Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М
Предложена методика введения спин-метки (2,2,6,6-тетраметил-4-аминопиперидин-1-оксил) в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области IgM.
Gespeichert in:
| Datum: | 1988 |
|---|---|
| Hauptverfasser: | , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1988
|
| Schriftenreihe: | Биополимеры и клетка |
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153810 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М / В.П. Тимофеев, В.А. Лапук, А.И. Чухрова, А.Е. Арутюиян, Т.М. Киселева // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 2. — С. 75-78. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-153810 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1538102025-02-23T18:13:04Z Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М Вибіркове введення спін-мітки у залишок N-ацетилнейрамінової кислоти олігосахаридного угруповання Fab-області імуноглобуліну М Selective spin-labelling of N-acetylneuraminic acid residue in oligosaccharide of IgM Fab-region Тимофеев, В.П. Лапук, В.А. Чухрова, А.И. Арутюнян, А.Е. Киселева, Т.М. Структура и функции биополимеров Предложена методика введения спин-метки (2,2,6,6-тетраметил-4-аминопиперидин-1-оксил) в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области IgM. Запропоновано методику введення спін-мітки (2,2,6,6-тетраметил-4-амінопіперидин-1-оксил) у залишок N-ацетилнейрамінової кислоти олігосахаридного угруповання Fab-області IgM. A method is proposed for spin-labelling (2,2,6,6-tetramethyl-4-aminopiperidine-I-oxyl) of N-acetylneuraminic acid residue within oligosaccharide of Fafe-region of immunoglobulin M. 1988 Article Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М / В.П. Тимофеев, В.А. Лапук, А.И. Чухрова, А.Е. Арутюиян, Т.М. Киселева // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 2. — С. 75-78. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000214 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153810 576.8.097:547.963.1 ru Биополимеры и клетка application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| language |
Russian |
| topic |
Структура и функции биополимеров Структура и функции биополимеров |
| spellingShingle |
Структура и функции биополимеров Структура и функции биополимеров Тимофеев, В.П. Лапук, В.А. Чухрова, А.И. Арутюнян, А.Е. Киселева, Т.М. Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М Биополимеры и клетка |
| description |
Предложена методика введения спин-метки (2,2,6,6-тетраметил-4-аминопиперидин-1-оксил) в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области IgM. |
| format |
Article |
| author |
Тимофеев, В.П. Лапук, В.А. Чухрова, А.И. Арутюнян, А.Е. Киселева, Т.М. |
| author_facet |
Тимофеев, В.П. Лапук, В.А. Чухрова, А.И. Арутюнян, А.Е. Киселева, Т.М. |
| author_sort |
Тимофеев, В.П. |
| title |
Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М |
| title_short |
Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М |
| title_full |
Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М |
| title_fullStr |
Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М |
| title_full_unstemmed |
Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М |
| title_sort |
избирательное введение спин-метки в остаток n-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки fab-области иммуноглобулина м |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| publishDate |
1988 |
| topic_facet |
Структура и функции биополимеров |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153810 |
| citation_txt |
