Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18

Установлено, что терминальные остатки N-ацетилгалактозамина (рецепторы лектина улитки), в большом количестве экспрессированные на поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18, находятся в составе N-гликозильных цепей комплексного типа гликопротеинов плазматической мембраны и ее микрошипов. С помощью...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	1991
Hauptverfasser:	Цегельский, А.А., Микитюк, Р.Г., Луцик, М.Д.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1991
Schriftenreihe:	Биополимеры и клетка
Schlagworte:	Клеточная биология
Online Zugang:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152936
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18 / А.А. Цегельский, Р.Г. Микитюк, М.Д. Луцик // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 1. — С. 94-100.— Бібліогр.: 20 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-152936
record_format	dspace
spelling	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1529362025-02-09T17:05:07Z Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18 Ідентифікація і функціональна характеристика рецепторів лектину слимака на поверхні клітин нейробластоми C 1300 N 18 Identification and functional characteristic of snail lectin receptors on the surface of neuroblastoma C 1300 N 18 Cells Цегельский, А.А. Микитюк, Р.Г. Луцик, М.Д. Клеточная биология Установлено, что терминальные остатки N-ацетилгалактозамина (рецепторы лектина улитки), в большом количестве экспрессированные на поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18, находятся в составе N-гликозильных цепей комплексного типа гликопротеинов плазматической мембраны и ее микрошипов. С помощью реакции розсткообразования исследована способность клеток нейробластомы С 1300 N 18 формировать контакт с эритроцитами группы А в зависимости от этапов перераспределения рецепторов, индуцируемого лектином улитки. Встановлено, що термінальні залишки N-ацетилгалактозаміну (рецептори лектину слимака), у великій кількості експресовані на поверхні клітин нейробластоми C 1300 N 18, знаходяться у складі N-глікозильних ланцюгів комплексного типу глікопротеїнів плазматичної мембрани та її мікрошипів. За допомогою реакції розеткоутворювання досліджена здатність клітин нейробластоми C 1300 N 18 формувати контакт з еритроцитами групи А в залежності від етапів перерозподілу рецепторів, стимульованого лектином слимака. The expression and chemical composition of receptors to garden snail lectin (terminal residues of N-acetyl-galactoscamine) on the surface of neuroblastoma C 1300 N 18 cells have been investigated using cytochemical and electorphoretic technique. Receptors are mainly represented by membrane glycoproteins (m. w. 33, 90 and 150 KDa), containing carbohydrate chains of N-type, and to a lesser extent by glycolipids. Receptors were localized on the cell surface as well as in microvilli. The lectin-receptor complexes were subjected to aggregation and endocytosis during 60 minutes, which resulted in rapid decrease of resetting ability with A group red blood cells. 1991 Article Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18 / А.А. Цегельский, Р.Г. Микитюк, М.Д. Луцик // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 1. — С. 94-100.— Бібліогр.: 20 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0002B9 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152936 577.112.853:616—006.487 ru Биополимеры и клетка application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Клеточная биология Клеточная биология
spellingShingle	Клеточная биология Клеточная биология Цегельский, А.А. Микитюк, Р.Г. Луцик, М.Д. Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18 Биополимеры и клетка
description	Установлено, что терминальные остатки N-ацетилгалактозамина (рецепторы лектина улитки), в большом количестве экспрессированные на поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18, находятся в составе N-гликозильных цепей комплексного типа гликопротеинов плазматической мембраны и ее микрошипов. С помощью реакции розсткообразования исследована способность клеток нейробластомы С 1300 N 18 формировать контакт с эритроцитами группы А в зависимости от этапов перераспределения рецепторов, индуцируемого лектином улитки.
format	Article
author	Цегельский, А.А. Микитюк, Р.Г. Луцик, М.Д.
author_facet	Цегельский, А.А. Микитюк, Р.Г. Луцик, М.Д.
author_sort	Цегельский, А.А.
title	Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18
title_short	Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18
title_full	Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18
title_fullStr	Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18
title_full_unstemmed	Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18
title_sort	идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы с 1300 n 18
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate	1991
topic_facet	Клеточная биология
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/152936
citation_txt	Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18 / А.А. Цегельский, Р.Г. Микитюк, М.Д. Луцик // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 1. — С. 94-100.— Бібліогр.: 20 назв. — рос.
