Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха

Разработан простой универсальный метод получения сферопластов у быстроратсущих видов клубеньковых бактерий(R. meliloti, R. phaseoli, R. trifolii, R. leguminosarum) , основанный на действии лизоцима на бактериальные культуры, выращенные на средах, сожержащих пенициллин. Проведен электронно-микроскопи...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:

Bibliographische Detailangaben
Datum:	1988
Hauptverfasser:	Баженова, О.В., Потокин, И.Л., Симаров, Б.В.
Format:	Artikel
Sprache:	Russian
Veröffentlicht:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1988
Schriftenreihe:	Биополимеры и клетка
Schlagworte:	Генно-инженерная биотехнология
Online Zugang:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153909
Tags:	Tag hinzufügen Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:	Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха / О.В. Баженова, И.Л. Потокин, Б.В. Симаров // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 3. — С. 151-157. — Бібліогр.: 17 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-153909
record_format	dspace
spelling	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1539092025-02-23T18:54:16Z Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха Отримання сферопластів у бульбочкових бактерій люцерни, конюшини, квасолі і гороху Obtaining of spheroplasts in nodule bacteria of lucerne, clover, bean and pea Баженова, О.В. Потокин, И.Л. Симаров, Б.В. Генно-инженерная биотехнология Разработан простой универсальный метод получения сферопластов у быстроратсущих видов клубеньковых бактерий(R. meliloti, R. phaseoli, R. trifolii, R. leguminosarum) , основанный на действии лизоцима на бактериальные культуры, выращенные на средах, сожержащих пенициллин. Проведен электронно-микроскопический анализ процесса образования сферопластов. Установлено, что средняя эффективность регенерации сферопластами оболочки составляет 1,4–5,0%. Розроблено простий універсальний метод отримання сферопластів у швидкоростучих видів бульбочкових бактерій (R. meliloti, R. phaseoli, R. trifolii, R. leguminosarum) на основі дії лізоциму на бактерійні культури, вирощені на середовищах з пеніціліном. Проведено електронно-мікроскопічний аналіз процесу утворення сферопластів. Встановлено, що середня ефективність регенерації сферопластів оболонки становить 1,4–5,0%. A simple universal procedure has been developed for obtaining stable spheroplasts from the fast-growing species of Rhizobium (R. meliloti, R. phaseoli, R. trifolii, R. leguminosarum). Spheroplasts were prepared by culturing cells in the osmotically stable medium with a decreased content of calcium cations in the presence of penicillin, followed by treatment with lysozyme. The electron-microscopic analysis of the process of spheroplasts formation was performed. The average effectiveness of the cell wall regeneration is 1.4-5.0%. 1988 Article Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха / О.В. Баженова, И.Л. Потокин, Б.В. Симаров // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 3. — С. 151-157. — Бібліогр.: 17 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000222 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153909 576.851.155 ru Биополимеры и клетка application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Генно-инженерная биотехнология Генно-инженерная биотехнология
spellingShingle	Генно-инженерная биотехнология Генно-инженерная биотехнология Баженова, О.В. Потокин, И.Л. Симаров, Б.В. Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха Биополимеры и клетка
description	Разработан простой универсальный метод получения сферопластов у быстроратсущих видов клубеньковых бактерий(R. meliloti, R. phaseoli, R. trifolii, R. leguminosarum) , основанный на действии лизоцима на бактериальные культуры, выращенные на средах, сожержащих пенициллин. Проведен электронно-микроскопический анализ процесса образования сферопластов. Установлено, что средняя эффективность регенерации сферопластами оболочки составляет 1,4–5,0%.
format	Article
author	Баженова, О.В. Потокин, И.Л. Симаров, Б.В.
author_facet	Баженова, О.В. Потокин, И.Л. Симаров, Б.В.
author_sort	Баженова, О.В.
title	Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха
title_short	Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха
title_full	Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха
title_fullStr	Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха
title_full_unstemmed	Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха
title_sort	получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate	1988
topic_facet	Генно-инженерная биотехнология
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/153909
citation_txt	Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха / О.В. Баженова, И.Л. Потокин, Б.В. Симаров // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 3. — С. 151-157. — Бібліогр.: 17 назв. — рос.
