Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам

Получены резистентные к токсину Pseudomonas syringae pv. aptata каллусные линии кормовой свеклы. Показана, перекрестная устойчивость этих линий и к низким температурам. Изучены цитогенетические особенности каллусных культур в процессе длительного культивирования на селективной среде и после обработк...

Full description

Saved in:

Bibliographic Details
Date:	2000
Main Authors:	Губанова, Н.Я., Дубровная, О.В., Чугункова, Т.В.
Format:	Article
Language:	Russian
Published:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2000
Series:	Биополимеры и клетка
Subjects:	Вирусы и клетка
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152467
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам / Н.Я. Губанова // Биополимеры и клетка. — 2000. — Т. 16, № 2. — С. 138-144. — Бібліогр.: 19 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-152467
record_format	dspace
spelling	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1524672025-02-09T20:48:55Z Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам Комплексна селекція in vitro на стійкість клітинних ліній кормовою буряку до токсину бактеріозу та низьких температур Complex in vitro selection of cell lines of mangel beet resistant to a toxin of bacteriosis pathogene and low temperatures Губанова, Н.Я. Дубровная, О.В. Чугункова, Т.В. Вирусы и клетка Получены резистентные к токсину Pseudomonas syringae pv. aptata каллусные линии кормовой свеклы. Показана, перекрестная устойчивость этих линий и к низким температурам. Изучены цитогенетические особенности каллусных культур в процессе длительного культивирования на селективной среде и после обработки устойчивых линий низкими температурами. Отримано резистентні до токсину Pseudomonas syringae pv. aptata калюсні лінії кормового буряку. Показано перехресну стійкість цих ліній і до низьких температур. Досліджено цитогенетичні особливості калюсних культур у процесі три валого культивування на селективному середовищі та після обробки стійких ліній низькими температурами. The callus strains of mangel beet resistant to a Pseudomonas syringae pv. aptata toxin have been obtained. It is shown that these strains have also crossed resistance to low temperatures. The cytogenetic peculiarities of callus cultures during prolonged cultivation on the selective medium and under the influence of low temperatures have been studied. 2000 Article Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам / Н.Я. Губанова // Биополимеры и клетка. — 2000. — Т. 16, № 2. — С. 138-144. — Бібліогр.: 19 назв. — рос. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.000560 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152467 57.085.23:633.63 ru Биополимеры и клетка application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Вирусы и клетка Вирусы и клетка
spellingShingle	Вирусы и клетка Вирусы и клетка Губанова, Н.Я. Дубровная, О.В. Чугункова, Т.В. Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам Биополимеры и клетка
description	Получены резистентные к токсину Pseudomonas syringae pv. aptata каллусные линии кормовой свеклы. Показана, перекрестная устойчивость этих линий и к низким температурам. Изучены цитогенетические особенности каллусных культур в процессе длительного культивирования на селективной среде и после обработки устойчивых линий низкими температурами.
format	Article
author	Губанова, Н.Я. Дубровная, О.В. Чугункова, Т.В.
author_facet	Губанова, Н.Я. Дубровная, О.В. Чугункова, Т.В.
author_sort	Губанова, Н.Я.
title	Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам
title_short	Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам
title_full	Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам
title_fullStr	Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам
title_full_unstemmed	Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам
title_sort	комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate	2000
topic_facet	Вирусы и клетка
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152467
citation_txt	Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам / Н.Я. Губанова // Биополимеры и клетка. — 2000. — Т. 16, № 2. — С. 138-144. — Бібліогр.: 19 назв. — рос.