series	Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv	AT cegelʹskijaa identifikaciâifunkcionalʹnaâharakteristikareceptorovlektinaulitkinapoverhnostikletoknejroblastomys1300n18 AT mikitûkrg identifikaciâifunkcionalʹnaâharakteristikareceptorovlektinaulitkinapoverhnostikletoknejroblastomys1300n18 AT lucikmd identifikaciâifunkcionalʹnaâharakteristikareceptorovlektinaulitkinapoverhnostikletoknejroblastomys1300n18 AT cegelʹskijaa ídentifíkacíâífunkcíonalʹnaharakteristikareceptorívlektinuslimakanapoverhníklítinnejroblastomic1300n18 AT mikitûkrg ídentifíkacíâífunkcíonalʹnaharakteristikareceptorívlektinuslimakanapoverhníklítinnejroblastomic1300n18 AT lucikmd ídentifíkacíâífunkcíonalʹnaharakteristikareceptorívlektinuslimakanapoverhníklítinnejroblastomic1300n18 AT cegelʹskijaa identificationandfunctionalcharacteristicofsnaillectinreceptorsonthesurfaceofneuroblastomac1300n18cells AT mikitûkrg identificationandfunctionalcharacteristicofsnaillectinreceptorsonthesurfaceofneuroblastomac1300n18cells AT lucikmd identificationandfunctionalcharacteristicofsnaillectinreceptorsonthesurfaceofneuroblastomac1300n18cells
first_indexed	2025-11-28T09:44:15Z
last_indexed	2025-11-28T09:44:15Z
_version_	1850026818184151040
fulltext	Клеточная биология УДК 577.112.853:616—006.487 А. А. Цегельский, Р. Г. Микитюк, М. Д. Луцик ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РЕЦЕПТОРОВ ЛЕКТИНА УЛИТКИ IIA ПОВЕРХНОСТИ КЛЕТОК НЕЙРОБЛАСТОМЫ С 1300 N 18 У становлено, что терминальные остатки N-ацетилгалактозамина (рецепторы лектина улитки), в большом количестве экспрессированные на поверхности клеток нейробласто- мы С 1300 N 18, находятся в составе N-гликозильных цепей комплексного типа глико- протеинов плазматической мембраны и ее микрошипов. С помощью реакции розстко- образования исследована способность клеток нейробластомы С 1300 N 18 формировать контакт с эритроцитами группы А в зависимости от этапов перераспределения рецеп- торов, индуцируемого лектином улитки. Введение. В осуществлении межклеточных контактов и взаимодейст- вия клеток с компонентами окружающей среды существенное значение имеют углеводсодержащие макромолекулы клеточной поверхности [1] . В последнее время в ряде исследований отмечается важная роль гли- коконъюгатов, содержащих терминальные остатки N-ацетилгалактоза- мина, в процессах ориентации ряда клеток — зародышевых [2] или метастазируюіцих опухолей [3]. При исследовании спектра углеводных детерминант поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18 с приме- нением в качестве зондов набора из 11 лектинов [4] нами было выяв- лено, что на поверхности этих клеток экспрессировано значительное количество углеводных цепей, предположительно в виде антигена А или Форссмана, содержащих терминальные остатки Ы-ацетил-а-^-галакто- замина, которые обусловливают связывание лектина улитки. В предпринятой работе проведена идентификация гликополимеров в мембране клеток нейробластомы С 1300 N 18, связывающих лек- тин улитки, а также исследованы функциональные свойства рецепто- ров, включающие перемещение их в живой клетке после связывания лиганда, и влияние этого процесса на розеткообразование с эритроци- тами группы А. Материалы и методы. В опытах использовали клетки нейроблас- томы С 1300 N 18, выращенные на матрасах объемом 1,0 л на моди- фицированной среде Дульбекко с добавлением 10 % сыворотки круп- ного рогатого скота. Д л я цитохимических исследований клетки культи- вировали на покровных стеклах во флаконах Карреля в течение 48 ч. Лектин из белочной железы улитки (ΗΡΑ) , агглютинин арахиса (ΡΝΑ), эритроагглютинин фасоли (PHA-E) , лектин чечевицы (LCL) и конъюгаты их с пероксидазой хрена получали по описанному методу [5]. Распластанные на стекле клетки обрабатывали ΗΡΑ, как описано ранее [6]. С целью исследования связывания лектина с поверхностью клеток блокировали процессы перераспределения лектин-рецепторных комплексов и их эндоцитоз путем префиксации глутаровым альдегидом [7] или снижением температуры во время реакции до 4 °С. Процессы с А. А. ЦЕГЕЛЬСКИЙ. Р. Г. МИКИТЮК. М. Д. ЛУЦИК. 