series	Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv	AT baženovaov polučeniesferoplastovuklubenʹkovyhbakterijlûcernykleverafasoliigoroha AT potokinil polučeniesferoplastovuklubenʹkovyhbakterijlûcernykleverafasoliigoroha AT simarovbv polučeniesferoplastovuklubenʹkovyhbakterijlûcernykleverafasoliigoroha AT baženovaov otrimannâsferoplastívubulʹbočkovihbakteríjlûcernikonûšinikvasolíígorohu AT potokinil otrimannâsferoplastívubulʹbočkovihbakteríjlûcernikonûšinikvasolíígorohu AT simarovbv otrimannâsferoplastívubulʹbočkovihbakteríjlûcernikonûšinikvasolíígorohu AT baženovaov obtainingofspheroplastsinnodulebacteriaoflucernecloverbeanandpea AT potokinil obtainingofspheroplastsinnodulebacteriaoflucernecloverbeanandpea AT simarovbv obtainingofspheroplastsinnodulebacteriaoflucernecloverbeanandpea
first_indexed	2025-11-24T12:54:17Z
last_indexed	2025-11-24T12:54:17Z
_version_	1849676380000747520
fulltext	Генноинженерная биотехнология У Д К 576.851.155 ПОЛУЧЕНИЕ СФЕРОПЛАСТОВ У КЛУБЕНЬКОВЫХ БАКТЕРИЙ ЛЮЦЕРНЫ, КЛЕВЕРА, ФАСОЛИ И ГОРОХА О. В. Баженова, И. Л. Потокин, Б. В. Симаров Введение. Протопласты бактерий широко используются в микробио- логии для решения фундаментальных и прикладных проблем. Они яв- ляются удобным объектом для изучения строения и функционирования оболочки, выяснения ее роли в синтезе и экскреции биологически актив- ных веществ [1]. С использованием прото- и сферопластов можно зна- чительно повысить эффективность внутри- и межвидовой гибридизации бактерий [2, 3]. Особенно актуальна разработка методов получения сферопластов у микроорганизмов, используемых в практической деятельности чело- века. К таким микроорганизмам относятся, в частности, клубеньковые бактерии (Rhizobium), активно фиксирующие молекулярный азот ат- мосферы в симбиозе с бобовыми растениями. Несмотря на то, что от- дельные авторы наблюдали образование сферопластов у ризобий [4— 6], методы их получения, позволяющие широко использовать сферо- пласты в генетических и биохимических исследованиях, отсутствуют. Ранее нами была разработана методика получения прото- и сферопла- стов у клубеньковых бактерий люцерны [7]. К сожалению, она оказа- лась малопригодной для получения сферопластов у других видов клу- беньковых бактерий. Данная работа посвящена разработке универсального метода, по- зволяющего получать сферопласты у различных видов быстрорастущих клубеньковых бактерий, что открывает возможности для проведения межвидовой гибридизации этих бактерий. Материалы и методы. Ш т а м м ы . В работе использовали следующие штаммы микроорганизмов из коллекции ВНИИ с.-х. микробиологии: прототрофные штаммы клубеньковых бактерий люцерны — СХМ1, 425а, L5-30; клевера — 348а; фасоли — 682, 695, 696; гороха — 250а, а также ауксотрофные мутанты клубеньковых бактерий фа- соли — 682-2 (met 106 t rpl 12), 682-4 (metl06 t rpl 12, s t r l08) , любезно предоставленные К. Μ. Злотниковым (Ин-т биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР), и го- роха— 897 (Ігр 12 phel sir37) из коллекции д-ра Дж. Беринджера (Англия). С ρ е д ы. Бактерии выращивали на обогащенной среде ТУ следующего состава (в г /л ) : бактотриптон — 5, дрожжевой экстракт — 3 («Difco», США), СаС12 — 0,9, рН 7,2 [8]. Регенерацию оболочки сферопластов проводили в слое 0,6 %-ного агара на среде 79 [9] с 0,4 Μ сорбитом. Сферопласты клубеньковых бактерий получали под действием лизоцима и пени- циллина. Для этого бактерии выращивали в жидкой среде ТУ без СаС12 (или его ко- личество