Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений
В обзоре обсуждаются имеющиеся на сегодняшний день результаты следующих вопросов трансмиссионной генетики процесса соматической гибридизации: а) наличие цитоплазматических гетерозигот среди парасексуального потомства; б) наличие (отсутствие) селективного давления в процессе митотической сегрегации п...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Дата: | 1986 |
| Автори: | , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1986
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152421 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений / Ю.Ю. Глеба, И.В. Мяшкене // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 1. — С. 5-11. — Бібліогр.: 26 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-152421 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Глеба, Ю.Ю. Мяшкене, И.В. 2019-06-11T11:11:58Z 2019-06-11T11:11:58Z 1986 Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений / Ю.Ю. Глеба, И.В. Мяшкене // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 1. — С. 5-11. — Бібліогр.: 26 назв. — рос. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.000102 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152421 575.1 В обзоре обсуждаются имеющиеся на сегодняшний день результаты следующих вопросов трансмиссионной генетики процесса соматической гибридизации: а) наличие цитоплазматических гетерозигот среди парасексуального потомства; б) наличие (отсутствие) селективного давления в процессе митотической сегрегации плазмагенов; в) косегрегация плазмагенов; г) генетическая рекомбинация плазмагенов; д) генетическое разнообразие цитоплазм, возникающих при соматической гибридизации; е) практические возможности в связи с генетической реконструкцией цитоплазмы. Обговорюються наявні на сьогодні результати наступних питань трансмісійної генетики процесу соматичної гібридизації: а) наявність цитоплазматичних гетерозигот серед парасексуального потомства; б) наявність (відсутність) селективного тиску в процесі мітотичної сегрегації плазмагенів; в) косегрегація плазмагенів; г) генетична рекомбінація плазмагенів; д) генетичне різноманіття цитоплазм, що виникають при соматичної гібридизації; е) практичні можливості у зв’язку з генетичною реконструкцією цитоплазми. The paper deals with the available results concerning the following problems of transmission genetics of the somatic hybridization process in higher plants: the presence of cytoplasmic heterozygotes among parasexual progeny; the occurrence of selective pressure in the process of mitotic segregation of plasmagenes; the cosegregation of plasmagenes; genetic recombination of plasmagenes; the genetic diversity of cytoplasms generating via somatic cell fusion; the practical possibilities opened by genetic reconstruction of cytoplasm. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Обзоры Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений Гібридизація соматичних клітин і можливості аналізу та маніпуляцій генами цитоплазми вищих рослин Hybridization of somatic cells and possibilities for analysis and manipulations of cytoplasmic genes of higher plants Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений |
| spellingShingle |
Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений Глеба, Ю.Ю. Мяшкене, И.В. Обзоры |
| title_short |
Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений |
| title_full |
Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений |
| title_fullStr |
Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений |
| title_full_unstemmed |
Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений |
| title_sort |
гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений |
| author |
Глеба, Ю.Ю. Мяшкене, И.В. |
| author_facet |
Глеба, Ю.Ю. Мяшкене, И.В. |
| topic |
Обзоры |
| topic_facet |
Обзоры |
| publishDate |
1986 |
| language |
Russian |
| container_title |
Биополимеры и клетка |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Гібридизація соматичних клітин і можливості аналізу та маніпуляцій генами цитоплазми вищих рослин Hybridization of somatic cells and possibilities for analysis and manipulations of cytoplasmic genes of higher plants |
| description |
В обзоре обсуждаются имеющиеся на сегодняшний день результаты следующих вопросов трансмиссионной генетики процесса соматической гибридизации: а) наличие цитоплазматических гетерозигот среди парасексуального потомства; б) наличие (отсутствие) селективного давления в процессе митотической сегрегации плазмагенов; в) косегрегация плазмагенов; г) генетическая рекомбинация плазмагенов; д) генетическое разнообразие цитоплазм, возникающих при соматической гибридизации; е) практические возможности в связи с генетической реконструкцией цитоплазмы.
