Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей

Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей

В работе суммированы данные, касающиеся введения ретровирусного генома в геном клеток мышей. Рассматриваются вопросы активации ретровирусных геномов в различных тканях в зависимости от их хромосомной локализации и стадии развития мышей. Підсумовано дані, що стосуються введення ретровірусного геному...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :Биополимеры и клетка
Дата:1986
Автори: Морозова, Л.М., Соломко, А.П.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1986
Теми:
Обзоры
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152681
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей / Л.М. Морозова, А.П. Соломко // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 2. — С.59-68. — Бібліогр.: 71 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-152681
record_format dspace
spelling Морозова, Л.М.
Соломко, А.П.
2019-06-12T15:38:30Z
2019-06-12T15:38:30Z
1986
Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей / Л.М. Морозова, А.П. Соломко // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 2. — С.59-68. — Бібліогр.: 71 назв. — рос.
0233-7657
DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.00019D
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152681
577.218
В работе суммированы данные, касающиеся введения ретровирусного генома в геном клеток мышей. Рассматриваются вопросы активации ретровирусных геномов в различных тканях в зависимости от их хромосомной локализации и стадии развития мышей.
Підсумовано дані, що стосуються введення ретровірусного геному в геном клітин мишей. Розглянуто питання активації ретровірусних геномів у різних тканинах залежно від їхньої хромосомної локалізації та стадії розвитку мишей.
Certain data concerning retrovirus genome introduction into murine genome as well as retrovirus activation in different tissues depending on the virus localization in chromosome and ontogenesis period of mice are discussed.
ru
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
Биополимеры и клетка
Обзоры
Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей
Взаємодія клітинних і ретровірусних геномів в онтогенезі мишей
Interaction between cellular and retroviral genomes in ontogenesis of mice
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей
spellingShingle Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей
Морозова, Л.М.
Соломко, А.П.
Обзоры
title_short Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей
title_full Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей
title_fullStr Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей
title_full_unstemmed Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей
title_sort взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей
author Морозова, Л.М.
Соломко, А.П.
author_facet Морозова, Л.М.
Соломко, А.П.
topic Обзоры
topic_facet Обзоры
publishDate 1986
language Russian
container_title Биополимеры и клетка
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
format Article
title_alt Взаємодія клітинних і ретровірусних геномів в онтогенезі мишей
Interaction between cellular and retroviral genomes in ontogenesis of mice
description В работе суммированы данные, касающиеся введения ретровирусного генома в геном клеток мышей. Рассматриваются вопросы активации ретровирусных геномов в различных тканях в зависимости от их хромосомной локализации и стадии развития мышей. Підсумовано дані, що стосуються введення ретровірусного геному в геном клітин мишей. Розглянуто питання активації ретровірусних геномів у різних тканинах залежно від їхньої хромосомної локалізації та стадії розвитку мишей. Certain data concerning retrovirus genome introduction into murine genome as well as retrovirus activation in different tissues depending on the virus localization in chromosome and ontogenesis period of mice are discussed.
issn 0233-7657
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152681
citation_txt Взаимодействие клеточных и ретровирусных геномов в онтогенезе мышей / Л.М. Морозова, А.П. Соломко // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 2. — С.59-68. — Бібліогр.: 71 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT morozovalm vzaimodeistviekletočnyhiretrovirusnyhgenomovvontogenezemyšei
AT solomkoap vzaimodeistviekletočnyhiretrovirusnyhgenomovvontogenezemyšei
AT morozovalm vzaêmodíâklítinnihíretrovírusnihgenomívvontogenezímišei
AT solomkoap vzaêmodíâklítinnihíretrovírusnihgenomívvontogenezímišei
AT morozovalm interactionbetweencellularandretroviralgenomesinontogenesisofmice
AT solomkoap interactionbetweencellularandretroviralgenomesinontogenesisofmice
first_indexed 2025-11-25T10:24:59Z
last_indexed 2025-11-25T10:24:59Z
_version_ 1850512598897786880
fulltext Η Обзоры У Д К 577.218 ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ КЛЕТОЧНЫХ И РЕТРОВИРУСНЫХ ГЕНОМОВ В ОНТОГЕНЕЗЕ МЫШЕИ Л. М. Морозова, А. П. Соломко Регуляция активности генов в сложноконтролируемых процессах раз- вития и специализации сегодня становится одной из самых актуальных и важных проблем биологической науки. Введение вирусных и реком- бинантных Д Н К в клетки разной степени дифференциации, а также в яйцеклетки эукариот с последующим анализом событий, происходящих па молекулярном уровне и сопровождающих развитие организма, яв- ляется одним из эффективных подходов к решению этой проблемы. В настоящее время интенсивно исследуют структуру и регуляцию ак- тивности ряда генов, встроенных в геном мышей путем инъецирования их в пронуклеус оплодотворенных яйцеклеток: анализируют рекомби- пантные молекулы Д Н К с встроенными генами глобина кролика и че- ловека [І, 2], тимидинкиназы вируса герпеса [3, 4], гормона роста крысы и человека [5, 6], иммуноглобулина [7, 