1991 94 ISSN 02ч:;-Г()57. ЫЮПОЛПМГ-РЫ И К Л Ι:ΤΚ Д. 1 !··!' І. Г. 7. лЬ \ где Π χ — с у м м а эритроцитов на клетках с одним эритроцитом на по- верхности; п2 — соответственно с двумя и т. д., пю—сумма эритроци- тов на клетках с более чем 8 эритроцитами на поверхности. Клеточные мембраны получали после разрушения клеток в гомо- генизаторе Поттера — Эльвейема с зазором 0,075 мм в растворе (10 мМ трис-HCl, рН 7,2, 5 мМ MgCl 2 , 0,15 M KCl) . Ядра отделяли центрифугированием при 200 g в течение 3 мин. Грубую мембранную фракцию получали из супернатанта осаждением при 25 000 g (50 мин) . Д а л ь н е й ш у ю очистку клеточных мембран осуществляли с помощью центрифугирования в ступенчатом градиенте концентрации сахарозы. Собирали фракции с плотностью 1,180—1,105 г / с м 3 . Д л я фракциони- рования клеточных мембран методом Фолча [9] использовали грубую мембранную фракцию. Гликолипиды выделяли из хлороформной ф а з ы методом, описанным Свеннерхольмом [10], гликопротеины о с а ж д а л и из водно-мстанольной фазы с помощью диализа против этанола и по- следующего центрифугирования. Состав гликопротеинов анализировали с помощью электрофореза в полиакрпламидном геле (ΓΙΑΑΓ) в присутствии DS-Na модифициро- ванным методом Леммли [11, 12]. В качестве стандарта для опреде- ления молекулярных масс (м. м.) использовали препарат белка из клеточной стенки Yersinia pseudotuberculosis (предоставлен А. Т. Щер- баковым и Л. Н. Сердобинцевым) . Гликопротеины в ы я в л я л и с помо- щью PAS-реакции в геле [13] и по связыванию лектин-пероксидазпых конъюгатов с репликами электрофореграмм на листках нитроцеллюло- зы, полученными методом электроблота [14]. Д л я проявления реплик лектин-пероксидазные конъюгаты использовали в концентрации 50 мкг/мл. Время обработки 2 ч. Перед обработкой P N A проводили десиалированис в 0,05 н. H 2 S O 4 при 80 °С в течение 50 мин. Связыва- ние ConA выявляли непрямым методом, применяя в качестве второго реагента пероксидазу хрена [15]. В контрольных опытах блокирование связывания лектинов осуществляли с помощью соответствующих угле- водов в концентрациях 0,2—0,5 М. Результаты и обсуждение. При обработке префикспропанных клеток лектином улитки наблюдалось равномерное распределение лек- тин-рецепгорных комплексов на их поверхности, что проявляется на свето-оптическом уровне характерной картиной контурирования клеток (рис. 1 , а ) . Равномерное распределение рецепторов к H P A на поверх- ности клеток нейробластомы С 1300 N 18 выявлено и на электронно- ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 1 95 перераспределения лектин-рецепторных комплексов наблюдали на жи- вых клетках после 5 мин обработки их H P A (10 м к г / м л при 4 °С) и последующей инкубации при 37 °С в течение 15, 30, 60, 120 и 240 мин в среде без лектина. После фиксации клеток глутаровым альдегидом меченный пероксидазой лектин выявляли с помощью диаминобензиди- на, препарат заключали в гумми-сироп с глицерином по Л и л л и [8] и исследовали в световом микроскопе. В реакции розеткообразования использовали 1 %-ный раствор сус- пензии эритроцитов группы А в З Ф Р (забуференный фосфатом физио- логический раствор, рН 7,2) с 5 м г / м л альбумина. Р а с п л а с т а н н ы е клетки обрабатывали H P A в концентрации 10 м к г / м л (5 мин при 4 °С) и выдерживали различные