Обговорюються наявні на сьогодні результати наступних питань трансмісійної генетики процесу соматичної гібридизації: а) наявність цитоплазматичних гетерозигот серед парасексуального потомства; б) наявність (відсутність) селективного тиску в процесі мітотичної сегрегації плазмагенів; в) косегрегація плазмагенів; г) генетична рекомбінація плазмагенів; д) генетичне різноманіття цитоплазм, що виникають при соматичної гібридизації; е) практичні можливості у зв’язку з генетичною реконструкцією цитоплазми.
The paper deals with the available results concerning the following problems of transmission genetics of the somatic hybridization process in higher plants: the presence of cytoplasmic heterozygotes among parasexual progeny; the occurrence of selective pressure in the process of mitotic segregation of plasmagenes; the cosegregation of plasmagenes; genetic recombination of plasmagenes; the genetic diversity of cytoplasms generating via somatic cell fusion; the practical possibilities opened by genetic reconstruction of cytoplasm.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152421 |
| citation_txt |
Гибридизация соматических клеток и возможности анализа и манипуляций генами цитоплазмы высших растений / Ю.Ю. Глеба, И.В. Мяшкене // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 1. — С. 5-11. — Бібліогр.: 26 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT glebaûû gibridizaciâsomatičeskihkletokivozmožnostianalizaimanipulâciigenamicitoplazmyvysšihrastenii AT mâškeneiv gibridizaciâsomatičeskihkletokivozmožnostianalizaimanipulâciigenamicitoplazmyvysšihrastenii AT glebaûû gíbridizacíâsomatičnihklítinímožlivostíanalízutamanípulâcíigenamicitoplazmiviŝihroslin AT mâškeneiv gíbridizacíâsomatičnihklítinímožlivostíanalízutamanípulâcíigenamicitoplazmiviŝihroslin AT glebaûû hybridizationofsomaticcellsandpossibilitiesforanalysisandmanipulationsofcytoplasmicgenesofhigherplants AT mâškeneiv hybridizationofsomaticcellsandpossibilitiesforanalysisandmanipulationsofcytoplasmicgenesofhigherplants |
| first_indexed |
2025-11-24T04:41:26Z |
| last_indexed |
2025-11-24T04:41:26Z |
| _version_ |
1850842259952500736 |
| fulltext |
Обзоры
J
УДК 575.1
ГИБРИДИЗАЦИЯ СОМАТИЧЕСКИХ КЛЕТОК
И ВОЗМОЖНОСТИ АНАЛИЗА И МАНИПУЛЯЦИЙ ГЕНАМИ
ЦИТОПЛАЗМЫ ВЫСШИХ РАСТЕНИЙ
Ю. Ю. Глеба, И. В. Мяшкене
Большинство высших растений (включая практически все сельскохо-
зяйственные растения) обнаруживают однородительское материнское
наследование плазмагенов в процессе обычного полового скрещивания.
Таким образом, с помощью половой гибридизации получить гетерози-
гота по этим генам невозможно. Многочисленные эксперименты послед-
них лет показывают, что гибридные растения, полученные после слия-
ния соматических клеток, содержат цитоплазматические гены обоих
родителей.
Цитоплазматические (внеядерные, внехромосомные) генетические
детерминанты (плазмагены) высших растений были обнаружены более
70 лет назад, однако генетика цитоплазмона высших растений и на
сегодняшний день остается слабо изученной. На продолжении длитель-
ного времени основным препятствием для исследования организацди
цитоплазмона средствами формальной генетики было однородительское
материнское наследование генов цитоплазмы в половом процессе. По-
этому не удивительно, что с появлением техники соматической гибри-
дизации особый интерес исследователей вызвала трансмиссия плазма-
генов в этом новом процессе гибридизации. Многочисленные экспери-
менты, проведенные за последнее десятилетие, однозначно доказали
двуродительский способ наследования плазмагенов после слияния сома-
тических клеток. Использование метода соматической гибридизации
для получения цитоплазматических гетерозигот открывает возможно-
сти формального генетического анализа цитоплазматических генов, а
также позволяет вести эффективную реконструкцию генных наборов
цитоплазмы в клетке высших растений [1]. Цель данного миниобзо-
ра — обсуждение имеющихся результатов в решении следующих вопро-
сов трансмиссионной генетики процесса соматической гибридизации:
а) наличие цитоплазматических гетерозигот среди парасексуального
потомства; б) наличие (отсутствие) селективного давления в процессе
митотической сегрегации плазмагенов; в) косегрегация плазмагенов;
г) генетическая рекомбинация плазмагенов; д) генетическое разнооб-
разие цитоплазм, возникающих при соматической гибридизации;
е) практические возможности в связи с генетической реконструкцией
цитоплазмы.
