Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322
Получены трансгенные мыши, несущие рекомбинантную плазмиду pATV-8, созданную на основе pBR322 и провирусной ДНК вируса саркомы Рауса. Введенная ДНК передавалась потомству с частотой, исключающей вероятность встраивания ее копий в один хромосомный сайт. У потомков некоторых трансгенных мышей наблюдал...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Дата: | 1988 |
| Автори: | , , , , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1988
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154047 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 / А.П. Соломко, А.В. Рындич, Т.Г. Титок, Л.М. Морозова, И.Н. Вагина, Л.И. Чащина, С.В. Евсиков, И.В. Кириченко, Н.А. Сарапина // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 5. — С. 267-269. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-154047 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Соломко, А.П. Рындич, А.В. Титок, Т.Г. Морозова, Л.М. Вагина, И.Н. Чащина, Л.И. Евсиков, С.В. Кириченко, И.В. Сарапина, Н.А. 2019-06-15T06:26:29Z 2019-06-15T06:26:29Z 1988 Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 / А.П. Соломко, А.В. Рындич, Т.Г. Титок, Л.М. Морозова, И.Н. Вагина, Л.И. Чащина, С.В. Евсиков, И.В. Кириченко, Н.А. Сарапина // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 5. — С. 267-269. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000236 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154047 577.218 Получены трансгенные мыши, несущие рекомбинантную плазмиду pATV-8, созданную на основе pBR322 и провирусной ДНК вируса саркомы Рауса. Введенная ДНК передавалась потомству с частотой, исключающей вероятность встраивания ее копий в один хромосомный сайт. У потомков некоторых трансгенных мышей наблюдались фенотипические аномалии. Отримано трансгенні миші, що несуть рекомбінантну плазміду pATV-8, створену на основі pBR322 і провірусної ДНК вірусу саркоми Рауса. Введена ДНК передавалася потомству з частотою, яка виключає ймовірність вбудовування її копій в один хромосомний сайт. У нащадків деяких трансгенних мишей спостерігали фенотипові аномалії. The transgenic mice containing recombinant pATV-8 plasmid, produced by insertion of the provirus DNA of RSV into pBR322 were obtained. The type of the transgene DNA inheritance cannot be explained by the insertion of its copies into one chromosomal site. In certain transgenic mice lines the phenotypic disorders were observed. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Краткие сообщения Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 Трансгенні миші, отримані на основі плазмід pATV-8 і pBR322 The transgenic mice containing pATV-8 AND pBR322 plasmids Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 |
| spellingShingle |
Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 Соломко, А.П. Рындич, А.В. Титок, Т.Г. Морозова, Л.М. Вагина, И.Н. Чащина, Л.И. Евсиков, С.В. Кириченко, И.В. Сарапина, Н.А. Краткие сообщения |
| title_short |
Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 |
| title_full |
Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 |
| title_fullStr |
Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 |
| title_full_unstemmed |
Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 |
| title_sort |
трансгенные мыши, полученные на основе плазмид patv-8 и pbr322 |
| author |
Соломко, А.П. Рындич, А.В. Титок, Т.Г. Морозова, Л.М. Вагина, И.Н. Чащина, Л.И. Евсиков, С.В. Кириченко, И.В. Сарапина, Н.А. |
| author_facet |
Соломко, А.П. Рындич, А.В. Титок, Т.Г. Морозова, Л.М. Вагина, И.Н. Чащина, Л.И. Евсиков, С.В. Кириченко, И.В. Сарапина, Н.А. |
| topic |
Краткие сообщения |
| topic_facet |
Краткие сообщения |
| publishDate |
1988 |
| language |
Russian |
| container_title |
Биополимеры и клетка |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Трансгенні миші, отримані на основі плазмід pATV-8 і pBR322 The transgenic mice containing pATV-8 AND pBR322 plasmids |
| description |
Получены трансгенные мыши, несущие рекомбинантную плазмиду pATV-8, созданную на основе pBR322 и провирусной ДНК вируса саркомы Рауса. Введенная ДНК передавалась потомству с частотой, исключающей вероятность встраивания ее копий в один хромосомный сайт. У потомков некоторых трансгенных мышей наблюдались фенотипические аномалии.