Избирательное введение спин-метки в остаток N-ацетилнейраминовой кислоты олигосахаридной группировки Fab-области иммуноглобулина М / В.П. Тимофеев, В.А. Лапук, А.И. Чухрова, А.Е. Арутюиян, Т.М. Киселева // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 2. — С. 75-78. — Бібліогр.: 12 назв. — рос. |
| series |
Биополимеры и клетка |
| work_keys_str_mv |
AT timofeevvp izbiratelʹnoevvedeniespinmetkivostatoknacetilnejraminovojkislotyoligosaharidnojgruppirovkifaboblastiimmunoglobulinam AT lapukva izbiratelʹnoevvedeniespinmetkivostatoknacetilnejraminovojkislotyoligosaharidnojgruppirovkifaboblastiimmunoglobulinam AT čuhrovaai izbiratelʹnoevvedeniespinmetkivostatoknacetilnejraminovojkislotyoligosaharidnojgruppirovkifaboblastiimmunoglobulinam AT arutûnânae izbiratelʹnoevvedeniespinmetkivostatoknacetilnejraminovojkislotyoligosaharidnojgruppirovkifaboblastiimmunoglobulinam AT kiselevatm izbiratelʹnoevvedeniespinmetkivostatoknacetilnejraminovojkislotyoligosaharidnojgruppirovkifaboblastiimmunoglobulinam AT timofeevvp vibírkovevvedennâspínmítkiuzališoknacetilnejramínovoíkislotiolígosaharidnogougrupovannâfaboblastíímunoglobulínum AT lapukva vibírkovevvedennâspínmítkiuzališoknacetilnejramínovoíkislotiolígosaharidnogougrupovannâfaboblastíímunoglobulínum AT čuhrovaai vibírkovevvedennâspínmítkiuzališoknacetilnejramínovoíkislotiolígosaharidnogougrupovannâfaboblastíímunoglobulínum AT arutûnânae vibírkovevvedennâspínmítkiuzališoknacetilnejramínovoíkislotiolígosaharidnogougrupovannâfaboblastíímunoglobulínum AT kiselevatm vibírkovevvedennâspínmítkiuzališoknacetilnejramínovoíkislotiolígosaharidnogougrupovannâfaboblastíímunoglobulínum AT timofeevvp selectivespinlabellingofnacetylneuraminicacidresidueinoligosaccharideofigmfabregion AT lapukva selectivespinlabellingofnacetylneuraminicacidresidueinoligosaccharideofigmfabregion AT čuhrovaai selectivespinlabellingofnacetylneuraminicacidresidueinoligosaccharideofigmfabregion AT arutûnânae selectivespinlabellingofnacetylneuraminicacidresidueinoligosaccharideofigmfabregion AT kiselevatm selectivespinlabellingofnacetylneuraminicacidresidueinoligosaccharideofigmfabregion |
| first_indexed |
2025-11-24T06:33:37Z |
| last_indexed |
2025-11-24T06:33:37Z |
| _version_ |
1849652430862548992 |
| fulltext |
в
Структура
и функция
биополимеров
УДК 576.8.097:547.963.1
ИЗБИРАТЕЛЬНОЕ ВВЕДЕНИЕ СПИН-МЕТКИ
В ОСТАТОК N-АЦЕТИЛНЕЙРАМИНОВОЙ КИСЛОТЫ
ОЛИГОСАХАРИДНОЙ ГРУППИРОВКИ Fab-ОБЛАСТИ
ИММУНОГЛОБУЛИНА Μ *
В. П. Тимофеев, В. А. Лапук, А. И. Чухрова, А. Е. Арутюиян,
Т. М. Киселева
Введение. Метод спин-метки является весьма информативным при ис-
следовании динамической структуры биологических макромолекул [1].
В последнее время с помощью этого метода были выявлены важные
особенности динамики молекулы иммуноглобулина Μ ( IgM)—одного
из основных участников иммунного ответа организма человека и жи-
вотных [2, 3]. При этом использовалась, главным образом, спин-метка
по углеводам IgM — 2,2,6,6-тетраметил-4-аминопиперидин-1-оксил
(CMI). Однако интерпретация данных в этом случае осложнялась труд-
ностью контроля процесса введения спин-метки в IgM и ее последую-
щей локализации в макромолекуле. В данной работе показана воз-
можность введения CMI только в одну из пяти олигосахаридных груп-
пировок (ОГ) IgM (в расчете на μ-цепь), расположенную в Fab-обла-
сти. При этом спин-метка локализуется только в остатке N-ацетилней-
раминовой кислоты (AcNeu) этой ОГ. Полученные таким образом
спин-меченные по Fab-области препараты IgM могут оказаться весьма
полезными при исследовании динамики структуры IgM, в частности
в процессе связывания антигена.
