Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro
Long-term cultivation of cell lines inevitably leads to genetic and epigenetic changes. The aim of this work was a comparative analysis of karyotype and level of the expression of reparative enzyme O6-methylguanine-DNA- methyltransferase (MGMT) at different stages of establishment and stabilization...
Saved in:
| Published in: | Вiopolymers and Cell |
|---|---|
| Date: | 2013 |
| Main Authors: | , , , , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | English |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2013
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153665 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro / L.L. Macewicz, V.O. Kushniruk, A.P. Iatsyshyna, K.V. Kotsarenko, V.V. Lylo, G.R. Akopyan, N.L. Huleuk, D.O. Mykytenko, L.L. Lukash // Вiopolymers and Cell. — 2013. — Т. 29, №. 6. — С. 480-486. — Бібліогр.: 24 назв. — англ. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-153665 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Macewicz, L.L. Kushniruk, V.O. Iatsyshyna, A.P. Kotsarenko, K.V. Lylo, V.V. Akopyan, G.R. Huleuk, N.L. Mykytenko, D.O. Lukash, L.L. 2019-06-14T12:14:32Z 2019-06-14T12:14:32Z 2013 Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro / L.L. Macewicz, V.O. Kushniruk, A.P. Iatsyshyna, K.V. Kotsarenko, V.V. Lylo, G.R. Akopyan, N.L. Huleuk, D.O. Mykytenko, L.L. Lukash // Вiopolymers and Cell. — 2013. — Т. 29, №. 6. — С. 480-486. — Бібліогр.: 24 назв. — англ. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00083D https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153665 576.32; 575.113; 577.15 Long-term cultivation of cell lines inevitably leads to genetic and epigenetic changes. The aim of this work was a comparative analysis of karyotype and level of the expression of reparative enzyme O6-methylguanine-DNA- methyltransferase (MGMT) at different stages of establishment and stabilization of human cell line 4BL and cell line of mouse germ cells G1. Methods. The set of methods was used to research the dynamics of karyotypes changes: the differential staining of chromosomes, FISH-method and comparative genomic hybridization. The level of MGMT expression was analyzed by PCR reaction and Western blot analysis. Results. General trends of establishment of mouse and human cell lines were revealed: at the first stage, which is characterized by increased structural instability of the genome, an increase in the MGMT expression was revealed while at the second stage of stabilization – a decrease in the expression. Therefore, almost complete disappearance of MGMT protein in unmodified form (24 kDa) is observed. Conclusions. Statistically significant correlation between MGMT repair enzyme and mutations induction processes during mammalian cell adaptation and cell line establishment to in vitro was described. Тривале культивування клітинних ліній неминуче призводить до виникнення генетичних та епігенетичних змін. Мета. Порівняльний аналіз каріотипу і рівня експресії репаративного ферменту О6-метилгуанін-ДНК метилтрансферази (MGMT) на різних етапах становлення та стабілізації клітинної лінії людини 4BL і лінії ембріональних гермінативних клітин миші G1. Методи. Зміни каріотипу в динаміці досліджували, використовуючи диференційне забарвлення хромосом, FISH-метод і порівняльну геномну гібридизацію. Ген MGMT та його експресію вивчали за допомогою ПЛР та Вестерн-блот аналізу. Результати. Період становлення ліній клітин миші та ліній клітин людини має загальні тенденції: на першому етапі, який характеризується підвищеною структурною нестабільністю геному, виявлено зростання рівня експресії гена MGMT, а на другому – етапі стабілізації – зниження рівня експресії даного гена. При цьому спостерігали практично повну відсутність немодифікованої форми білка MGMT (24 кДа). Висновки. Встановлено достовірну позитивну кореляцію рівня експресії репаративного ферменту MGMT з мутаційними процесами, які виникають при адаптації клітин до умов культивування у період становлення ліній клітин ссавців. Длительное культивирование клеточных линий неизбежно приводит к возникновению генетических и эпигенетических изменений. Цель Cравнительный анализ кариотипов и уровня экспрессии репаративного фермента