Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины
Исследован полиморфизм локуса соматотропного гормона некоторых пород крупного рогатого скота Украины (Бурой карпатской и Серой украинской) с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Выявлены породоспецифические особенности распределения аллельных вариантов С и D локуса соматотропного гормона. Уро...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Datum: | 1996 |
| Hauptverfasser: | , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1996
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153783 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины / С.Б. Зеленый, И.Л. Лисовский, В.И. Глазко // Биополимеры и клетка. — 1996. — Т. 12, № 2. — С. 38-41. — Бібліогр.: 5 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-153783 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Зеленый, С.Б. Лисовский, И.Л. Глазко, В.И. 2019-06-14T16:07:14Z 2019-06-14T16:07:14Z 1996 Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины / С.Б. Зеленый, И.Л. Лисовский, В.И. Глазко // Биополимеры и клетка. — 1996. — Т. 12, № 2. — С. 38-41. — Бібліогр.: 5 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00041F https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153783 575.572 Исследован полиморфизм локуса соматотропного гормона некоторых пород крупного рогатого скота Украины (Бурой карпатской и Серой украинской) с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Выявлены породоспецифические особенности распределения аллельных вариантов С и D локуса соматотропного гормона. Уровень гетерозиготности был более высоким у локальных пород (Бурой карпатской и Серой украинской) по сравнению с широко распространенной породой черно-пестрых голштинов. Досліджено поліморфізм локусу соматотропного гормону деяких порід великої рогатої худоби України (Бурої карпатської та Сірої української) за допомогою полімеразної ланцюгової реакції. Виявлено породоспецифічні особливості розподілу алельних варіантів С і D локусу соматотропного гормону. Рівень гетерозиготності був вищим у локальних порід (Бурої карпатської та Сірої української) у порівнянні з широкорозповсюдженою породою чорно-рябих голштинів. The polymorphism ofsomatotropin locus with use of PCR in same Ukrainian cattle breeds was investigated. The breed-specific patterns of distribution of C and D allelic variants of somatotropin locus were observed. The level of heterozygosity of somatotropin locus was more high in local breeds (Brown Carpathian, Ukrainian Grey), than in wide used Slack and White Holstein. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины Поліморфізм соматотропного гормону у локальних порід великої рогатої худоби України The cattle somatotropin locus polymorphism in local breeds in Ukraine Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины |
| spellingShingle |
Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины Зеленый, С.Б. Лисовский, И.Л. Глазко, В.И. Структура и функции биополимеров |
| title_short |
Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины |
| title_full |
Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины |
| title_fullStr |
Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины |
| title_full_unstemmed |
Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины |
| title_sort |
полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота украины |
| author |
Зеленый, С.Б. Лисовский, И.Л. Глазко, В.И. |
| author_facet |
Зеленый, С.Б. Лисовский, И.Л. Глазко, В.И. |
| topic |
Структура и функции биополимеров |
| topic_facet |
Структура и функции биополимеров |
| publishDate |
1996 |
| language |
Russian |
| container_title |
Биополимеры и клетка |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Поліморфізм соматотропного гормону у локальних порід великої рогатої худоби України The cattle somatotropin locus polymorphism in local breeds in Ukraine |
| description |
Исследован полиморфизм локуса соматотропного гормона некоторых пород крупного рогатого скота Украины (Бурой карпатской и Серой украинской) с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Выявлены породоспецифические особенности распределения аллельных вариантов С и D локуса соматотропного гормона. Уровень гетерозиготности был более высоким у локальных пород (Бурой карпатской и Серой украинской) по сравнению с широко распространенной породой черно-пестрых голштинов.
Досліджено поліморфізм локусу соматотропного гормону деяких порід великої рогатої худоби України (Бурої карпатської та Сірої української) за допомогою полімеразної ланцюгової реакції. Виявлено породоспецифічні особливості розподілу алельних варіантів С і D локусу соматотропного гормону. Рівень гетерозиготності був вищим у локальних порід (Бурої карпатської та Сірої української) у порівнянні з широкорозповсюдженою породою чорно-рябих голштинів.