series	Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv	AT gubanovanâ kompleksnaâselekciâinvitronaustoičivostʹkletočnyhliniikormovoisveklyktoksinuvozbuditelâbakteriozainizkimtemperaturam AT dubrovnaâov kompleksnaâselekciâinvitronaustoičivostʹkletočnyhliniikormovoisveklyktoksinuvozbuditelâbakteriozainizkimtemperaturam AT čugunkovatv kompleksnaâselekciâinvitronaustoičivostʹkletočnyhliniikormovoisveklyktoksinuvozbuditelâbakteriozainizkimtemperaturam AT gubanovanâ kompleksnaselekcíâinvitronastíikístʹklítinnihlíníikormovoûburâkudotoksinubakteríozutanizʹkihtemperatur AT dubrovnaâov kompleksnaselekcíâinvitronastíikístʹklítinnihlíníikormovoûburâkudotoksinubakteríozutanizʹkihtemperatur AT čugunkovatv kompleksnaselekcíâinvitronastíikístʹklítinnihlíníikormovoûburâkudotoksinubakteríozutanizʹkihtemperatur AT gubanovanâ complexinvitroselectionofcelllinesofmangelbeetresistanttoatoxinofbacteriosispathogeneandlowtemperatures AT dubrovnaâov complexinvitroselectionofcelllinesofmangelbeetresistanttoatoxinofbacteriosispathogeneandlowtemperatures AT čugunkovatv complexinvitroselectionofcelllinesofmangelbeetresistanttoatoxinofbacteriosispathogeneandlowtemperatures
first_indexed	2025-11-30T16:10:21Z
last_indexed	2025-11-30T16:10:21Z
_version_	1850232297843851264
fulltext	ISSN 0233-7657. Биополимеры и клетка. 2000. Т. 16, № 2 В И Р У С Ы И К Л Е Т К А Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам Н. Я. Губанова, О. В. Дубровная, Т. В. Чугункова Институт физиологии растений и генетики НАН Украины Ул. Васильковская, 31/17, Киев, 03022, Украина Получены резистентные к токсину Pseudomonas syringae pv. aptata каллусные линии кормовой свеклы. Показана, перекрестная устойчивость этих линий и к низким температурам. Изучены цитогенетические особенности каллусных культур в процессе длительного культивирования на селективной среде и после обработки устойчивых линий низкими температурами. Введение. Создание исходного селекционного мате риала, устойчивого к экстремальным факторам среды, токсинам патогенов и другим неблагоприят ным воздействиям, возможно при использовании методов клеточной селекции. В условиях in vitro на селективных средах можно отбирать клетки с мутантными генотипами, а затем получать из них растения, устойчивые к селективному фактору. Наиболее эффективно использование данного метода у тех сельскохозяйственных культур, для которых разработаны приемы массовой регенера ции растений из клеток и протопластов. Примене ние клеточной селекции in vitro позволило полу чить селекционные формы томатов, картофеля, пшеницы, риса, клевера и люцерны, устойчивые к грибным и бактериальным токсинам [1—7] . Полу чены клеточные линии и растения, устойчивые и к другим стрессовым факторам окружающей среды, в том числе и к низким температурам [8—10] . Существует несколько способов отбора рези стентных клеточных линий: жесткая селекция с использованием сублетальных доз стрессового фак тора и многократным пассированием в селективных условиях; мягкая селекция на адаптированных концентрациях селективного агента на протяжении © Н. Я. ГУБАНОВА, О В ДУБРОВНАЯ, Т. В. ЧУГУНКОВА, 2000 нескольких пассажей; ступенчатая селекция с по степенным повышением концентрации стрессового фактора и чередованием селективных и неселек тивных условий. Выбор схем клеточной селекции на устойчи вость к болезням непосредственно зависит от меха низмов действия токсинов. Проведение селекции на резистентность к токсинам целесообразно прово дить в тех случаях, когда патогены сначала выде ляют токсины, которые убивают растительные кле тки, а затем используют продукты их распада для питания, так как в данном случае существует корреляция между устойчивостью in vitro и in vivo, У свеклы метод клеточной