DNA import competence and mitochondrial genetics

Aim. To understand the mechanism(s) underlying mitochondrial competence for DNA uptake and to exploit these pathways for the development of in vivo models of gene therapy. Methods. DNA uptake into isolated mitochondria from plant or from mutant Saccharomyces cerevisiae defective for mitochondrial pr...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in:Вiopolymers and Cell
Date:2014
Main Authors: Weber-Lotfi, F., Mileshina, D.V., Ibrahim, N., Koulintchenko, M.V., D'Souza, G., Saxena, V., Konstantinov, Yu.M., Lightowlers, R.N., Dietrich, A.
Format: Article
Language:English
Published: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2014
Subjects:
Online Access:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153732
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:DNA import competence and mitochondrial genetics / F. Weber-Lotfi, D.V. Mileshina, N. Ibrahim, M.V. Koulintchenko, G. D'Souza, V. Saxena, Yu.M. Konstantinov, R.N. Lightowlers, A. Dietrich // Вiopolymers and Cell. — 2014. — Т. 30, № 1. — С. 71-73. — Бібліогр.: 8 назв. — англ.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-153732
record_format dspace
spelling Weber-Lotfi, F.
Mileshina, D.V.
Ibrahim, N.
Koulintchenko, M.V.
D'Souza, G.
Saxena, V.
Konstantinov, Yu.M.
Lightowlers, R.N.
Dietrich, A.
2019-06-14T14:44:37Z
2019-06-14T14:44:37Z
2014
DNA import competence and mitochondrial genetics / F. Weber-Lotfi, D.V. Mileshina, N. Ibrahim, M.V. Koulintchenko, G. D'Souza, V. Saxena, Yu.M. Konstantinov, R.N. Lightowlers, A. Dietrich // Вiopolymers and Cell. — 2014. — Т. 30, № 1. — С. 71-73. — Бібліогр.: 8 назв. — англ.
0233-7657
DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000881
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153732
577
Aim. To understand the mechanism(s) underlying mitochondrial competence for DNA uptake and to exploit these pathways for the development of in vivo models of gene therapy. Methods. DNA uptake into isolated mitochondria from plant or from mutant Saccharomyces cerevisiae defective for mitochondrial proteins and carriers, biochemical approaches and transfection of mammalian cells with DNA bound to mitochondriotropic liposomes. Results. Special focus on the inner membrane showed the involvement of isoforms of the adenine nucleotide translocator and the contribution of proteins controlling mitochondrial morphology in DNA uptake into yeast organelles. Transfection assays led to significant incorporation of a mitochondrial construct into mammalian cells and expression of a marker gene. Conclusions. The data imply that there are multiple mitochondrial DNA import pathways. On the other hand, preliminary results suggest that mitochondriotropic liposomes can deliver DNA to mitochondria in live mammalian cells.
Мета. Визначити механізми поглинання ДНК мітохондріями і використати їх для удосконалення існуючих моделей генної терапії in vivo. Методи. Поглинання ДНК ізольованими мітохондріями рослин або мітохондріями мутантних ліній Saccharomyces cerevisiae, дефектних за мітохондріальними білками та переносниками, біохімічні підходи і трансфекція в клітини ссавців ДНК, зв’язаної з мітохондріотропними ліпосомами. Результати. Основним підсумком вивчення внутрішньої мембрани виявилося встановлення того факта, що до процесу перенесення ДНК дріжджовими органелами залучені кілька ізоформ аденіннуклеотидтранслокази, а також білки, які контролюють мітохондріальну морфологію. В експериментах з трансфекції ДНК у клітини ссавців виявлено вбудовування в них мітохондріальної конструкції і експресію маркерного гена. Висновки. Отримані дані дозволяють припустити існування декількох механизмів імпорту ДНК у мітохондрії. Проте є попередні результати, які показують, що мітохондріотропні ліпосоми можуть бути використані для доставки ДНК у мітохондрії клітин ссавців in vivo.