было уменьшено до 0,09 г /л в зависимости от вида бактерий) с пеницилли- ном при температуре 28 °С до оптической плотности 1,0, которую определяли па спектрофотометре «Спектромом-195» при длине волны 450 нм. Концентрация пеницил- лина в среде для R. meliloti составляла 1,0 ед/мл, а для R. leguminosarum, R. trifolii, R. phaseoli — 0,1 ед/мл. Затем бактерии осаждали центрифугированием (15 мин, 4000 об/мин), и осадок ресуспендировали в среде для получения сферопластов. По со- ставу она была аналогична срсде с пенициллином, но содержала осмотический стабили- 151 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1988.— Т. 4, № з затор — 0,5 Μ янтарно-кислый натрий и 0,5 мкг/мл лизоцима. Обработку клеток про- водили 1—2 ч при температуре 37 °С и мягком покачивании на качалке. Изменение морфологии клеток в процессе образования сферопластов контролировали под фазово- контрастным и электронным микроскопами. Изучение ультраструктурной организации вегетативных клеток и сферопластов осуществляли на ультратонких срезах клеток по стандартной методике [7]. Результаты и обсуждение. Одним из способов получения сферо- пластов у грам-отрицательных бактерий является нарушение биосин- теза оболочки бактерий под действием ингибиторов и последующий лизис дефектной клеточной степки лизоцимом [1]. В качестве ингиби- тора в нашей работе выбран пенициллин, который, как известно, пре- пятствует нормальному биосинтезу пептидогликапа — компонента, при- дающего основную прочность бактериальной оболочке [10]. Кроме того, показано, что на процесс образования сферопластов у грам-отрицатель- ных бактерий [11] и морфологию клеток ризобий [12] оказывает су- щественное влияние концентрация дивалептных катионов в среде, в ча- стности кальция. Поэтому свою работу мы начали с изучения действия различных концентраций пенициллина и СаС12 па рост в жидкой среде и морфологию клеток различных видов быстрорастущих клубеньковых бактерий. Результаты этих экспериментов представлены в табл. 1. Было установлено, что форма клеток ризобий зависит от концентрации в среде как пенициллина, так и СаСЬ- Добавление в среду для выра- щивания клеток 0,09 г/л СаС12 и 0,5 ед/мл пенициллина вызывало у клубеньковых бактерий клевера, фасоли и гороха образование форм «несбалансированного роста», т. е. клеток овальной или неправильной формы с нарушенным биосинтезом оболочки. При уменьшении концен- трации СаС12 в 10 раз форма клеток менялась в зависимости от сниже- ния концентрации пенициллина в среде (табл. 1). Т а б л и ц а 1 Характеристика формы клеток ризобий при выращивании их на среде, содержащей пенициллин и CaCl2 The morphology of the Rhizobium cells grown on the medium containing penicillin and CaCl2 Вид Штамм Концентрация в среде CaCl2, г/л Вид Штамм 0 I 0,009 0,9 Вид Штамм Концентрация пенициллина, ед/мл Вид Штамм 0,1 0,5 1,0 0,1 0,5 ι,ο ο,ι 0,5 1,0 R. meliloti CXM1 Π HP HP Π Π Π Π π π » L5-30 η Π HP Π π π π π π » 425a π HP HP Π π π ΓΙ π π R. phaseoli 682 — — — HP — — π HP — » 682-2 — — — HP — — π HP — » 682-4 — — — HP — — π HP — » 695 — — — HP — — π HP — » 696 — — — HP — — π HP — R. trijolii 348a — — — HP — — π HP — R. leguminosarum 250a — — — HP — — π HP — » 897 — — — HP — — π HP — П р и м е ч а н и е . Π—нормальный рост на среде, палочковидные клетки; HP—несбалан- сированный рост, клетки деформированы; (—)—отсутствие роста. Клубеньковые бактерии люцерны оказались более устойчивыми к применяемому воздействию. В отличие от других видов ризобий они, во-первых, были способны к росту в среде без добавления СаСЬ и, во-вторых, нарушение биосинтеза оболочки у них происходило при более высокой концентрации пенициллина—1,0 ед/мл. Таким образом, мы наблюдали различия в условиях образования форм «несбалансиро- 152 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1988.