Отримано трансгенні миші, що несуть рекомбінантну плазміду pATV-8, створену на основі pBR322 і провірусної ДНК вірусу саркоми Рауса. Введена ДНК передавалася потомству з частотою, яка виключає ймовірність вбудовування її копій в один хромосомний сайт. У нащадків деяких трансгенних мишей спостерігали фенотипові аномалії.
The transgenic mice containing recombinant pATV-8 plasmid, produced by insertion of the provirus DNA of RSV into pBR322 were obtained. The type of the transgene DNA inheritance cannot be explained by the insertion of its copies into one chromosomal site. In certain transgenic mice lines the phenotypic disorders were observed.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154047 |
| citation_txt |
Трансгенные мыши, полученные на основе плазмид pATV-8 и pBR322 / А.П. Соломко, А.В. Рындич, Т.Г. Титок, Л.М. Морозова, И.Н. Вагина, Л.И. Чащина, С.В. Евсиков, И.В. Кириченко, Н.А. Сарапина // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 5. — С. 267-269. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT solomkoap transgennyemyšipolučennyenaosnoveplazmidpatv8ipbr322 AT ryndičav transgennyemyšipolučennyenaosnoveplazmidpatv8ipbr322 AT titoktg transgennyemyšipolučennyenaosnoveplazmidpatv8ipbr322 AT morozovalm transgennyemyšipolučennyenaosnoveplazmidpatv8ipbr322 AT vaginain transgennyemyšipolučennyenaosnoveplazmidpatv8ipbr322 AT čaŝinali transgennyemyšipolučennyenaosnoveplazmidpatv8ipbr322 AT evsikovsv transgennyemyšipolučennyenaosnoveplazmidpatv8ipbr322 AT kiričenkoiv transgennyemyšipolučennyenaosnoveplazmidpatv8ipbr322 AT sarapinana transgennyemyšipolučennyenaosnoveplazmidpatv8ipbr322 AT solomkoap transgennímišíotrimanínaosnovíplazmídpatv8ípbr322 AT ryndičav transgennímišíotrimanínaosnovíplazmídpatv8ípbr322 AT titoktg transgennímišíotrimanínaosnovíplazmídpatv8ípbr322 AT morozovalm transgennímišíotrimanínaosnovíplazmídpatv8ípbr322 AT vaginain transgennímišíotrimanínaosnovíplazmídpatv8ípbr322 AT čaŝinali transgennímišíotrimanínaosnovíplazmídpatv8ípbr322 AT evsikovsv transgennímišíotrimanínaosnovíplazmídpatv8ípbr322 AT kiričenkoiv transgennímišíotrimanínaosnovíplazmídpatv8ípbr322 AT sarapinana transgennímišíotrimanínaosnovíplazmídpatv8ípbr322 AT solomkoap thetransgenicmicecontainingpatv8andpbr322plasmids AT ryndičav thetransgenicmicecontainingpatv8andpbr322plasmids AT titoktg thetransgenicmicecontainingpatv8andpbr322plasmids AT morozovalm thetransgenicmicecontainingpatv8andpbr322plasmids AT vaginain thetransgenicmicecontainingpatv8andpbr322plasmids AT čaŝinali thetransgenicmicecontainingpatv8andpbr322plasmids AT evsikovsv thetransgenicmicecontainingpatv8andpbr322plasmids AT kiričenkoiv thetransgenicmicecontainingpatv8andpbr322plasmids AT sarapinana thetransgenicmicecontainingpatv8andpbr322plasmids |
| first_indexed |
2025-11-25T01:52:31Z |
| last_indexed |
2025-11-25T01:52:31Z |
| _version_ |
1850504138334404608 |
| fulltext |
в Краткие
сообщения
УДК 577.218
ТРАНСГЕННЫЕ МЫШИ.