Цель. Выяснить механизмы поглощения ДНК митохондриями и использовать их для усовершенствования существующих моделей генной терапии in vivo. Методы. Поглощение ДНК изолированными митохондриями растений или митохондриями мутантных линий Saccharomyces cerevisiae, дефектных по митохондриальным белкам и переносчикам, биохимические подходы и трансфекция в клетки млекопитающих ДНК, связанной с митохондриотропными липосомами. Результаты. Основным итогом изучения внутренней мембраны оказалось установление того факта, что в процесс переноса ДНК дрожжевыми органеллами вовлечены несколько изоформ адениннуклеотидтранслоказы, а также белки, контролирующие митохондриальную морфологию. В экспериментах по трансфекции ДНК в клетки млекопитающих выявлены встраивание в них митохондриальной конструкции и экспрессию маркерного гена. Выводы. Полученные данные позволяют предположить существование нескольких механизмов импорта ДНК в митохондрии. Однако есть предварительные результаты, показывающие, что митохондриотропные липосомы могут быть использованы для доставки ДНК в митохондрии клеток млекопитающих in vivo.
en
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
Вiopolymers and Cell
Short Communications
DNA import competence and mitochondrial genetics
Природна здатність мітохондрій до імпорту ДНК і мітохондріальна генетика
Природная способность митохондрий к импорту ДНК и митохондриальная генетика
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title DNA import competence and mitochondrial genetics
spellingShingle DNA import competence and mitochondrial genetics
Weber-Lotfi, F.
Mileshina, D.V.
Ibrahim, N.
Koulintchenko, M.V.
D'Souza, G.
Saxena, V.
Konstantinov, Yu.M.
Lightowlers, R.N.
Dietrich, A.
Short Communications
title_short DNA import competence and mitochondrial genetics
title_full DNA import competence and mitochondrial genetics
title_fullStr DNA import competence and mitochondrial genetics
title_full_unstemmed DNA import competence and mitochondrial genetics
title_sort dna import competence and mitochondrial genetics
author Weber-Lotfi, F.
Mileshina, D.V.
Ibrahim, N.
Koulintchenko, M.V.
D'Souza, G.
Saxena, V.
Konstantinov, Yu.M.
Lightowlers, R.N.
Dietrich, A.
author_facet Weber-Lotfi, F.
Mileshina, D.V.
Ibrahim, N.
Koulintchenko, M.V.
D'Souza, G.
Saxena, V.
Konstantinov, Yu.M.
Lightowlers, R.N.
Dietrich, A.
topic Short Communications
topic_facet Short Communications
publishDate 2014
language English
container_title Вiopolymers and Cell
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
format Article
title_alt Природна здатність мітохондрій до імпорту ДНК і мітохондріальна генетика
Природная способность митохондрий к импорту ДНК и митохондриальная генетика
description Aim. To understand the mechanism(s) underlying mitochondrial competence for DNA uptake and to exploit these pathways for the development of in vivo models of gene therapy. Methods. DNA uptake into isolated mitochondria from plant or from mutant Saccharomyces cerevisiae defective for mitochondrial proteins and carriers, biochemical approaches and transfection of mammalian cells with DNA bound to mitochondriotropic liposomes. Results. Special focus on the inner membrane showed the involvement of isoforms of the adenine nucleotide translocator and the contribution of proteins controlling mitochondrial morphology in DNA uptake into yeast organelles. Transfection assays led to significant incorporation of a mitochondrial construct into mammalian cells and expression of a marker gene. Conclusions. The data imply that there are multiple mitochondrial DNA import pathways. On the other hand, preliminary results suggest that mitochondriotropic liposomes can deliver DNA to mitochondria in live mammalian cells. Мета. Визначити механізми поглинання ДНК мітохондріями і використати їх для удосконалення існуючих моделей генної терапії in vivo. Методи. Поглинання ДНК ізольованими мітохондріями рослин або мітохондріями мутантних ліній Saccharomyces cerevisiae, дефектних за мітохондріальними білками та переносниками, біохімічні підходи і трансфекція в клітини ссавців ДНК, зв’язаної з мітохондріотропними ліпосомами. Результати. Основним підсумком вивчення внутрішньої мембрани виявилося встановлення того факта, що до процесу перенесення ДНК дріжджовими органелами залучені кілька ізоформ аденіннуклеотидтранслокази, а також білки, які контролюють мітохондріальну морфологію. В експериментах з трансфекції ДНК у клітини ссавців виявлено вбудовування в них мітохондріальної конструкції і експресію маркерного гена. Висновки. Отримані дані дозволяють припустити існування декількох механизмів імпорту ДНК у мітохондрії. Проте є попередні результати, які показують, що мітохондріотропні ліпосоми можуть бути використані для доставки ДНК у мітохондрії клітин ссавців in vivo. Цель. Выяснить механизмы поглощения ДНК митохондриями и использовать их для усовершенствования существующих моделей генной терапии in vivo. Методы. Поглощение ДНК изолированными митохондриями растений или митохондриями мутантных линий Saccharomyces cerevisiae, дефектных по митохондриальным белкам и переносчикам, биохимические подходы и трансфекция в клетки млекопитающих ДНК, связанной с митохондриотропными липосомами. Результаты. Основным итогом изучения внутренней мембраны оказалось установление того факта, что в процесс переноса ДНК дрожжевыми органеллами вовлечены несколько изоформ адениннуклеотидтранслоказы, а также белки, контролирующие митохондриальную морфологию. В экспериментах по трансфекции ДНК в клетки млекопитающих выявлены встраивание в них митохондриальной конструкции и экспрессию маркерного гена. Выводы. Полученные данные позволяют предположить существование нескольких механизмов импорта ДНК в митохондрии. Однако есть предварительные результаты, показывающие, что митохондриотропные липосомы могут быть использованы для доставки ДНК в митохондрии клеток млекопитающих in vivo.
