Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека

Описана процедура быстрого, чувствительного а точного определения цитомегаловируса (ЦМВ) в тканях и биологических жидкостях человека с помощью термофильной ДНК-по ли ме разы из Thermus thermophilus. Процедура состоит из двух последовательных ПЦР. Первая включает 40 циклов (денатурация ДНК, отжиг пра...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :Биополимеры и клетка
Дата:1991
Автори: Виноградская, Г.Р., Горышин, И.Ю., Новикова, Л.Н., Плуталов, О.В., Башмакова, М.А., Берлин, Ю.А., Цинзерлинг, В.А., Шварц, Е.И., Ланцов, В.А.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1991
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153530
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека / Г.Р. Виноградская, И.Ю. Горышин, Л.Н. Новикова, О.В. Плуталов, М.А. Башмакова, Ю.А. Берлин, В.А. Цинзерлинг, Е.И. Шварц, В.А. Ланцов // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 3. — С. 31-35. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-153530
record_format dspace
spelling Виноградская, Г.Р.
Горышин, И.Ю.
Новикова, Л.Н.
Плуталов, О.В.
Башмакова, М.А.
Берлин, Ю.А.
Цинзерлинг, В.А.
Шварц, Е.И.
Ланцов, В.А.
2019-06-14T10:49:46Z
2019-06-14T10:49:46Z
1991
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека / Г.Р. Виноградская, И.Ю. Горышин, Л.Н. Новикова, О.В. Плуталов, М.А. Башмакова, Ю.А. Берлин, В.А. Цинзерлинг, Е.И. Шварц, В.А. Ланцов // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 3. — С. 31-35. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.
0233-7657
DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0002CB
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153530
577.21
Описана процедура быстрого, чувствительного а точного определения цитомегаловируса (ЦМВ) в тканях и биологических жидкостях человека с помощью термофильной ДНК-по ли ме разы из Thermus thermophilus. Процедура состоит из двух последовательных ПЦР. Первая включает 40 циклов (денатурация ДНК, отжиг праймеров и ДНК-полимеризация), выполняемых с двумя праймерами по 20 оснований, консервативная последовательность которых взята из гена MIE (major immediate early) ЦВМ. Вторая реакция включает от 20 до 50 циклов, аналогичных первым, но на основе 20-членных праймеров, фланкирующих внутреннюю часть фрагмента ДНК, намноженного ранее. Конечный фрагмент обнаруживается по окрашиванию бромистым этидием после электрофореза в полиакриламидном геле. Верификация искомой полосы включает ее рестрикционный анализ. С помощью плазмиды рСМ5018, несущей ген MIE вируса, показано, что предлагаемая процедура может выявлять столь малые количества ДНК, как несколько (от 1 до 5) плазмидных молекул.
Описана процедура швидкого, чутливого та точного визначення цитомегаловірусу (ЦМВ) у тканинах і біологічних рідинах людини за допомогою термофільної ДНК-полімерази Thermus thermophilus. Процедура складається з двох послідовних ПЦР. У першій реакції проходить 40 циклів (денатурація ДНК, ренатурація праймерів і ДНК-полімерізація), що виконуються з двома праймерами по 20 основ, консервативна послідовність яких узята із гену MIE (major immediate early) ЦМВ. Друга реакція включає від 20 до 50 циклів, що відповідають першим, але на основі 20-членних праймерів, які ампліфікують внутрішню частину фрагменту ДНК (останній намножений раніше). Кінцевий фрагмент виявляється при фарбуванні бромистим етидієм після електрофорезу в поліакриламідному гелі. Веріфікація потрібної смуги провадиться і на·основі рестрикційного аналізу. За допомогою плазміди рСМ5018, що несе ген MIE вірусу, показано, що пропонована процедура може виявляти такі малі кількості ДНК, як декілька (від 1 до 5) плазмідних молекул.