The polymorphism ofsomatotropin locus with use of PCR in same Ukrainian cattle breeds was investigated. The breed-specific patterns of distribution of C and D allelic variants of somatotropin locus were observed. The level of heterozygosity of somatotropin locus was more high in local breeds (Brown Carpathian, Ukrainian Grey), than in wide used Slack and White Holstein.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153783 |
| citation_txt |
Полиморфизм соматотропного гормона у локальных пород крупного рогатого скота Украины / С.Б. Зеленый, И.Л. Лисовский, В.И. Глазко // Биополимеры и клетка. — 1996. — Т. 12, № 2. — С. 38-41. — Бібліогр.: 5 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT zelenyisb polimorfizmsomatotropnogogormonaulokalʹnyhporodkrupnogorogatogoskotaukrainy AT lisovskiiil polimorfizmsomatotropnogogormonaulokalʹnyhporodkrupnogorogatogoskotaukrainy AT glazkovi polimorfizmsomatotropnogogormonaulokalʹnyhporodkrupnogorogatogoskotaukrainy AT zelenyisb polímorfízmsomatotropnogogormonuulokalʹnihporídvelikoírogatoíhudobiukraíni AT lisovskiiil polímorfízmsomatotropnogogormonuulokalʹnihporídvelikoírogatoíhudobiukraíni AT glazkovi polímorfízmsomatotropnogogormonuulokalʹnihporídvelikoírogatoíhudobiukraíni AT zelenyisb thecattlesomatotropinlocuspolymorphisminlocalbreedsinukraine AT lisovskiiil thecattlesomatotropinlocuspolymorphisminlocalbreedsinukraine AT glazkovi thecattlesomatotropinlocuspolymorphisminlocalbreedsinukraine |
| first_indexed |
2025-11-24T21:47:01Z |
| last_indexed |
2025-11-24T21:47:01Z |
| _version_ |
1850498532019011584 |
| fulltext |
I S S N 0233-7657. Биополимеры и клетка. 1996. Т. 12, № 2
38
Полиморфизм соматотропного гормона у локальных
пород крупного рогатого скота Украины
С. Б. Зеленый*, И. Л. Лисовский, В. И. Глазко
Институт агроэкологии и биотехнологии УААН
252143 Киев, ул. Метрологическая, 12
Исследован полиморфизм локуса соматотропного гормона некоторых пород
крупного рогатого скота Украины (Бурой карпатской и Серой украинской) с по
мощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Выявлены породоспецифические
особенности распределения аллельных вариантов С и D локуса соматотропного
гормона. . Уровень гетерозиготности был более высоким у локальных пород (Бурой
карпатской и Серой украинской) по сравнению с широко распространенной поро
дой черно-пестрых голштинов.
Введение. Соматотропний гормон (СТГ), или гормон роста, является одним
из основных стимуляторов пролиферации клеток у животных и человека.
Его образование и секреция передней долей гипофиза у млекопитающих
регулируется двумя гипоталамическими пептидами — соматолиберином,
индуцирующим эти процессы, и соматостатином — ингибирующим их.
Кроме того, синтез СТГ в клетках гипофиза активирует инсулин, тиреоид
ные гормоны и глюкокортикоиды.