Изучение судьбы цитоплазматических генов в гибридах сомати-
ческих клеток в значительной степени усложняется тем, что цитоплаз-
мон парасексуального потомства анализируется, как правило, после
многократных делений продуктов слияния соматических клеток; при
этом теоретически возможно разнообразие генетических событий. По-
строить изящную схему эксперимента по трансмиссионной генетике в
системе, где одновременно происходят такие независимые события, как
селективная элиминация генофоров, митотическая сегрегация и косе-
БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 1 2 — 5-722 5
грегация, генетическая рекомбинация, мутационные процессы и др.,
довольно сложно. Как оказалось, большинство из вышеупомянутых
процессов действительно имеют место [2]. Для выявления цитоплаз-
матических гетерозигот, возникающих в результате слияния соматиче-
ских клеток, было поставлено достаточно много экспериментов, Были
подобраны признаки — подходящие маркеры для исследования генети-
ческой конституции цитоплазмы высших растений. Из них, как оказа-
лось, пластомная хлорофиллдефектность является наиболее чувстви-
тельным маркером для селекции цитоплазматических гетерозигот.
В 1975 году Глеба с сотр. впервые сообщили о наличии «смешанных»
цитоплазм в растениях, полученных после слияния двух линий Nico-
tiana tabacum с пластомной хлорофиллдефектностью и ядерной мута-
цией типа ауреа [3]. Обнаруженная в этих опытах цитоплазматиче-
ская гетерозиготность (пестролистность), в отличие от химерности,
передавалась половому потомству. В последующих экспериментах
сливали протопласты пластомного мутанта табака либо с цме-анало-
гом, содержащим наряду с ядром (геномом) N. tabacum цитоплазму
N. debneyi, либо с протопластами N. debneyi [4]. В потомстве, полу-
ченном в обоих видах опытов по слиянию, были обнаружены пестро-
листные растения. Анализ рибулезодифосфаткарбоксилазы-оксигеназы
(большая субъединица которой кодируется хлоропластной ДНК) и
гибридологические скрещивания подтвердили цитоплазматическую ге-
терозиготность как результат гибридизации, а не химерности и/или му-
тационных изменений, так как большая субъединица содержала поли-
пептиды и табака, и дикого вида, а пестролистность передавалась час-
ти полового потомства. Пестрые растения содержали в тканях листа
так называемые «смешанные» клетки, т. е. клетки со смесью нормаль-
ных и дефектных пластид. Гетерозиготность по генам пластомной хло-
рофиллдефектности, когда в качестве одной из родительских форм был
пластомный мутант, наблюдали у гибридов после соматического слия-
ния во всех исследованиях [5—7]. В последних, наиболее обширных
и убедительных экспериментах [8, 9], изучали регенеранты из клони-
рованных гетероплазматических продуктов слияния Nicotiana, где в
качестве одного из родителей был использован пластомный хлоро-
филлдефектный мутант, а другими служили четыре формы аналогов
с цитоплазматической мужской стерильностью аллоплазматической
природы и два диких вида Nicotiana. Во всех видовых комбинациях
цитоплазм, хотя и не во всех клонах, среди регенерантов были обна-
ружены пестрые растения. Пестролистность была связана с наличием
хлоропластных Д Н К обоих родительских видов и гетерозиготностью
полипептидного состава большой субъединицы РДФК/О, с присутстви-
ем гетеропластидных клеток в мезофильных тканях пестрых растений,
а также с материнским наследованием пестроты частью полового по-
томства. Из экспериментов следует, что, во-первых, в процессе слияния
соматических клеток внеядерные генные детерминанты наследуются
двуродительски — это относится ко всем признакам, кодируемым плаз-
магенами во всех изученных видовых комбинациях; во-вторых, состоя-
ние гетерозиготности, возникающее вследствие слияния протопластов,
является относительно длительным, и цитоплазматические гетерозиго-
ты могут быть обнаружены после многократных клеточных делений,
происходящих вслед за слиянием. Эти выводы следуют из опытов с
межвидовыми комбинациями цитоплазм Nicotiana, но, по всей видимо-
сти, они справедливы для всех экспериментальных систем, в которых
не применяли селективное давление в пользу генов какой-либо из ци-
топлазм при селекции гибридов. Следует отметить, что большинство
выводов о наследовании цитоплазматических генов при соматической
гибридизации высших растений основано не на прямой демонстрации
существования среди потомков цитоплазматических гетерозигот, а
лишь на данных изучения спектров сегрегантов по плазмагенам
[10—17].