MGMT на разных стадиях становления и стабилизации клеточной линии человека 4BL и линии эмбриональных герминативных клеток мыши G1. Методы. Исследовали изменение кариотипа в динамике с использованием дифференциальной окраски хромосом, FISH-метода и сравнительной геномной гибридизации. Ген MGMT и его экспрессию изучали с помощью ПЛР и Вестерн-блот-анализа. Результаты. Период становления клеточных линий человека и мыши характеризуется общими тенденциями: на первом этапе, где наблюдается повышенная структурная нестабильность генома, выявлено возрастание уровня экспрессии гена MGMT, а на втором – этапе стабилизации – снижение уровня экспрессии указанного гена. При этом отмечено практически полное отсутствие немодифицированной формы белка MGMT (24 кДа). Выводы. Обнаружена достоверная позитивная корреляция уровня экспрессии репаративного фермента MGMT с мутационными процессами, возникающими при адаптации клеток к условиям культивирования в период становления клеточных линий млекопитающих. en Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вiopolymers and Cell Genomics, Transcriptomics and Proteomics Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro Кореляція змін рівня мутагенезу і експресії репаративного ферменту О6-метилгуанін-ДНК метилтрансферази за становлення клітинних ліній in vitro Корреляция изменений уровня мутагенеза и экспрессии репаративного фермента MGMT при становлении клеточных линий in vitro Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro |
| spellingShingle |
Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro Macewicz, L.L. Kushniruk, V.O. Iatsyshyna, A.P. Kotsarenko, K.V. Lylo, V.V. Akopyan, G.R. Huleuk, N.L. Mykytenko, D.O. Lukash, L.L. Genomics, Transcriptomics and Proteomics |
| title_short |
Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro |
| title_full |
Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro |
| title_fullStr |
Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro |
| title_full_unstemmed |
Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro |
| title_sort |
correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme o6-methylguanine dna methyltransferase during establishment of cell lines in vitro |
| author |
Macewicz, L.L. Kushniruk, V.O. Iatsyshyna, A.P. Kotsarenko, K.V. Lylo, V.V. Akopyan, G.R. Huleuk, N.L. Mykytenko, D.O. Lukash, L.L. |
| author_facet |
Macewicz, L.L. Kushniruk, V.O. Iatsyshyna, A.P. Kotsarenko, K.V. Lylo, V.V. Akopyan, G.R. Huleuk, N.L. Mykytenko, D.O. Lukash, L.L. |
| topic |
Genomics, Transcriptomics and Proteomics |
| topic_facet |
Genomics, Transcriptomics and Proteomics |
| publishDate |
2013 |
| language |
English |
| container_title |
Вiopolymers and Cell |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Кореляція змін рівня мутагенезу і експресії репаративного ферменту О6-метилгуанін-ДНК метилтрансферази за становлення клітинних ліній in vitro Корреляция изменений уровня мутагенеза и экспрессии репаративного фермента MGMT при становлении клеточных линий in vitro |
| description |
Long-term cultivation of cell lines inevitably leads to genetic and epigenetic changes. The aim of this work was a comparative analysis of karyotype and level of the expression of reparative enzyme O6-methylguanine-DNA- methyltransferase (MGMT) at different stages of establishment and stabilization of human cell line 4BL and cell line of mouse germ cells G1. Methods. The set of methods was used to research the dynamics of karyotypes changes: the differential staining of chromosomes, FISH-method and comparative genomic hybridization. The level of MGMT expression was analyzed by PCR reaction and Western blot analysis. Results. General trends of establishment of mouse and human cell lines were revealed: at the first stage, which is characterized by increased structural instability of the genome, an increase in the MGMT expression was revealed while at the second stage of stabilization – a decrease in the expression. Therefore, almost complete disappearance of MGMT protein in unmodified form (24 kDa) is observed. Conclusions. Statistically significant correlation between MGMT repair enzyme and mutations induction processes during mammalian cell adaptation and cell line establishment to in vitro was described.