Полипептидная цепь СТГ у исследованных видов животных и человека
состоит из 189—191 аминокислотного остатка и содержит два дисульфидных
мостика. СТГ разных видов животных высококонсервативен. Так, напри
мер, СТГ крупного рогатого скота (КРС), лошадей и свиней различается не
более чем на 5 % аминокислотных остатков, тогда как в случае СТГ
человека подобные различия превышают 30 %. Известен делеционный
вариант человеческого СТГ, у которого отсутствует участок между 32-м и
46-м аминокислотными остатками, что приводит к снижению его молеку
лярной массы с 22 до 20 кДа. Несмотря на это, он идентичен нормальному
СТГ по вторичной и третичной структуре отдельных участков и сохраняет
биологическую активность. По данным зарубежных авторов, существуют
четыре варианта полипептидного полиморфизма соматотропного гормона
КРС [1—3]. Эти варианты возникли из замен двух возможных N-терми-
нальных аминокислот (аланин или фенилаланин) и комбинации двух
аминокислот в положении 127 цепи бычьего соматотропного полипептида
(лейцин или валин). Вариации N-терминальных участков бычьего соматот
ропного гормона были определены рестрикционным анализом сигнальных
пептидов в терминальной области бычьего соматотропного гормона —
аланин в позиции 190 и фенилаланин в позиции 191. Нуклеотидные
замены, ответственные за вариабельность данного района, пока неизвестны.
Correspondence address.
© С. Б. З Е Л Е Н Ы Й , И. Л. Л И С О В С К И Й , В. И. ГЛАЗКО, 1996
П О Л И М О Р Ф И З М С О М А Т О Т Р О П Н О Г О Г О Р М О Н А У Л О К А Л Ь Н Ы Х П О Р О Д К Р С
В отличие от этого, описаны генетические аллельные варианты, ответствен
ные за полиморфизм молекулы бычьего соматотропина в 127-м положении
(лейцин или валин). Это является следствием замены кодона CTG на GTG,
т. е. лейцинового кодона на валиновый в гене бычьего СТГ.
При введении молочному скоту рекомбинантных форм бычьего сома
тотропина молочная продуктивность возрастала у тех коров, в гене СТГ
которых в 127-м положении содержался валин по сравнению с коровами,
имеющими лейцин в этом положении. То есть выявленный полиморфизм
гена бычьего гормона роста ассоциирован с молочной продуктивностью
лактирующих коров [3].
В последнее время значительно возрос интерес к исследованию ДНК-
полиморфизма генов, кодирующих те или иные белки (соматотропин,
лактотропин, каппа-казеин и др.), а также к закономерностям их локали
зации в различных группах сцепления и их межлокусным взаимодействиям.
Нуклеотидные замены могут приводить к различным вариантам полимор
физма ДНК, например, к конформационному полиморфизму. На основании
изменчивости ДНК разрабатываются маркерные системы, базирующиеся на
конформационном либо рестриктном выявлении полиморфизма [2, 4] .
В зарубежной и отечественной литературе все больше внимания уделя
ется данным, прямо или косвенно связывающим полиморфизм различных
структурных генов с изменчивостью продуктивности у крупного рогатого
скота. Поэтому настоящая работа направлена на изучение полиморфизма
гена соматотропина методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) и
последующим рестрикционным анализом продукта амплификации у двух
пород крупного рогатого скота, представляющих собой локальные породы
Украины и являющихся носителями уникального генофонда — Бурой
карпатской и Серой украинской.
Материалы и методы. Образцы крови животных Бурой карпатской и
Серой украинской пород получены в одном из хозяйств Веловецкого района.
Для анализа отбирали животных, у которых по родословным отсутствовали
представители других пород до 4-го поколения. ДНК образцов крови Бурой
карпатской и Серой украинской пород выделяли двумя методами, которые
обеспечивали достаточно высокую концентрацию и чистоту выделенной
ДНК. Первая методика заключалась в выделении и очистке ДНК с
использованием перхлората натрия. Для этого лизированные лейкоциты
обрабатывали раствором, содержащим 50 мМ перхлорат натрия, рН 7,5,
10 мМ ЭДТА и 10 % DS-Na, и переосажденную 96 %-м этанолом ДНК
растворяли в ТЕ-буфере (10 мМ трис-HCl, рН 8,0, 1 мМ ЭДТА). Вторая
методика состояла в выделении ДНК и ее очистке с помощью смеси фенол—
хлороформ. Для этого клетки обрабатывали лизирующим буфером (320 мМ
сахароза, 1 %-й Тритон Х-100, 5 мМ MgCl2, 10 мМ трис-HCl, рН 7,6),
осажденные центрифугированием ядра ресуспендировали в буфере
(25 мМ ЭДТА, рН 8,0, 75 мМ NaCl) с добавлением протеиназы К
(0,1 мг/мл) и обрабатывали смесью фенол.хлороформ (1:1). Осажденную
ДНК растворяют в ТЕ-буфере.
