Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика
Проведен ограниченный протеолиз лейцил-тРНК-синтетазы (ЛРС) в присутствии различных конформеров тРНК. Активные конформеры тРНКa способны защищать ЛРС от действия трипсина, в то время как в присутствии неактивных конформеров тРНКi и защитного эффекта не наблюдается. В результате ингибиторного анализа...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Дата: | 1986 |
| Автори: | , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1986
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152758 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика / Б.С.Негруцкий, А.В. Ельская // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 3. — С. 149-152. — Бібліогр.: 7 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-152758 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Негруцкий, Б.С. Ельская, А.В. 2019-06-12T17:45:21Z 2019-06-12T17:45:21Z 1986 Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика / Б.С.Негруцкий, А.В. Ельская // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 3. — С. 149-152. — Бібліогр.: 7 назв. — рос. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.0001AC https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152758 577.217.337 Проведен ограниченный протеолиз лейцил-тРНК-синтетазы (ЛРС) в присутствии различных конформеров тРНК. Активные конформеры тРНКa способны защищать ЛРС от действия трипсина, в то время как в присутствии неактивных конформеров тРНКi и защитного эффекта не наблюдается. В результате ингибиторного анализа установлено, что неактивные конформеры способны ингибировать реакцию аминоацилирования тРНКa+i. Ренатурация тРНКa+i приводит к исчезновению эффекта. Настоящие результаты, как и полученные ранее данные по термоинактивации ЛРС в присутствии тРНКа и тРНКa+1, свидетельствуют о различиях в свойствах их комплексов с ЛРС. Проведено обмежений протеоліз лейцил-тРНК-синтетази (АРС) за присутності різних конформерів тРНК. Активні конформери тРНКа здатні захищати ЛРС від дії трипсину, тоді як за присутності неактивних конформеров тРНКi ᶦ захисного ефекту не спостерігається. В результаті інгібіторного аналізу встановлено, що неактивні конформери здатні пригнічувати реакцію аміноацилювання тРНКa+i Ренатурація тРНКa+i призводить до зникнення ефекту. Справжні результати, як і отримані раніше дані по термоінактивації ЛРС за присутності тРНКа і тРНКa+1, свідчать про відмінності у властивостях їхніх комплексів з ЛРС. The partial proteolysis of leucyl-tRNA synthetase (LRS) was carried out in the presence of different tRNA conformers. Active tRNA conformers (tRNAa) were found to protect the LRS against proteolysis, while inactive conformers (tRNAi) did not show the protecting effect. tRNAa+i inhibited the rate of aminoacylation as evidenced by the inhibitory analysis, but tRNAa+i renaturation eliminated this effect. These results as well as recent data on LRS thermoinactivation demonstrate the difference between tRNAa-LRS and tRNAтРНКa+i·LRS complexes ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Краткие сообщения Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика Взаємодія біологічно неактивних конформерів тРНК з лейцил-тРНК-синтетазою з печінки кроля Interaction of biologically inactive tRNA conformers with leucyl-tRNA synthetase from rabbit liver Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика |
| spellingShingle |
Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика Негруцкий, Б.С. Ельская, А.В. Краткие сообщения |
| title_short |
Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика |
| title_full |
Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика |
| title_fullStr |
Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика |
| title_full_unstemmed |
Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика |
| title_sort |
взаимодействие биологически неактивных конформеров трнк с лейцил-трнк-синтетазой из печени кролика |
| author |
Негруцкий, Б.С. Ельская, А.В. |
| author_facet |
Негруцкий, Б.С. Ельская, А.В. |
| topic |
Краткие сообщения |
| topic_facet |
Краткие сообщения |
| publishDate |
1986 |
| language |
Russian |
| container_title |
Биополимеры и клетка |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Взаємодія біологічно неактивних конформерів тРНК з лейцил-тРНК-синтетазою з печінки кроля Interaction of biologically inactive tRNA conformers with leucyl-tRNA synthetase from rabbit liver |
| description |
Проведен ограниченный протеолиз лейцил-тРНК-синтетазы (ЛРС) в присутствии различных конформеров тРНК. Активные конформеры тРНКa способны защищать ЛРС от действия трипсина, в то время как в присутствии неактивных конформеров тРНКi и защитного эффекта не наблюдается. В результате ингибиторного анализа установлено, что неактивные конформеры способны ингибировать реакцию аминоацилирования тРНКa+i. Ренатурация тРНКa+i приводит к исчезновению эффекта. Настоящие результаты, как и полученные ранее данные по термоинактивации ЛРС в присутствии тРНКа и тРНКa+1, свидетельствуют о различиях в свойствах их комплексов с ЛРС.