issn 0233-7657
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153732
citation_txt DNA import competence and mitochondrial genetics / F. Weber-Lotfi, D.V. Mileshina, N. Ibrahim, M.V. Koulintchenko, G. D'Souza, V. Saxena, Yu.M. Konstantinov, R.N. Lightowlers, A. Dietrich // Вiopolymers and Cell. — 2014. — Т. 30, № 1. — С. 71-73. — Бібліогр.: 8 назв. — англ.
work_keys_str_mv AT weberlotfif dnaimportcompetenceandmitochondrialgenetics
AT mileshinadv dnaimportcompetenceandmitochondrialgenetics
AT ibrahimn dnaimportcompetenceandmitochondrialgenetics
AT koulintchenkomv dnaimportcompetenceandmitochondrialgenetics
AT dsouzag dnaimportcompetenceandmitochondrialgenetics
AT saxenav dnaimportcompetenceandmitochondrialgenetics
AT konstantinovyum dnaimportcompetenceandmitochondrialgenetics
AT lightowlersrn dnaimportcompetenceandmitochondrialgenetics
AT dietricha dnaimportcompetenceandmitochondrialgenetics
AT weberlotfif prirodnazdatnístʹmítohondríidoímportudnkímítohondríalʹnagenetika
AT mileshinadv prirodnazdatnístʹmítohondríidoímportudnkímítohondríalʹnagenetika
AT ibrahimn prirodnazdatnístʹmítohondríidoímportudnkímítohondríalʹnagenetika
AT koulintchenkomv prirodnazdatnístʹmítohondríidoímportudnkímítohondríalʹnagenetika
AT dsouzag prirodnazdatnístʹmítohondríidoímportudnkímítohondríalʹnagenetika
AT saxenav prirodnazdatnístʹmítohondríidoímportudnkímítohondríalʹnagenetika
AT konstantinovyum prirodnazdatnístʹmítohondríidoímportudnkímítohondríalʹnagenetika
AT lightowlersrn prirodnazdatnístʹmítohondríidoímportudnkímítohondríalʹnagenetika
AT dietricha prirodnazdatnístʹmítohondríidoímportudnkímítohondríalʹnagenetika
AT weberlotfif prirodnaâsposobnostʹmitohondriikimportudnkimitohondrialʹnaâgenetika
AT mileshinadv prirodnaâsposobnostʹmitohondriikimportudnkimitohondrialʹnaâgenetika
AT ibrahimn prirodnaâsposobnostʹmitohondriikimportudnkimitohondrialʹnaâgenetika
AT koulintchenkomv prirodnaâsposobnostʹmitohondriikimportudnkimitohondrialʹnaâgenetika
AT dsouzag prirodnaâsposobnostʹmitohondriikimportudnkimitohondrialʹnaâgenetika
AT saxenav prirodnaâsposobnostʹmitohondriikimportudnkimitohondrialʹnaâgenetika
AT konstantinovyum prirodnaâsposobnostʹmitohondriikimportudnkimitohondrialʹnaâgenetika
AT lightowlersrn prirodnaâsposobnostʹmitohondriikimportudnkimitohondrialʹnaâgenetika
AT dietricha prirodnaâsposobnostʹmitohondriikimportudnkimitohondrialʹnaâgenetika
first_indexed 2025-11-26T14:37:06Z
last_indexed 2025-11-26T14:37:06Z
_version_ 1850624703523192832
fulltext 71 UDC 577 DNA import competence and mitochondrial genetics F. Weber-Lotfi1, D. V. Mileshina1, 2, N. Ibrahim1, 3, M. V. Koulintchenko1, 2, 3, G. G. M. D’Souza4, V. Saxena4, Yu. M. Konstantinov2, R. N. Lightowlers3, A. Dietrich1 1Institute of Plant Molecular Biology, CNRS and University of Strasbourg (UdS) 12, General Zimmer Str., Strasbourg, France, 67084 2Siberian Institute Plant Physiology and Biochemistry, Siberian Branch of the RAS 132, Lermontova Str., Irkutsk, Russian Federation, 664033 3Institute for Cell and Molecular