Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex

Aim. Rictor is a component of the protein complex mTORC2 that is activated by growth factors and regulates cell growth, survival and migration. Here, we describe the development of the Rictor specific monoclonal antibody and characterize its suitability for various immunological assays. Methods. Hyb...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:Вiopolymers and Cell
Datum:2015
1. Verfasser: Malanchuk, O.M.
Format: Artikel
Sprache:Englisch
Veröffentlicht: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2015
Schlagworte:
Online Zugang:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152616
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex / O.M. Malanchuk // Вiopolymers and Cell. — 2015. — Т. 31, № 5. — С. 379-386. — Бібліогр.: 28 назв. — англ.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
_version_ 1862740256059555840
author Malanchuk, O.M.
author_facet Malanchuk, O.M.
citation_txt Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex / O.M. Malanchuk // Вiopolymers and Cell. — 2015. — Т. 31, № 5. — С. 379-386. — Бібліогр.: 28 назв. — англ.
collection DSpace DC
container_title Вiopolymers and Cell
description Aim. Rictor is a component of the protein complex mTORC2 that is activated by growth factors and regulates cell growth, survival and migration. Here, we describe the development of the Rictor specific monoclonal antibody and characterize its suitability for various immunological assays. Methods. Hybridoma technology has been used for the monoclonal antibody production. Immunization was carried out with the recombinant N-terminal fragment of human Rictor expressed in E. coli as a GST-tagged fusion protein. Results. Specific monoclonal antibody (mAb) against Rictor has been developed. Conclusions. The generated mAb specifically recognizes the recombinant and endogenous Rictor and is suitable for Western blotting, immunoprecipitation, and immunofluorescence assays of mammalian cells. This mAb will be a useful tool for the investigations of a physiological role of Rictor as well as the function of the mTORC2 in general. Мета. Rictor є унікальним компонентом білкового комплекса mTORC2, що активується ростовими факторами та регулює ріст клітин, виживання та міграцію. В даній статті описано процедуру отримання моноклональних антитіл, специфічних до Rictor, а також особливості їх використання у різноманітних імунологічних методах аналізу. Методи. Для отримання моноклональних антитіл було використано гібридомну технологію. Імунізацію проводили рекомбінантним GST-таг злитим N-термінальним фрагментом Rictor, синтезованим в E. coli. Результати. Отримано специфічні моноклональні антитіла проти Rictor. Висновки. Отримані моноклональні антитіла специфічно розпізнають рекомбінантний та ендогенний Rictor в Вестерн-блот аналізі, імунопреципітації та імунофлюорисценції клітин ссавців, та можуть бути використані як необхідний інстумент досліджень при вивченні як індивідуальної фізіологічної ролі Rictor в клітині, так і в складі комплекса mTORC2 в цілому. Цель. Rictor является уникальным компонентом белкового комплекса mTORC2, который активируется ростовыми факторами и регулирует рост клеток, выживание и миграцию. В данной статье описано процедуру получения моноклональных антител, специфичных к Rictor, а также особенности их использования в различных иммунологических методах анализа. Методы. Для получения моноклональных антител была использована гибридомная технология. Иммунизацию проводили рекомбинантным GST-таг слитым N-терминальным фрагментом Rictor, синтезированном в E. coli. Результаты. Получены специфические моноклональные антитела против Rictor. Выводы. Полученные моноклональные антитела специфично распознают рекомбинантный и эндогенный Rictor в Вестерн-блот анализе, иммунопреципитации и иммунофлюорисценции клеток млекопитающих, и могут быть использованы как необходимый инстумент исследований при изучении как индивидуальной физиологической роли Rictor а в клетке, так и в составе комплекса mTORC2 в целом.
first_indexed 2025-12-07T20:13:59Z
format Article
fulltext
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-152616
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn 0233-7657
language English
last_indexed 2025-12-07T20:13:59Z
publishDate 2015
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
record_format dspace
spelling Malanchuk, O.M.
2019-06-12T13:18:05Z
2019-06-12T13:18:05Z
2015
Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex / O.M. Malanchuk // Вiopolymers and Cell. — 2015. — Т. 31, № 5. — С. 379-386. — Бібліогр.: 28 назв. — англ.