— Т. 4, № з ванного роста» между клубеньковыми бактериями люцерны, с одной стороны, и клубеньковыми бактериями клевера, фасоли и гороха, с другой. Для выяснения характера изменений, происходящих в клетках клу- беньковых бактерий при образовании морфологически атипичных форм, Рис. 1. Ультратонкие срезы вегетативных клеток клубеньковых бактерий люцерны, штамм СХМ1 (а) и фасоли, штамм 682-2 (б). Ув. 15000 Fig. 1. Electron micrographs of thin sections of vegetative cells of R. mell· loti, strain CXM1 (a) and R. phaseoli, strain 682-2 (б). Magnification 15000X было проведено их цитологическое изучение до и после обработки пенициллином. На рис. 1 представлены ультратонкие срезы вегетатив- ных клеток клубеньковых бактерий фасоли и люцерны, являющихся типичными палочковидными грам-отрицательными бактериями с мно- гослойной клеточной стенкой. 153 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1988.— Т. 4, № з После культивирования бактерий на среде с пенициллином и огра- ниченным количеством СаС12 у них происходили значительные мор- фологические изменения (рис. 2). Оболочка клеток становится тоньше. Нарушение структуры пептидогликана приводит к отслоению паруж- Рис. 2. Ультратонкие срезы вегетативных клеток клубеньковых бактерий люцерны, штамм СХМ1 (а) и фасоли, штамм 682-2 (б), выращенных на среде с пенициллином и ограниченным количеством СаС12. Ув. 35000 Fig. 2. Electron micrographs of thin sections of vegetative cells of R. rneli- loti, strain CXM1 (a) and R. phaseoli, strain 682-2 (6) grown on the medium with penicillin and limited content of CaCl2. Magnification 35 000X ной мембраны от цитоплазматической, расширению периплазматиче- ского пространства и сжатию протоплазмы клеток. Большинство бак- терий приобретает неправильную, часто сферическую форму. Действие лизоцима на формы «несбалансированного роста» клу- беньковых бактерий вызывает образование сферопластов. При этом сначала происходит локальный лизис оболочки бактерий и образова- 154 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1988.— Т. 4, № з ниє в ней брешей. Расширение периплазматического пространства при- водит затем к отслоению оболочки от цитоплазматической мембраны и отделению ее от сферопластов. Сферопласты клубеньковых бактерий люцерны и фасоли представлены на рис. 3. Рис. 3. Сферопласты клубеньковых бактерий люцерны, штамм СХМ1 (а) и фасоли, штамм 682-2 (б). Ультратонкие срезы. Ув. 90000 Fig. 3. Electron micrographs of thin sections of spheroplasts of R. meliloti, strain CXM1 (a) and R. phaseoli, strain 682-2 (6). Ultrathin sections. Mag- nification 90 0Q0X При детальном рассмотрении строения оболочки клеток, обрабо- танных лизоцимом, было установлено, что большая часть из них — от 90 до 100%, являлась сферопластами, т.е. сохраняла незначитель- ные фрагменты оболочки. Доля протопластов среди них составляла не более 1—10 %. Кроме морфологического анализа строения оболочки, образование сферопластов подтверждалось изучением осмотической чувствительнос- Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1988.