Biosciences, Medical School, Newcastle University Framlington Place, Newcastle upon Tyne, UK, NE2 4HH 4School of Pharmacy, MCPHS University, 179, Longwood Ave., Boston, USA, MA 02115 andre.dietrich@ibmp-cnrs.unistra.fr Aim. To understand the mechanism(s) underlying mitochondrial competence for DNA uptake and to exploit the- se pathways for the development of in vivo models of gene therapy. Methods. DNA uptake into isolated mito- chondria from plant or from mutant Saccharomyces cerevisiae defective for mitochondrial proteins and carriers, biochemical approaches and transfection of mammalian cells with DNA bound to mitochondriotropic liposo- mes. Results. Special focus on the inner membrane showed the involvement of isoforms of the adenine nucleotide translocator and the contribution of proteins controlling mitochondrial morphology in DNA uptake into yeast or- ganelles. Transfection assays led to significant incorporation of a mitochondrial construct into mammalian cells and expression of a marker gene. Conclusions. The data imply that there are multiple mitochondrial DNA im- port pathways. On the other hand, preliminary results suggest that mitochondriotropic liposomes can deliver DNA to mitochondria in live mammalian cells. Keywords: mitochondria, DNA import, mitochondrial transfection, plant, Saccharomyces cerevisiae, mammal. Introduction. Mitochondrial genome expression is es- sential for organelle functional efficiency and intercom- partment cross-talk. Manipulation of mitochondrial ge- netics is thus of interest for a range of fundamental in- vestigations and is appealing to treat neurodegenerative diseases caused by organelle DNA mutations. In plants, mitochondrial genetics underlies key breeding tools. Given the importance of these issues, transforming mi- tochondria has been a long standing goal that was unfor- tunately reached only in a couple of unicellular orga- nisms. Contrasting with the failure to transform the or- ganelles in whole cells, we established that isolated plant and mammalian mitochondria can functionally import double-stranded DNA through an active mechanism [1, 2]. The process is sensitive to a number of effectors and can accommodate large size linear DNA [3]. Remarkab- ly, the imported DNA functionally joins the organelle genetic system. Marker sequences under the control of a mitochondrial promoter are expressed in organello [1, 2]. Imported DNA carrying oxidative lesions is repaired [4, 5]. Constructs carrying fragments of mitochondrial DNA undergo homologous recombination with the resi- dent DNA [6]. On that basis, we aim to understand the mechanism(s) underlying mitochondrial competence for DNA uptake and to develop cell uptake followed by mi- tochondrial targeting of functional gene constructs. Materials and methods. We developed DNA upta- ke experiments with mitochondria isolated from potato (Solanum tuberosum) or from Saccharomyces cerevi- siae mutants defective for various nucleus-encoded mi- ISSN 0233–7657. Biopolymers and Cell. 