A rapid, sensitive and precise procedure of detecting cytomegalovirus (CMV) DNA in human tissue and biological liquid by means of the thermostable DNA-polymerase from Thermus thermophilus is described. The procedure consists of two consecutive PCRs. The-first one includes 40 cycles of denaturation, primer annealing and chain extension with two 20-base primers chosen from the conserved sequence ot MIE (major immediate early) gene of CMV. The second reaction includes from 20 up to 50 cycles consisting of the same steps but with 20-base primers chosen to amplify the internal part of the fragment amplified during the first reaction. The final fragment is detected by the ethidium bromide staining after polyacrylamide gel electrophoresis. Verification of the band includes restriction enzyme analysis. Use of pCM5018 plasmid bearing the CMV MIE gene shows that the proposed procedure can detect as little as several (from 1 to 5) molecules of DNA.
ru
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
Биополимеры и клетка
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) для діагностики вірусної інфекції: цитомегаловірус людини
Polymrase Chain Reaction (PCR) for the diagnosis of virus infection: human cytomegalovirus
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
spellingShingle Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
Виноградская, Г.Р.
Горышин, И.Ю.
Новикова, Л.Н.
Плуталов, О.В.
Башмакова, М.А.
Берлин, Ю.А.
Цинзерлинг, В.А.
Шварц, Е.И.
Ланцов, В.А.
title_short Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
title_full Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
title_fullStr Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
title_full_unstemmed Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
title_sort полимеразная цепная реакция (пцр) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека
author Виноградская, Г.Р.
Горышин, И.Ю.
Новикова, Л.Н.
Плуталов, О.В.
Башмакова, М.А.
Берлин, Ю.А.
Цинзерлинг, В.А.
Шварц, Е.И.
Ланцов, В.А.
author_facet Виноградская, Г.Р.
Горышин, И.Ю.
Новикова, Л.Н.
Плуталов, О.В.
Башмакова, М.А.
Берлин, Ю.А.
Цинзерлинг, В.А.
Шварц, Е.И.
Ланцов, В.А.
publishDate 1991
language Russian
container_title Биополимеры и клетка
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
format Article
title_alt Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) для діагностики вірусної інфекції: цитомегаловірус людини
Polymrase Chain Reaction (PCR) for the diagnosis of virus infection: human cytomegalovirus
description Описана процедура быстрого, чувствительного а точного определения цитомегаловируса (ЦМВ) в тканях и биологических жидкостях человека с помощью термофильной ДНК-по ли ме разы из Thermus thermophilus. Процедура состоит из двух последовательных ПЦР. Первая включает 40 циклов (денатурация ДНК, отжиг праймеров и ДНК-полимеризация), выполняемых с двумя праймерами по 20 оснований, консервативная последовательность которых взята из гена MIE (major immediate early) ЦВМ. Вторая реакция включает от 20 до 50 циклов, аналогичных первым, но на основе 20-членных праймеров, фланкирующих внутреннюю часть фрагмента ДНК, намноженного ранее. Конечный фрагмент обнаруживается по окрашиванию бромистым этидием после электрофореза в полиакриламидном геле. Верификация искомой полосы включает ее рестрикционный анализ. С помощью плазмиды рСМ5018, несущей ген MIE вируса, показано, что предлагаемая процедура может выявлять столь малые количества ДНК, как несколько (от 1 до 5) плазмидных молекул. Описана процедура швидкого, чутливого та точного визначення цитомегаловірусу (ЦМВ) у тканинах і біологічних рідинах людини за допомогою термофільної ДНК-полімерази Thermus thermophilus. Процедура складається з двох послідовних ПЦР. У першій реакції проходить 40 циклів (денатурація ДНК, ренатурація праймерів і ДНК-полімерізація), що виконуються з двома праймерами по 20 основ, консервативна послідовність яких узята із гену MIE (major immediate early) ЦМВ. Друга реакція включає від 20 до 50 циклів, що відповідають першим, але на основі 20-членних праймерів, які ампліфікують внутрішню частину фрагменту ДНК (останній намножений раніше). Кінцевий фрагмент виявляється при фарбуванні бромистим етидієм після електрофорезу в поліакриламідному гелі. Веріфікація потрібної смуги провадиться і на·основі рестрикційного аналізу. За допомогою плазміди рСМ5018, що несе ген MIE вірусу, показано, що пропонована процедура може виявляти такі малі кількості ДНК, як декілька (від 1 до 5) плазмідних молекул. A rapid, sensitive and precise procedure of detecting cytomegalovirus (CMV) DNA in human tissue and biological liquid by means of the thermostable DNA-polymerase from Thermus thermophilus is described. The procedure consists of two consecutive PCRs. The-first one includes 40 cycles of denaturation, primer annealing and chain extension with two 20-base primers chosen from the conserved sequence ot MIE (major immediate early) gene of CMV. The second reaction includes from 20 up to 50 cycles consisting of the same steps but with 20-base primers chosen to amplify the internal part of the fragment amplified during the first reaction. The final fragment is detected by the ethidium bromide staining after polyacrylamide gel electrophoresis. Verification of the band includes restriction enzyme analysis. Use of pCM5018 plasmid bearing the CMV MIE gene shows that the proposed procedure can detect as little as several (from 1 to 5) molecules of DNA.