6 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, .1Mb 1
Сегрегация и рекомбинация плазмагенов
Основная особенность поведения плазмагенов — это их сегрегация в
процессе митотических делений клеток с цитоплазматической гетеро-
зиготностью. Это ведет к митотической рассортировке генов цитоплаз-
мы и, следовательно, к выщеплению генетически новых гомозиготных
по этим генам форм. Такое расщепление может происходить с разной
скоростью для разных генов и сама возможность обнаружения гетеро-
зигот по плазмагенам зависит от скорости сегрегационного процесса.
Поэтому не удивительно, что при анализе парасексуальных гибридов
исследователи чаще всего обнаруживали цитоплазматические гомози-
готы-сегреганты. Ценную информацию об организации цитоплазмона
представило бы изучение всего спектра цитоплазматических сегреган-
тов. Это позволило бы определить генетическое разнообразие получен-
ных с помощью соматической гибридизации цитоплазм. В настоящее
время уже очевидно, что процесс сегрегации не является случайным.
Полный анализ этого процесса должен помочь выяснению возможного
влияния следующих факторов: а) селективного давления в пользу тех
или иных генофоров цитоплазмы; б) сцепленной сегрегации или косе-
грегации плазмагенов; в) возникновения новых признаков за счет гене-
тической рекомбинации.
Селективное давление, направленное против специфических гено-
форов, может проявляться как выщепление только одного класса сегре-
гантов, несущих пластиды (митохондрии) одного из родительских
видов. Во всех работах, где исследовали достаточное количество гиб-
ридных растений, возникших из независимых продуктов слияния прото-
пластов, наблюдали чаще всего не один, а оба типа родительских плас-
тид и митохондрий [5—7, 9, 10, 12]. Таким образом, можно сделать
вывод, что сегрегация органелл происходит случайным образом, и пока
что нет неоспоримых доказательств того, что на уровне цитоплазмати-
ческих гетерозигот, полученных в результате слияния соматических
клеток, имеет место выраженное селективное давление. Можно с уве-
ренностью утверждать, что наблюдаемые в случае с генами пластид
результаты являются результатами сегрегации, а не какого-либо дру-
гого генетического процесса, скажем рекомбинации, так как пластом-
ные сегреганты во всех случаях полностью идентичны родительским
формам. Что касается генов митохондрий, то здесь положение более
сложное и на сегодняшний день нельзя дать однозначного ответа
(см. ниже).