Материалы и методы. М о н о к л о н а л ь н ы й ^ М р 0 щ (болезнь Вальденштрема)
выделяли по описанному ранее методу [7], но без стадии лиофилизадии. Гомогенность
препарата доказана иммуноэлектрофорезом с использованием овечьей поливалентной
антисыворотки против плазмы крови человека.
С п и н-м е τ к а С Μ I фирмы «Aldrich Chemical Со.» (США).
В в е д е н и е C M I в О Г I g M в у с л о в и я х неконтролируемого окисления
N a I 0 4 проводили по описанному методу [2].
В в е д е н и е C M I в О Г I g M п о о с т а т к а м AcNeu [4]. К 1 мл раствора IgM
(8,27 мг/мл, или 9 - Ю - 6 М; концентрация AcNeu — 3,6· Ю - 4 М) в 0,006 Μ фосфатном
буфере, рН 7,0, содержащем 0,15 Μ NaCl (буфер А), охлажденного до 0-ь4°С, добав-
ляют 10 мкл раствора N a I 0 4 в воде (15,6 мг/мл), т. е. до концентрации 7,1·10~4 М,
выдерживают 15 мин при 0ч-4°С, добавляют 136 мкл этиленгликоля, т. е. до концент-
рации 1,9· 10~3 М, выдерживают 10 мин при 4°С, добавляют 0,62 мг (3,65· 10~6 моля)
CMI (сухая навеска или раствор в минимальном объеме этанола) и 0,23 мг (3,65Х
Х Ю - 6 моля) NaCNBH3 , т. е. до концентрации 3,14· 10—3 М, выдерживают 16—20 ч при
4°С и диализуют в трубках «Visking» 5 сут против буфера А (6X0,4 л). Таким обра-
зом, молярное соотношение AcNeu : N a I 0 4 : CMI : этиленгликоль : NaCNBH3 округленно
составляет 1 : 2 : 9 : 5 : 9 .
* Представлена членом редколлегии В. И. Ивановым.
БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА— 1988.—Т. 4, № 2 4 — 7-854 75
П о л у ч е н и е д е с и а л и р о в а н н о г о п р е п а р а т а IgM. Раствор IgM в
0,01 Μ трис-НСІ буфере, рН 8,3—8,4, содержащем 0,15 Μ NaCl (буфер Б) , с кон-
центрацией 1,5 мг/мл центрифугируют 15 мин при 7500 об/мин, белок переводят в
0,1 Μ Ыа-ацетатный буфер, рН 6,0, содержащий 0,002 Μ СаС12, 0,15 Μ NaCl, с по-
МОЩЫО ячейки «Ашісоп» с мембраной РМ-10, добавляют нейрамииидазу холерного
вибриона (фирма «Serva», ФРГ) из расчета 0,1 ед. активности на 1 мг IgM, инкубиру-
ют 3,5 сут при 37 °С под толуолом, переводят в буфер Б с помощью ячейки «Агпісоп»
с мембраной РМ-30, центрифугируют 15 мин при 7500 об/мин, надосадочную жидкость
Рис. 1. Спектры ЭПР нативного и десиалированного
IgM, меченного спин-меткой СМІ: 1 — препарат, по-
дученный в условиях контролируемого окисления ОГ
по AcNeu с помощью N a I 0 4 (^М С И ал -СМ1); 2 —
препарат, полученный в условиях неконтролируемого
окисления ОГ с помощью N a I 0 4 (IgM-CMI) [2]; З —
десиалированный препарат IgM, спин-меченный в
условиях получения спектра / ; 4 — свободная спин-
метка СМІ (5 -Ю- 6 М). Все растворы — в буфере А
(см. «Материалы и методы»). Концентрации препара-
тов белков — в пределах 1,5—3,0 мг/мл. Спектры 3
и 4 записаны при одинаковых параметрах, но при
усилении в 3 раза большем, чем спектр 1. Все спект-
ры записаны при 20 °С
Fig. 1. ESR spectra of the native and asialo-IgM la-
belled with the spin label СМІ: 1 — the preparation