8], трансферний птиц [9], эластазы крыс [10] и др. Структурный ген в рекомбинантной мо- лекуле присутствует либо с собственным промотором [7, 8], либо его заменяют на другой активный промотор, к которым относятся и LTR вирусов [3, 4, 11]. Особое внимание обращается на выяснение природы тканеспецифичности экспрессии введенных генов. Известно, что многие вирусы эукариот тканеспецифичны, что делает их весьма интересным объектом как для целей генной инженерии с перспективой использования в качестве векторов, так и в качестве ге- номных зондов для изучения процесса дифференцировки. В частности, с этой целью используют эндогенные вирусы С-типа [11, 12]. Эти виру- сы присутствуют в соматических и половых клетках многих видов эука- риот, а их провирусная Д Н К передается в ряду поколений как стабиль- ный генетический элемент [13]. Интегрированная в геном эукариот провирусная Д Н К обнаруживает сходство с транспозонами [14, 15] и, скорее всего, подвергается подобным механизмам регуляции внутри клетки, оказывая при этом влияние на экспрессию генов самой клетки [ 1 6 — 1 8 ] . В последнее время привлекает внимание серия работ, посвященная изучению взаимодействия вируса лейкоза мышей Молони (Mo-MuLV ) с геномом клеток эмбрионов мышей, проводимая лабораторией Джени- ша. В результате инфицирования вирусом мышей на различных ста- диях их онтогенеза (на стадии 4—16 бластомеров с последующей трансплантацией их самкам-реципиентам, in utero на 9—10-й день раз- вития либо сразу после рождения мышат) были получены 13 субли- ний мышей, которые в зависимости от места интеграции вирусного ге- нома в геном клеток были обозначены ΜουΙ-ІЗ. В экспериментах были использованы зародыши нескольких линий мышей. Сублинии Μουΐ, Μου2-4, Μου5-9 получены в результате культивирования доимпланта- ционных зародышей соответственно линий мышей BALB, ICR и 129 на монослое клеток Cl-1-Ia, продуцирующих вирус [19—24]. Сублинии MovlO-12 происходят от зародышей, инъецированных в бластоцель клеткой Cl-1-Ia, линии мышей 129 [21, 22], а сублиния Μου13 получе- на после инъецирования вируса Молони через стенку матки зародышам Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 2 2 - 5-901 59 мышеи . 'ПИШИ Съ-Bi и 129 на 8,5—9,5 лип развития [25]. Сублипия Μου 14 получена в результате инъецирования клонированной последова- тельности вируса Мол они из сублинии МоиЗ в оплодотворенные яйце- клетки мышей [26]. Как правило, введение тем или иным способом вируса во всех слу- чаях приводило к образованию мозапков, которые при скрещивании их с нормальными животными передавали вирусную последовательность с частотой, значительно меньшей 5 0 % . Только введение клонированного генома вируса в зиготы мышей позволило избежать мозаицизма уже в Г0. Последующее скрещивание гетерозиготных по MuLV мышей с нормальными особями позволило установить, что посительетво экзоген- ного вирусного генома передается с частотой около 50 % их потомкам, т. е. провпруспые последовательности наследовались как целая едини- ца наследственности, подчиняющаяся законам Менделя [19]. Анализ первичной структуры интегрированной провируспой Д Н К , проведенный с помощью нуклеаз рестрикции, позволил обнаружить перестройку, скорее всего делецпю, на Законне Д Н К MuLV только у двух сублиний — Μου4 и Μονβ [22]. При этом выявилась суще- ственная гетерогенность размеров /:б ,о/?/-фрагмептов геномной Д Н К , несущих вирусную последовательность у разных сублиний мышей (от 9000 до 30000 пар пуклеотидов для Μον4 и Μου 11 соответственно). Размер генома MuLV составляет 9000 пар пуклеотидов [22, 27, 28], Так как внутри генома вируса пет сайтов рестрикции для I:coRI, то полученные результаты свидетельствуют, скорее всего, в пользу того, что встройка провируспой Д Н К произошла у разных сублиний в раз- личные места генома мышей. Достаточно точно локализация прови- руспой Д Н К установлена только у линии Movl. С помощью генети- ческого анализа показана встройка Д Н К MuLV із шестой хромосоме па расстоянии 31 рекомбннацпоипой единицы от маркера wa-ί (wa- ved) [20] . Относительно ряда ретровирусов достаточно точно показано, что интеграция их геномов в геном клеток сайтнеспецифична, они с равной вероятностью могут включаться в уникальные и повторяющиеся после- довательности генома хозяина [29]. То же самое было показано и для генома MuLV. Последовательности Д Н К мышей, прилегающие в 5'- положепии к геному вируса, были клонированы, а затем гибридизова- лись с EсоRI-фрагмептами Д Н К мышей линии C57Bl, 129, BALB, ICR и сублиний Movl и Mov2. В результате оказалось, что клонированные последовательности гибридизуются с рядом EсоRI-фрагмеитов Д Н К мышей разных линий и сублиний, демонстрируя тем самым, что после- довательности, аналогичные местам встройки вируса, встречаются в геноме мышей достаточно часто [30, 31]. Полученные сублинии мышей, несущие экзогенный провпрусный геном, были проанализированы для выявления возможной активации провируса н образования зрелых вирусных частиц (виремия). Оказа- лось, что только 5 из 13 проанализированных сублиний мышей были виремичными (Μου 1-3, Μον9 и Μου 13), причем у одной из сублиний, Μου2, провирус активировался только у 20 % животных и в достаточно позднем возрасте (2—4 месяца). Генетическая основа мышей, исполь- зованных для получения сублиний, не сказывалась существенным обра- зом на предпочтительной активации вируса у какой-либо одной липни. Различия в локализации генома вируса у отдельных сублиний нашли подтверждение в том факте, что активация провируса у этих сублиний происходила в разные сроки их жизни. Отсутствие виремии у остальных сублиний можно было объяснить либо интеграцией вирусного генома в неактивные области генома мы- шей, либо появлением дефектов в провируспой Д Н К или в последова- тельностях Д Н К мышей, ограничивающих геном MuLV, тем более, что у двух сублиний (Mov4 и Μου6) изменения провируспой Д Н К были обнаружены на З'-конце. Для проверки этого предположения проведен эксперимент, в котором были выделены EсоRI-фрагменты геномной 60 ПИОПОЛНМЕРЫ II КЛЕТКА, 1986, т. 2, .