Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека
Описаны условия проведения реакции амплификации ДНК для определения мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы (ФАГид). Указано на необходимость оптимизации условий реакции. Подчеркивается последовательность составления реакционной смеси, при этом праймеры, фермент и трифосфаты следует добав...
Saved in:
| Published in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Date: | 1990 |
| Main Authors: | , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1990
|
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153062 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека / М.И. Николенко, С.Б. Арбузова // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 2. — С. 35-38. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862749504532381696 |
|---|---|
| author | Николенко, М.И. Арбузова, С.Б. |
| author_facet | Николенко, М.И. Арбузова, С.Б. |
| citation_txt | Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека / М.И. Николенко, С.Б. Арбузова // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 2. — С. 35-38. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Описаны условия проведения реакции амплификации ДНК для определения мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы (ФАГид). Указано на необходимость оптимизации условий реакции. Подчеркивается последовательность составления реакционной смеси, при этом праймеры, фермент и трифосфаты следует добавлять после денатурации ДНК. ДНК можно выделять не только из цельной крови больных фенилкетонурией (ФКУ), но и из сухих пятен крови на фильтровальной бумаге. В результате амплификации образуется фрагмент гена ФАГид длиной 245 пар оснований (п. о.), несущий мутации. Последующая дот-гибридизация с мутантними мечеными зондами позволяет определить гетерозиготное носительство у здоровых членов семей.
Описано умови проведення реакції ампліфікації ДНК для визначення мутацій у 12-му екзоні гена фенілаланінгідроксилази (ФАГід). Вказано на необхідність оптимізації умов реакції. Підкреслюється важливість послідовності складання реакційній суміші, при цьому праймери, фермент і трифосфати слід додавати після денатурації ДНК. ДНК можна виділяти не тільки з цільної крові хворих на фенілкетонурію (ФКУ), а й із сухих плям крові на фільтрувальному папері. В результаті ампліфікації утворюється фрагмент гена ФАГід довжиною 245 пар основ, що несе мутації. Подальша дот-гібридизація з мутантними міченими зондами дозволяє визначити гетерозиготне носійство у здорових членів сімей.
The conditions of the amplification procedure for region of gene of human phenylalanine hydroxylase with some PKU mutations were elaborated. Genomic DNA of PKU-palients was isolated from whole blood and from dry blood spots on filter paper. The concentration of EDTA must be low to prevent inhibition of the reaction. It is necessary to perform dot-hybridization of amplificational sample with mutant DNA-probes for identification of mutations and rapid carrier testing.
|
| first_indexed | 2025-12-07T21:00:33Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-153062 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T21:00:33Z |
| publishDate | 1990 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Николенко, М.И. Арбузова, С.Б. 2019-06-13T13:15:16Z 2019-06-13T13:15:16Z 1990 Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека / М.И. Николенко, С.Б. Арбузова // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 2. — С. 35-38. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000257 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153062 577.213.3 Описаны условия проведения реакции амплификации ДНК для определения мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы (ФАГид). Указано на необходимость оптимизации условий реакции. Подчеркивается последовательность составления реакционной смеси, при этом праймеры, фермент и трифосфаты следует добавлять после денатурации ДНК. ДНК можно выделять не только из цельной крови больных фенилкетонурией (ФКУ), но и из сухих пятен крови на фильтровальной бумаге. В результате амплификации образуется фрагмент гена ФАГид длиной 245 пар оснований (п. о.), несущий мутации. Последующая дот-гибридизация с мутантними мечеными зондами позволяет определить гетерозиготное носительство у здоровых членов семей. Описано умови проведення реакції ампліфікації ДНК для визначення мутацій у 12-му екзоні гена фенілаланінгідроксилази (ФАГід). Вказано на необхідність оптимізації умов реакції. Підкреслюється важливість послідовності складання реакційній суміші, при цьому праймери, фермент і трифосфати слід додавати після денатурації ДНК. ДНК можна виділяти не тільки з цільної крові хворих на фенілкетонурію (ФКУ), а й із сухих плям крові на фільтрувальному папері. В результаті ампліфікації утворюється фрагмент гена ФАГід довжиною 245 пар основ, що несе мутації. Подальша дот-гібридизація з мутантними міченими зондами дозволяє визначити гетерозиготне носійство у здорових членів сімей. The conditions of the amplification procedure for region of gene of human phenylalanine hydroxylase with some PKU mutations were elaborated. Genomic DNA of PKU-palients was isolated from whole blood and from dry blood spots on filter paper. The concentration of EDTA must be low to prevent inhibition of the reaction. It is necessary to perform dot-hybridization of amplificational sample with mutant DNA-probes for identification of mutations and rapid carrier testing. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека Підбір оптимальних умов проведення ланцюгової реакції синтезу ДНК при ідентифікації мутацій в 12-м екзоні гена фенілаланінгідроксилази людини Selection of optimal conditions for polymerase chain reaction for identification of mutations in 12th gene of human phenylalanine hydroxylase Article published earlier |
| spellingShingle | Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека Николенко, М.И. Арбузова, С.Б. |
| title | Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека |
| title_alt | Підбір оптимальних умов проведення ланцюгової реакції синтезу ДНК при ідентифікації мутацій в 12-м екзоні гена фенілаланінгідроксилази людини Selection of optimal conditions for polymerase chain reaction for identification of mutations in 12th gene of human phenylalanine hydroxylase |
| title_full | Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека |
| title_fullStr | Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека |
| title_full_unstemmed | Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека |
| title_short | Подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза ДНК при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека |
| title_sort | подбор оптимальных условий проведения цепной реакции синтеза днк при идентификации мутаций в 12-м экзоне гена фенилаланингидроксилазы человека |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153062 |
| work_keys_str_mv | AT nikolenkomi podboroptimalʹnyhusloviiprovedeniâcepnoireakciisintezadnkpriidentifikaciimutaciiv12mékzonegenafenilalaningidroksilazyčeloveka AT arbuzovasb podboroptimalʹnyhusloviiprovedeniâcepnoireakciisintezadnkpriidentifikaciimutaciiv12mékzonegenafenilalaningidroksilazyčeloveka AT nikolenkomi pídbíroptimalʹnihumovprovedennâlancûgovoíreakcíísintezudnkpriídentifíkacíímutacíiv12mekzonígenafenílalaníngídroksilazilûdini AT arbuzovasb pídbíroptimalʹnihumovprovedennâlancûgovoíreakcíísintezudnkpriídentifíkacíímutacíiv12mekzonígenafenílalaníngídroksilazilûdini AT nikolenkomi selectionofoptimalconditionsforpolymerasechainreactionforidentificationofmutationsin12thgeneofhumanphenylalaninehydroxylase AT arbuzovasb selectionofoptimalconditionsforpolymerasechainreactionforidentificationofmutationsin12thgeneofhumanphenylalaninehydroxylase |