0233-7657
DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0008FA
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152616
577.112.7 + 616-097 + 576.31
Aim. Rictor is a component of the protein complex mTORC2 that is activated by growth factors and regulates cell growth, survival and migration. Here, we describe the development of the Rictor specific monoclonal antibody and characterize its suitability for various immunological assays. Methods. Hybridoma technology has been used for the monoclonal antibody production. Immunization was carried out with the recombinant N-terminal fragment of human Rictor expressed in E. coli as a GST-tagged fusion protein. Results. Specific monoclonal antibody (mAb) against Rictor has been developed. Conclusions. The generated mAb specifically recognizes the recombinant and endogenous Rictor and is suitable for Western blotting, immunoprecipitation, and immunofluorescence assays of mammalian cells. This mAb will be a useful tool for the investigations of a physiological role of Rictor as well as the function of the mTORC2 in general.
Мета. Rictor є унікальним компонентом білкового комплекса mTORC2, що активується ростовими факторами та регулює ріст клітин, виживання та міграцію. В даній статті описано процедуру отримання моноклональних антитіл, специфічних до Rictor, а також особливості їх використання у різноманітних імунологічних методах аналізу. Методи. Для отримання моноклональних антитіл було використано гібридомну технологію. Імунізацію проводили рекомбінантним GST-таг злитим N-термінальним фрагментом Rictor, синтезованим в E. coli. Результати. Отримано специфічні моноклональні антитіла проти Rictor. Висновки. Отримані моноклональні антитіла специфічно розпізнають рекомбінантний та ендогенний Rictor в Вестерн-блот аналізі, імунопреципітації та імунофлюорисценції клітин ссавців, та можуть бути використані як необхідний інстумент досліджень при вивченні як індивідуальної фізіологічної ролі Rictor в клітині, так і в складі комплекса mTORC2 в цілому.
Цель. Rictor является уникальным компонентом белкового комплекса mTORC2, который активируется ростовыми факторами и регулирует рост клеток, выживание и миграцию. В данной статье описано процедуру получения моноклональных антител, специфичных к Rictor, а также особенности их использования в различных иммунологических методах анализа. Методы. Для получения моноклональных антител была использована гибридомная технология. Иммунизацию проводили рекомбинантным GST-таг слитым N-терминальным фрагментом Rictor, синтезированном в E. coli. Результаты. Получены специфические моноклональные антитела против Rictor. Выводы. Полученные моноклональные антитела специфично распознают рекомбинантный и эндогенный Rictor в Вестерн-блот анализе, иммунопреципитации и иммунофлюорисценции клеток млекопитающих, и могут быть использованы как необходимый инстумент исследований при изучении как индивидуальной физиологической роли Rictor а в клетке, так и в составе комплекса mTORC2 в целом.
I thank Prof. Filonenko V. V. (Dep. of Cell
 Signalling, Institute of molecular biology and genetics, NAS of Ukraine) for valuable comments and
 critical review of the manuscript.
en
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
Вiopolymers and Cell
Molecular and Cell Biotechnologies
Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
Отримання моноклональних антитіл до компонента комплекса mTORC2 білка Rictor
Получение моноклональных антител к компоненту комплекса mTORC2 белку Rictor
Article
published earlier
spellingShingle Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
Malanchuk, O.M.
Molecular and Cell Biotechnologies
title Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_alt Отримання моноклональних антитіл до компонента комплекса mTORC2 білка Rictor
Получение моноклональных антител к компоненту комплекса mTORC2 белку Rictor
title_full Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_fullStr Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_full_unstemmed Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_short Development of monoclonal antibody against protein Rictor, a component of the mTORC2 complex
title_sort development of monoclonal antibody against protein rictor, a component of the mtorc2 complex
topic Molecular and Cell Biotechnologies
topic_facet Molecular and Cell Biotechnologies
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152616
work_keys_str_mv AT malanchukom developmentofmonoclonalantibodyagainstproteinrictoracomponentofthemtorc2complex
AT malanchukom otrimannâmonoklonalʹnihantitíldokomponentakompleksamtorc2bílkarictor
AT malanchukom polučeniemonoklonalʹnyhantitelkkomponentukompleksamtorc2belkurictor