М· 2 Д Н К мышей, содержащие вставку провирусной экзогенной ДНК. За- тем их клонировали и сопоставили с Д Н К вируса. Рестрикционный анализ и гибридизация не позволили обнаружить изменений в струк- туре исследуемых фрагментов у трех виремичных и двух невиремич- ных сублиний [21, 22]. Основываясь на этих результатах и наличии факта высокой частоты появления дефектных по репликации вирусов мышей [32, 33], авторы предположили, что в провирусном геноме невиремичных сублиний мышей имеются мутации, которые вышепри- веденными методами не могут быть обнаружены. На эту же мысль наводили и результаты по котрансфекции клонированными фрагмен- тами геномной Д Н К мышей сублиний Mov7 и ΜουΙΟ, содержащими провирусную ДНК. В результате котрансфекции образовался инфек- ционный вирус, в то время как в отдельности клонированные фрагмен- ты не приводили к продукции вируса. При дополнительном анализе структуры клонированного фрагмента Μον7 было установлено наличие дефекта, локализованного в гене «рої» [24, 34]. Сопоставление инфекционности клонированных фрагментов, со- держащих провирусную ДНК, с Д Н К тех же фрагментов, но выделен- ных из генома различных сублиний, показало, что инфекционность первых была значительно выше, чем геномной ДНК, например, ин- фекционность ρΜον9 была в 100 раз выше, чем у Mov9. Сравнитель- ный рестрикционный анализ клонированных и неклонированных фраг- ментов, содержащих MuLV из сублинии Mov3, не обнаружил иных различий в структуре, кроме степени метилирования. Было установлено, что геном провируса MuLV и фланкирующие последовательности мы- шиной Д Н К в сублинии Mov3 интенсивно метилированы, выделенная Д Н К неинфекционна, в то время как клонированный геномный фраг- мент, содержащий провирусную ДНК, высокоинфекционен и неметили- рован [35, 36]. Эти результаты отражают наличие корреляции между активностью генов и степенью метилирования, которая показана для ряда вирусов [37—39] и генов эукариот [40—43]. Результаты, анало- гичные вышеприведенным, получены Граудайном и др. [38], показав- шими, что различающиеся по уровню транскрипционной активности провирусы evl и ev3 в клетках цыплят отличаются и по степени мети- лирования. В то время как Д Н К evl не чувствительна к обработке ДНКазой I и гиперметилирована, Д Н К ev3 метилирована слабо и чувствительна к обработке ДНКазой I. Экспонирование клеток с 5- азацитидином, который не метилируется, приводит к снижению уровня метилирования Д Н К evl и появлению транскрипционной активности. Таким образом, удаление метальных групп при клонировании или экспонировании клеток, несущих провирус с 5-азацитидином, приводит к активации генов и может служить пусковым механизмом в контроле генной экспрессии. Так, уже одноразовая инъекция 5-азацитидина мышам постнатального периода развития сублиний Mov7 и MovlO, каждая из которых несла мутацию в кодирующем районе в неиден- тичных положениях, приводила к индукции транскрипции эндогенных дефектных провирусных геномов, которые до обработки были сильно метилированными и не экспрессировались [44]. Метилирование Д Н К de novo в эмбриональных клетках отмечено не только в случае вирусной нуклеиновой кислоты, но и при микро- инъецировании в пронуклеус оплодотворенных мышиных яйцеклеток рекомбинантных Д Н К [45, 46]. Однако при инфицировании ви- русом MuLV постимплантационных эмбрионов отмечают довольно низкий уровень метилирования его ДНК. Рестрикционный анализ сви- детельствует, что около 80 % молекул Д Н К MuLV, инъецированного на этой стадии, остаются полностью неметилированными. Существен- ные различия в уровне метилирования вирусной Д Н К были отмечены как в дифференцированных, так и в недифференцированных эмбрио- нальных клетках [47]. Необходимо отметить, что процесс метилирования de novo харак- терен, в основном, для зародышевых клеток и ранних этапов эмбрио- БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 2 2 - 5-901 61 генеза и, по-видимому, служит своего рода защитным механизмом от повреждающего действия чужеродной Д Н К развивающихся зароды- шей и недифференцированных клеток. Суммируя, можно сказать, что процесс метилирования Д Н К на разных этапах развития и функциони- рования организма несомненно является важной составной частью весьма сложного процесса регуляции экспрессии генов, что особенно четко видно на примере метилирования так называемых «усилителей», часто расположенных на достаточно большом расстоянии от структур- ных генов и влияющих на их активность при изменении конформации хроматина [48,49]. С нашей точки зрения было бы очень интересно исследовать на примере интегрированной Д Н К MuLV степень ее метилирования в ди- намике развития организма, поскольку процесс деметилирования и активации провирусного генома, его связь с этапами онтогенеза и специализацией клеток и тканей представляется существенно важным моментом для решения проблем дифференцировки и развития. Тем более, что накапливаются данные, показывающие независимость уров- ня транскрипционной активности некоторых генов от степени их мети- лирования [50, 51]. Не менее важно установить причины и выяснить механизмы ам- плификации вирусного генома, наблюдаемой в экспериментах. В ряде тканей сублинейных животных отмечается увеличение числа встроен- ных провирусных Д Н К (соматическая амплификация) в дополнение к основным эндогенным копиям, полученным в результате инфицирова- ния или инъецирования и передающихся вертикально половым путем. Амплификация возникает в результате реинтеграции провирусной Д Н К в клеточный геном, в основном, в тканях-мишенях и отсутствует