issn 0233-7657
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153530
citation_txt Полимеразная цепная реакция (ПЦР) для диагностики вирусной инфекции: цитомегаловирус человека / Г.Р. Виноградская, И.Ю. Горышин, Л.Н. Новикова, О.В. Плуталов, М.А. Башмакова, Ю.А. Берлин, В.А. Цинзерлинг, Е.И. Шварц, В.А. Ланцов // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 3. — С. 31-35. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT vinogradskaâgr polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnoiinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT goryšiniû polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnoiinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT novikovaln polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnoiinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT plutalovov polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnoiinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT bašmakovama polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnoiinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT berlinûa polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnoiinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT cinzerlingva polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnoiinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT švarcei polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnoiinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT lancovva polimeraznaâcepnaâreakciâpcrdlâdiagnostikivirusnoiinfekciicitomegalovirusčeloveka
AT vinogradskaâgr polímeraznalancûgovareakcíâplrdlâdíagnostikivírusnoíínfekcíícitomegalovíruslûdini
AT goryšiniû polímeraznalancûgovareakcíâplrdlâdíagnostikivírusnoíínfekcíícitomegalovíruslûdini
AT novikovaln polímeraznalancûgovareakcíâplrdlâdíagnostikivírusnoíínfekcíícitomegalovíruslûdini
AT plutalovov polímeraznalancûgovareakcíâplrdlâdíagnostikivírusnoíínfekcíícitomegalovíruslûdini
AT bašmakovama polímeraznalancûgovareakcíâplrdlâdíagnostikivírusnoíínfekcíícitomegalovíruslûdini
AT berlinûa polímeraznalancûgovareakcíâplrdlâdíagnostikivírusnoíínfekcíícitomegalovíruslûdini
AT cinzerlingva polímeraznalancûgovareakcíâplrdlâdíagnostikivírusnoíínfekcíícitomegalovíruslûdini
AT švarcei polímeraznalancûgovareakcíâplrdlâdíagnostikivírusnoíínfekcíícitomegalovíruslûdini
AT lancovva polímeraznalancûgovareakcíâplrdlâdíagnostikivírusnoíínfekcíícitomegalovíruslûdini
AT vinogradskaâgr polymrasechainreactionpcrforthediagnosisofvirusinfectionhumancytomegalovirus
AT goryšiniû polymrasechainreactionpcrforthediagnosisofvirusinfectionhumancytomegalovirus
AT novikovaln polymrasechainreactionpcrforthediagnosisofvirusinfectionhumancytomegalovirus
AT plutalovov polymrasechainreactionpcrforthediagnosisofvirusinfectionhumancytomegalovirus
AT bašmakovama polymrasechainreactionpcrforthediagnosisofvirusinfectionhumancytomegalovirus
AT berlinûa polymrasechainreactionpcrforthediagnosisofvirusinfectionhumancytomegalovirus
AT cinzerlingva polymrasechainreactionpcrforthediagnosisofvirusinfectionhumancytomegalovirus
AT švarcei polymrasechainreactionpcrforthediagnosisofvirusinfectionhumancytomegalovirus
AT lancovva polymrasechainreactionpcrforthediagnosisofvirusinfectionhumancytomegalovirus
first_indexed 2025-12-02T00:25:50Z
last_indexed 2025-12-02T00:25:50Z
_version_ 1850861246143791104

Схожі ресурси