— Т. 4, № 3 155 Т а б л и ц а 2 Эффективность регенерации сферопластов различных штаммов быстрорастущих клубені ковых бактерий The effectiveness of spheioplast regeneration in different strains of fastgrowing Rhizobia Вид Штамм Эффективность регенерации, % Вид Штамм 1-й опыт 2-й опыт 3-й опыт Среднее значение R. melilcti CXM1 6 ,4 1,3 5 , 7 4 , 4 ± 1 , 6 0 R. pnaseoli 682 4 , 8 3 , 3 6 ,9 5 , 0 + 1 , 0 4 » 682-2 5 , 4 1,4 2 , 7 3,2-4-1,17 R. trifolii 348a 1,0 1,8 1,5 1 , 4 ± 0 , 2 3 R. leguminosarum » 250a 0 , 8 3 , 1 2 , 5 2 , 1 + 0 , 4 6 R. leguminosarum » 897 3 , 2 2 ,0 4 , 4 3,2-4-0,69 ти клеток. Бактерии, обработанные лизоцимом и пенициллином, после суспендирования в дистиллированной воде теряли жизнеспособность и не формировали колоний при высеве на агаризоваппые среды. Для проведения генетических экспериментов со сферопластами не- обходимо было изучить их способность к восстановлению оболочки. Оказалось, что эффективность регенерации сферопластов составляла в среднем 1,4—5,0% (табл. 2). Она была несколько ниже у клубенько- вых бактерий клевера (штамм 348а) и гороха (штамм 250а). Отмече- на большая изменчивость в способности сферопластов восстанавливать свою оболочку в различных опытах. Известно, что эффективность регенерации сферопластов у грам-от- рицательпых бактерий зависит от способа их получения и, как прави- ло, составляет 1 —10% [1]. Часто сферопласты получают при фермен- тативном лизисе оболочки лизоцимом и ЭДТА [1, 4, 7, 13], так как этот метод обеспечивает наиболее полное удаление бактериальной оболочки [14, 15]. При его использовании эффективность регенерации сферопластов не превышает 1% [7, 14]. Результаты наших исследо- ваний, выполненных па различных видах быстрорастущих клубеньковых бактерий, подтверждают вывод о том, что сферопласты, полученные с помощью пенициллина [1, И, 13], обладают более высокой способ- ностью восстанавливать оболочку, чем сферопласты, полученные под действием ЭДТА. Как известно, ЭДТА может экстрагировать дивалент- ные катионы из цитоплазматической мембраны, окружающей сферо- пласты [16], и понижать жизнеспособность бактерий [17]. Таким образом, в результате проделанной работы нам удалось раз- работать универсальный метод получения сферопластов у быстрорасту- щих видов клубеньковых бактерий. Его использование позволяет при- ступить к проведению как внутри-, так и межвидовой гибридизации бактерий рода Rhizobium. OBTAINING OF S P H E R O P L A S T S IN NODULE BACTERIA O F LUCERNE, CLOVER, BEAN AND P E A О. V. Bazhenova, I. L. Potokin, В. V. Simarov Ail-Union Research Inst i tute of Farm Microbiology, Leningrad, Pushkin S u m m a r y A simple universal procedure has been developed for obtaining stable spheroplasts from the fas t -growing species of Rhizobium (R. meliloti, R. phaseoli, R. trifolii, R. legumino- sarum). Spheroplasts were prepared by cul tur ing cells in the osmotically stable medium with a decreased content of calcium cations in the presence of penicillin, followed by t rea tment with lysozyme. The electron-microscopic analysis of the process of sphero- plas ts formation was performed. The average effectiveness of the cell wall regeneration is 1.4-5.0 %· 156 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1988,— Τ. 4, N° З 1. Яковенко К. Η., Троицкий Η. А. Протопласты микроорганизмов.— Минск : Наука и техника, 1985.—159 с. 2 Chang S., Cohen S. Ν. High frequency transformation of Bacillus subtilis protoplast by plasmid D N A / / M o l . and Gen. Genet.— 1979.—168, N 1.—P. 111—115. 