селекции использу ется недостаточно широко, в основном для созда ния форм, устойчивых к засолению [11 — 1 3 ] . Вме сте с тем устойчивость к болезням и температур ным стрессам — одна из задач, которую также пытаются решить с помощью культуры in vitro. Так , используя метод ступенчатой селекции, полу чены каллусные линии сахарной свеклы, резистен тные к церкоспорозу [14] . Благодаря существованию общих механизмов устойчивости к различным селективным факторам отобранные клеточные линии и растения иногда проявляют резистентность к двум и более видам стресса [15, 16] . Однако работ по изучению пере крестной устойчивости in vitro культуры кормовой свеклы в доступной нам литературе не обнаружено. 138 СЕЛЕКЦИЯ НА УСТОЙЧИВОСТЬ КОРМОВОЙ СВЕКЛЫ К ТОКСИНУ Следует отметить, что в последние годы боль шой вред свекловичным посевам, наряду с грибны ми и вирусными, наносят бактериальные болезни, вызывающие пятнистости листьев (возбудитель Pseudomonas syringae pv. aptata). Поэтому целью наших исследований было использование токсина данного возбудителя в качестве селективного фак тора для отбора устойчивых к бактериозу клеточ ных линий кормовой свекы, проверка их на пере крестную устойчивость к низким температурам, а также цитологический анализ полученных в ре зультате селекции каллусных линий. Материалы и методы. Объектом исследования служила высокоорганогенная каллусная линия N 25, полученная из листовых эксплантов диплоид ных растений кормовой свеклы сорта Панфиль- ская, предварительно выращенных в культуре in vitro. Абсолютный возраст каллуса — 2 пассажа, относительный — 10 сут. Как контрольную исполь зовали питательную среду DS-2 [17] , которую разливали в равном объеме (по 10 мл) в одномер ные тонкостенные стаканы диаметром 50 мм. Суспензионную культуру получали на жидкой среде DS-2 (рН 5,7—5,8) в колбах при постоянном встряхивании и температуре 2 6 ± 2 °С. Для получе ния резистентных к токсину клеток суспензионную культуру высевали на агаризованную среду DS-2 с различными концентрациями токсина. Токсин возбудителя бактериоза свеклы выде ляли из культуральной среды после выращивания бактерий осаждением сернокислым а м м о н и е м 50 %-го насыщения. Токсин очищали диализом и ультрацентрифугированием, а затем лиофильно су шили. Температурную обработку каллуса осуществ ляли в следующих режимах: закаливание при 2— 6 °С от 7 до 14 сут; обработка отрицательными температурами - 2 и - 5 °С с экспозицией от 1 до 21 ч. Экспериментальный материал выращивали на свету с 16-ч фотопериодом при т е м п е р а т у р е 2 6 ± 2 °С. Учет сформировавшихся микророзеток проводили через 5—10 недель после начала опыта. Массу каллусной ткани в процессе культивирова ния определяли по Кучеренко [18] . Цитологический анализ резистентных каллус ных линий проводили в период наибольшей мито- тической активности на 25—27-й день пассажа (длительность пассажа 80 дней) и 6—7-й день пассажа у линии 25 (длительность пассажа 20 дней) . Каллусную ткань фиксировали в смеси спирт : уксусная кислота ( 3 : 1 ) в течение суток. Окрашивали 2 % - м ацетоорсеином в течение 7 дней и готовили давленые препараты. Результаты и обсуждение . В результате прове дения серии опытов (три повторносте, каждый длительностью три пассажа) была определена чув ствительность каллусной ткани кормовой свеклы к различным концентрациям фитотоксина и установ лена доза, оказывающая сублетальное воздействие. Следует отметить, что токсин в дозах 0,5—1,0 г / л вызывал в первом пассаже очень слабое ингибиро- вание роста каллуса и регенерацию стеблевых по чек. Значительное ингибирование роста каллуса (до 50 %) было выявлено при концентрации токси на 2,0—3,0 г / л , что, однако, не позволяет вести селекцию на устойчивость. Концентрация