в дру- гих (мозг, печень). Интересно, что процесс амплификации происходит в два этапа: в прелейкемической стадии находят 1—2 копии провирус- ной Д Н К на гаплоидный геном, а в лейкемической происходит увеличе- ние до 3—4. Дальнейшее увеличение числа копий провирусной Д Н К до 5—8 копий было обнаружено в более старых опухолях [20, 30, 52]. Однако уровень экспрессии вирусного генома коррелирует с числом ко- пий только в прелейкемической и лейкемической фазах жизни живот- ного [53]. Подобная амплификация провирусного генома отмечена и для вируса опухоли молочной железы мышей [54]. Проведение пассивной иммунизации мышей сублинии Movl анти- сывороткой против MuLV предохраняло большинство животных от развития лейкемии, при этом показано, что амплификация провирусной Д Н К отсутствует и не наблюдается вирусспецифической транскрипции [55]. Амплификация провирусной Д Н К MuLV происходит также в слу- чае инъецирования в пронуклеус мышиных зигот клонированных фраг- ментов Д Н К MuLV из сублинии Mov3 [56]. Было установлено, что единственным отличием реинтегрированных амплифицированных копий MuLV по сравнению с эндогенными провирусными копиями, передавае- мыми половым путем, является их слабое метилирование [24, 35]. Исследование экспрессии вирусного генома на уровнях транскрип- ции (блотгибридизацией) и трансляции (обнаружение радиоиммунным методом белка рЗО, появление которого характерно для инфекции, вы- званной MuLV) было проведено у вируспродуцирующих сублиний Movly Μον2, Μον3, Mov9 и Μου13, контролем служили мыши линии BALB. В результате экспериментов установлено, что клетки селезенки всех исследованных сублиний мышей характеризуются наличием довольно высоких концентраций вирусспецифической Р Н К и белка рЗО, в других же органах уровень экспрессии вирусного генома существенно зависел от времени активации вируса в онтогенезе животного. Для сублиний мышей, у которых вирус активировался в постнатальном периоде (Movl и Mov2), экспрессия вирусного генома в клетках печени, кишечника, сердца, легкого, почек, тестиса оказалась на уровне контроля, в то время как у сублиний мышей, характеризующихся активацией вируса в эмбриогенезе (Mov3 и Movl3), уровень экспрессии вирусного генома 62 ПИОПОЛНМЕРЫ II КЛЕТКА, 1986, т. 2, .М· 2 варьировал в разных органах, превышая контрольный уровень [22,53]. Количество молекул вирусспецифических мРНК в клетках мозга, пе- чени и тестиса было в 50—100 раз меньшим, чем в клетках селезенки, почек и лимфоузлов. У всех вируспродуцирующих сублиний мышей отмечается экспрес- сия вирусного генома в клетках лимфоидной ткани, которая, по-види- мому, представляет собой ткань — мишень для вируса MuLV. Была предпринята попытка выяснить, происходит ли активация вирусного генома именно на стадии дифференцировки лимфоидной ткани [57]. С этой целью сублетально облученным животным линии BALB вво- дили эмбриональные клетки гемо- и лимфопоэтического ряда, взятые на 15-й и 19-й дни развития зародышей сублинии Μουΐ , а также клет- ки селезенки и костного мозга взрослых животных, предварительно обработанные противовирусной антисывороткой. Последующее изуче- ние популяции клеток селезенки и тимуса облученных животных показа- ло наличие в них до 70 % клеток из сублинии Movl, а рестрикционный анализ выявил в их геноме вирусспецифическую Д Н К в составе фраг- мента размером 27000 пар нуклеотидов, характерного для сублинии Movl. Наблюдение, проведенное в течение дальнейших четырех меся- цев, не позволило обнаружить синтез вирусспецифического белка рЗО, при этом не определялась и вирусспецифическая мРНК. В параллельных экспериментах введение клеток селезенки взрос- лых мышей сублинии Mov 1 мышам линии BALB приводило к развитию виремии. Вероятнее всего, что активация вируса происходит в какой-то специфической популяции клеток на определенной стадии дифферен- циации, так как простого клеточного деления явно недостаточно для активации провируса, поскольку за время наблюдения лимфоциты де- лились много раз. Таким образом, разный уровень экспрессии вирус- ного генома в различных тканях мышей сублиний Μον3 и Μον13, скорее всего, является следствием соматической реинтеграции MuLV, а не экспрессии генома эндогенного вируса и определяется степенью ин- фильтрации органов лимфоцитами. Степень выражения вирусного генома в различных тканях живот- ных зависит от места встраивания, что достаточно хорошо демонстри- руется экспериментами, проведенными с клонированным фрагментом клеточной Д Н К из сублинии Μον3, содержащим провирусный геном. В результате микроинъецирования такого фрагмента pMov3 в опло- дотворенные яйцеклетки встраивание его происходит в участок генома, отличающийся от такового для сублинии Mov3 [35, 56]. У мышей новой сублинии Movl4, полученной в результате микроинъецирования, также наблюдалась амплификация MuLV в лимфоидных тканях, в частности в селезенке. В то же время при отсутствии амплификации в клетках мышечной ткани количество обнаруживаемой вирусспецифической мРНК в сублинии Movl4 оказалось в пять раз большим, чем в селе- зенке. Более высокая степень экспрессии MuLV в мышечной ткани, по-видимому, является следствием нового местоположения эндогенно- го вируса. Количество молекул вирусспецифической Р Н К распределя- лось в клетках различных органов следующим образом (по мере уменьшения): мышцы, селезенка, легкое, тестис [56]. Таким образом, весьма четко прослеживается тканеспецифическая регуляция экспрессии вирусного генома. Были предприняты попытки обнаружить специальные последовательности хозяйского генома, от- вечающие за тканеспецифичность экспрессии, однако в большинстве случаев их не удалось найти, и только в опытах с анализом экспрессии кристаллинового гена кур в хрусталиках глаза мышей было установ- лено, что последовательности, локализованные выше 5 /-концов чуже- родного гена, являются ответственными за тканеспецифичность его экспрессии. Анализ делеционных карт показал, что эти последователь- ности расположены в области между 50—100 парами нуклеотидов перед первым экзоном [58, 59]. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 2 2 - 5-901 63 Анализировали и возможность изменения активности генов в ре- зультате структурных изменений хроматинового комплекса, характер- ного для каждой ткани, при встраивании чужеродной ДНК. Структур- ные изменения, приводящие к активации специфических районов хро- матина, сопровождаются повышением чувствительности к нуклеолити- ческим энзимам. Оказалось, что встроенный и наследуемый половым путем геном провируса MuLV в сублиниях мышей Movl и Mov3 не- чувствителен к ДНКазе I как в опухолевых, так и нормальных тканях в отличие от соматически реинтегрированных провирусных геномов, чувствительных к обработке ДНКазой I. При этом отмечено, что в чув- ствительной к ДНКазе I хроматиновой конформации, главным образом, располагался {/-конец провирусной Д Н К [60—62]. Аналогичные результаты были получены для транскрипционно ак- тивного локуса ev3 в клетках цыплят, который имел районы, чувстви- тельные к ДНКазе I в каждом из двух своих LTR, в то время как транскрипционно инактивированный локус не обнаруживал такой чув- ствительности. Приведенные результаты свидетельствуют о том, что последовательности, находящиеся возле промоторного района в актив- но транскрибируемых генах, гиперчувствительны к ДНКазе I. Однако не стоит забывать, что и кодирующие последовательности активно транскрибируемых генов также находятся в более чувствительном к ДНКазе I структурном состоянии, чем нетранскрибируемые. Исследование мышей сублинии Movl3 в случае нахождения про- вируса в гомозиготном состоянии позволило обнаружить изменение структуры хроматина в клеточной Д Н К недалеко от места встройки генома MuLV. Интеграция провируса у сублинии Movl3 произошла в первый интрон αϊ-коллагенового гена и привела к появлению рецес- сивной летали у зародышей 12-го дня эмбрионального развития, вы- зывая инактивацию αϊ-коллагенового гена [63—66]. Анализ фрагментов клеточной ДНК, несущих αΐ-коллагеновый ген со вставкой генома MuLV в гомо- и гетерозиготном состоянии, а также тканей, продуцирующих и непродуцирующих коллаген, выявил два участка Д Н К с повышенной чувствительностью к ДНКазе I и более существенный третий, расположенный на расстоянии 100—200 пар нуклеотидов от начала транскрипции αΐ-коллагенового гена. Третий участок выявлялся только в тех тканях, где обнаруживалась и мРНК αϊ-коллагена. Этот участок, связанный с транскрипцией коллагенового гена, отсутствовал в мутантном аллеле, в то время как чувствитель- ность к ДНКазе I двух других не менялась при наличии вставки ви- русного генома [66]. Было высказано предположение, что такие участ- ки хроматина, обладающие повышенной чувствительностью к ДНКазе I, могут являться местами связывания РНК-полимеразы и тем самым играть важную роль в процессе транскрипции генов [67]. Отсутствие транскрипционной активности в тканях эмбрионов мы- шей сублинии Μον13, гомозиготных по MuLV, было продемонстриро- вано с помощью метода Northern-блот-гибридизации с использованием в качестве зонда Д Н К локуса Movl3. При использовании в качестве зонда последовательностей первого экзона αϊ-коллагенового гена в реакции гибридизации с Р Н К эмбрионов дикого типа (wt/wt), гетеро- зигот ( M o v l 3 / w t ) и гомозигот ( M o v l 3 / M o v l 3 ) было обнаружено от- сутствие реакции гибридизации для гомозигот 12-го дня развития. У ге- терозигот уровень межмолекулярной гибридизации Р Н К / Д Н К составил только 50 % по отношению к дикому типу, указывая тем самым на за- висимость уровня транскрипции αϊ-коллагенового гена от дозы гена. Результаты вышеприведенных экспериментов свидетельствуют также о том, что провирусная вставка не просто терминирует транскрипцию, а запрещает ее уже в первом экзоне [65]. Влияние интеграции чужеродной Д Н К на жизнеспособность за- родышей мышей отметили Вагнер и др. [68]. Инъецировав в оплодо- творенные яйцеклетки мышей плазмиду, несущую ген гормона роста человека, авторы попытались получить гомозиготных по этому гену 64 ПИОПОЛНМЕРЫ II КЛЕТКА, 1986, т. 2, .М· 2 животных. Однако в постнатальном периоде в двух сублиниях гомо- зигот не выявили, отметив при этом снижение количества мышат в пометах. Как выяснилось, обе сублинии явились носителями рецессив- ной прекатальной летали, обусловленной встройкой чужеродной ДНК. Встройка чужеродной Д Н К оказывает влияние не только на жиз- неспособность животных, но может повлечь и изменение их фенотипа. Так, для мышей сублинии Movl3 показано характерное изменение цве- та волос между шестой и восьмой неделями постнатального развития, которое не наблюдается в этом возрасте у мышей линии С57£/, на ос- нове которой была получена сублиния Μου 13 [22, 25]. Изменение окраски мышей под влиянием вставки вирусных LTR было отмечено и для линии DBA/2 [69, 70]. Таким образом, наличие гено- и фенотипических изменений, обу- словленных интеграцией провирусной Д Н К в геном мышей и прояв- ляющихся на различных этапах эмбриогенеза и постнатального раз- вития, а также зависимость проявления экспрессии провирусов во вре- мени от места их локализации делают MuLV интересным и удобным объектом для изучения механизмов генной регуляции и выражения функции генов в онтогенезе животных. Идентификация хромосом с вирусными последовательностями позволяет использовать вирус в ка- честве маркера хромосом мышей [261. Исследование взаимодействия вируса Mo-MuLV с геномом развивающихся зародышей дало возмож- ность использовать его для переноса генов в системе in vivo [71]. Однако еще много вопросов, связанных с интеграцией провирус- ной Д Н К в геном мышей, остаются нерешенными: неясна причина и место первоначальной активации вируса, которые влекут за собой соматическую амплификацию и лейкоз. Это в свою очередь затрудняет дальнейшие исследования, связанные со спецификой экспрессии вводи- мых ретровирусов, их генов и сцепленных с ними чужеродных генов, ввиду возможной рекомбинации с родственными эндогенными виру- сами. Представляется более интересным использование чужеродных вирусов (или их НК), микроинъецируя их в зиготы. INTERACTION BETWEEN CELLULAR AND RETROVIRAL G E N O M E S IN O N T O G E N E S I S OF MICE L. M. Morozova, A. P. Solomko Inst i tute of Molecular Biology and Genetics, Academy of Sciences of the Ukrainian SSR, Kiev S u m m a r y Certain data concerning retrovirus genome introduction into murine genome as well as retrovirus activation in different tissues depending on the virus localization in chromoso- me and ontogenesis period of mice are discussed. 1. Microinjection of a rabbit β-globin gene into zygotes and its subsequent expression in adul t mice and their o f f s p r i n g / Т . E. Wagner , P. C. Hoppe, J. D. Jollick et a l . / / Proc. Nat. Acad. Sci USA.— 1981.—78, N 10.—P. 6376—6380. 2. Stewart Τ. Α., Wagner E. F., Mintz В. H. Human β-globin gene sequences injected into mouse eggs retained in adul ts and t ransmit ted to p r o g e n y / / S c i e n c e . — 1982.— 217, N 4564.—P. 1046—1048. 3. Replication and expression of thymidine kinase and human globin genes microinjected into mouse f ibroblasts / W. F. Anderson. L. Killos, L. Sandes-Haigh et al. / / Proc. Nat . Acad. Sci. USA.— 1980.—77, N 9 . — P . 5399—5403. 4. Regulation of metal lothionein-thymidine kinase fusion plasmid injected into mouse e g g s / R . L. Brinster, Η. Y. Chen, R. Warren et a l . / / N a t u r e . — 1982.—296, N 5852.— P. 39—41. 5. Introduction of ra t growth hormone gene into mouse fibroblasts , a retroviral DNA vector: expression and regulat ion / J. Doehmer, M. Bar inaga , W. Vale et al. / / Proc. Nat . Acad. Sci. USA.— 1982.—79, N 8 . — P . 2268—2272. 6. Dramatic g rowth of mice that develop f rom eggs microinjected with metallothionein- growth hormone fusion genes / R. D. Palmiter , R. L. Brinster, R. E. Hammer et al. / / Nature.— 1982.—300, N 5893.—P. 611—615. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 2 2 - 5-901 65 7. Introduction of a μ-immunoglobulin gene into mouse germ line: specific expression in lymphoid cells and synthesis of functional antibody / R. Grosschedl, D. Weaver, D. Baltimore, F. C o n s t a n t i n i / / C e l l . — 1984.—38, N 3 .—P. 647—658. 8. Expression of microinjected immunoglobulin gene in the spleen of transgenic mice / R. L. Brinster, K. A. Ritchie, R. E. Hammer et a l . / / N a t u r e . — 1983.—306, N 5941.— P. 332-336. 9. Expression of the chicken transferr in gene in transgenic mice / G. S. McKnight, R. E. Hammer, E. A. Kuenzel, R. L. B r i n s t e r / / C e l l . — 1983.—34, N 2 .—P. 335—341. 10. Tissue-specific expression of the rat pancreatic elastase I gene in transgenic mice / G. H. Swift, R. E. Hammer, R. J. MacDonald, R. L. Brinster / / Ibid.— 1984.—38, N 3.— P. 639—646. 11. Микроинъекция в зиготы мышей рекомбинантных ДНК, содержащих ген тимидин- киназы вируса герпеса и последовательности Д Н К ретровирусов / К. Г. Газарян, Л. В. Генинг, Н. С. Незнанов и д р . / / М о л е к у л я р . генетика, микробиология и виру- сология.— 1984.— № 10.—С. 22—28. 12. Construction and isolation of transmissible retrovirus containing the src gene of Har- vey murine sarcoma virus and thymidine kinase gene of Herpes complex virus type I / С. M. Wei, M. Gibson, P. G. Spear, Ε. M. Scholnick / / J. Virol.— 1981.—39, N 3.— P. 935—944. 13. Weis R. A. Retroviruses as host mendelian elements / / Folia biol.— 1983.—29, N 2 — P. 156—163. 14. Structure of Moloney murine leukemia viral DNA: nucleotide sequence of the 5 ' long terminal repeat and adjacent cellular sequences / С. V. Beveren, J. G. Goddard, A. Berns, I. M. Verma / / Proc. Nat. Acad. Sci. USA.— 1980.—77, N 6 .—P. 3307— 3311. 15. Shimotohno K., Mizutani S., Temin Η. M. Sequence of retrovirus provirus resembles that of bacterial t ransposable e l e m e n t s / / N a t u r e . — 1980.—285, N 5716.—P. 550— 554. 16. Analysis of avian leukosis virus DNA and RNA in bursal tumors: viral gene expres- sion is not required for maintenance of the tumor state / G. S. Payne, S. A. Courtneid- ge, L. B. Crittenden et a l . / / C e l l . — 1981.—23, N 2 .—P. 311—322. 17. Structure of viral DNA and RNA in mammalian cell infected with avian sarcoma vi- rus / N. Quintrell, S. Hughes, Η. E. Varmus, J. M. Bishop / / J . Мої. Biol.— 1980.— 143, N 4.— P. 363—393. 18. Varmus Η. E., Quintrell N.f Ortiz S. Retroviruses as mutagens: insertion and excision of a nont ransforming provirus alter expression of a resident t ransforming provirus / / Cell.— 1981.—25, N 1.—P. 23—26. 19. Jaenisch R. Germ line integration and mendelian transmission of the exogenous Mo- loney leukemia v i r u s / / P r o c . Nat. Acad. Sci. USA.— 1976.—73, N 4 .—P. 1260— 1264. 20. Germ line integration of Moloney leukemia virus: identification of the chromosomal integration s i t e / M . Breindl, J. Doehmer, K. Willecke et a l . / / I b i d . — 1979.—76, N 4 .—P. 1938—1942. 21. lahner D., Jaenisch R. Integrat ion Moloney leukemia virus into the germ line of mice: correlation between site of integration and virus a c t i v a t i o n / / N a t u r e . — 1980.—287, N 5781.—P. 456—458. 22. Chromosomal position and activation of retroviral genomes inserted into the germ li- ne of m i c e / R . Jaenisch, D. Jahner, P. Nobis et a l . / / C e l l . — 1981.—24, N 3.— P. 519—529. 23. Infectivity and structure of molecular clones obtained from two genetically transmit- ted Moloney leukemia proviral genomes / K. Harbers, A. Schnieke, H. Stuhlmann, R. Jaenisch / / N u c l . Acids Res.