Из экспериментальных данных следует, что в процессе митотичес-
кой сегрегации плазмагены выщепляются определенными группами,
группами косегрегации [18], что свидетельствует о существовании в ци-
топлазме групп сцепления генов. Этот путь выявления групп сцепления
внеядерных генов называют косегрегационным анализом [19]. Такие
исследования представляют особенную ценность в опытах с высшими
растениями, цитоплазма клеток которых содержит как минимум два
генофора (хлоропласты и митохондрии). Исследования, проведенные
во многих лабораториях мира, показали, что такие признаки, как ус-
тойчивость к тентоксину, стрептомицину, атразину, пластомная хло-
рофиллдефектность, полипептидный состав большой субъединицы
РДФК/О, косегрегируют с соответствующим типом хлоропластной
ДНК, т. е. они кодируются пластомом [6—9, 20]. Эти данные хорошо
согласуются с ранее полученными результатами генетических и биохи-
мических анализов. Так, ранее было установлено, что мутация плас-
томной хлорофиллдефектности связана с физическими изменениями
хлоропластной ДНК; уже проведено картирование гена большой субъ-
единицы РДФК/О на хлоропластной ДНК; также показано, что резис-
тентность к тентоксину и атразину связана соответственно с изменения-
ми одного из полипептидов сопрягающего фактора и белка из фото-
системы II с молекулярной массой 32 000. которые локализованы в
БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 1 2 — 7-722 5
хлоропластах и кодируются хлоропластной ДНК. Однако только сома-
тическая гибридизация клеток позволила подтвердить эти выводы с по-
мощью строгого формального генетического анализа. Два признака: ци-
топлазматическая мужская стерильность и связанные с ней морфоло-
гические изменения цветка сегрегируют независимо от хлоропластной
Д Н К и в то же время косегрегируют с соответствующим типом мито-
хондриальной Д Н К [4, 7, 8, 12, 13, 21—23]. Данные косегрегации ми-
тохондриальной Д Н К и генов цмс следует в настоящее время рассмат-
ривать осторожно, так как митохондриальная Д Н К в процессе гибри-
дизации клеток подвергается значительным перестройкам. Тем не
менее в большинстве работ наблюдается корреляция между количест-
венным преобладанием видоспецифических фрагментов того или иного
родителя и экспрессией признаков цмс(мф), фенотипически маркиру-
ющих тот же вид цитоплазмы.
Следующий логический шаг в исследованиях групп сцепления плаз-
магенов состоит в пропускании через «множественные гетерозиготы»
всех известных внеядерных генов, что позволит установить связь плаз-
магенов с теми или иными группами сцепления. В настоящее время
уже подтверждено существование двух групп сцепления плазмагенов
высших растений. Следует подчеркнуть, что у других типов эукариот
генетическими методами не обнаружено более одной группы сцепления
плазмагенов.
До настоящего времени почти все исследователи, изучая хлоро-
пластную Д Н К соматических гибридов, находили только чисто роди-
тельские формы ДНК. В связи с этим возможность рекомбинации хло-
ропластной Д Н К в процессе гибридизации соматических клеток каза-
лась сомнительной. Однако недавно проведенные исследования, в кото-
рых применяли селекцию в пользу рекомбинантных форм пластома,
оказались успешными и уже можно сделать вывод, что рекомбинация
хлоропластных ДНК, хотя и с весьма низкой частотой, все же проис-
ходит и может быть обнаружена имеющимися методами генетики [24].
В противоположность хлоропластной митохондриальная Д Н К под-
вергается частым и крупным перестройкам в процессе гибридизации
клеток [13, 22, 23, 25]. Анализ большинства соматических г ибридов об-
наружил уникальные типы митохондриальных Д Н К у каждого из них.
Наборы фрагментов, полученных при гидролизе специфическими рес-
триктазами, у разных гибридов варьируют и для большинства растений
помимо специфических фрагментов, характерных родительским видам,
было выявлено от одного до нескольких новых фрагментов. Такие из-
менения могут быть следствием: а) взаимодействия родительских мо-
лекул, которое приводит к возникновению рекомбинантных форм
молекул митохондриальных ДНК, содержащих нуклеотидные последо-
вательности обоих родительских видов; б) рекомбинации между моле-
кулами одного вида; в) внутримолекулярных перестроек; г) селектив-
ного размножения и доминирования таких молекулярных форм в гиб-
ридной цитоплазме, которые составляли минорную часть гетерогенной
популяции митохондриальных Д Н К в родительских клетках и поэтому
не обнаруживались там. Хотя еще рано говорить о рекомбинации ми-
тохондриальных Д Н К на данном этапе исследований, все же ясно, что
гибридизация соматических клеток в противоположность половому
скрещиванию приводит к значительным изменениям в геноме митохон-
дрий. Следовательно, гибридизация соматических клеток открывает
заманчивые возможности для генетического анализа и реконструкции
хондриома высших растений [26].