токсина в среде 6 г / л оказалась летальной, так как к концу первого пассажа все каллусы погибли. Наиболее оптимальной для наших целей оказалась доза 4,0 г / л . При такой концентрации к концу первого пассажа (через 11 недель) на отдельных коричне вых каллусных культурах формировались крупные стеблевые почки, а также отдельные микророзетки. Во втором и третьем пассажах выявлено около 14 % жизнеспособных клеточных клонов. Далее проводили жесткую селекцию с исполь зованием сублетальной дозы токсина (4 г /л ) по схеме: селективная среда (2—3 пассажа) — конт рольная среда (2—3 пассажа) — селективная среда (2—3 пассажа) . В результате проведенной работы по такой схеме было получено 30 каллусных кло нов, сохраняющих постоянный рост после вторич ного переноса на селективную среду с сублетальной дозой. После четырех циклов отбора каллусы поме щали на среду без токсина и в течение года вели пересадки на обычную среду DS-2, а затем снова пересаживали на селективную среду. Частота сохранения признака устойчивости к токсину среди отобранных каллусных клонов соста вила около 40 % . Из них получены четыре каллусные линии кормовой свеклы, у которых признак резистентно сти к токсину сохраняется на протяжении длитель ного времени (более 2 лет ) . Активность роста каллуса является важной характеристикой устойчивости к стрессовым фак торам. Все полученные токсинрезистентные кал лусные линии кормовой свеклы отличались очень медленным ростом (табл. 1). Относительный прирост сырой массы у данных линий при росте как на селективной среде, так и на контрольной был в 7—10 раз меньше, чем у исходной линии 25. В отличие от исходных, у резистентных каллусов, кроме замедленного роста, отмечены также мелкозернистая плотная структу ра и изменение пигментации с оранжевой на свет ло-желтую. Подобные морфологические изменения 139 ГУБАНОВА Н Я., ДУБРОВНАЯ О В., ЧУГУНКОВА Т. В. Таблица J Относительный прирост сырой массы у резистентных каллусных линий кормовой свеклы *Не определяли. наблюдались и у других резистентных к токсинам и культуральным фильтратам каллусных культур [2, 4, 6 ] . Показано, что устойчивые к низким темпера турным стрессам клеточные линии характеризуют ся медленным ростом, что обусловлено снижением содержания фитогормонов в клетке [19] . Посколь ку наши резистентные к токсину бактериоза кле точные линии кормовой свеклы также оказались медленнорастущими, можно было предположить, что они проявят определенную устойчивость и к низким температурам. Поэтому нами была прове дена серия экспериментов по изучению перекрест ной устойчивости данных линий к температурному стрессу. Из литературных данных [16, 19] извест но, что предварительная обработка опытного мате риала низкими положительными температурами 2—6 °С способствует повышению устойчивости культуры клеток к отрицательным температурам. Поэтому опыты с температурными стрессами про водили в два этапа — первоначальное закаливание и последующая обработка отрицательными темпе ратурами. Закаливание опытного материала осуществля ли в двух режимах: 7 сут при 2 °С и 14 сут с последовательной с недельным интервалом сменой температур — 6 и 2 °С. Каллусы, прошедшие такое закаливание, не отличались по массе и пролифера ции микророзеток от исходных. Последующая об работка закаленных каллусов отрицательной тем пературой - 2 °С в течение 1, 8 и 16 ч не привела к гибели клеточных линий ни в одном из испытан ных вариантов. Однако у контрольных каллусов линии 25 через 5 недель отмечалось резкое замедление при роста биомассы (табл. 2) и снижение частоты пролиферации микророзеток до 50 %. У резистентных к токсину каллусов подобная обработка не влияла на их способность формиро вать микропобеги и прирост биомассы. Повторная