Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих
В вектор для бактериальной экспрессии рЕТ32а клонированы и секвенированы вставки ДНК, кодирующие полноразмерные цитокин ЕМАР-2 и цитокинподобный домен тирозил-тРНК синтетазы (TyrRS) млекопитающих, а также их делетированные с СООН- и NH₂-концов формы. Получена бактериальная экспрессия всех клонов, и...
Saved in:
| Published in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Date: | 2000 |
| Main Authors: | , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2000
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152620 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих
 / А.Л. Дубровский, Дж. Браун, А.И. Корнелюк, Дж.К. Мюррей, Г.X. Мацука // Биополимеры и клетка. — 2000. — Т. 16, № 3. — С. 229-235. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862557679460810752 |
|---|---|
| author | Дубровский, А.Л. Браун, Дж. Карнелюк, А.И. Мюррей, Дж.К. Мацука, Г.Х. |
| author_facet | Дубровский, А.Л. Браун, Дж. Карнелюк, А.И. Мюррей, Дж.К. Мацука, Г.Х. |
| citation_txt | Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих
 / А.Л. Дубровский, Дж. Браун, А.И. Корнелюк, Дж.К. Мюррей, Г.X. Мацука // Биополимеры и клетка. — 2000. — Т. 16, № 3. — С. 229-235. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | В вектор для бактериальной экспрессии рЕТ32а клонированы и секвенированы вставки ДНК, кодирующие полноразмерные цитокин ЕМАР-2 и цитокинподобный домен тирозил-тРНК синтетазы (TyrRS) млекопитающих, а также их делетированные с СООН- и NH₂-концов формы. Получена бактериальная экспрессия всех клонов, и для полноразмерных форм осуществлены аффинная очистка до гомогенного состояния, протеолитическое удаление константной части слитых рекомбинантных белков, а также тестирование их биологической активности в реакции индукции тканевого фактора. Полноразмерная форма цитокинподобного домена TyrRS не взаимодействует с поликлональными антителами к ЕМАР-2 в вестерн-блот-анализе. Делается вывод о пригодности полученной панели рекомбинантных белков для сравнительного изучения локализации функционально важных участков белков
У вектор для бактеріальної експресії рЕТ32а клоновано і секвеновано вставки ДНК, що кодують повнорозмірні цитокін ЕМАР-2 і цитокінподібний домен тирозил-тРНК синтетазы (TyrRS) ссавців, а також їхні делетовані з СООН- і NH₂-кінців форми. Отримано бактеріальну експресію всіх клонів, та для повнорозмірних форм здійснено афінне очищення до гомогенного стану, протеолітичне видалення константної частини злитих рекомбінантних білків, а також тестування їхньої біологічної активності у реакції індукції тканинного фактора. Повнорозмірна форма цитокінподібного домену TyrRS не взаємодіє з поліклональними антитілами до ЕМАР-2 у вестерн-блот-аналізі. Зроблено висновок щодо придатності одержаної панелі рекомбінантньїх білків для порівняльного вивчення локалізації функціонально важливих ділянок білків
DNA fragments encoded full-length cytokine EMAP-2 and cytokine-like domain of mammalian TyrRS and truncated from COOH- and NH₂-termini forms were cloned in vector for bacterial expression pET32a. For all clones bacterial overexpression were obtained and full-length forms were purified to homogeneity state by affin chromatography and affinity tag was remove by protease cleavage. Induction of tissue factor for full-length forms was tested. Full-length form of cytokine-like domain of mammalian TyrRS did not interact with polyclonal antibody against EMAP-2 in western-blot analysis. It was concluded that this set of recombinant proteins may be usefull for functional study of these cytokine proteins.
|
| first_indexed | 2025-11-25T22:45:09Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-152620 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-25T22:45:09Z |
| publishDate | 2000 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Дубровский, А.Л. Браун, Дж. Карнелюк, А.И. Мюррей, Дж.К. Мацука, Г.Х. 2019-06-12T13:22:08Z 2019-06-12T13:22:08Z 2000 Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих
 / А.Л. Дубровский, Дж. Браун, А.И. Корнелюк, Дж.К. Мюррей, Г.X. Мацука // Биополимеры и клетка. — 2000. — Т. 16, № 3. — С. 229-235. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.00056B https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152620 577.152.611 В вектор для бактериальной экспрессии рЕТ32а клонированы и секвенированы вставки ДНК, кодирующие полноразмерные цитокин ЕМАР-2 и цитокинподобный домен тирозил-тРНК синтетазы (TyrRS) млекопитающих, а также их делетированные с СООН- и NH₂-концов формы. Получена бактериальная экспрессия всех клонов, и для полноразмерных форм осуществлены аффинная очистка до гомогенного состояния, протеолитическое удаление константной части слитых рекомбинантных белков, а также тестирование их биологической активности в реакции индукции тканевого фактора. Полноразмерная форма цитокинподобного домена TyrRS не взаимодействует с поликлональными антителами к ЕМАР-2 в вестерн-блот-анализе. Делается вывод о пригодности полученной панели рекомбинантных белков для сравнительного изучения локализации функционально важных участков белков У вектор для бактеріальної експресії рЕТ32а клоновано і секвеновано вставки ДНК, що кодують повнорозмірні цитокін ЕМАР-2 і цитокінподібний домен тирозил-тРНК синтетазы (TyrRS) ссавців, а також їхні делетовані з СООН- і NH₂-кінців форми. Отримано бактеріальну експресію всіх клонів, та для повнорозмірних форм здійснено афінне очищення до гомогенного стану, протеолітичне видалення константної частини злитих рекомбінантних білків, а також тестування їхньої біологічної активності у реакції індукції тканинного фактора. Повнорозмірна форма цитокінподібного домену TyrRS не взаємодіє з поліклональними антитілами до ЕМАР-2 у вестерн-блот-аналізі. Зроблено висновок щодо придатності одержаної панелі рекомбінантньїх білків для порівняльного вивчення локалізації функціонально важливих ділянок білків DNA fragments encoded full-length cytokine EMAP-2 and cytokine-like domain of mammalian TyrRS and truncated from COOH- and NH₂-termini forms were cloned in vector for bacterial expression pET32a. For all clones bacterial overexpression were obtained and full-length forms were purified to homogeneity state by affin chromatography and affinity tag was remove by protease cleavage. Induction of tissue factor for full-length forms was tested. Full-length form of cytokine-like domain of mammalian TyrRS did not interact with polyclonal antibody against EMAP-2 in western-blot analysis. It was concluded that this set of recombinant proteins may be usefull for functional study of these cytokine proteins. Работа выполнена при финансовой поддержке Европейского Молекулярно-Биологического Общества (ЕМБО), номер гранта ASNF 9231.