Практические возможности в связи с реконструкцией цитоплазмы
Гибридизация соматических клеток и возможности получения цито-
плазматических гетерозигот могут заинтересовать селекционера в двух
отношениях. Во-первых, слияние соматических клеток позволяет в один
8 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 1 2 — 8-722 5
цикл гибридизации синтезировать формы, несущие ядро одного роди-
теля наряду с цитоплазмой другого. Такого рода «пересадку» цито-
плазмона в ряде случаев осуществляют и с помощью обычного скрещи-
вания, однако традиционные методы связаны с длительной (многократ-
ной) рекуррентной гибридизацией и поэтому малоэффективны; кроме
того, не во всех случаях родительские виды можно скрестить. В насто-
ящее время задачи пересадки генов цитоплазмы, в частности генов,
контролирующих цмс и устойчивость к гербицидам, практически реша-
ются с помощью слияния соматических клеток для таких видов, как
табак, капуста, рапс, турнепс, петунья и др. Конкретным примером
технического решения вопроса, т. е. путем замещения цитоплазмы, яв-
ляются работы по переносу генов устойчивости к атразину — гербициду
триазинового типа. Этот признак кодируется геном пластома. У ряда
культурных растений устойчивость может быть получена путем пере-
садки хлоропластов диких сородичей, выработавших такую устойчи-
вость. С помощью соматической гибридизации подобный перенос осу-
ществлен от сурепицы к рапсу и турнепсу [26]. Делаются попытки (с той
же целью) пересадить пластиды от черного паслена картофелю [20].
Во-вторых, слияние клеток позволяет, как видно из вышеизложенного,
довольно радикально реконструировать генные наборы цитоплазмы и
путем совмещения пластома одного вида с хондриомом другого в одной
клетке, и с помощью рекомбинации органельных ДНК. Поскольку вли-
яние генов цитоплазмы на практически важные показатели культурных
растений изучено слабо, конкретные направления исследований можно
лишь предполагать, однако примеры удачных решений уже имеются.
Так, цмс-аналоги рапса, получаемые на основе цитоплазмы редиса, не
находили практического применения из-за чувствительности их к низ-
ким температурам. Недавние исследования показали, что полученные
слиянием протопластов рекомбинантные цмс-формы рапса, несущие
пластиды от рапса, а митохондрии от редиса, этого недостатка не
имеют.
Выводы
Гибридизация соматических клеток позволяет создавать новые комби-
нации родительских плазмагенов у высших растений, в частности, этим
путем можно получить: а) гетерозиготные по внеядерным генам расте-
ния; б) растения с ядром одного, а цитоплазмой другого вида; в) рас-
тения, несущие стабильный набор некоторых внеядерных генов одного
родителя плюс набор иных внеядерных генов другого. Получить такие
комбинации с помощью обычного полового скрещивания очень трудно
или вообще невозможно. Возможности манипуляции плазмагенами рас-
тительных клеток при помощи парасексуальной гибридизации представ-
ляют теоретический и прикладной интерес. Теоретически получение ге-
терозигот по цитоплазмону с помощью слияния протопластов означает
возможность использования тонкой техники для проведения формаль-
ного генетического анализа плазмагенов клеток высших растений. Наи-
более многообещающей перспективой на данном этапе является изуче-
ние групп сцепления плазмагенов и возможность выявления и приме-
нения генетической рекомбинации цитоплазматических генов. Перенос
цитоплазмы, в частности перенос плазмагенов, ответственных за цмс,
резистентность к гербицидам, патогенам, устойчивость к низким тем-
пературам и др., от одного вида к другому является реальным приме-
нением метода соматической гибридизации на сегодняшний день. Гене-
тическое разнообразие внеядерных генов в растительных сортах может
быть увеличено не только путем замены цитоплазмона, но и перестрой-
ки родительских цитоплазмонов, что стало бы еще одним практическим
результатом использования метода соматической гибридизации. Хлоро-
пласты и митохондрии отвечают за снабжение энергией растительных
клеток, поэтому генетическая реконструкция этих органелл является
БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 1 2 — 9-722 5
существенной частью любой действительно всеохватывающей програм-
мы селекции сельскохозяйственных растений. С помощью метода гиб-
ридизации соматических клеток мы вступаем сейчас в эру селекции
цитоплазмы.