2014. Vol. 30. N 1. P. 71–73 doi: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000881 Ó Institute of Molecular Biology and Genetics, NAS of Ukraine, 2014 tochondrial proteins and carriers. We used 1–2.3 kb ra- diolabeled DNA fragments as substrates. Isolation of mitochondria and uptake assays were performed as de- scribed earlier [1, 7]. For mitochondrial targeting of DNA in mammalian cells, a liposomal formulation was prepared by a standard film hydration method [8]. A 2.2 kb DNA construct was complexed with the liposo- mal carrier and incubated with a rat cell culture. qPCR and RT-qPCR analyses assessed the level of cell-inter- nalized construct and putative transcription. Results and discussion. The voltage-dependent ani- on channel (VDAC) seems to be involved in DNA trans- location through the mitochondrial outer membrane [1, 2, 7]. For the inner membrane, inhibition studies of the uptake using specific effectors pointed to an involve- ment of the adenine nucleotide translocator in plants [1], but the challenge of understanding which channel(s) can be recruited or hijacked by double-stranded DNA mole- cules remains mostly open. In the present studies, we used both biochemical approaches and S. cerevisiae genetic tools to identify the still elusive inner membrane pro- teins participating in mitochondrial DNA import. Stri- kingly, among the candidates from the inner membrane carrier family selected on the basis of biochemical data with plant organelles, only the two minor forms of the adenine nucleotide translocator turned out to be requi- red for optimal DNA translocation into isolated yeast mitochondria (Figure). Conversely, we highlighted a pu- tative contribution of proteins that control mitochond- rial morphology in S. cerevisiae. Building on the hypothesis that the competence for DNA uptake is also a property of the organelles in vivo, we attempted to use nanocarriers to target DNA to mito- chondria in intact cells. We explored the use of a mito- chondriotropic liposomal formulation to deliver a DNA construct encoding a recoded green fluorescent protein (gfp) gene controled by a rat mitochondrial promoter in- to the mitochondria in live rat cells. In comparison to free DNA and vehicle controls, incubation of the cells with liposome/DNA complexes led to significant incor- poration of the construct and generation of gfp mRNA. Conclusions. Taken together, our data imply that the- re are significant variations in the mitochondrial DNA import mechanism between different organisms and that even in a given organism multiple pathways might ope- rate. Our first in vivo results suggest that mitochond- riotropic liposomes can deliver DNA into mitochond- ria of live mammalian cells, potentially opening novel prospects for mitochondrial transfection. Funding. This work was supported by regular fun- ding from the CNRS and the University of Strasbourg, as well as by the Investissements d’Avenir from the French Ministry for Research (grant number ANR-11-LABX- 