Проведено обмежений протеоліз лейцил-тРНК-синтетази (АРС) за присутності різних конформерів тРНК. Активні конформери тРНКа здатні захищати ЛРС від дії трипсину, тоді як за присутності неактивних конформеров тРНКi ᶦ захисного ефекту не спостерігається. В результаті інгібіторного аналізу встановлено, що неактивні конформери здатні пригнічувати реакцію аміноацилювання тРНКa+i Ренатурація тРНКa+i призводить до зникнення ефекту. Справжні результати, як і отримані раніше дані по термоінактивації ЛРС за присутності тРНКа і тРНКa+1, свідчать про відмінності у властивостях їхніх комплексів з ЛРС.
The partial proteolysis of leucyl-tRNA synthetase (LRS) was carried out in the presence of different tRNA conformers. Active tRNA conformers (tRNAa) were found to protect the LRS against proteolysis, while inactive conformers (tRNAi) did not show the protecting effect. tRNAa+i inhibited the rate of aminoacylation as evidenced by the inhibitory analysis, but tRNAa+i renaturation eliminated this effect. These results as well as recent data on LRS thermoinactivation demonstrate the difference between tRNAa-LRS and tRNAтРНКa+i·LRS complexes
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152758 |
| citation_txt |
Взаимодействие биологически неактивных конформеров тРНК с лейцил-тРНК-синтетазой из печени кролика / Б.С.Негруцкий, А.В. Ельская // Биополимеры и клетка. — 1986. — Т. 2, № 3. — С. 149-152. — Бібліогр.: 7 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT negruckiibs vzaimodeistviebiologičeskineaktivnyhkonformerovtrnksleiciltrnksintetazoiizpečenikrolika AT elʹskaâav vzaimodeistviebiologičeskineaktivnyhkonformerovtrnksleiciltrnksintetazoiizpečenikrolika AT negruckiibs vzaêmodíâbíologíčnoneaktivnihkonformerívtrnkzleiciltrnksintetazoûzpečínkikrolâ AT elʹskaâav vzaêmodíâbíologíčnoneaktivnihkonformerívtrnkzleiciltrnksintetazoûzpečínkikrolâ AT negruckiibs interactionofbiologicallyinactivetrnaconformerswithleucyltrnasynthetasefromrabbitliver AT elʹskaâav interactionofbiologicallyinactivetrnaconformerswithleucyltrnasynthetasefromrabbitliver |
| first_indexed |
2025-11-26T10:13:43Z |
| last_indexed |
2025-11-26T10:13:43Z |
| _version_ |
1850618595582672896 |
| fulltext |
THE THIRD SITE OF THE 70S RIBOSOME
FOR AMINOACYL-tRNA ANALOGUE BINDING
D. B. Dorokhov„ S. B. Bourd, Yu. P. Semenkov
Department of Plant Genetics, Academy of Sciences
of the Moldavian SSR, Kishinev;
B. P. Konstantinov Institute of Nuclear Physics,
Academy of Sciences of the USSR, Gatchina
S u m m a r y
The interaction of the stable aminoacyl-tRNA analogue, tRNAP h e—С—C—A(3'NH)-Phe,
with 70S ribosome is studied. It is shown that in the presence of poly(U) a ribosome
can bind three molecules of tRNAP h e—С—C—A(3'NH) -Phe. The «additional» site for
binding aminoacyl-tRNA analogue was shown to be similar to the ribosomal Ε-site for
deacylate tRNA.
1. Fraser Т. H., Rich A. Synthesis and aminoacylation of З '-deoxytransfer RNA and its
activity in ribosomal protein synthesis / / Proc. Nat. Acad. Sci. USA —1973 —70,
N 9 .—P. 2671—2675.
2. Sprinzl M., Wagner T. Role of 2', 3' isomerization of aminoacyl-tRNA during riboso-
mal protein s y n t h e s i s / / T r a n s f e r RNA: structure, properties and recognition.— New
York: Cold Spring Harbor Laboratory, 1979.—P. 12.