сроки (0; 2,5; 5; 7,5; 15 и 30 мин) в среде без лектина при 37 °С. Затем на стекла наносили суспензию эритроци- тов и оставляли на 5 мин при 4 °С. После отмывания неадгезирован- Hbix эритроцитов З Ф Р препарат помещали на предметное стекло с кап- лей З Ф Р (клетками вниз) д л я микроскопического исследования. Реги- стрировали по 100 клеток на к а ж д у ю точку опыта. Индекс адгезии ( / а ) вычисляли по формуле микроскопическом уровне [5]. Из литературы известно, что равномер- ное распределение мембранных рецепторов имеет место и у живых кле- ток, но при обработке лектинами при температуре не выше 4 °С. Нами обнаружены следующие различия в связывании H P A с по- верхностью живых и префиксированных клеток. Концентрация лекти- на, необходимая для достижения достаточно интенсивной окраски плаз- матической мембраны у живых клеток, примерно в 5 раз ниже, чем у префиксированных. Значительно сокращается и продолжительность обработки лектином (5 мин против 30 мин). И, что наиболее сущест- Рис. 1. Связывание НРА-пероксидазных конъюгатов с клетками неиробластомы С 1300 N 18. Связывание с поверхностью префиксированной (а) и живой (б) клеток; динами- ка перемещения лектин-рецепторных комплексов в клетке спустя 30 (в) и 240 (г) мин после связывания лектина (см. текст). Х 4 5 0 Fig. 1. B ind ing of H P A - H R P conjugates with neuroblastoma C 1300 N 18 cells. B ind ing on the surface of prefixed cell (a) ; binding on the surface with l iv ing cell (6) ; the dy- namics of lectin-receptor complexes redistribution 30 min (в) and 240 min (г) after bin- d ing of lectin (see the t e x t ) . X 4 5 0 в енно, обработка живых клеток меченым лектином позволяет выявить поверхностные клеточные структуры, которые не выявляются после фиксации. Как видно из рис. 1,6, на поверхности нефиксированных клеток лектин-пероксидазный комплекс связывается с поверхностью клетки, а также ее микрошипами — сенсорными образованиями, позво- ляющими клетке ориентироваться в окружающей среде. Известно, что микрошипы появляются, когда клетка прикрепляется к субстрату, миг- рирует или округляется перед делением [16]. Связывание H P A с этими образованиями свидетельствует о наличии в составе гликоконъюгатов их поверхности терминальных остатков N-ацетилгалактозамина. После- дующая фиксация клеток глутаровым альдегидом не влияет на карти- ну окраски поверхностных структур, и микрошипы хорошо выявляются, что, вероятно, связано с иммобилизацией этих поверхностных структур клетки за счет мультивалентности используемого лектина. Динамика перераспределения НРА-рецепторных комплексов в жи- вых клетках нейробластомы характеризуется следующим образом. ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 1 7-0-693 97 Спустя 15 мин после связывания НРА-рецепторные комплексы лока- лизованы в плазматической мембране, однако микрошипы обнаружи- ваются слабее и в их основании появляются кластеры лектин-рецеп- торных комплексов. Через 30 мин происходит укрупнение кластеров, микрошипы уже не видны (рис. l , e ) . К 60 мин кластеры лектин-рецеп- торных комплексов выявляются внутри клеток и могут быть обнару- жены на многих уровнях фокуса микроскопа, клетки теряют окраску поверхности, что особенно четко наблюдается к 2—4 ч после начала инкубации (рис. 1 ,г) . Эти изменения в локализации свидетельствуют, что НРА-рецепторные комплексы перемеща- ются в ретроградном от микрошипов направ- лении с последующей концентрацией в цито- плазме вокруг ядра. Подобное перераспреде- ление рецепторов, индуцированное связыва- нием лектинов, выявлено при исследовании филоподий конусов роста симпатических ней- ронов в культуре [17]. Рис. 2. Показатель розеткообразовательной способности (I a ) клеток