ПЦР-анализ. Для анализа полиморфизма гена соматотропина исполь
зовали олигонуклеотидные затравки, синтезированые, как описано ранее
[5J. 10 х ПЦР-буфер содержал 670 мМ трис-НCl, 160 мМ аммоний
сернокислый, 0,1 %-й Твин-20. Хлорид магния добавляли в ПЦР-смесь до
конечной концентрации 2 мМ. В работе использовали термостабильную
ДНК-полимеразу, выпускаемую фирмой «Бион» (Москва).
Амплификацию осуществляли, как описано в [5], после чего продукты
ПЦР переосаждали 96 %-м этанолом и растворяли в бидистиллированной
воде. Затем растворенные продукты ПЦР рестрицировали эндонуклеазой
MspI Продукты рестрикции разделяли в 2,0 %-м агарозном геле.
39
Результаты и обсуждение. ПЦР-продукты (891 п. н.), содержащие
С-аллели (гомозиготы), имели фрагменты рестрикции размером 526, 193,
109 и 63 пары нуклеотидов (п. н.). ПЦР-продукты, включающие D-аллели
(гомозиготы), содержали фрагменты рестрикции длиной 635, 193 и 63 п. н.
CD-аллели (гетерозиготы) имели фрагменты рестрикции длиной 635, 526,
193, 109 и 63 п. н. (рисунок).
Распределение генотипоов по локусу гормона роста у Бурой карпатской (а) и Серой
украинской (б) пород крупного рогатого скота: а (маркеры молекулярной массы pUCI9 +
+ H a e l l l — дорожка / ; pUC 19 + Saiua ~ 7; pVC19 + Alul — 16): 2, З, 6, S — JO, 15 — CC;
4, 5у 11, J3y 14 — CD; 12 — D D ; 6 (маркер молекулярной массы pUC19 + Sau3a - дорожка
8): I, 6, 7. 9 — ІЗ, 15, 16 — CC; 2,4,5 — CD; 3, 14 ~ D D
Породы КРС различной продуктивности, по литературным данным,
имеют следующие особенности по частотам встречаемости аллельных вари
антов СТГ (С- и D-варианты, связанные с наличием либо отсутствием
дополнительного сайта при рестрикции эндонуклеазой MspI продукта
амплификации). Так, мясная порода герефордов (35 голов) была идентифи
цирована по аллельному варианту С. Специализированная молочная порода
голштинов оказалась полиморфной с относительно высокой частотой встре
чаемости аллельного варианта D (qD-0.26). Следует отметить, что в наших
исследованиях среди 15 голов голштинов, полученных от скрещивания
отечественного черно-пестрого скота и импортных (немецких) черно-пест
рых голштинов, не удалось выявить полиморфизма по указанному локусу.
Все 15 голов были гомозиготами по С-аллели. Это может быть обусловлено
либо ограниченным количеством исследованных животных, либо отличиями
между описанными в литературе и в настоящей работе продуктивными
качєства и животных.
Бурая карпатская — локальная порода, высокоадаптированная к разве
дению в условиях Карпат. В настоящее время численность чистопородных
представителей этой породы быстро уменьшается и, очевидно, для разработ
ки методов эффективного сохранения ее уникального генофонда необходимо
выявление породоспецифичного распределения аллельных вариантов по
разным локусам.