3. Kirillov S. V., Makhno V. /., Semenkov Yu. P. Mechanism of codon-anticodon inte-
raction in ribosomes. Direct functional evidence that isolated 30S subunits contain
two codon-specific binding sites for t ransfer R N A / / N u c l . Acids Res.—1980.—8,
N 1.—P. 183—196.
4. Comparative study of the interaction of polyuridylic acid with 30S subunits and 70S
ribosomes of Escherichia coli/V. I. Katunin, Yu. P. Semenkov, V. I. Makhno,
S. V. Kirillov / / Ibid.—1980.—8, N 2 .—P. 403—421.
5. Sprinzl M., Sternbach H. Enzymatic modification of the С—С—A t e r m i n u s / / M e t h .
Enzymol.—1979.—59.—P. 182—190.
6. Rappaport H., Lapidot Y. The chemical preparation of acetylaminoacyl-tRNA / /
Ibid.—1974.—29 E.—P. 685—693.
7. Пеиіин Η. Η., Кириллов С. В. Природа гетерогенности 30S рибосомных субчастиц
in vitro. II. Два типа инактивации 30S субчастиц рибосом Escherichia coli // Мо-
лекуляр. биология.—1979.—13, № 4.—С. 752—759.
8. Rheinberger Η. J., Sternbach Η., Nierhaus Κ. Η. Three tRNA binding sites on Esche-
richia coli ribosomes / / Proc. Nat. Acad. Sci. USA.—1981.—78, N 9 .—P. 5310—
5314.
9. Grajevskaja R. Α., Ivanov Yu. V., Saminsky Ε. M. 70S ribosomes of Escherichia coli
have an additional site for deacylated tRNA binding / / Eur. J. Biochem.—1982.—
128, N 1.—P. 47—52.
10. Kirillov S. V., Makarov Ε. M., Semenkov Yu. P. Quantitative study of interaction of
deacylated tRNA with Escherichia coli r i b o s o m e s / / F E B S Lett.—1983—157, N 1 —
P. 91—94.
11. Binding of complementary oligonucleotides to aminoacylated tRNA P h e f rom y e a s t /
O. Pongs, P. Wrede, V. A. Erdmann, M. Sprinzl / / Biochem. and Biophys. Res. Com-
muns.—1976.—71, N 4 .—P. 1025—1033.
Отдел генетики растений АН МССР, Кишинев Получено 9.04.85
Ленинград, ин-т ядерной физики
им. Б. П. Константинова АН СССР
УДК 577.217.337
ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ
БИОЛОГИЧЕСКИ НЕАКТИВНЫХ КОНФОРМЕРОВ тРНК
С ЛЕЙЦИЛ-тРНК-СИНТЕТАЗОЙ ИЗ ПЕЧЕНИ КРОЛИКА
Б. С. Негруцкий, А. В. Ельская
Появление биологически неактивных форм тРНК наблюдается при некоторых состоя-
ниях организма животных, сопровождающихся изменением биосинтеза белков [1—3].
Ранее нами показано, что значения термодинамических параметров конформационно-
го перехода при ренатурации in vitro сходны для неактивных конформеров тРНК, вы-
Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА, 1986. т. 2. № 3 149
деленных при различных состояниях организма, а величины энтальпии активации,
составляющие около 30 ккал/моль, свидетельствуют о заметном изменении пространст-
венной структуры т Р Н К при ренатурации [4]. Особый интерес вызывают принципи-
альная возможность и особенности взаимодействия биологически неактивных
конформеров т Р Н К с аминоацил-тРНК-синтетазами. При изучении термоинактивацин
лейцил-тРНК-синтетазы ( Л Р С ) из печени кроликов было показано, что неактивные
конформеры т Р Н К способны взаимодействовать с Л Р С , причем термостабильность фер-
мента в комплексе с различными конформерами т Р Н К значительно уменьшалась в ряду
т Р Н К а * · Л Р С > Л Р С > > т Р 1 1 К а + н * * · Л Р С [5]. Д л я объяснения обнаруженного явления
Рис. 1. Влияние т Р Н К а (1) и т Р Н К а + п (2) на трипсинолиз Л Р С из печени кроликов.