нейробластомы в зависимости от времени после импульсной метки их H P A Fig. 2. Index of rosett ing ability (Ia) of neuroblastoma ce l l s in relation to the time after the pulse label l ing with H P A Д л я исследования взаимосвязи между перераспределением поверх- ностных рецепторов, содержащих терминальный N-ацетилгалактозамин, и способностью клеток нейробластомы к образованию межклеточных контактов использовали реакцию розеткообразования с эритроцитами группы А. Как следует из приведенного графика (рис. 2), максималь- ная розеткообразовательная способность клеток нейробластомы, обра- ботанных ΗΡΑ, наблюдается непосредственно после связывания лекти- на с клеточной поверхностью, т. е. в период, когда лектин-рецепторные комплексы равномерно связаны с плазматической мембраной. В после- дующем в процессе перераспределения лектин-рецепторных комплек- сов и их эндоцитоза розеткообразовательная способность резко снижа- ется и к 30-й мин практически не выявляется. Таким образом, к этому времени количества поверхностных рецепторов, необходимых для фор- мирования межклеточного контакта, уже не достаточно. Эти данные согласуются с предположением [18] о том, что кластерирование лек- тин-рецепторных комплексов на клеточной поверхности не является обязательным условием для формирования контакта между клетками, а микрошипы поверхности клеток нейробластомы являются важным фактором агглютинации [19]. С целью идентификации среди мембранных компонентов рецепто- ров, связывающих ΗΡΑ, грубую мембранную фракцию подвергали экстракции по методу Фолча с последующим выделением гликолипи- дов и гликопротеинов. Исследование ингибиторной активности получен- ных гликолипидов и гликопротеинов в отношении H P A в тесте гемаг- глютинации показало, что гликопротеины мембран клеток нейроблас- томы С 1300 N 18 блокируют гемагглютинирующую активность H P A в минимальных концентрациях 26 мкг /мл и являются значительно бо- лее сильным ингибитором, чем гликолипиды, проявляющие активность в концентрации 3300 мкг/мл. Это позволяет сделать вывод о том, что рецепторы, содержащие терминальные остатки N-ацетилгалактозамина и выявляемые на поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18, представлены преимущественно гликопротеинами. С целью изучения молекулярного состава гликопротеинов плазма- тических мембран клеток нейробластомы препараты очищенных мем- ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 1 7 - 0 - 6 9 3 97 бран солюбилизировали и анализировали с помощью электрофореза в ПААГ в присутствии DS-Na. Электрофоретический спектр полипепти- дов и гликопротеинов мембран клеток нейробластомы С 1300 N 18, их молекулярные массы представлены на рис. 3. Окраска гликопротеинов на полосках геля с помощью PAS-реак- ции позволяет выявить лишь две слабые зоны д а ж е в гелях, перегру- женных белком. С помощью лектинов обнаруживается значительно большее число гликопротеинов. Обработкой реплик электрофореграмм Рис. 3. Полипептидный и гликопротеиновый состав мембран клеток нейробластомы С 1300 N 18: а — электрофоретический спектр полипептидов мембран клеток нейро- бластомы (наиболее выраженные полипептидные полосы пронумерованы и приведена шкала молекулярных масс· IO3); б — л о к а л и з а ц и я гликопротеинов на электрофореграм- мах, выявляемых PAS-реакцией и связыванием лектинов с нитроцеллюлозными репли- ками фореграмм (см. текст) Fig . 