 Авторы статьи выражают благодарность М. Тасу (Ноттингемский университет) за любезно предоставленную плазмиду pGEXAt-EMAP и поликлональные антитела против ЕМАР-2, а также В. Ворд л Б (Ноттингемский университет) — за помощь в работе с клеточными культурами. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих Бактеріальна експресія повнорозмірних і усічених форм цитокіну ЕМАР-2 і цитокінподібного домену тирозил-тРНК синтетази ссавців Bacterial expression of full-length and truncated forms of cytokine EMAP-2 and cytokine-like domain of mammalian tyrosyl-tRNA synthetase Article published earlier |
| spellingShingle | Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих Дубровский, А.Л. Браун, Дж. Карнелюк, А.И. Мюррей, Дж.К. Мацука, Г.Х. Структура и функции биополимеров |
| title | Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
| title_alt | Бактеріальна експресія повнорозмірних і усічених форм цитокіну ЕМАР-2 і цитокінподібного домену тирозил-тРНК синтетази ссавців Bacterial expression of full-length and truncated forms of cytokine EMAP-2 and cytokine-like domain of mammalian tyrosyl-tRNA synthetase |
| title_full | Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
| title_fullStr | Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
| title_full_unstemmed | Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
| title_short | Бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина ЕМАР-2 и цитокинподобного домена тирозил-тРНК синтетазы млекопитающих |
| title_sort | бактериальная экспрессия полноразмерных и усеченных форм цитокина емар-2 и цитокинподобного домена тирозил-трнк синтетазы млекопитающих |
| topic | Структура и функции биополимеров |
| topic_facet | Структура и функции биополимеров |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152620 |
| work_keys_str_mv | AT dubrovskiial bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih AT braundž bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih AT karnelûkai bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih AT mûrreidžk bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih AT macukagh bakterialʹnaâékspressiâpolnorazmernyhiusečennyhformcitokinaemar2icitokinpodobnogodomenatiroziltrnksintetazymlekopitaûŝih AT dubrovskiial bakteríalʹnaekspresíâpovnorozmírnihíusíčenihformcitokínuemar2ícitokínpodíbnogodomenutiroziltrnksintetazissavcív AT braundž bakteríalʹnaekspresíâpovnorozmírnihíusíčenihformcitokínuemar2ícitokínpodíbnogodomenutiroziltrnksintetazissavcív AT karnelûkai bakteríalʹnaekspresíâpovnorozmírnihíusíčenihformcitokínuemar2ícitokínpodíbnogodomenutiroziltrnksintetazissavcív AT mûrreidžk bakteríalʹnaekspresíâpovnorozmírnihíusíčenihformcitokínuemar2ícitokínpodíbnogodomenutiroziltrnksintetazissavcív AT macukagh bakteríalʹnaekspresíâpovnorozmírnihíusíčenihformcitokínuemar2ícitokínpodíbnogodomenutiroziltrnksintetazissavcív AT dubrovskiial bacterialexpressionoffulllengthandtruncatedformsofcytokineemap2andcytokinelikedomainofmammaliantyrosyltrnasynthetase AT braundž bacterialexpressionoffulllengthandtruncatedformsofcytokineemap2andcytokinelikedomainofmammaliantyrosyltrnasynthetase AT karnelûkai bacterialexpressionoffulllengthandtruncatedformsofcytokineemap2andcytokinelikedomainofmammaliantyrosyltrnasynthetase AT mûrreidžk bacterialexpressionoffulllengthandtruncatedformsofcytokineemap2andcytokinelikedomainofmammaliantyrosyltrnasynthetase AT macukagh bacterialexpressionoffulllengthandtruncatedformsofcytokineemap2andcytokinelikedomainofmammaliantyrosyltrnasynthetase |