 1 мМ H₂O₂
, а третя –
в присутності як 1 мМ H₂O₂
, так і 20 нг/мл NGF. Клітини
трьох інших груп (4–6) інкубували в тих самих умовах, але це були клітини bcl-2-PC12. Ступінь апоптозу в кожній
групі після одногодинної інкубації вимірювали з використанням методу флоуцитометрії. Методику з використанням
біцинхонінової кислоти застосовували для оцінки експресії
білка Bcl-2 в культурах. Як було виявлено, дія H₂O₂
істотно
збільшувала ступінь апоптозу в зразках як c-PC12, так і
bcl-2-PC12, але одночасна дія NGF помітно зменшувала
таке зростання. В той же час інтенсивності апоптозу клітин
bcl-2-PC12 були значно меншими, ніж відповідні значення
у клітин c-PC12 при всіх трьох режимах інкубації. В культурах, підданих впливу H₂O₂
, кількість протеїну Bcl-2 була
зменшеною, тоді як вплив NGF протидіяв таким зрушенням.
Вміст згаданого протеїну в групах bcl-2-PC12 був значно
вищим, ніж у групах c-PC12. Отже, трансдукція гена bcl2 істотно гальмує апоптоз культивованих клітин PC12, а
комбінований вплив експресії цього гена та аплікації NGF
забезпечує сінергічні ефекти.
|
| issn |
0028-2561 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/148307 |
| citation_txt |
Effects of Transduction of the bcl-2 Gene and of Nerve Growth Factor on Apoptosis of Cultured PC12 Cells / G. Han, W. Wei, X. Zhang, Zh. Lai, Ch. Chen // Нейрофизиология. — 2014. — Т. 46, № 4. — С. 375-380. — Бібліогр.: 11 назв. — англ. |
| work_keys_str_mv |
AT hang effectsoftransductionofthebcl2geneandofnervegrowthfactoronapoptosisofculturedpc12cells AT weiw effectsoftransductionofthebcl2geneandofnervegrowthfactoronapoptosisofculturedpc12cells AT zhangx effectsoftransductionofthebcl2geneandofnervegrowthfactoronapoptosisofculturedpc12cells AT laizh effectsoftransductionofthebcl2geneandofnervegrowthfactoronapoptosisofculturedpc12cells AT chench effectsoftransductionofthebcl2geneandofnervegrowthfactoronapoptosisofculturedpc12cells AT hang vplivitransdukcíígenabcl2tadíínervovogofaktorarostunaapoptozkulʹtivovanihklítinpc12 AT weiw vplivitransdukcíígenabcl2tadíínervovogofaktorarostunaapoptozkulʹtivovanihklítinpc12 AT zhangx vplivitransdukcíígenabcl2tadíínervovogofaktorarostunaapoptozkulʹtivovanihklítinpc12 AT laizh vplivitransdukcíígenabcl2tadíínervovogofaktorarostunaapoptozkulʹtivovanihklítinpc12 AT chench vplivitransdukcíígenabcl2tadíínervovogofaktorarostunaapoptozkulʹtivovanihklítinpc12 |
| first_indexed |
2025-12-07T18:36:00Z |
| last_indexed |
2025-12-07T18:36:00Z |
| _version_ |
1850875639927668736 |