obtained upon controlled NaI04-oxidation of AcNeu in
oligosaccharide groups (OG-s) of the IgM (IgM s i a i . -
CMI); 2 — the preparation obtained upon noncontrol-
led NaI04-oxidation of OG-s (IgM-CMI) [2]; 3 — asialo-IgM spin-labelled as in 1\ 4 —
free spin label CMI (5·10~6 M). All solutions are in buffer A (see «Materials and
methods»). Protein concentrations are in the range of 1.5-3.0 mg/ml . The spectra 3 and
4 are recorded under the same recording parameters but at 3-fold receiver gain as compa-
red with 1. All spectra are recorded at 20 °С
концентрируют до 0,35 мг/мл с помощью ячейки «Атісоп» с мембраной РМ-10, от-
деляют нейраминидазу гель-фильтрацией на колонке с сефарозой 6В (2X90 см) в бу-
фере Б и полученный препарат десиалированного IgM концентрируют до 4—6 мг/мл
с помощью ячейки «Атісоп» с мембраной РМ-10. Во всех случаях концентрирования
IgM методом ультрафильтрации в фильтрате практически не обнаруживали низкомо-
лекулярных продуктов распада белка.
О п р е д е л е н и е AcNeu в п р е п а р а т а х IgM. Навеску лиофильно высушенно-
го обессоленного препарата IgM гидролизуют 1 ч при 80 °С в 0,1 н. H 2 S0 4 (из расчета
2—3 мл кислоты на 1 мг белка) и затем проводят определение по методу [8].
Спектры ЭПР записывали на приборе «Varian Е-104-А» (США) при амплитуде
модуляции ВЧ-поля 0,2 мТл и уровне СВЧ 5 мВт. Для определения расстояния между
крайними широкими пиками спектры записывали на развертке поля 0,25 мТл/см при
амплитуде модуляции ВЧ-поля 0,4 мТл. Расчет и построение температурно-вязкостной
зависимости проводили по описанному ранее методу [1, 9]. Интерпретация спектров
ЭПР, обозначения, терминология и анализ описаны ранее [1, 2, 10—12].
Результаты и обсуждение. Для введения СМІ в ОГ биологических
макромолекул необходимо предварительное окисление этих ОГ с по-
мощью NaI0 4 . Этот процесс плохо поддается контролю и во всяком
случае требует дополнительных трудоемких исследований. Недавно
была предложена методика окисления с помощью NaI0 4 ОГ гликопро-
теиновых и гликолипидных рецепторов лимфоцитов, позволяющая из-
бирательно окислять только остатки AcNeu [4]. Мы модифицировали
указанную методику и применили этот вариант для введения СМІ в
моноклональный IgM (болезнь Вальденштрема). В результате был
получен спин-меченный препарат I g M c ^ - C M I , спектр ЭПР которого
(рис. I, спектр / ) отличался существенно большей расторможенностью
спин-метки, чем в случае спин-меченного препарата IgM-CMI (рис. 1,
спектр 2), в котором CMI вводили в условиях неконтролируемого
окисления ОГ периодатом Na [2]. Это видно уже при 20 °С по полному
отсутствию крайнего широкого пика (КШП) в левой части спектра
76 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА— 1988.—Т. 4, № 2 4 — 7-854 76
^Мсиал-СМІ, тогда как в спектре IgM-CMI этот КШП хорошо заме-
тен. Более наглядно расторможенность ЭПР-спектра I g M c ^ - C M I
проявляется при 1 °С и переменной вязкости среды (рис. 2).