ПОЛУЧЕННЫЕ НА ОСНОВЕ ПЛАЗМИД pATV-8 И pBR322
А. П. Соломко, А. В. Рындич, Т. Г. Титок, Л. М. Морозова,
И. Н. Вагина, Л. И. Чащина, С. В. Евсиков,
И. В. Кириченко, Н. А. Сарапина
Исследованиями последних десяти лет показано, что существенную роль в изменчи-
вости генома эукариот играет интеграция провирусной Д Н К ретровирусов, в результа-
те чего изменяется регуляция активности различных хозяйских генов. При этом обра-
щает на себя внимание сходство структуры ретровирусов с перемещающимися генети-
ческими элементами эукариот: лабильность их структуры при интеграции, наличие
сильного промотора ( L T R ) , способного усиливать во много раз транскрипцию прилежа-
щих генов клеток хозяина, стадиеспецифичность функциональной активности, зависи-
мой от характера дифференцировки тех или иных клеток [1].
Данная работа посвящена созданию экспериментальной модели, которая позволила
бы детально исследовать механизмы взаимодействия ретровирусного генома и генома
хозяина на основе трансгенных мышей с интегрированными последовательностями про-
вируса саркомы Рауса кур.
Для проведения микроинъекций в качестве донорной была взята Д Н К плазмиды
pATV-8, созданная на основе плазмиды pBR322 и провирусной Д Н К вируса саркомы
Рауса кур [2]. Донорами яйцеклеток для проведения инъекций служили мыши линии
ICR, гормонально стимулированные для получения синхронизированных яйцеклеток.
Микроинъекции проводили в мужской пронуклеус зигот на стадии двух пронуклеусов
с помощью микроманипулятора КМ-2. Вводили 200—400 копий плазмиды на яйцеклет-
ку, после чего зиготы пересаживали псевдобеременным самкам той же линии. В па-
раллельных экспериментах в яйцеклетки вводили столько же копий плазмиды pBR322.
Нами было установлено, что инъекция плазмиды, имеющей в своем составе по-
следовательности генома вируса Рауса кур, достоверно снижает число самок-реципи-
ентов, выносивших детенышей, по отношению к контрольной группе, где проводились
пересадки зародышей, прошедших все манипулирования, кроме инъекций. Такая же за-
кономерность наблюдалась и для самок-реципиентов при трансплантации им зароды-
шей, микроинъецированных плазмидой pBR322.
Результаты пересадок зародышей, микроинъецированных плазмидными ДНК
Results of transplantation of microinjected zygotes
Количество
Инъецированная
Д Н К реципиентов инъецированных
зародышей
родивших
самок (%)
родившихся
мышат (%)
pATV-8 8 0 821 31
( 3 8 , 7 5 ± 0 , 0 5 ) *
8 4
( 1 0 , 2 3 + 0 , 0 1 )
pBR322 2 5 2 9 4 14
( 5 6 , 0 0 + 0 , 1 0 )
6 0
( 2 0 , 4 1 + 0 , 0 2 ) *
Контроль 3 9 4 9 6 2 7 8 3
(69,23+0,07) (16,73+0,02)
* Достоверно при Ρ > 0 , 9 9 .
Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА,— 1988,—Т. 4, № 5 267
Анализ результатов экспериментов по пересадке микроинъецированных зигот по-
казал, что выживаемость зародышей в случае инъекции плазмиды pATV-8 была досто-
верно меньше, чем при введении плазмиды pBR322 (таблица). Можно предположить,
что особенности структуры плазмиды pATV-8 и ее достаточно большой размер
(14 Т. п, н.) являются основными причинами повышенной частоты летальных повреж-
дений зародышей по сравнению с плазмидой pBR322.
