Клонирование, экспрессия и очистка тРНКPro из бактерии Enterococcus faecalis

• Published in: Вiopolymers and Cell
• Date: 2009
• Main Authors: Бояршин, К.С., Крикливый, И.А., Яремчук, А.Д., Тукало, М.А.
• Format: Article
• Language: Russian
• Published: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2009
• Subjects: Структура та функції біополімерів
• Online Access: https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153842
• Journal Title: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Cite this: Клонирование, экспрессия и очистка тРНКPro из бактерии Enterococcus faecalis / К.С. Бояршин, И.А. Крикливый, А.Д. Яремчук, М.А. Тукало // Вiopolymers and Cell. — 2009. — Т. 25, № 6. — С. 445-450. — Бібліогр.: 15 назв. — рос, англ.

Цель. Разработать методику экспрессии и очистки транскрипта тРНКPro бактерии E. faecalis. Методы. Коэкспрессированную in vitro с цис-гидролитическим рибозимом тРНК очищали при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием анионообменной хроматографической колонки. Результаты. Получены удовлетворительные выход продукта и чистота препаратов. Транскрипт тРНКPro проявляет акцепторную активность в реакции аминоацилирования. Выводы. Разработанный метод может быть внедрен в лабораторную практику и стать основой для создания новых способов получения транскриптов других тРНК. Aim. To elaborate the method of expression and purification of bacteria Enterococcus faecalis tRNAPro transcript. Methods. tRNA, co-expressed in vitro with cis-hydrolytical ribozyme, was purified by high performance liquid chromatography using anion-exchange chromatographic column. Results. A satisfactory yield of high purity preparation was obtained. A transcript of tRNAPro exhibits acceptor activity in aminoacylation reaction. Conclusions. The method developed may be introduced in laboratory practice including the obtaining of other tRNAs. Мета. Розробити методику експресії і очищення транскрипта тРНКPro бактерії E. faecalis. Методи. Коекспресовану in vitro з цис-гідролітичним рибозимом тРНК очищували за допомогою високоефективної рідинної хроматографії з використанням аніонообмінної колонки. Результати. Отримано задовільні вихід продукту та чистоту препаратів. Транскрипт тРНКPro виявляє акцепторну активність у реакції аміноацилювання. Висновки. Розроблений метод може бути впроваджений у лабораторну практику та стати основою для створення нових способів отримання транскриптів інших тРНК.