Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов
Транскрипция дезоксирибоолигонуклеотидных матриц в системе РНК-полимеразы Escherichia coli является одним из перспективных методов получения рибоолигонуклеотидов заданного строения. Для получения препаративных количеств AGGGGAUUGAAAAUC-фрагмента антикодоновой петли фенилаланиновой тРНК и AUGAGGAAUAC...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Datum: | 1990 |
| Hauptverfasser: | , , , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1990
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153437 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов / Л.Я. Денисова, С.Н. Загребельный, Н.М. Пустошилова, А.Г. Веньяминова, В.В. Горн, В.Ф. Зарытова, М. Н. Репкова // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 3. — С. 50-55. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862598741916123136 |
|---|---|
| author | Денисова, Л.Я. Загребельный, С.Н. Пустошилова, Н.М. Веньяминова, А.Г. Горн, В.В. Зарытова, В.Ф. Репкова, М. Н. |
| author_facet | Денисова, Л.Я. Загребельный, С.Н. Пустошилова, Н.М. Веньяминова, А.Г. Горн, В.В. Зарытова, В.Ф. Репкова, М. Н. |
| citation_txt | Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов / Л.Я. Денисова, С.Н. Загребельный, Н.М. Пустошилова, А.Г. Веньяминова, В.В. Горн, В.Ф. Зарытова, М. Н. Репкова // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 3. — С. 50-55. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Транскрипция дезоксирибоолигонуклеотидных матриц в системе РНК-полимеразы Escherichia coli является одним из перспективных методов получения рибоолигонуклеотидов заданного строения. Для получения препаративных количеств AGGGGAUUGAAAAUC-фрагмента антикодоновой петли фенилаланиновой тРНК и AUGAGGAAUACCCAUG-фрагмента РНК фага MS2 проведена транскрипция комплементарных дезоксирибоолигонуклеотидов. Уровень включения нуклеотидов в продукт транскрипции при этом составил не менее 70 % нуклеотидного материала матрицы. Разработана процедура извлечения транскрипта из реакционной смеси, включающая хроматографию на гепарин-агарозе, хроматографию на гидрофобном сорбенте Lichroprep RP18 и электрофорез в 20 %-ном полиакриламидном геле (ПААГ) с последующей электроэлюцией целевого продукта из геля. При использовании в РНК-полимеразной реакции 5 о. е. A₂₆₀ дезоксирибоматрицы конечный выход точной РНК-копии составил 1,0—1,5 о. е. A₂₆₀.
Транскрипція дезоксирибоолігонуклеотидних матриць у системі РНК-полімерази Escherichia coli є одним із перспективних методів отримання рибоолігонуклеотидів заданої будови. Для одержання препаративних кількостей AGGGGAUUGAAAAUC-фрагмента антикодонової петлі фенілаланінової тРНК і AUGAGGAAUACCCAUG-фрагмента РНК фага MS2 проведено транскрипцію комплементарних дезоксирибоолігонуклеотидів. Рівень включення нуклеотидів у продукт транскрипції при цьому становив не менше 70 % нуклеотидного матеріалу матриці. Розроблено процедуру вилучення транскрипта з реакційної суміші, що включає хроматографію на гепарин-агарозі, хроматографію на гідрофобному сорбенті Lichroprep RP18 і електрофорез у 20 %-му поліакриламідному гелі з подальшою електроелюцією цільового продукту з гелю. При використанні в РНК-полімеразній реакції 5 о. о. A₂₆₀ дезоксирибоматриці кінцевий вихід точної РНК-копії склав 1,0–1,5 о. о. A₂₆₀.