обработка экспериментального ма териала температурой - 5 °С в течение 21 ч оказа лась критической для исходного каллуса (линии 25) . Несмотря на его закаливание и предобработку температурой - 2 °С, наблюдалась 100 % - я гибель каллуса (табл. 3) . У токсинрезистентных клеточ ных линий при такой обработке через 7 недель выявлено около 40 % живых каллусов. Регенерационная способность этих культур в зависимости от линии была на уровне 45—60 % . Однако количество стеблевых почек на них умень шалось пропорционально увеличению экспозиции обработки и формировались розетки высотой до 20 мм. Среди каллусов с исходно светло-желтой окраской появлялись непигментированные, белого цвета каллусы. После переноса на свежую пита тельную среду каллусы с перекрестной устойчиво стью хорошо росли в течение двух пассажей при низких положительных температурах (4 °С). Следует отметить, что в результате обработки отрицательной температурой (-5 °С) с экспозицией в течение 14 ч исходной линии 25 было выделено три медленнорастущих штамма. Эти штаммы были высажены на среду с сублетальной дозой токсина. Показано, что данные штаммы оказались более жизнеспособными, чем исходная линия. Так , если у контрольной линии в третьем пассаже выявлено около 14 % живых каллусов, то у изучаемых штаммов их количество возросло до 23 % . Проведенные цитологические исследования свидетельствуют о том, что первичный каллус, образовавшийся на экспланте листа, был исходно гетерогенным по числу хромосом. При доминирова нии диплоидных клеток (81 %) выявлены тетрап- 140 СЕЛЕКЦИЯ НА УСТОЙЧИВОСТЬ КОРМОВОЙ СВЕКЛЫ К ТОКСИНУ Таблица 2 Относительный прирост сырой биомассы у исходной и токсинрезистентных клеточных линий кормовой свеклы под действием отрицательной температуры (-2 °С/16 ч) Таблица 3 Влияние обработки отрицательной температурой клеточных линий кормовой свеклы на пролиферацию микророзеток лоидные и анеуплоидные клетки с околотетрапло- идным числом хромосом (табл. 4) . Каллусная культура второго пассажа линии 25, использованная в качестве исходной для работ по клеточной селекции, характеризуется большой ва риабельностью клеток по плоидности. Наблюдается полиплоидизация штамма, что выражается в появ лении значительного количества гиперплоидных клеток. У исходной линии плоидность клеток варь ирует от гиподиплоидных до гиперплоидных с пло- идностью 6—12х. При пересадке клеточных культур на среду с токсином уже в первом пассаже обнаруживаются значительные цитологические изменения по срав нению с контрольным каллусом. Наблюдается резкое увеличение количества анеуплоидных клеток до 1 8 — 2 1 % по сравнению с 7,3 % у контрольного каллуса. В клеточных популяциях каллусов обнаружи вается значительное количество клеток с отклоне ниями от нормального процесса митоза. В анафазах клеток разного уровня плоидности отмечены отста вания одной или нескольких хромосом, многочис ленные мосты, двойные и одиночные фрагменты. Количество клеток с аномалиями митоза колеба лось у разных линий от 12 до 1 6 % . В то время как у контрольной линии 25 число таких клеток не превышало 3—4 % , хотя спектр аномалий митоза был примерно таким же . У резистентных линий третьего пассажа на- 141 ГУБАНОВА Н. Я., ДУБРОВНАЯ О. В., ЧУГУНКОВА Т. В. Таблица 4 Частота клеток с различным числом хромосом у резистентных каллусных линий кормовой свеклы контрольный каллус культивировали на обычной среде DS-2. Таблица 5 Частота клеток с различным числом хромосом у токсинрезистентных каллусных линий кормовой свеклы после обработки отрицательной температурой (-5 °С 121 ч) блюдается снижение количества анеуплоидных клеток до 13—15 % , а т акже клеток с нарушения ми митоза до 7—8 % . Обнаруживается дальнейшая полиплоидизация культур — доля клеток с тетрап- лоидным набором хромосом превышает 40 % на фоне значительного уменьшения исходного модаль ного класса 2х. Однако делящихся клеток с плоид- ностью выше 8х уже не обнаруживается. При последующем пассировании каллусов на селективной среде наблюдается дальнейшая на правленная изменчивость в пользу тетраплоидных клеток — их количество превышает 50 % . 