3. Polypept ide and glycoprotein composit ion of neuroblastoma C 1300 N 18 cel ls: a—· electrophoretic spectra of membrane polypept ides of neuroblastoma cells . The mos t prominent bands are enumerated and molecular we ight scale is des ignated; б — l o c a l i z a - tion of g lycoprote ins on the e lectrophoregrams as revealed by P A S method and lectin b inding wi th nitrocel lulose replicas (see the text) комплексом H P A с пероксидазой было показано, что рецепторы, свя- зывающие ΗΡΑ, появляются в гликопротеинах с м. м. 33 000, 150 000 и особенно интенсивно — 90 000. Параллельное связывание ConA, LCL и PHA-E гликопротеинами с м. м. 90 000 указывает на то, что терми- нальные остатки N-ацетилгалактозамина, обнаруживаемые ΗΡΑ, на- ходятся в составе гликополимеров, содержащих N-гликозильные цепи комплексного типа. PNA, обладающий специфичностью к олигосахаридам О-гликозиль- ного типа, интенсивно связывался с гликопротеинами с м. м. 70 000 и в меньшей мере рядом других зон, в том числе и с м. м. 33 000. Это свидетельствует о том, что небольшая часть N-ацетилгалактозамино- вых терминальных рецепторов находится и в составе О-гликозильных цепей без терминальных остатков сиаловых кислот, что характерно для опухолевых клеток [20]. Ранее нами было показано, что 17 % клеток нейробластомы С 1300 N 18 связывают PNA на поверхности без пред- варительного десиалирования [7]. Результаты исследования позволяют сделать вывод о- том, что ре- цепторы лектина улитки, содержащие терминальные остатки N-ацетил- галактозамина, в большом количестве экспрессируются на поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18 и представлены преимущественно гликопротеинами и только в небольшой мере — гликолипидами. Угле- водные цепи этих гликопротеинов в большинстве представлены N-гли- канами комплексного типа с незавершенностью процессов гликозили- рования. Гликопротеины с терминальными остатками N-ацетилгалакто- замина входят в состав сенсорных поверхностных образований клеток 98 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 1 7-0-693 97 нейробластомы микрошипов, играющих важную роль в процессах меж- клеточного узнавания и взаимодействия. Полученные результаты также свидетельствуют в пользу того, что реакция розеткообразования с ис- пользованием в качестве мембранного маркера группоспецифических эритроцитов адекватно отображает процесс перераспределения лектин- рецепторных комплексов и их интернализацию из плоскости мембраны внутрь клетки. В то же время с помощью лектина улитки можно моде- лировать степень эритроцитарного розеткообразования на поверхности клеток нейробластомы. Р е з ю м е Встановлено, що термінальні залишки N-ацетилгалактозаміну (рецептори лектину сли- мака), у великій кількості експресовані на поверхні клітин нейробластоми C 1300 N 18, знаходяться у складі N-глікозильних ланцюгів комплексного типу глікопротеїнів плаз- матичної мембрани та її мікрошипів. За допомогою реакції розеткоутворювання дослід- жена здатність клітин нейробластоми C 1300 N 18 формувати контакт з еритроцитами групи Λ в залежності від етапів перерозподілу рецепторів, стимульованого лектином слимака. S и m m а г у The expression and chemical composit ion of receptors to garden snail lectin (terminal re- s idues of N-acety l -ga lac toscamine) on the surface of neuroblastoma C 1300 N 18 ce l l s have been invest igated us ing cytochemical and electorphoretic technique. Receptors are mainly represented by membrane g lycoprote ins (m. w. 33, 90 and 150 K D a ) , conta in ing carbohydrate chains of N-type, and to a lesser extent by glycol ipids . Receptors were lo- calized on the cell surface as wel l as in microvilli . The lectin-receptor complexes were subjected to aggrega t ion and endocytos i s during 60 minutes, which resulted in rapid de- crease of rosett ing ability with A group red blood cells. С П И С О К Л И Т Е Р А Т У Р Ы 1. Хьюз P. Гликопротеины.