The transcription of complementary deoxyribooligonucleotides was performed to obtain AGGGGAUUGAAAAUC (tRNAphe anticodon loop fragment) and AUGAGGAAUACCCAUG (the MS2 phase RNA fragment) in preparative amounts. The nucleotide incorporation into the transcription product was shown to achieve 70 % of the template nucleotide level. The procedure was developed for the isolation of the transcript from the reaction mixture. The isolation steps involve geparine-agarose chromatography, Lichroprep RP 18 one and the electrophoresis in 20 % polyacrylamide gel under denaturation conditions followed by electroelution of the desired product from gel. Being an exact copy of deoxyribotemplate the ribooligonucleotide gave the yield of 1.0–1.5 U₂₆₀ on 5.0 U₂₆₀ of the template.
|
| first_indexed | 2025-11-27T20:21:51Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-153437 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-27T20:21:51Z |
| publishDate | 1990 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Денисова, Л.Я. Загребельный, С.Н. Пустошилова, Н.М. Веньяминова, А.Г. Горн, В.В. Зарытова, В.Ф. Репкова, М. Н. 2019-06-14T10:21:18Z 2019-06-14T10:21:18Z 1990 Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов / Л.Я. Денисова, С.Н. Загребельный, Н.М. Пустошилова, А.Г. Веньяминова, В.В. Горн, В.Ф. Зарытова, М. Н. Репкова // Биополимеры и клетка. — 1990. — Т. 6, № 3. — С. 50-55. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00026B https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153437 577.214.3 Транскрипция дезоксирибоолигонуклеотидных матриц в системе РНК-полимеразы Escherichia coli является одним из перспективных методов получения рибоолигонуклеотидов заданного строения. Для получения препаративных количеств AGGGGAUUGAAAAUC-фрагмента антикодоновой петли фенилаланиновой тРНК и AUGAGGAAUACCCAUG-фрагмента РНК фага MS2 проведена транскрипция комплементарных дезоксирибоолигонуклеотидов. Уровень включения нуклеотидов в продукт транскрипции при этом составил не менее 70 % нуклеотидного материала матрицы. Разработана процедура извлечения транскрипта из реакционной смеси, включающая хроматографию на гепарин-агарозе, хроматографию на гидрофобном сорбенте Lichroprep RP18 и электрофорез в 20 %-ном полиакриламидном геле (ПААГ) с последующей электроэлюцией целевого продукта из геля. При использовании в РНК-полимеразной реакции 5 о. е. A₂₆₀ дезоксирибоматрицы конечный выход точной РНК-копии составил 1,0—1,5 о. е. A₂₆₀. Транскрипція дезоксирибоолігонуклеотидних матриць у системі РНК-полімерази Escherichia coli є одним із перспективних методів отримання рибоолігонуклеотидів заданої будови. Для одержання препаративних кількостей AGGGGAUUGAAAAUC-фрагмента антикодонової петлі фенілаланінової тРНК і AUGAGGAAUACCCAUG-фрагмента РНК фага MS2 проведено транскрипцію комплементарних дезоксирибоолігонуклеотидів. Рівень включення нуклеотидів у продукт транскрипції при цьому становив не менше 70 % нуклеотидного матеріалу матриці. Розроблено процедуру вилучення транскрипта з реакційної суміші, що включає хроматографію на гепарин-агарозі, хроматографію на гідрофобному сорбенті Lichroprep RP18 і електрофорез у 20 %-му поліакриламідному гелі з подальшою електроелюцією цільового продукту з гелю. При використанні в РНК-полімеразній реакції 5 о. о. A₂₆₀ дезоксирибоматриці кінцевий вихід точної РНК-копії склав 1,0–1,5 о. о. A₂₆₀. The transcription of complementary deoxyribooligonucleotides was performed to obtain AGGGGAUUGAAAAUC (tRNAphe anticodon loop fragment) and AUGAGGAAUACCCAUG (the MS2 phase RNA fragment) in preparative amounts. The nucleotide incorporation into the transcription product was shown to achieve 70 % of the template nucleotide level. The procedure was developed for the isolation of the transcript from the reaction mixture. The isolation steps involve geparine-agarose chromatography, Lichroprep RP 18 one and the electrophoresis in 20 % polyacrylamide gel under denaturation conditions followed by electroelution of the desired product from gel. Being an exact copy of deoxyribotemplate the ribooligonucleotide gave the yield of 1.0–1.5 U₂₆₀ on 5.0 U₂₆₀ of the template. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов Препаративне отримання рібоолігонуклеотідов заданого будови шляхом транскрипції дезоксирибоолигонуклеотидов Preparative synthesis of ribooligonucleotides with the preset sequence by transcription of deoxyribonucleotides Article published earlier |