Тривале культивування клітинних ліній неминуче призводить до виникнення генетичних та епігенетичних змін. Мета. Порівняльний аналіз каріотипу і рівня експресії репаративного ферменту О6-метилгуанін-ДНК метилтрансферази (MGMT) на різних етапах становлення та стабілізації клітинної лінії людини 4BL і лінії ембріональних гермінативних клітин миші G1. Методи. Зміни каріотипу в динаміці досліджували, використовуючи диференційне забарвлення хромосом, FISH-метод і порівняльну геномну гібридизацію. Ген MGMT та його експресію вивчали за допомогою ПЛР та Вестерн-блот аналізу. Результати. Період становлення ліній клітин миші та ліній клітин людини має загальні тенденції: на першому етапі, який характеризується підвищеною структурною нестабільністю геному, виявлено зростання рівня експресії гена MGMT, а на другому – етапі стабілізації – зниження рівня експресії даного гена. При цьому спостерігали практично повну відсутність немодифікованої форми білка MGMT (24 кДа). Висновки. Встановлено достовірну позитивну кореляцію рівня експресії репаративного ферменту MGMT з мутаційними процесами, які виникають при адаптації клітин до умов культивування у період становлення ліній клітин ссавців.
Длительное культивирование клеточных линий неизбежно приводит к возникновению генетических и эпигенетических изменений. Цель Cравнительный анализ кариотипов и уровня экспрессии репаративного фермента MGMT на разных стадиях становления и стабилизации клеточной линии человека 4BL и линии эмбриональных герминативных клеток мыши G1. Методы. Исследовали изменение кариотипа в динамике с использованием дифференциальной окраски хромосом, FISH-метода и сравнительной геномной гибридизации. Ген MGMT и его экспрессию изучали с помощью ПЛР и Вестерн-блот-анализа. Результаты. Период становления клеточных линий человека и мыши характеризуется общими тенденциями: на первом этапе, где наблюдается повышенная структурная нестабильность генома, выявлено возрастание уровня экспрессии гена MGMT, а на втором – этапе стабилизации – снижение уровня экспрессии указанного гена. При этом отмечено практически полное отсутствие немодифицированной формы белка MGMT (24 кДа). Выводы. Обнаружена достоверная позитивная корреляция уровня экспрессии репаративного фермента MGMT с мутационными процессами, возникающими при адаптации клеток к условиям культивирования в период становления клеточных линий млекопитающих.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153665 |
| citation_txt |
Correlation of mutagenesis level with expression of reparative enzyme O6-methylguanine DNA methyltransferase during establishment of cell lines in vitro / L.L. Macewicz, V.O. Kushniruk, A.P. Iatsyshyna, K.V. Kotsarenko, V.V. Lylo, G.R. Akopyan, N.L. Huleuk, D.O. Mykytenko, L.L. Lukash // Вiopolymers and Cell. — 2013. — Т. 29, №. 6. — С. 480-486. — Бібліогр.: 24 назв. — англ. |
| work_keys_str_mv |