Ранее мы показали, что при получении IgM-CMI количество свя-
занных остатков CMI в расчете на μ-цепь не превышает 2. При этом
Рис. 2. Влияние вязкости среды на спектры Э П Р ^ М С И а л - С М І (рис. 1, спектр / ) :
1—0, 2—41, 3—50, 4—55, 5—60,6 % сахарозы. Спектры записаны при 1 °С в буфере А
(см. «Материалы и методы»). Концентрация белка « 1 , 5 мг /мл
Fig. 2. Influence of the solution viscosity on the ESR spectrum of the IgMS ia i . -CMI
(Fig. 1, spectrum / ) : 1—0, 2—41, 5—50, 4—55, 5—60.6% sucrose. Spectra are recorded
a t 1°C in buffer A (see «Materials and Methods») . Protein concentrat ion is « 1 . 5 m g / m l
Рис. 3. Зависимость расстояния между крайними ши-
рокими пиками в ЭПР-спектре IgM, меченного CMI в
различных условиях окисления NaI0 4 , от вязкости
среды при постоянной температуре (1°С) : А — для
IgMcnaл"CMI (см. рис. 2) ; Б — для IgM-CMI [21.
Цифры на кривой А соответствуют нумерации спект-
ров на рис. 2; вертикальная пунктирная линия отве-
чает вязкости раствора при температуре 1 °С в от-
сутствие сахарозы
Fig. 3. The dependence of a distance between the ou-
ter wide peaks of the ESR spectra of the IgM spin-
labelled under var ious NaI0 4 -oxidat ion conditions on
solution viscosity at the constant temperature (1°C):
A — f o r I g M s i a i . - C M I ( s e e F i g . 2 ) ; 5 — f o r I g M - C M I
[2]. The digits at the curve A are the same as for
ESR spectra in Fig. 2; the vertical dotted line refers
to sucrose-free solution at the temperature 1 °С
в ЭПР-спектре IgM-CMI наблюдалась суперпозиция двух форм: за-
торможенной и расторможенной [2]. Дальнейшее исследование показа-
ло, что вторая — расторможенная — форма спектра ЭПР обусловлена
вхождением одного из двух остатков CMI в ОГ Fab-области [3]. Такой
вывод был сделан на том основании, что спектр ЭПР спин-меченного
фрагмента Fab-CMI имел именно такую расторможенную форму: КШП
хорошо разрешались в этом спектре лишь при и концентрации
сахарозы 47 %. Аналогичное явление мы наблюдаем и в случае ЭПР-
спектра I g M c n a л ~СМ1, в котором КШП появлялись лишь при 1 °С и кон-
БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА— 1988.—Т. 4, № 2 4 — 7-854 77
центрации сахарозы 41 % (рис. 2, спектр 2; рис. 3). Такое совпадение
характеристик ЭПР-спектров Fab-CMI и I g M c ^ - C M I позволяет сде-
лать вывод, что в предлагаемых нами условиях удается избирательно
ввести СМІ в ОГ Fab-области IgM.
Для того чтобы удостовериться, что метка при этом, как можно
было ожидать, действительно входит в остаток AcNeu, мы провели
спин-мечение по этой же методике предварительно десиалированного
нейраминидазой препарата IgM, в котором было удалено 96—97 %
AcNeu. Запись спектра ЭПР этого спин-меченного препарата на пре-
дельной чувствительности прибора выявила лишь присутствие следов
свободной спин-метки (рис. 1, спектры 3, 4) . Это означает, что в де-
сиалированный IgM спин-метка в наших условиях не входит.
Таким образом, полученные данные показывают, что предлагае-
мая нами методика позволяет избирательно вводить спин-метку CMI
в ОГ Fab-области IgM, при этом CMI оказывается расположенной на
остатках AcNeu. Такой результат можно объяснить тем, что из пяти
ОГ в IgM в расчете на μ-цепь [5] именно ОГ в Fab-области является
наиболее пространственно доступной и подвижной [3, 6].