3. Akamatsu ΤSekiguchi J. Selection methods in bacilli for recombinants and transfor- mants of intra- and interspecific fused p ro top l a s t s / /Arch . Microbiol — 1983.—134, N 4.— P. 303—308. 4. Staniewski R., Rugala A. Frequency of infection and efficiency of transfection of Rhizobium meliloti cells and spheroplasts / / Acta microbiol pol. Α.— 1975.—N 3,— P. 151 — 160. 5. Berry J., Atherley A. G. Spheroplasts of Rhizobium japonicum / / Can. J. Microbiol.— 1984.—30, N 2 .—P. 415—419. 6. Child J. J., Sietsma J. N. Spheroplasts from Rhizobium japonicum / / Plant Sci. Lett.— 1975.—4, N 3 ,—P. 267—271. 7. Получение протопластов у клубеньковых бактерий люцерны Rhizobium meliloti / О. В. Филатова, Б. В. Симаров, В. В. Кучко и д р . / / И з в . АН СССР.— 1982.— № 1.—Р. 140—142. 8. DNA sequences homology in Rhizobium meliloti plasmids / L. Jouanin, P. de Lajudie, S. Bazetoux, T. Huguet / / Мої. and Gen. Genet.— 1981.—182, N 2 ,—P. 189—195. 9. Allen O. N. Experiments in soil bacteriology.— Minneapolis: Burgess publ. со., 1959.—59 p. 10. Франклин Т., Сноу Дж. Биохимия антимикробного действия.— М. : Мир, 1984.— 238 с. 11. Максимова Н. П., Желдакова Р. Α., Фомичев Ю. К. Получение протопластоподоб- ных структур Pseudomonas putida и их реверсия в бактериальные формы / / Микро- биология.— 1982.—51, № 4.— С. 628—631. 12. Bergersen F. J. The growth of Rhizobium on synthetic media / / A u s t r . J. Biol. Sci.— 1961,—14, N 1.—P. 349—360. 13. McQuillen K. Bacterial p r o t o p l a s t s / / T h e Bacteria.— New York: Acad, press, 1981.— Vol. 1.— P. 249—360'. 14. Ценин A. H., Каримова F. Α., Рыбчин В. Η. Рекомбинация при слиянии протопла- стов Е. coli И Докл. АН СССР.— 1978.—243, № 4.—С. 1066—1068. 15. Weiss R. L. Protoplast formation in Escherichia coli s t r a i n s / / J . Bacteriol.— 1976.— 128, N 2 .—P. 668—670. 16. Leive L. Release of lipopolysaccharide by EDTA treatment Escherichia coli / / B i o - chem. and Biophys. Res. Communs.— 1965.—21, N 1.—P. 290—296. 17. Goldschmidt M. C., Wyss O. Chelation effects on Azotobacter cells and c y s t s / / J . Bacteriol.— 1966.—91, N 1.—P. 120—124. ВНИИ с.-х. микробиологии, Ленинград Получено 27.08.86 У Д К 575.24 ОТСУТСТВИЕ У ПРИРОДНЫХ САХАРОМИЦЕТОВ Ту ЭЛЕМЕНТОВ И 2 мкм ДНК С. А. Булат Введение. В геноме дрожжей Saccharomyces cerevisiae присутствуют локализованные в хромосомах перемещающиеся элементы — Ту транс- позоны [1—3] и экстрахромосомный элемент специфической структу- ры— 2 мкм плазмида [4, 5]. Первая группа элементов (транспозоны) является, по-видимому, обязательной компонентой генома всякой эука- риотической клетки, вторая же — 2 мкм ДНК, может рассматриваться как элемент, специфичный для дрожжей [4—8]. Поскольку биологиче- ская роль этих элементов в дрожжах остается нераскрытой, несмотря на интенсивные исследования, мы будем называть их криптическими генетическими элементами дрожжей. Для решения проблемы биологической значимости криптических генетических элементов представляется важным дополнить молекуляр- но-генетическое их изучение в дрожжах S. cerevisiae филогенетическим и экологическим аспектами, т.е. расширить круг организмов — объек- тов исследования с учетом их родства и биологических связей и исполь- зовать метод трансгенеза элементов. В соответствии с этим планом на- ми начата работа по изучению распространения известных криптиче- Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1988.—Т. 4, № 3 157

Получение сферопластов у клубеньковых бактерий люцерны, клевера, фасоли и гороха

Institution

Ähnliche Einträge