З а 100 % принято количество нерасщепленного белка, инкубировавшегося без трипсина
и т Р Н К . Превышение 100 %-ного уровня при максимальной концентрации т Р Н К а , воз-
можно, является следствием защиты белка этой т Р Н К от действия эндогенных протеаз.
Усреднение по 4—6 опытам.
Fig. 1. Inf luence of tRNA a (1) and tRNAa+* (2) ( tRNA a +i — a mixture of biologically
active and inactive tRNA conformers) on the part ial proteolysis of the leucyl-tRNA
synthetase . Quant i ty of unspl i t t ing protein incubated without trypsin and tRNA is taken
for 100 %. The exceeding of the 100 % level in the case of maximum concentrat ion of
tRNA a may be a consequence of tRNA a protection of LRS agains t endogenous proteoly-
sis. The data result f rom 4-6 experiments.
Рис. 2. Влияние т Р Н К а ( 1 ) и т Р Н К а + н (2) на активность Л Р С . Д о внесения дополни-
тельных количеств т Р Н К все пробы содержали избыток т Р Н К а — 20 мкг. Активность
фермента в реакции аминоацилирования при «насыщающей» концентрации т Р Н К а при-
нята за 100 %.
Fig. 2. Inf luence of tRNA a (1) and tRNA a +i (2) on the LRS activity. Before the addit ion
of tRNA all probes contained the excess of tRNA a — 20 μg. The enzyme activity at the
s a tu r a t i ng tRNA a concentrat ion is taken for 100 %.
нами было высказано два предположения. Во-первых, наблюдаемый эффект может
быть следствием более «рыхлой» пространственной структуры фермента в комплексе с
неактивными конформерами т Р Н К . Во-вторых, неактивные конформеры т Р Н К , обра-
зуя с Л Р С стабильный, но непродуктивный комплекс, могут снижать концентрацию
функционирующего фермента, вызывая не связанную с термоинактивацией потерю фер-
ментативной активности. В настоящей работе приведены результаты исследований по
выяснению справедливости высказанных предположений.
Препараты т Р Н К получали из печени голодавших 10—12 сут и контрольных кро-
ликов по стандартной методике [4]. Очищенный препарат Л Р С выделяли, как опи-
сано ранее [6], за исключением того, что элюцию фермента с ДЭАЭ-целлюлозы про-
водили в нелинейном градиенте 0,05—0,4 Μ NH4C1. Д л я дальнейшей очистки Л Р С
хроматографировали на рРНК-сефарозе, оксиапатите, рН 6,5, сорбенте MonoQ и окси-
апатите, рН 8,0. Чистота полученного препарата Л Р С по данным электрофореза соста-
вила свыше 80 %. Ренатурацию биологически неактивных конформеров т Р Н К и опре-
деление активности Л Р С проводили, как описано в [5]. Трипсинолиз Л Р С проводили
в 0,025 Μ Na-какодилатном буфере, рН 7,0, в течение 10 мин при весовом соотноше-
нии трипсин : Л Р С , равном 1 : 1 0 . Л Р С и т Р Н К преинкубировяли в отсутствие трипсина
4 мин для образования комплексов. Пробу, содержавшую все компоненты реакцион-
ной смеси, кроме трипсина, подвергали идентичным процедурам, она служила контро-
лем на эндогенную протеазную активность препаратов т Р Н К и Л Р С . Электрофорез
продуктов протеолиза проводили по [7]. При этом мы не обнаружили значительных
* т Р Н К 3 — т Р Н К , содержащая только активные конформеры; ** т Р Н К а + н —
т Р Н К , содержащая смесь биологически активных и неактивных конформеров.
150 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА, 1986. т. 2. № 3 150
по размеру триптичееких фрагментов ЛРС, что, вероятней всего, связано с присутстви-
ем в препарате трипсина фирмы «Спофа» (ЧССР) дополнительных протеазных актив-
ностей, приводящих к более полному гидролизу фермента. О ходе протеолиза в дан-
ном случае судили по степени сохранности исходной белковой субъединицы. Гели фо-
тографировали и денситометрировали на аппарате МК-2 «Джойс». Результаты обраба-
тывали статистически с использованием t-критерия Стьюдента в доверительном ин-
тервале 0,05.