H Y B R I D I Z A T I O N OF SOMATIC CELLS A N D P O S S I B I L I T I E S
FOR A N A L Y S I S A N D M A N I P U L A T I O N S OF CYTOPLASMIC G E N E S
O F H I G H E R P L A N T S
Yu. Yu. Gleba, I. V. M y a s h k e n e
N. G. Kholodny Inst i tute of Botany , Academy of Sc iences of the Ukrainian SSR, Kiev
Institute of Botany , Academy of Sc iences of the Lithuanian SSR, Vilnius
S u m m a r y
The paper deals wi th the avai lable results concerning the f o l l o w i n g problems of transmis-
s ion genet ics of the somat ic hybridization process in higher plants: the presence of cyto-
plasmic he terozygotes a m o n g parasexual progeny; the occurrence of se lect ive pressure in
the process of mitotic s egrega t ion of p lasmagenes ; the cosegregat ion of p la smagenes ;
genet i c recombinat ion of p lasmagenes ; the genet ic diversity of cy top lasms generat ing via
somat ic cell fusion; the practical possibi l i t ies opened by genet ic reconstruction of cy-
toplasm.
1. Глеба Ю. Ю., Сытник К. M. Клеточная инженерия растений.— Киев : Наук, думка,
1984.—160 с.
2. Gleba Yu., Evans D. A. Hybridizat ion of somat ic plant cel ls and genet ic ana lys i s / /
Advances in gene technology: Molecular genet ics of p lants and animals / Eds.
K. D o w n e y et a l . — N e w York: Acad, press, 1 9 8 3 . — P . 131 — 145.
3. Глеба Ю. Ю., Бутенко P. ГСытник К. Μ. Слияние протопластов и парасексуаль-
ная гибридизация у Nicotiana tabacum L. / / Д о к л . АН СССР.—1975.—221, № 5.—
C. 1196—1198.
4. Π ар асексуальные цитоплазматические гибриды (цибриды) N. tabacum + N. debneyi,
полученные слиянием протопластов / Ю. Ю. Глеба, Η. М. Пивень, И. К. Комарниц-
кий, К. М. С ы т н и к / / Т а м же.—1978.—240, № 5 . — С . 1223—1226.
5. Glimelius КBonnett Η. Т. Somat ic hybridization in Nicotiana: Restorat ion of pho-
toautotrophy to an albino mutant with defect ive p l a s t i d s / / P l a n t a ' — 1 9 8 1 . — 1 5 3 ,
N 6.— P. 497—503.
6. Chloroplast transfer in Nicotiana based on metabol ic complementat ion between irra-
diated and iodoacetate treated protoplasts / V. A. Sidorov, L. Menczel , F. N a g y , P. Ma-
l i g a / / P l a n t a . — 1 9 8 1 . — 1 5 2 , N 3 . — P . 341—345.
7. Generation of h e t e r o p l a s t i c Nicotiana cybrids by protoplast fus ion / R. Fluhr,
D. Avid, E. Galun, M. E d e l m a n / / T h e o r . Appl. Genet .—1984.—67, N 6 — P . 491—498.
8. Transmission genet ics of somat ic hybridization process in Nicotiana. I. Hybrids and
cybrids a m o n g the regenerates from cloned protoplast fus ion p r o d u c t s / Y u . Gleba,
I. Meshkiene, N. N. Kolesnik et al. / / Ibid.— 1984.—69, N 2 . — P . 121 — 128.
9. Transmission genet ics of the somat ic hybridization process in Nicotiana. II. P las to -
me he terozygotes / Yu. Gleba, І. K. Komarnitsky, N. N. Kolesnik et a l . / / M o l . and
Gen. Genet .—1985.—198, N 5 . — P . 476—481.
10. Chen K., Wildmann S. G., Smith Η. H. Chloroplast D N A distribution in parasexual
hybrids as s h o w n by polypeptide composi t ion of Fraction I p r o t e i n / / P r o c . Nat . Acad.
Sci. USA.—1977 .—74, N 1 6 , — P . 5109—5112.
11. Belliard G., Pelletier G., Ferault M. Fus ion de protoplastes de Nicotiana tabacum a
cy top lasmes differents: etude des hybrides cytoplasmiques neoformes / / CR Acad. Sci.
D . — 1 9 7 7 . — 2 8 4 . — P . 749—752.
