Синтез на однонитевой кольцевой ДНК фага М13, направляемый ДНК-полимеразой вируса ядерного полиэдроза тутового шелкопряда

• Date: 1985
• Main Authors: Атаева, Д.О., Марлыев, К.А., Куллыев, П.К., Михайлов, В.С.
• Format: Article
• Language: Russian
• Published: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1985
• Series: Биополимеры и клетка
• Subjects: Обзоры
• Online Access: https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152405
• Journal Title: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Cite this: Синтез на однонитевой кольцевой ДНК фага М13, направляемый ДНК-полимеразой вируса ядерного полиэдроза тутового шелкопряда / Д.О. Атаева, К.А. Марлыев, П.К. Куллыев, В.С. Михайлов // Биополимеры и клетка. — 1985. — Т. 1, № 5. — С. 234-241. — Бібліогр.: 11 назв. — рос.

Из куколок тутового шелкопряда Bombух mori, инфицированных вирусом ядерного полиэдроза (ВЯП), выделена вирусспецифичная ДНК-полимераза (ВЯП-полимераза), ВЯП-полимераза представляет собой полипептид с молекулярной массой 136 000 и коэффициентом седиментации 6,3 S. Фермент предпочитает в качестве матрицы poly(dA) с затравкой (dT)₁₀ и не активен при использовании poly (А). Частично очищенная ВЯП-полимераза активна на однонитевой кольцевой ДНК фага М13 в отсутствие затравки. Способность к синтезу на ДНК М13 обусловлена присутствием в препаратах ВЯП-полимеразы Mg²⁺-зависимой эндонуклеазы, специфичной в отношении двунитевых участков ДНК. Эндонуклеаза присутствует в препаратах ВЯП-полимеразы после фракционирования экстракта инфицированных куколок сульфатом аммония, хроматографии на фосфоцеллюлозе и оксиапатите, но может быть отделена от ВЯП-полимеразы при ультрацентрифугировании в градиенте глицерина в присутствии 200 мМ фосфата калия. При снижении концентрации соли ВЯП-полимераза и эндонуклеаза проявляют тенденцию к агрегации.