0057_MITOCROSS). Ïðè ðîä íà çäàòí³ñòü ì³òî õîíäð³é äî ³ìïîð òó ÄÍÊ ³ ì³òî õîíäð³àëü íà ãå íå òè êà Ô. Âå áåð-Ëîòô³, Ä. Â. ̳ëå øè íà, Í. ²áðàã³ì, Ì. Â. Êóë³í÷åí êî, Ã. Ã. Ì. Äñó çà, Â. Ñàê ñå íà, Þ. Ì. Êîí ñòàí òè íîâ, Ð. Í. Ëàé òà ó åðñ, À. Äèò ðèø Ðå çþ ìå Ìåòà. Âèç íà ÷è òè ìå õàí³çìè ïî ãëè íàí íÿ ÄÍÊ ì³òî õîíäð³ÿìè ³ âè- êî ðèñ òà òè ¿õ äëÿ óäîñ êî íà ëåí íÿ ³ñíó þ ÷èõ ìî äå ëåé ãåí íî¿ òå ðàﳿ 72 WEBER-LOTFI F. ET AL. Import assay Incubation of mitochondria with radiolabeled dsDNA DNase I treatment Nucleic acid extraction and analysis by Southern blot A B 2.3 kb PI ® MgCl2 2 mM ATP 2 mM - + - + - + - + - - + + - - + + Parental Daac 1, 2, 3 DNA import into mitochondria from S. cerevisiae deleted for the three isoforms of adenine nucleotide translocator (Daac 1,2,3) is impaired: A – scheme of an in vitro DNA import assay with isolated mitochondria (dsDNA: double-stranded DNA); B – import of radiolabeled Zea mays 2.3 kb mitochondrial linear plasmid into isolated mitochondria from the parental or the deleted S. cerevisiae strain, without or with addition of MgCl 2 and /or ATP in the reaction medium. Migration of the 2.3 kb import substrate is indicated by an arrow. Addition of ATP and MgCl 2 still enhances DNA import into mitochondria from the deleted strain. When using mitochondria isolated from an S. cerevisiae strain deleted for only the major form of the adenine nucleotide translocator (Daac 2), DNA import was not affected (not shown) in vivo. Ìå òî äè. Ïîã ëè íàí íÿ ÄÍÊ ³çîëü î âà íè ìè ì³òî õîíäð³ÿìè ðîñ ëèí àáî ì³òî õîíäð³ÿìè ìó òàí òíèõ ë³í³é Saccharomyces cerevi- siae, äå ôåê òíèõ çà ì³òî õîíäð³àëü íè ìè á³ëêà ìè òà ïå ðå íîñ íè êà ìè, á³îõ³ì³÷í³ ï³äõî äè ³ òðàíñ ôåêö³ÿ â êë³òèíè ññàâö³â ÄÍÊ, çâ’ÿ çà íî¿ ç ì³òî õîíäð³îò ðîï íè ìè ë³ïî ñî ìà ìè. Ðå çóëü òà òè. Îñíîâ íèì ï³ä- ñóì êîì âèâ ÷åí íÿ âíóòð³øíüî¿ ìåì áðà íè âè ÿ âè ëî ñÿ âñòà íîâ ëåí íÿ òîãî ôàê òà, ùî äî ïðî öå ñó ïå ðåíå ñåí íÿ ÄÍÊ äð³æäæî âè ìè îðãà - íå ëà ìè çà ëó ÷åí³ ê³ëüêà ³çî ôîðì àäåí³ííóê ëå î òèä òðàí ñëî êà çè, à òà êîæ á³ëêè, ÿê³ êîí òðî ëþ þòü ì³òî õîíäð³àëü íó ìîð ôî ëîã³þ.  åêñïå ðè ìåí òàõ ç òðàíñ ôåêö³¿ ÄÍÊ ó êë³òèíè ññàâö³â âè ÿâ ëå íî âáó- äîâóâàí íÿ â íèõ ì³òî õîíäð³àëü íî¿ êîíñòðóêö³¿ ³ åêñïðåñ³þ ìàð êåð - íî ãî ãåíà. Âèñ íîâ êè. Îòðè ìàí³ äàí³ äîç âî ëÿ þòü ïðè ïóñ òè òè ³ñíó - âàí íÿ äåê³ëüêîõ ìå õà íèçì³â ³ìïîð òó ÄÍÊ ó ì³òî õîíäð³¿. Ïðî òå º ïî ïå ðåäí³ ðå çóëü òà òè, ÿê³ ïî êà çó þòü, ùî ì³òî õîíäð³îò ðîïí³ ë³ïî - ñî ìè ìî æóòü áóòè âè êî ðèñ òàí³ äëÿ äîñ òàâ êè ÄÍÊ ó ì³òî õîíä𳿠êë³òèí ññàâö³â in vivo. Êëþ ÷îâ³ ñëî âà: ì³òî õîíäð³ÿ, ³ìïîðò ÄÍÊ, òðàíñ ôåêö³ÿ ì³òî - õîíäð³é, ðîñ ëè íà, Saccharomyces cerevisiae, ññà âåöü. Ïðèðîäíàÿ ñïî ñîá íîñòü ìè òî õîí äðèé ê èì ïîð òó ÄÍÊ è ìè òî õîí äðèàëüíàÿ ãå íå òè êà Ô. Âå áåð-Ëîò ôè, Ä. Â. Ìè ëå øè íà, Í. Èáðà ãèì, Ì. Â. Êó ëèí ÷åí êî, Ã. Ã. Ì. Äñó çà, Â. Ñàê ñå íà, Þ. Ì. Êîí ñòàí òè íîâ, Ð. Í. Ëàé òà ó ýðñ, À. Äèò ðèø Ðå çþ ìå Öåëü. Âû ÿñ íèòü ìå õà íèç ìû ïîãëî ùå íèÿ ÄÍÊ ìè òî õîí äðè ÿ ìè è èñ- ïî ëüçîâàòü èõ äëÿ óñî âåð øå íñòâî