Результаты изучения влияния различных концентраций т Р Н К на ограниченный
протеолиз Л Р С представлены на рис. 1. Видно, что увеличение концентрации тРНК 3
приводило к защите субъединицы фермента от расщепления. В то же время т Р Н К а + н
не оказывала на Л Р С защитного действия, а при увеличении ее концентрации наблю-
далась тенденция к ускорению протеолиза. Инкубация Л Р С с т Р Н К а + н в отсутствие
трипсина не вызывала расщепления субъединицы фермента, что свидетельствует об
отсутствии протеазной активности в препарате т Р Н К а + н . Результаты настоящих ис-
следований хорошо коррелируют с данными о влиянии т Р Н К а + н и тРНК 3 на термо-
инактивацию Л Р С [5] и подтверждают то, что в условиях, близких по ионному соста-
ву, величине рН и соотношению т Р Н К Л е й : Л Р С к условиям термоинактивации, про-
странственная структура Л Р С в присутствии т Р Н К а + н и тРНК 3 заметно отличается,
причем, судя по большей доступности действию протеаз, она более «разрыхлена» в
комплексе с биологически неактивными конформерами. Поскольку в препарате
т Р Н К а + н содержатся приблизительно равные количества активных и неактивных кон-
формеров [4], отсутствие «видимого» защитного действия активных конформеров при
протеолизе и термоинактивации фермента в присутствии т Р Н К а + н может свидетельство-
вать о меньшем воздействии на Л Р С активных конформеров т Р Н К по сравнению с
неактивными.
Для проверки второго предположения (о способности неактивных конформеров
тРНК путем образования прочного комплекса с Л Р С вызывать не связанную с термо-
ппактивацией потерю ферментативной активности [5]) было изучено влияние т Р Н К а + п
на скорость реакции аминоацилирования Л Р С нативной т Р Н К Л е й (рис. 2). Видно,
что добавление возрастающих количеств т Р Н К а + п приводит к существенному инги-
бированию активности ЛРС, в то время как внесение в систему таких же количеств
тРНК а не оказывает влияния. Следует подчеркнуть, что ренатурация биологически не-
активных конформеров, т. с. перевод т Р Н К а + н в тРНК а , приводила к исчезновению
ингибиторного эффекта. Итак, т Р Н К а + н , очевидно, за счет образования прочного, но
непродуктивного комплекса с ферментом способна ингибировать реакцию аминоацили-
рования нативной т Р Н К Л е й .
Таким образом, получены новые экспериментальные доказательства в пользу вы-
сказанного ранее предположения о том, что биологически неактивные конформеры
тРНК образуют с Л Р С комплексы, отличающиеся по своим свойствам от комплексов
фермента с активными конформерами тРНК.
INTERACTION OF BIOLOGICALLY INACTIVE tRNA CONFORMERS
WITH LEUCYL-tRNA SYNTHETASE FROM RABBIT LIVER
B. S. Negrutsky, Α. V. El'skaya
Institute of Molecular Biology and Genetics,
Academy of Sciences of the Ukrainian SSR, Kiev
S u m m a r y
The partial proteolysis of leucyl-tRNA synthetase (LRS) was carried out in the pre-
sence of different tRNA conformers. Active tRNA conformers (tRNA3) were found to
protect the LRS against proteolysis, while inactive conformers (tRNA*) did not show
the protecting effect. tRNA a + i inhibited the rate of aminoacylation as evidenced by the
inhibitory analysis, but tRNA a + i renaturation eliminated this effect.
These results as well as recent data on LRS thermoinactivation demonstrate the
difference between tRNA 3 -LRS and tRNA a + i -LRS complexes.
1. Биологически неактивные транспортные РНК печени животных / Г. X. Мацука,
Т. П. Бабий, Э. Б. Сквирская и др . / /Биохимия.—1973—38, λ^ 6.—С. 1221 — 1227.
Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА, 1986. т. 2. № 3 151
2. Демидов С. В., Коваленко М. И., Ельская А. В. Изучение биологической активности
тРНК печени кроликов разного возраста / /Биол . науки.—1980.— № 12.— С. 18—24.
3. Изучение молекулярных основ нарушения биосинтеза белка при экспериментальном
инфаркте миокарда и аутолизе миокарда / М. И. Коваленко, Г. А. Родовичюс,
А. И. Тамулявичюс и др . / /Молекуляр . биология.—1984.— вып. 37.— С. 18—21.