— 1982.—10, N 8 .—P. 2521—2537. 24. Cloning of two genetically transmitted Moloney leukemia proviral genomes: correla- tion between biological activity of the cloned DNA and viral genome activation in the a n i m a l / I. Chumakov, H. Stuhlmann, K. Harbers, R. J a e n i s c h / / J . Virol.— 1982.—42, N 3.— P. 1088—1098. 25. Jaenisch R. Retroviruses and embryogenesis microinjection of Moloney leukemia vi- rus into midgestation mouse e m b r y o s / / C e l l . — 1980.—19, N 1.—P. 181—188. 26. X-chromosome linked transmission and expression of retroviral genomes microinjected into mouse zygotes / C. Stewart, S. Harbers, D. Jahner, R. Jaenisch / / Science.— 1983.—221, N 4612.—P. 760—762. 27. Verma /. M. Genome organization of RNA tumor viruses. I. In vitro synthesisof full genome-length single-stranded and double-stranded viral DNA transcripts / / J. Virol.— 1978.—26, N 3 .—P. 615—629. 28. In vitro synthesis of a 9 kbp terminally redundant DNA carrying the infectivity of Moloney leukemia virus / E. Gilboa, S. Goff, A. Shilds et a l . / / C e l l . — 1979.—16, N 3.— P. 863—874. 29. Characterization of endogenous and exogenous mouse mammary tumor virus provi- ral DNA with site-specific molecular clones / B. Groner, E. Buetti, H. Diggelmann, N. E. Hynes / / J . Virol.— 1980.—36, N 3 .—P. 734—745. 30. The integration site of endogenous and exogenous Moloney murine leukemia v i r u s / H. Van der Putten, E. Terwindt, A. Berns, R. J a e n i s c h / / C e l l . — 1979.—18, N 1.— P. 109—116. 31. Bacheler L. H., Fan H. Multiple integration sites for Moloney murine leukemia virus in productively infected mouse f i b r o b l a s t s / / J . Virol.— 1979.—30, N 3 .—P. 657— 667. 66 ПИОПОЛНМЕРЫ II КЛЕТКА, 1986, т. 2, .М· 2 32. A replication defective var ian t of Moloney murine leukemia virus / A. Rein, В. I. Gerwin, R. H. Bassin et a l . / / I b i d . — 1978.—25, N 1 .—P. 146—156. 33. High frequency of aberrant expression of Moloney leukemia virus in clonal isolates / A. Schields, O. Witte, E. Rothenberg, D. Balt imore / / C e l l . — 1978.—14, N 3 . — P . 601 — 609. 34. Endogenous Moloney leukemia virus in nonviremic Μου substra in of mice carries defects in proviral genome / A. Schnieke, H. Stuhlmann, K. Harbers et a l . / / J . Vi- rol.— 1983.—45, N 2 . — P . 505—513. 35. DNA methylat ion and gene expression: endogenous retroviral genome becomes in- fections af ter molecular cloning / K. Harbers , A. Schnieke, H. S tuh lmann et al. / / Proc. Nat. Acad. Sci. USA.— 1981.—78, N 12.—P. 7609—7613. 36. Stuhlmann H., Jahner DJaenisch R. Infectivity and methylat ion of retroviral ge- nomes is correlated with expression in a n i m a l / / C e l l . — 1981.—26, N 2.— P. 222—232. 37. DNA methylat ion and viral gene expression in adenovirus- t ransformed and infected cells / L. Vardimon, R. Neumann, I. Kuhlmann et a l . / / N u c l . Acids Res.— 1980.—8, N 11.—P. 2461—2473. 38. Groudine M., Eisenmann R., Weintraub H. Chromatin s t ructure of endogenes retrovi- ral genes and activation by an inhibitor of DNA m e t h y l a t i o n / / N a t u r e . — 1981.—292, N 5821.—P. 311—317. 39. Cohen / . C. Methylat ion of milk-borne and genetically t ransmit ted mouse mammary tumor virus proviral DNA / / C e l l . — 1980.—19, N 3 . — P . 653—662. 40. Doerfler W. DNA methylat ion — a regula tory s ignal in eukaryotic gene expression / / J. Gen. Virol.— 1981.—57, N 1 .—P. 1—20. 41. Felsenfeld G., McChee / . Methylat ion and gene c o n t r o l / / N a t u r e . — 1982—296, N 5858.— P. 602—603. 42. Variations in DNA methylat ion dur ing mouse cell different iat ion in vivo and in vitro / A. Rasin, C. Webb, M. Szyf et a l . / / P r o c . Nat . Acad. Sci. USA.— 1984.—81, N 8.— P. 2275—2279. 43. Naven-Many Т., Ceder H. Active gene sequences are undermethylated / / Ibid.— 1981.—78, N 8 .—P. 4246—4250. 44. Jaenisch R., Schnieke Α., Harbers K. Treatment of mice with 5-azacytidine efficiently activates silent retroviral genomes in different t issues / / Ibid.— 1985.—82, N 5.— P. 1451 — 1455. 45. De novo methylat ion and expression of retroviral genomes dur ing mouse embryoge- nesis / D . Jahner , H. S tuhlmann, C. L. S tewar t et a l . / / N a t u r e . — 1982.—298, N 5875.— P. 623—628. 46. Palmiter R. D., Chen Η. Y., Brinster R. L. Different ial regulat ion of metallothionein- thymidine-kinase fusion genes in t ransgenic mice and their o f f s p r i n g / / C e l l . — 1982.— 29, N 3 . — P . 701—710. 47. De novo methylation, expression and infectivity of retroviral genomes introduced into early mouse embryonic cells / C. L. Stewart , D. Jahner , H. S tuhlmann, R. Jaenisch / / Hereditas.— 1983.—98, N 1 .—P. 156. 48. Rasin Α., Szyf M. DNA methylat ion pat terns. Format ion and funct ion / / Biochim et biophys. acta.— 1984.—782, N 9 . — P . 331—342. 49. Mosche У. Regulat ion of eukaryotic gene expression by t ransac t iva t ing proteins and cis act ing DNA e l e m e n t s . / / B i o l . Cell.— 1984—50, N 3 . — P . 203—216. 50. Unusual methylat ion pat tern of a - 2 ( l ) collagen gene / С. McKoon, H. Ohkudo, I. Pa - stan, B. de Crombrugghe / / Cell.— 1982.—20, N 1 .—P. 203—210. 51. Mather E. L., Perry R. P. Methylat ion s ta tus and DNAse I sensitivity of immunoglo- bulin genes: changes associated with r e a r r a n g e m e n t / / P r o c . Nat . Acad. Sci. USA.—• 1983.—80, N 16.—P. 4689—4693. 52. Jahner D., Stuhlmann H., Jaenisch R. Conformat ion of free and of integrated Molo- ney leukemia proviral DNA in preleukemic and leukemic BALB / Mo m i c e / / V i r o l o - gy.—1980.—101, N 1 .—P. 111—123. 53. Jaenisch R. Moloney leukemia virus gene expression and gene amplification in pre- leukemic and leukemic BALB / Mo m i c e / / I b i d . — 1979.