12. Morphological characterist ics and chloroplast D N A distribution in different cyto-
plasmic parasexual hybrids of Nicotiana tabacum / G. Belliard, G. Pelletier, F. Vedel ,
F. Quetier / / М о ї . and Gen. G e n e t . — 1 9 7 8 — 1 6 5 , N 3 . — P . 231—238.
13. Belliard G., Vedel F., Pelletier G. Mitochondrial recombination in cytoplasmic hybrids
of Nicotiana tabacum by protoplast f u s i o n / / N a t u r e — 1 9 7 9 . — 2 8 1 , N 5 7 3 0 . — P . 401—
402.
14. Scowcroft Ψ. R., Larkin P. J. Chloroplast D N A assorts randomly in intraspecif ic so-
matic hybrids of N. debneyi / / Theor. Appl. Genet .— 1981.—60, N 2 . — P . 179—184.
15. Melchers G., Sacristan M. D., Holder A. A. Somat ic hybrid plants of potato and to-
mato regenerated from fused p r o t o p l a s t s / / C a r l s b e r g Res. C o m m . — 1 9 7 8 — 4 3 . —
P. 203—218.
16. Streptomycin res istant and sensi t ive somat ic hybrids of N. tabacum N. knightia-
na : correlation of res istance to N. tabacum p last ids / L. Menczel , F. N a g y , Z. Kiss,
P. M a l i g a / / T h e o r . Appl. Genet .—1981.—59, N 2 . — P . 191 — 198.
10 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 1 2 — 10-722 5
17. Schiller В., Herrmann R. G., Melchers G. Restriction endonuclease analysis of plastid
DNA from tomato, potato and some of their somatic hybrids / / М о ї . and Gen. Genet.—
1982.—186, N 4 . — P . 453—459.
18. Gleba Yu., Evans D. A. Hybridization of somatic plant cells : genetic a n a l y s i s / / G e -
netic Engineering / Eds. J. K. Setlow, A. Hollander.— New York: Plenum press, 1984.—
P. 175—209.
19. Сэджер P. Цитоплазматические гены и органеллы.— Μ . : Мир, 1975.—423 с.
20. Gressel J., Cohen Ν., Binding Η. Somatic hybridization of an atrazine resistant bio-
type of Solanum nigrum with Solanum tuberosum // Theor. Appl. Genet.—1984.—67,
N 2 / 3 . — P . 131 — 134.
21. Zelcer Α., Avid D., Galun E. Interspecific transfer of cytoplasmic male sterility by
fusion between protoplasts of normal Nicotiana sylvestris and X / ray irradiated pro-
toplasts of male-sterile N. tabacum//Z. Pflanzenphysiol .— 1978.—90, N 4 . — P . 397—
407.
22. Nagy F., Torok I., Maliga P. Extensive rearrangements in the mitochondrial DNA in
somatic hybrids of N. tabacum + N. k η і gh tiana 11 Мої. and Gen. Genet.—1981.—183,
N 3.— P. 437—439.
23. A heteropiasmic state induced by protoplast fusion is a necessary condition for de-
tecting rearrangements in Nicotiana mitochondrial DNA / F. Nagy, G. Lazar, L. Menc-
zel, P. M a l i g a / / T h e o r . and Appl. Genet.—1983.—66, N 3/4.— P. 203—209.
24. Medgyesy P., Fejes E., Maliga P. Interspecific chloroplast recombination in a Nico-
tiana somatic hybr id / /Proc . Nat. Acad. Sci. USA.—1985.—82, N 12.—P. 4062—4079.
25. Cytoplasmic hybridization in Nicotiana / E. Galun, P. Arzee-Gonen, R. Fluhr et al. / /
Мої. and Gen. Genet.—1982.—186, N 1 .—P. 50—56.
26. Intergeneric cytoplasmic hybridization in Cruciferae by protoplast fusion / G. Pelle-
tier, C. Primard, F. Vedel et a l . / / I b i d . — 1983.—191, N 2 . — P . 244—250.
Ин-т ботаники им. Η. Г. Холодного АН УССР, Киев Получено
Ин-т ботаники АН ЛитССР, Вильнюс 10.07.85
БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, Кя 1
11
|