142 СЕЛЕКЦИЯ НА УСТОЙЧИВОСТЬ КОРМОВОЙ СВЕКЛЫ К ТОКСИНУ Доля анеуплоидных клеток постепенно снижа ется и не превышает 10 % . По сравнению с контрольным каллусом у резистентных линий мож но отметить значительно меньшее (в 2—3 раза) количество диплоидных клеток, а также высоко- плоидных (в 2 раза) . Вместе с тем выявляется значительно больше триплоидных клеток. Т а к и м образом , цитогенетический а н а л и з структуры клеточных популяций резистентных к бактериальному токсину каллусных линий кормо вой свеклы выявил сходный тип развития — увели чение степени полиплоидизации с возрастом куль тур и селективный отбор в пользу субпопуляции тетраплоидных клеток. Анализ хромосомного состава клеточных попу ляций токсинрезистентных клеточных линий, под вергшихся обработке отрицательной температурой - 5 °С в течение 21 ч, через 4 недели после обработки выявил полное исчезновение класса дип лоидных клеток. При доминировании тетраплоид ных клеток (> 60 %) в популяции отмечены три- плоидные, гексаплоидные и октоплоидные клетки, суммарное количество которых находилось на уровне 25—30 % (табл. 5 ) . Анеуплоидные клетки в большинстве случаев имели околотетраплоидное число хромосом и составляли примерно 10 % . Через три пассажа после температурной обра ботки в структуре клеточной популяции данных линий значительных изменений не обнаружено. Отмечено появление отдельных диплоидных кле ток. Таким образом, методами клеточной селекции получены четыре медленнорастущие каллусные л и нии кормовой свеклы сорта Панфильская, рези стентные к токсину возбудителя бактериальной пятнистости листьев Ps. syringae pv. aptata. Показа на перекрестная устойчивость данных линий и к низким температурам. Отмечены морфологические изменения клеточных культур. Выявлен сходный тип развития каллусных культур — увеличение степени полиплоидизации под влиянием стрессо вых факторов. Н. Я. Губанова, О. В. Дубровна, Т. В. Чугункова Комплексна селекція in vitro на стійкість клітинних ліній кормовою буряку до токсину бактеріозу та низьких температур Резюме Отримано резистентні до токсину Pseudomonas syringae pv. aptata калюсні лінії кормового буряку. Показано перехресну стійкість цих ліній і до низьких температур. Досліджено цитогенетичні особливості калюсних культур у процесі три валого культивування на селективному середовищі та після обробки стійких ліній низькими температуре ми. N. Ya. Gubanova, О. V. Dubrovnaya, Т. V. Chugunkova Complex in vitro selection of cell lines of mangel beet resistant to a toxin of bacteriosis pathogene and low temperatures Summary The callus strains of mangel beet resistant to a Pseudomonas syringae pv. aptata toxin have been obtained. It is shown that these strains have also crossed resistance to low temperatures. The cytogenetic peculiarities of callus cultures during prolonged cultivation on the selective medium and under the influence of low temperatures have been studied. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Аврова А. О., Тютерев С. А., Евстигнеева Т. А., Ко зырева О. П. Селекция томатов in vitro на устойчивость к Alternaria solani II Тез. докл. 2-го Между нар. симпоз. «Растительная биотехнология и молекулярная биология» (Пущино, 18—20 мая 1993).—Пущино, 1993.—С. 105. 2. Toyoda И., Shimiza К., Chatani N., Kita J., Matsuda К Selection of bacterial wilt-resistant tomato throught tissue culture / / Plant Cell, Tissue and Organ Cult.