SELECTIVE SPIN-LABELLING OF N-ACETYLNEURAMINIC ACID RESIDUE
IN OLIGOSACCHARIDE OF IgM Fab-REGION
V. P. Timofeev, V. A. Lapuk, Α. I. Tchukhrova, A. E. Arutjunjan, Т. M. Kiseleva
Inst i tute of Molecular Biology, Academy of Sciences of the USSR, Moscow
N. D. Zelinsky Insti tute of Organic Chemistry,
Academy of Sciences of the USSR, Moscow
S u m m a r y
A method is proposed for spin-labelling (2,2,6,6-tetramethyl-4-aminopiperidine-l-oxyl) of
N-acetylneuraminic acid residue within oligosaccharide of Fab-region of immunoglobu-
lin M.
1. Тимофеев В. П. Сегментальная подвижность поли(и) и метод спин-метки / /Моле-
куляр. биология.— 1986.—20, № 3.—С. 697—711.
2. Тимофеев В. П., Лапук В. А. Исследование необратимого конформационпого пере-
хода в иммуноглобулине Μ методом спин-метки, введенной в углеводную и пеп-
тидную части его молекулы / / Т а м же.— 1982.—16, № 2.— С. 403—410.
3. Some peculiarities of the dynamics of the immunoglobulin Μ s t r u c t u r e / V . A. Lapuk,
V. P. Timofeev, A. I. Tchukhrova et al. / / J . Biomol. Struct, and Dynam.— 1984.—
2, N 1.—P. 63—76.
4. Sharom F. J., Ross Т. E. Spin labelling of sialic acid and galactose residues on lymp-
nocyte plasma membrane: effects of lectins on oligosaccharide dynamics / / Мої. Im-
munol.—1985,—22, N 5 ,—P. 521—530.
5. Complete amino acids sequence of the Mu heavy chain of a human IgM immunoglo-
bulin / F. W. Putnam, G. Florent, C. Paul et al. / / Science.— 1973.—182, N 4109.—
P. 287—291.
6. Каверзнева Ε. Д., Чухрова А. И., Виха Г. В. Роль углеводных групп в иммуногло-
булинах Μ. V. Стерическая доступность олигосахаридных группировок в макро-
иммуноглобулинах/ /Биоорг . химия.— 1978.—4, Лг2 3.— С. 369—374.
7. Лапук В. Α., Шмакова Ф. В., Каверзнева Е. Д. Роль углеводных групп в иммуно-
глобулинах Μ. 1. Выделение и характеристика иммуноглобулина Μ человека, име-
ющего углеводные группы на L - ц е п я х / / Т а м же.— 1975.—1, № 8.— С. 1134—1139.
8. Warren L. Thiobarbituric acid assay of sialic a c i d / / J . Biol. Chem.— 1959.—234,
N 8 .—P. 1971—1975.
9. Измерение времени вращательной корреляции макромолекул методом Э П Р в слу-
чае ковалентно связанной спин-метки / И. В. Дудич, В. П. Тимофеев, М. В. Воль-
кенштейн, А. Ю. М и ш а р и н / / М о л е к у л я р . биология— 1977—И, № 3.—С. 685—693.
10. Rotational correlation times of IgG and its f r agments spin-labelled at carbohydrate
or protein moieties Spatialy fixed position of the Fc carbohydrate / V. P. Timofeev,
I. V. Dudich, Yu. K. Sykulev, R. S. Nezlin / / FEBS Lett.—1978.—89, N 2 ,—P. 191—
194.
11. Timofeev V. P., Dudich І. V., Volkenstein Μ. V. Comparative study of dynamic
structure of pig and chicken aspar ta te aminotransferases by measur ing the rotational
correlation t i m e / / B i o p h y s . Struct, and Mech.— 1980.—1, N 1.—P. 41—49.
12. Тимофеев В. Я. Описание динамического поведения боковых групп глобулярных
белков при помощи методов спин-метки, ЯМР и поляризации люминесценции / /
Молекуляр. биология.— 1983.—17, № 3.—С. 519—531.
Ин-т молекуляр. биологии АН СССР, Москва Получено 10.02.87
Ин-т орг. химии им. Н. Д. Зелинского АН СССР, Москва
78 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА— 1988.—Т. 4, № 2 4 — 7-854 78
|