| spellingShingle | Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов Денисова, Л.Я. Загребельный, С.Н. Пустошилова, Н.М. Веньяминова, А.Г. Горн, В.В. Зарытова, В.Ф. Репкова, М. Н. Структура и функции биополимеров |
| title | Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов |
| title_alt | Препаративне отримання рібоолігонуклеотідов заданого будови шляхом транскрипції дезоксирибоолигонуклеотидов Preparative synthesis of ribooligonucleotides with the preset sequence by transcription of deoxyribonucleotides |
| title_full | Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов |
| title_fullStr | Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов |
| title_full_unstemmed | Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов |
| title_short | Препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов |
| title_sort | препаративное получение рибоолигонуклеотидов заданного строения путем транскрипции дезоксирибоолигонуклеотидов |
| topic | Структура и функции биополимеров |
| topic_facet | Структура и функции биополимеров |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153437 |
| work_keys_str_mv | AT denisovalâ preparativnoepolučenieribooligonukleotidovzadannogostroeniâputemtranskripciidezoksiribooligonukleotidov AT zagrebelʹnyisn preparativnoepolučenieribooligonukleotidovzadannogostroeniâputemtranskripciidezoksiribooligonukleotidov AT pustošilovanm preparativnoepolučenieribooligonukleotidovzadannogostroeniâputemtranskripciidezoksiribooligonukleotidov AT venʹâminovaag preparativnoepolučenieribooligonukleotidovzadannogostroeniâputemtranskripciidezoksiribooligonukleotidov AT gornvv preparativnoepolučenieribooligonukleotidovzadannogostroeniâputemtranskripciidezoksiribooligonukleotidov AT zarytovavf preparativnoepolučenieribooligonukleotidovzadannogostroeniâputemtranskripciidezoksiribooligonukleotidov AT repkovamn preparativnoepolučenieribooligonukleotidovzadannogostroeniâputemtranskripciidezoksiribooligonukleotidov AT denisovalâ preparativneotrimannâríboolígonukleotídovzadanogobudovišlâhomtranskripcíídezoksiribooligonukleotidov AT zagrebelʹnyisn preparativneotrimannâríboolígonukleotídovzadanogobudovišlâhomtranskripcíídezoksiribooligonukleotidov AT pustošilovanm preparativneotrimannâríboolígonukleotídovzadanogobudovišlâhomtranskripcíídezoksiribooligonukleotidov AT venʹâminovaag preparativneotrimannâríboolígonukleotídovzadanogobudovišlâhomtranskripcíídezoksiribooligonukleotidov AT gornvv preparativneotrimannâríboolígonukleotídovzadanogobudovišlâhomtranskripcíídezoksiribooligonukleotidov AT zarytovavf preparativneotrimannâríboolígonukleotídovzadanogobudovišlâhomtranskripcíídezoksiribooligonukleotidov AT repkovamn preparativneotrimannâríboolígonukleotídovzadanogobudovišlâhomtranskripcíídezoksiribooligonukleotidov AT denisovalâ preparativesynthesisofribooligonucleotideswiththepresetsequencebytranscriptionofdeoxyribonucleotides AT zagrebelʹnyisn preparativesynthesisofribooligonucleotideswiththepresetsequencebytranscriptionofdeoxyribonucleotides AT pustošilovanm preparativesynthesisofribooligonucleotideswiththepresetsequencebytranscriptionofdeoxyribonucleotides AT venʹâminovaag preparativesynthesisofribooligonucleotideswiththepresetsequencebytranscriptionofdeoxyribonucleotides AT gornvv preparativesynthesisofribooligonucleotideswiththepresetsequencebytranscriptionofdeoxyribonucleotides AT zarytovavf preparativesynthesisofribooligonucleotideswiththepresetsequencebytranscriptionofdeoxyribonucleotides AT repkovamn preparativesynthesisofribooligonucleotideswiththepresetsequencebytranscriptionofdeoxyribonucleotides |