Серая украинская порода представляет собой ветвь самой древней
породы — европейского серого скота, который обладает рядом уникальных
40
П О Л И М О Р Ф И З М С О М А Т О Т Р О П Н О Г О Г О Р М О Н А У ЛОКАЛЬНЫХ. П О Р О Д К Р С
фенотипических характеристик (выносливость, устойчивость к ряду заболе
ваний и др.) и находится в тесных генеалогических взаимосвязях с
некоторыми другими породами КРС, разводимыми в Украине, например, с
Красной степной, поголовье которой также резко сокращается.
Таким образом, Бурая карпатская и Серая украинская породы являют
ся локальными породами Украины — носителями уникального генофонда,
нуждающимися в разработке специальных генетически обоснованных про
грамм по их сохранению. Вкладом в изучение породоспецифических особен
ностей и являются выполненные нами исследования распределения аллель-
ных вариантов у этих пород по соматотропному гормону.
При скрининге образцов Бурой карпатской и Серой украинской пород
КРС частоты встречаемости аллелей распределены следующим образом:
соответственно qC — 0,740 и 0,674; qD — 0,260 и 0,326; количество
гомозигот составило 57,00 и 69,56 %; гетерозигот — 43,00 и 30,44 %.
Вполне возможно, что относительно высокая частота встречаемости
аллеля qD (0,260; 0,326), а также большее количество гетерозигот являются
отличительными чертами аборигенных и локальных пород КРС на террито
рии Украины в отличие от коммерческих пород КРС, что может быть
использовано для последующих работ по выведению новых высокопродук
тивных пород КРС.
С. Б. Зелений, I. Л. Лісовський, В. I. Глазко
Поліморфізм соматотропного гормону у локальних порід великої рогатої худоби України
Резюме
Досліджено поліморфізм локусу соматотропного гормону деяких порід великої рогатої худоби
України (Бурої карпатської та Сірої української) за допомогою полімеразної ланцюгової реакції.
Виявлено породоспецифічні особливості розподілу алельних варіантів С і D локусу
соматотропного гормону. Рівень гетерозиготності був вищим у локальних порід (Бурої
карпатської та Сірої української) у порівнянні з широкорозповсюдженою породою чорно-рябих
голштинів,
S. В. Zeleny, I. L. Lysovsky, V. 1. Glazko
The cattle somatotropin locus polymorphism in local breeds in Ukraine
Summary
The polymorphism of somatotropin locus with use of PCR in same Ukrainian cattle breeds was investigated.
The breed-specific patterns of distribution of С and D allelic variants of somatotropin locus were observed.
The level of lieterozygosity of somatotropin locus was more high in local breeds (Brown Carpathian, Uk
rainian Grey), than in wide used Black and White Holstein.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
л . Gordon D. F., Quick C. P.., Erwin C. R. et ai Nucleotide sequence of the bovine growth
hormone chromosomal gene / / Мої. and Cell. Endocrinol .—1993.—33.—P. 81 .
2. Kirkpatrick B. W., Huff В. M., Casas-Carillo E. Double-strand DNA conformation polymor
phisms as a source of highly polymorphic genetic markers / / Animals Genet .—1993 .—24.—
P. 155—161 .
3. Luci M. C, Hauser S. D., Eppard P. J. et ai Variants of somatotropin in cattle: gene
frequencies in major dairy breeds and associated milk production II Domestic Animal
Endocrinol .—1993.—10 (4 ) .—P 325—333.
4. Parks J. 5. , Abdul-Latif H., Kinoshita E. et ai Genetics of growth hormone gene expression
/ / Horm. Res .—1993 .—40.—P. 5 4 — 6 1 .
5. Zhang H. M., Brown D. R., DeNise S. K., Ax R. L. Polymerase chain reaction — restriction
fragment lenght polymorphism analysis of the bovine somatotropin gene / / J. Anim. Sci.—
1993 .—71.—P. 2276.
УДК' 515.512 Поступила в редакцию 28.02.96
41
|