Изучение первичной структуры бактериальной формиатдегидрогеназы. Определение N-концевой аминокислотной последовательности и выделение цистеинсодержащих пептидов

• Опубліковано в: : Биополимеры и клетка
• Дата: 1986
• Автори: Устинникова, Т.Б., Попов, В.О., Егоров, А.М., Егоров, Ц.А.
• Формат: Стаття
• Мова: Russian
• Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1986
• Теми: Структура и функции биополимеров
• Онлайн доступ: https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152741
• Назва журналу: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Цитувати: Изучение первичной структуры бактериальной формиатдегидрогеназы. Определение N-концевой аминокислотной последовательности и выделение цистеинсодержащих пептидов / Т.Б. Устинникова, В.О. Попов, А.М. Егоров, Ц.А. Егоров // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 3. — С. 129-135, 159. — Бібліогр.: 10 назв. — рос.

Осуществлена иммобилизация НАД-зависимой формиатдегидрогеназы из метилотрофных бактерий Pseudomonas sp101 на тиоловых носителях. Выделены и охарактеризованы цистеинсодержащие пептиды. Проведена локализация остатка цистеина, ответственного за проявление каталитической активности фермента. Определена N-концевая аминокислотная последовательность формиатдегидрогеназы. Здійснено іммобілізацію НАД-залежної форміатдегідрогенази з метилотрофних бактерій Pseudomonas sp101 на тіолових носіях. Виділено та охарактеризовано цистеїнвмісні пептиди. Проведено локалізацію залишка цистеїну, відповідального за прояв каталітичної активності ферменту. Визначено N-кінцеву амінокислотну послідовність форміатдегідрогенази. NAD-dependent formate dehydrogenase from methylotrophic bacteria of Pseudotnonas sp101 was immobilized on thiopropyl-Sepharose 6B and CPG/Thiol activated by 2,2'-di-pyridyl disulphide via the thiol-disulphide exchange reaction. A procedure for the tryptic digestion of the immobilized enzyme was optimized. Cysteine-containing tryptic peptides were isolated and partially characterized. The peptide which contained the essential cysteine residue responsible for the catalytic enzyme activity was located. A method for the determination of the N-terminal amino acids after fragmentation of the immobilized protein was developed. The N-terminal amino acid sequence of the formate dehydrogenase immobilized via its cysteine residues on a controlled porous glass was determined.