— Μ. : Мир, 1985 — 140 с. 2. Presetise of unique g lycoconjugate on the surface of rat primordial germ cel ls dur ing m i g r a t i o n / A . R. Fazel , B. A. Schulte, R. P. Thompson, S. S. S p i c e r / / C e l l Di f ferent .— 1987,— 21, N 3 . — P . 199—211. 3. Rademacher T. W., Parekh R. B., Dwek R. A. G l y c o b i o l o g y / / A n n . Rev. B iochem.— 1988,— 57,— P. 785—838. 4. Lutsik M. D., Ghula N. M., Tsegelsky A. A. Glycoproteins of neuroblastoma C 1300 in relation to the intensity of cell p r o l i f e r a t i o n / / I n t e r l e c II: Abstr.— Tartu, 1989.— P. 46. 5. Хомутовский О. AЛуцик Μ. Д., Передерей О. Ф. Электронная гистохимия рецеп- торов клеточных мембран.— Киев : Наук, думка, 1986.— 167 с. 6. Miller M., Karnowsky M., Diamandopoulos G. An improved immunoperoxidase techni- que for ident i fy ing SV-40 and T ant igens by light m i c r o s c o p y / / P r o c . Soc. Exp. Biol , and Med.— 1974.— 146, N 2 . — P . 432—437. 7. Цегельский А. А., Луцик Μ. Д., Лаиікай Α. Φ. Исследование углеводных компонен- тов поверхности клеток нейробластомы С 1300 с помощью методов цитохимии и агглютинации л е к т и н а м и / / Э к с п е р и м . онкология.— 1989.— 11, № 5 . — С. 30—34. 8. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. — М. : Мир, 1969 ,—645 с. 9. Hamaguchi H., Cleve Н. Solubi l i sat ion of human erythrocyte membrane g lycoprote ins and separation of the M N glycoprote ins from a g lycoprote ins with I, S and A activi- t y / / B i o c h i m . et biophys. acta.— 1972 .—278 , N 2 . — P . 271—280. 10. СвеннерхоАьм Л. Ганглиозиды: в ы д е л е н и е / / М е т о д ы исследования углеводов / П о д ред. А. Я. Хорлина.—М. : Мир, 1975 .—С. 347—357. 11. Laemmli U. К. C l e a v a g e of structural proteins during the assembly of head of bacte- riophage T4 / / N a t u r e . — 1970.— 277, N 5 2 5 9 , — P . 680—685. 12. Portio M., Pearson A. Improved resolution of the myofibri l lar proteins with S D S - P A G E / / B i o c h i m . et biophys. acta.— 1977 .—490, N 1 , — P . 27—34. 13. Keyser J. S ta in ing of serum glycoprote ins after electrophoretic separation in polyac- rylamide g e l s / / A n a l . Biochem.— 1964 .—9, N 2 , — P . 249—252. 14. Луцик Μ. Д., Кусень С. И. Исследование мембранных гликопротеинов эритроцитов человека с применением л е к т и н о в / / У к р . биохим. жури.— 1987.— 59, № 6.— С. 3—9. 6 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 1 15. Barat N., Avrameas S. Surface and intracellular local izat ion of concanaval in A in human l y m p h o c y t e s / / E x p . Cell. Res .— 1973 .—76, N 2 , — P . 451—455. 16. Молекулярная биология клетки / Б. А. Албертс, Д . Брей, Д ж . Льюис и др.— M . : Мир, 1987 .—Т. 3 , — 2 9 6 с. 17. Carboneito S., Argon У. Lect in induce the r ed i s t r i bu t ion and i n t e r n a l i z a t i o n of re- c e p t o r s on the s u r f a c c of cu l t u r ed n e u r o n s // Deve lop . Biol .— 1980.— '80, N 2.— P. 364—378. 18. Roth / . The lectins. Molecular probes in cell b io logy and membrane research.— Jena : V E B Gustav Fisher Verlag, 1978,— 186 p. 19. Nicolson G. L. The interaction of lectins with animal cell surface / / Int. Rev. Cytol .— 1974 .—39 .— P. 89—190. 20. Takahashi H. K., Metoki R., Hakotnori S. Immunoglobul in G 3 monoclonal antibody directed to Tn ant igen (tumor associated α -Ν-ace ty lga lac toaminy l epitope) that docs not cross-react with blood group A a n t i g e n / / C a n c e r Res. — 1988.— 48, N 15.— P. 4361—4367. Львов, отд-ние Ин-та биохимии им. А. В. Палладина А Н УССР, Получено 22.05.90 Киев 100 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 1

Идентификация и функциональная характеристика рецепторов лектина улитки нa поверхности клеток нейробластомы С 1300 N 18

Institution

Ähnliche Einträge