AT macewiczll correlationofmutagenesislevelwithexpressionofreparativeenzymeo6methylguaninednamethyltransferaseduringestablishmentofcelllinesinvitro AT kushnirukvo correlationofmutagenesislevelwithexpressionofreparativeenzymeo6methylguaninednamethyltransferaseduringestablishmentofcelllinesinvitro AT iatsyshynaap correlationofmutagenesislevelwithexpressionofreparativeenzymeo6methylguaninednamethyltransferaseduringestablishmentofcelllinesinvitro AT kotsarenkokv correlationofmutagenesislevelwithexpressionofreparativeenzymeo6methylguaninednamethyltransferaseduringestablishmentofcelllinesinvitro AT lylovv correlationofmutagenesislevelwithexpressionofreparativeenzymeo6methylguaninednamethyltransferaseduringestablishmentofcelllinesinvitro AT akopyangr correlationofmutagenesislevelwithexpressionofreparativeenzymeo6methylguaninednamethyltransferaseduringestablishmentofcelllinesinvitro AT huleuknl correlationofmutagenesislevelwithexpressionofreparativeenzymeo6methylguaninednamethyltransferaseduringestablishmentofcelllinesinvitro AT mykytenkodo correlationofmutagenesislevelwithexpressionofreparativeenzymeo6methylguaninednamethyltransferaseduringestablishmentofcelllinesinvitro AT lukashll correlationofmutagenesislevelwithexpressionofreparativeenzymeo6methylguaninednamethyltransferaseduringestablishmentofcelllinesinvitro AT macewiczll korelâcíâzmínrívnâmutagenezuíekspresííreparativnogofermentuo6metilguaníndnkmetiltransferazizastanovlennâklítinnihlíníiinvitro AT kushnirukvo korelâcíâzmínrívnâmutagenezuíekspresííreparativnogofermentuo6metilguaníndnkmetiltransferazizastanovlennâklítinnihlíníiinvitro AT iatsyshynaap korelâcíâzmínrívnâmutagenezuíekspresííreparativnogofermentuo6metilguaníndnkmetiltransferazizastanovlennâklítinnihlíníiinvitro AT kotsarenkokv korelâcíâzmínrívnâmutagenezuíekspresííreparativnogofermentuo6metilguaníndnkmetiltransferazizastanovlennâklítinnihlíníiinvitro AT lylovv korelâcíâzmínrívnâmutagenezuíekspresííreparativnogofermentuo6metilguaníndnkmetiltransferazizastanovlennâklítinnihlíníiinvitro AT akopyangr korelâcíâzmínrívnâmutagenezuíekspresííreparativnogofermentuo6metilguaníndnkmetiltransferazizastanovlennâklítinnihlíníiinvitro AT huleuknl korelâcíâzmínrívnâmutagenezuíekspresííreparativnogofermentuo6metilguaníndnkmetiltransferazizastanovlennâklítinnihlíníiinvitro AT mykytenkodo korelâcíâzmínrívnâmutagenezuíekspresííreparativnogofermentuo6metilguaníndnkmetiltransferazizastanovlennâklítinnihlíníiinvitro AT lukashll korelâcíâzmínrívnâmutagenezuíekspresííreparativnogofermentuo6metilguaníndnkmetiltransferazizastanovlennâklítinnihlíníiinvitro AT macewiczll korrelâciâizmeneniiurovnâmutagenezaiékspressiireparativnogofermentamgmtpristanovleniikletočnyhliniiinvitro AT kushnirukvo korrelâciâizmeneniiurovnâmutagenezaiékspressiireparativnogofermentamgmtpristanovleniikletočnyhliniiinvitro AT iatsyshynaap korrelâciâizmeneniiurovnâmutagenezaiékspressiireparativnogofermentamgmtpristanovleniikletočnyhliniiinvitro AT kotsarenkokv korrelâciâizmeneniiurovnâmutagenezaiékspressiireparativnogofermentamgmtpristanovleniikletočnyhliniiinvitro AT lylovv korrelâciâizmeneniiurovnâmutagenezaiékspressiireparativnogofermentamgmtpristanovleniikletočnyhliniiinvitro AT akopyangr korrelâciâizmeneniiurovnâmutagenezaiékspressiireparativnogofermentamgmtpristanovleniikletočnyhliniiinvitro AT huleuknl korrelâciâizmeneniiurovnâmutagenezaiékspressiireparativnogofermentamgmtpristanovleniikletočnyhliniiinvitro AT mykytenkodo korrelâciâizmeneniiurovnâmutagenezaiékspressiireparativnogofermentamgmtpristanovleniikletočnyhliniiinvitro AT lukashll korrelâciâizmeneniiurovnâmutagenezaiékspressiireparativnogofermentamgmtpristanovleniikletočnyhliniiinvitro |
| first_indexed |
2025-11-27T17:08:14Z |
| last_indexed |
2025-11-27T17:08:14Z |
| _version_ |
1850852581474041856 |