âà íèÿ ñó ùåñ òâó þ ùèõ ìî äå ëåé ãåííîé òå ðà ïèè in vivo. Ìå òî äû. Ïîã ëî ùå íèå ÄÍÊ èçî ëè ðî âàí íû- ìè ìè òî õîí äðè ÿ ìè ðàñ òå íèé èëè ìè òî õîí äðè ÿ ìè ìó òàí òíûõ ëè íèé Saccharomyces cerevisiae, äå ôåê òíûõ ïî ìè òî õîí äðè àëü - íûì áåë êàì è ïå ðå íîñ ÷è êàì, áè î õè ìè ÷åñ êèå ïîä õî äû è òðàíñ ôåê - öèÿ â êëåò êè ìëå êî ïè òà þ ùèõ ÄÍÊ, ñâÿ çàí íîé ñ ìè òî õîí äðèî- òðîïíûìè ëè ïî ñî ìà ìè. Ðå çóëü òà òû. Îñíîâ íûì èòî ãîì èç ó÷å íèÿ âíóòðåí íåé ìåì áðà íû îêà çà ëîñü óñòà íîâ ëå íèå òîãî ôàê òà, ÷òî â ïðî öåññ ïå ðå íî ñà ÄÍÊ äðîæ æå âû ìè îðãà íåë ëà ìè âîâ ëå ÷å íû íå - ñêîëü êî èçî ôîðì àäå íèí íóê ëå î òèäòðàíñ ëî êà çû, à òàê æå áåë êè, êîíòðî ëè ðó þ ùèå ìè òî õîí äðè àëü íóþ ìîð ôî ëî ãèþ.  ýêñ ïå ðè ìåí- òàõ ïî òðàíñ ôåê öèè ÄÍÊ â êëåò êè ìëå êî ïè òà þ ùèõ âû ÿâ ëåíû âñòðà è âà íèå â íèõ ìè òî õîí äðè àëü íîé êî íñòðóê öèè è ýêñ ïðåñ ñèþ ìàð êåð íî ãî ãåíà. Âû âî äû. Ïî ëó ÷åí íûå äàí íûå ïî çâî ëÿ þò ïðåä - ïî ëî æèòü ñó ùåñ òâî âà íèå íå ñêîëü êèõ ìå õà íèçìîâ èì ïîð òà ÄÍÊ â ìè òî õîí äðèè. Îäíà êî åñòü ïðåä âà ðèòåëü íûå ðå çóëü òà òû, ïî êà - çû âà þ ùèå, ÷òî ìè òî õîí äðè îò ðîïíûå ëèïîñî ìû ìî ãóò áûòü èñ - ïîëü çî âà íû äëÿ äîñ òàâ êè ÄÍÊ â ìè òî õîíäðèè êëå òîê ìëå êî ïè òà- þùèõ in vivo. Êëþ ÷å âûå ñëî âà: ìè òî õîí äðèÿ, èì ïîðò ÄÍÊ, òðàíñ ôåê öèÿ ìè- òî õîí äðèé, ðàñ òå íèå, Saccharomyces cerevisiae, ìëå êî ïè òà þ ùåå. REFERENCES 1. Koulintchenko M, Konstantinov Y, Dietrich A. Plant mitochond- ria actively import DNA via the permeability transition pore complex. EMBO J. 2003; 22(6):1245–54. 2. Koulintchenko M, Temperley RJ, Mason PA, Dietrich A, Lightow- lers RN. Natural competence of mammalian mitochondria allows the molecular investigation of mitochondrial gene expression. Hum Mol Genet. 2006; 15(1):143–54. 3. Ibrahim N, Handa H, Cosset A, Koulintchenko M, Konstantinov Y, Lightowlers RN, Dietrich A, Weber-Lotfi F. DNA delivery to mitochondria: sequence specifity and energy enhancement. Pharm Res. 2011; 28(11):2871–82. 4. Boesch P, Ibrahim N, Paulus F, Cosset A, Tarasenko V, Dietrich A. Plant mitochondria possess a short-patch base excision DNA repair pathway. Nucleic Acids Res. 2009; 37(17):5690–700. 5. Boesch P, Ibrahim N, Dietrich A, Lightowlers RN. Membrane as- sociation of mitochondrial DNA facilitates base excision repair in mammalian mitochondria. Nucleic Acids Res. 2010; 38(5): 1478–88. 6. Mileshina D., Koulintchenko M., Konstantinov Y., Dietrich A. Transfection of plant mitochondria and in organello gene inte- gration. Nucleic Acids Res. 2011; 39(17):e115. 7. Weber-Lotfi F, Ibrahim N, Boesch P, Cosset A, Konstantinov Y, Lightowlers RN, Dietrich A. Developing a genetic approach to investigate the mechanism of mitochondrial competence for DNA import. Biochim Biophys Acta. 2009; 1787(5):320–7. 8. Boddapati SV, Tongcharoensirikul P, Hanson RN, D’Souza GG, Torchilin VP, Weissig V. Mitochondriotropic liposomes. J Lipo- some Res. 2005; 15(1–2):49–58. Received 15.07.13 73 DNA IMPORT COMPETENCE AND MITOCHONDRIAL GENETICS