4. Негруцкий Б. С., Солдаткин К. А. Термодинамическая оценка конформационных пе-
реходов при ренатурации биологически неактивных конформеров тРНК / / Там же.—
С. 26—28.
5. Негруцкий Б. С., Ельская А. В. Особенности тепловой инактивации лейцил-тРНК-
синтетазы в присутствии различных конформеров тРНК / / Молекуляр. биология.—•
1984.—18, № 5.—С. 1297—1300.
6. Гудзера О. И., Ельская А. В. Метод выделения лейцил-тРНК-синтетазы из молочной
железы и определение ее молекулярного в е с а / / М е т о д ы молекулярной биологии.—
Киев : Наук, думка, 1979.—С. 127—133.
7. Weber Кν Osborn Μ. The reliability of molecular weight determination by dodecyl
sulfate-polyacrylamide gel e lec t rophores is / / J . Biol. Chem.— 1969.—244, N 16.—
P. 4406—4413.
Ин-т молекуляр. биологии и генетики АН УССР, Получено 11.05.85
Клев
УДК 547.963.3
ВЛИЯНИЕ БИОМАССЫ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТОК
POLYSCIAS FILICIFOLIA B A I L E Y НА АКТИВНОСТЬ тРНК
И АМИНОАЦИЛ-тРНК-СИНТЕТАЗ ПЕЧЕНИ КРОЛИКОВ
Р. Ю. Славинскене, Л. 10. Лукошявичюс, В. А. Кунах,
Л. И. Слепян, М. И. Коваленко, Л. Л. Иванов
Первым этапом биосинтеза белка является образование аминоацил-тРНК, уровень ко-
торых в клетке определяется специфическим взаимодействием тРНК и аминоацил-
тРНК-синтетаз (АРСаз). Ранее показано существенное изменение активности ряда
тРНК и АРСаз, выделенных из печени кроликов через 6—24 ч после воспроизведения
экспериментального инфаркта миокарда (ЭИМ) [1]. Полученные данные явились ос-
новой для изучения возможности направленного воздействия на функциональную ак-
тивность компонентов трансляционного аппарата клеток печени при стрессовом состоя-
нии организма, вызванном ЭИМ.
Полисциас папоротниколистный, Polyscias filicifolia B a i l e y , произрастает в тро-
пиках, где используется в народной медицине как заменитель женьшеня. Культура
ткани этого растения была получена в Ленинградском химико-фармацевтическом инсти-
туте в 1971 г. Предварительные химические исследования биомассы культивируемых
клеток полисциаса показали наличие в ней тритерпеновых гликозидов, а настойка, по-
лученная из этой биомассы, оказывает на мышей действие, аналогичное действию жень-
шеня [2]. Настоящая работа посвящена изучению влияния биомассы культивируемых
клеток полисциаса папоротниколистного на уровень аминоацилирования т Р Н К Л е й и
ферментативную активность лейцил-тРНК-синтетазы печени кроликов через 6 ч после
ЭИМ. Выбор аминокислоты обусловлен значительным снижением акцептирования лей-
цина тРНК печени кролика в первые сутки ЭИМ, в то время как лейцил-тРНК-синте-
тазная активность в этот период увеличивается на 30 %. Установлено, что снижение
акцепторной активности препаратов тРНК является следствием перехода некоторых
тРНК печени в биологически неактивную конформацию при ЭИМ. Что же касается
АРСаз, то в отличие от тРНК наблюдается увеличение лейцил-тРНК-синтетазной ак-
тивности в экстрактах печени через 6 ч после окклюзии коронарной артерии [1]. Иссле-
дования проведены на кроликах-самцах массой 2,5—3,0 кг. Моделью ЭИМ служила ок-
клюзия коронарной артерии сердца [3]. Кролики получали перорально три раза в день
в течение двух дней до операции по 13 мг высушенной биомассы культуры ткани по-
лисциаса. Непосредственно перед операцией доза была увеличена до 26 мг. Методы вы-
деления суммарных тРНК и АРСаз, условия определения акцепторной активности опи-
саны ранее [4].
Согласно данным, приведенным в таолице, способность тРНК печени акцептиро-
вать лейцин существенно снижается при ЭИМ. При введении животным перед опера-
152 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА, 1986. т. 2. № 3 152
|