—1990.—22, N 3.—P. 191—196. 3. Хромова Л. M.t Седнина Г. В., Буте н ко Р. Г., Яшина И. М., Русинов А. В. Клеточная селекция картофеля / / С.-х. биология.—1983.—№ 6.—С. 3—12. 4. Быстрых Е. Е., Тарабрин Г. А. Оценка устойчивости пшеницы к гельминтоспориозу с использованием токсина возбудителя / / Докл. Рос. Акад. с.-х. наук.—1993.— № 5.—С. 5—7. 5. Ling D. Я., Vidhyaseharan P., Borromeo Е. С. In vitro screening of rise germplasm for resistance to brown spot disease using phytotoxin / / Theor. and Appl. Genet. —1985.—71, N 1.—P. 133—135. 6. Масленников С. E., Посыпанов Г. С, Мезенцева А. В. Разработка методических подходов для получения форм люцерны, устойчивых к фузариозу, с использованием культуры каллусов и клеток / / Изв. TCXA.—1994.—5.— С. 177—185. 7. Мазин В. В., Кирьян И. /'., Ключникова Л. А. Исполь зование патогена Fusarium oxysporum в клеточной селек ции клевера на повышенную устойчивость к болезням / / Тез. докл. Науч.-метод, совещ. (пос. Немчиновка, Моск. обл., 15—17 ноября, 1994).—М.: Наука, 1994.—С. 34—35. 8. Michrle М. N. Di., Toponi М. A. Cold stress organogenesis in tobacco pith tissue culture / / G. Bot. Ital.—1989.—123, N 1—2, Suppl. N 2.—P. 188. 9. Yamaguchi M., Yamoda A., Hinata K. Variental differences the response to low temperature treatment for callus formation in anther culture of rise / / Jap. J. Bred.—1990.—40, N 2.— P. 193—198. 10. Songstad D. D., Dunkan D. R., Widholm J. M. Involvement in chilling tolerance of maize suspension cultures / / J. Exp. Botany.—1990.—41, N 224.—P. 284—289. I {.Chandler S. F., Reak К J.f Pua E.-C, Trevor A. The effectiveness of selection for salinity tolerance using in vitro shoot cultures / / Bot. Gaz.—1988.—149, N 2.—P. 166—172. 12. Le Dily F., Hagege D., Billard J. P., Bossoutrot D. Effect du chlomre de sodium sur la croissance et le potentiel osmotique de cals normaux et habitues de betterave sucriere / / Biol. Plant.—1990.—12, N 4.—P. 256—265. 13. Freytag A. Wrather J. A., Erichsen A. W. Solt tolerant sugarbeet progeny from tissue cultures challenged with multiple salt / / Plant Cell Repts—1990.—8, N 11.—P. 647—650. 143 ГУБАНОВА Н. Я., ДУБРОВНАЯ О. В., ЧУГУНКОВА Т В. 14. Lepoivre P., Carets N. Selection of sugar beet calli to obtain plants resistant to Cercospora beticola II Nuel. Techn. and in vitro Cult. Plant Improv.: Proc .Int. Symp. (Vienna, 19—23 Aug., 1985).—Vienna, 1986.—P. 305—308. 15. Долгих О. И. Принципы скрининга клеток in vitro с целью получения устойчивых к абиотическим стрессам форм растений / / 2-й Рос. симпоз. «Новые методы биотехно логии растений» (Пущино, 18—20 мая, 1993): Тез. докл.— Пущино, 1993.—С. 103. 16. Swaaij Л., Yacobsen Е., Keil J., Feenstra W. Selection, characterization and regeneration of hydroxyproline-resistant cell lines of Solanum tuberosum: tolerance to NaCl and freezing stress / / Physiol, plant.—1986.—68, N 3.—P. 359— 366. 17. Doley W. P., Saunders G. W. Hormone-free medium will support callus production and subsequent shoot regeneration from whole leaf explants in same sugar beet {Beta vulgaris L.) populations / / Plant Cell Repts.—1989.-8, N 4 . - P . 2 2 2 - 225. 18. Кучеренко Л. А., Маддумаге P. П., Гужов Ю. Л. К методике определения массы каллусных тканей в процессе культивирования / / С.-х. биология.—1991.—№ 3.— С. 84—85. 19. Zhu В., Ryn S. В., Li Р. Н. Effect of abscisic acid biosynthesis inhibitor on cold induced hardiness in cultured plant cell / / Plant Physiol.—1990.—93, N 1.—P. 84. УДК 57.085.23:633.63 Поступила в редакцию 11.12.98 144

Комплексная селекция in vitro на устойчивость клеточных линий кормовой свеклы к токсину возбудителя бактериоза и низким температурам

Institution

Similar Items