—93, N 1 .—P. 80—90. 54. Amplification and hormone-regulated expression of a mouse m a m m a r y tumor virus- Eco gpt fusion plasmid in mouse 3T6 c e l l s / A . B. Chapmann, M. A. Costello, F. Lee, G. M. Ringold / / Мої. and Cell. Biol.— 1983.—3, N 8 . — P . 1421—1429. 55. Nobis P., Jaenisch R. Pass ive immunotherapy prevents expression of endogenous Mo- loney virus and amplification of proviral DNA in BALB / Mo m i c e / / P r o c . Nat . Acad Sci. USA.— 1980.—77, N 6 . — P . 3677—3681. 56. Harbers K., Jahner DJaenisch R. Microinjection of cloned retroviral genomes into mouse zygotes: in tegrat ion and expression in the a n i m a l / / N a t u r e . — 1981.—293, N 5833.—P. 540—542. 57. Differentiation and virus expression in BALB / Mo mice: endogenous Moloney leuke- mia virus is not activated in hematopoietic c e l l / W . Fiedler, P. Nobis, D. Jahner , R. Jaenisch / / P r o c . Nat . Acad. Sci. USA.— 1982.—79, N 6 . — P . 1874—1878. 58. Hayashi S., Kondoh H., Okada T. S. β-crystall in gene expression: the requirement of upstream r e g i o n / / D e v e l o p . Growth and Differ.— 1984.—26, N 4 . — P . 961. 59. Tissue-specific expression of β-crystall in gene as demonstra ted by the in t ranuclear injection of cloned genes / T. S. Okada, H. Kondoh, S. Hayashi , K. Y a s u d a / / J . Embri- ol. and Exp. Morphol.— 1984.—82, Suppl.— P. 138. 60. Chromatin conformat ion of integrated Moloney leukemia virus DNA sequences in t issues of BALB / Mo mice and in virus-infected cell l i n e s / М . Breindl, L. Bacheler, H. Fan, R. J a e n i s c h / / J . Virol.— 1980.—34, N 2 . — P . 373—382. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА, 1986, т. 2, № 2 2 - 5-901 67 61. Moloney murine leukemia virus-induced tumor: recombinant proviruses in active chro- matin regions / H. Van der Putten, W. Quint, I. M. Verma, A. Berns / / Nucl. Acids Res.— 1982.—10, N 2 .—P. 577—592. 62. DNAse I sensitivity of endogenous and exogenous proviral genome copies in M- Afi/LV-induced tumors of Mou-3 m i c e / M . Breindl, U. Nath, D. Jahner, R. Jae- nisch / / V i r o l o g y . - 1982.—119, Ν l . - P . 204-208 . 63. Schnieke Α., Harbers КJaenisch R. Embryonic lethal mutation in mice induced by retrovirus insertion into the a 1(1) collagen g e n e / / N a t u r e . — 1983.—304, N 5924.— P. 315—320. 64. Germ line integration of Moloney murine leukemia virus at the Movl3 locus leads to recessive lethal mutation and early embryonic death / R. Jaenisch, K. Harbers, A. Schnieke et al. / / Cell.— 1983.—32, N 1.—P. 209—215. 65. Insertion of retrovirus into first intron of a 1(1) collagen gene leads to embryonic lethal mutation in mice / K. Harbers, M. Kuehn, H. Delius, R. Jaenisch / / Proc. Nat. Acad. Sci. USA.— 1984.—81, N 5 .—P. 1504—1508. 66. Breindl M., Harber КJaenisch R. Retro virus-induced lethal mutation in collagen 1 ge- ne of mice is associated with an altered chromatin structure / / Cell.— 1984.—38r N 1.—P. 9—16. 67. Wasylyk В., Chambon P. Potentiator effect of the SV40 72 bp repeat on initiation of transcription from heterologous promoter elements / / Cold Spring Harbor Symp. Qu- ant. Biol.— 1982.—47.—P. 921—934. 68. Prenatal lethalities in mice homozygous for human growth hormone gene sequences integrated in the germ line / E. F. Wagner, L. Covarrubias, T. A. Stewart, B. Mintz / / Cell.— 1983.—35, N 3 .—P. 647—655. 69. Copeland N. G., Hutchison К. W., Jenkins N. A. Excision of the DBA ecotropic provi- rus in dilute coat-colar revertants of mice occurs by homologous recombination invol- ving the viral LTR / / Ibid.— 1983.—33, N 2 .—P. 379—387. 70. Copeland N. G., Jenkins Ν. Α., Lee В. K. Association of the lethal yellow (Av) coat color mutat ion with on ecotropic murine leukemia virus genome / / Proc. Nat. Acad. Sci. USA.— 1983.—80, N 1.—P. 247—249. 71. Introduction of selectable gene into different animal tissue by retrovirus recombinant v e c t o r / Н . Stuhlmann, R. Cone, R. C. Mulligan, R. J a e n i s c h / / I b i d . — 1984.—81, N 22.—P. 7151—7155. Ин-т молекуляр. биологии и генетики АН УССР, Киев Получено 24.07.85 К сведению читателей В июне 1986 г. выйдет из печати журнал всесоюзного химического общества им. Д. И. Менделеева, № 3, посвященный молекулярной природе рака. В последние годы произошло коренное изменение наших знаний о молекулярной природе рака, связанное с развитием новейших методов биологии и химии (генети- ческая и клеточная инженерия, онковирусология, расшифровка структур нуклеиновых кислот и белков, методы введения генетического материала в клетки и т. д.). В обзорных статьях ведущих советских и иностранных ученых в номере представлена современное состояние таких ключевых вопросов физико-химической биологии и медицины, как роль онкогенов, протоонкогенов, онкобелков, РНК- и Д Н К - с о д е р ж а - щих опухолеродных вирусов, полипептидных факторов роста в дифференцировке, делении, росте и трансформации клеток. Обсуждаются проблемы химического кан- церогенеза, разработки новых подходов к химиотерапии опухолей, рассмотрены вопросы диагностики и лечения опухолей иммунологическими методами, включая получение и применение моноклональных антител. Журнал в продажу не поступает и распространяется только по подписке. П о письму, подписанному руководителем и бухгалтером, редакция может выслать счет для предварительной оплаты нужного Вам количества экземпляров. Цена номера — 2 руб. плюс стоимость почтовых р а с х о д о в — 4 5 коп. Просим прислать такое письмо не позднее 15 марта 1986 г. Индивидуальная подписка принимается всеми отделениями связи без ограничения на указанный номер до 1 апреля 1986 г. Индекс издания 70285. М о ж н о подписаться также и в редакции по адресу: 101000, Москва, Кривоколенный пер., 12. 68 ПИОПОЛНМЕРЫ II КЛЕТКА, 1986, т. 2, .М· 2

Схожі ресурси