По данным дот-блот-гибридизации меченной 3 2 Р Д Н К плазмид pATV-8 и pBR322
(удельная активность (2—3)·108 и м п - м и н - ^ м к г - 1 ) с тотальной высокополимерной
Д Н К из хвостов экспериментальных мышей, количество трансгенных животных в се-
рии с микроинъецированием плазмиды pATV-8 было достоверно большим (24 из 52
исследованных мышат, что составляет 46,15±0,007 %), чем в серии с введением плаз-
миды pBR322 (8 из 40 исследованных, 20±0,06 %).
Полученные трансгенные мыши были скрещены с нормальными животными той
же линии. Предварительный анализ результатов скрещиваний свидетельствует о на-
рушении репродуктивных способностей у ряда трансгенных самок, несущих вставку
pATV-8. Из 13 исследованных трансгенных самок четыре дали всего 1—2 небольших
помета, от одной самки не удалось получить потомства при различных скрещиваниях.
У трансгенных самок В-7 и В-17 после первых
родов развились опухоли, и они были забиты
для анализа. У самок двух линий после скре-
щивания их с самцом П-6 (вставка pBR322)
также отмечено достоверное снижение плодо-
витости за счет увеличения постимплантаци-
онной смертности эмбрионов.
Рис. 1. Фенотип потомков второго поколения трансгенных мышей: а, б, β — мутантные
мышата; г — мышата дикого типа
Fig. 1. The phenotype of F2 t ransgenic mice progeny: a, 6, β — mutant mice; г — w i l d -
type mice
Рис. 2. Дот-гибридизационный анализ Д Н К хвостов потомков первого поколения транс-
генных мышей
Fig. 2. Dot hybridization analysis of tail DNA from Fi transgenic mice progeny
Анализ потомков трансгенных мышей первого поколения показал отсутствие
менделсвского наследования введенной плазмиды pATV-8 в некоторых сублиниях. Прак-
тически все потомки сублинии В-6 наследовали данную последовательность (рис. 1).
Эти результаты свидетельствуют либо о том, что встраивание плазмидной последова-
тельности произошло как минимум в две негомологичные хромосомы, либо об авто-
номном существовании плазмиды наряду с интеграцией. Данные о возможности пере-
дачи свободно существующей плазмиды у трансгенных мышей появились в печати в
последнее время [3, 4]. Вероятность такой передачи в случае нашей модели сейчас
проверяется.
В той же сублинии {В-6) трансгенных мышей, несущих вставку pATV-8, среди
потомков второго поколения выявлены мертворожденные мышата с недоразвитием
хвостов (рис. 2). Аномалии в развитии скелета у потомков трансгенных мышей были
отмечены авторами работы [5, 6]. Обнаруженные нами нарушения репродуктивных
функции у ряда исходных трансгснных мышей и аномалии развития их потомков, как
правило, проявляющиеся у потомков второго поколения гомозиготных по встройке чу-
жеродной ДНК, отмечали и другие авторы [7—9].
268 БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА — 1988 —Т. 4, ^
Транспозоноподобная структура генома вируса саркомы Рауса — наличие флан-
кирующих LTR, гена sarc, находящегося под сильным промотором, обусловливают пер-
спективность использования плазмиды pATV-8 в исследованиях стадие- и тканеспеци-
фичиости экспрессии генов, стабильности структуры трансгеномов, взаимодействия
трансгеномов и генома клеток организма, несущего трансгеном.
THE TRANSGENIC MICE CONTAINING pATV-8 AND pBR822 PLASMIDS
A. P. Solomko, Α. V. Ryndich, T. G. Titok, L. M. Morozova, I. N. Vagina,
L. I. Chashchina, S. V. Evsykov, I. V. Kirichenko, N. A. Sarapina
Inst i tute of Molecular Biology and Genetics,
Academy of Sciences of the Ukrainian SSR, Kiev
S u m m a г у
The t ransgenic mice conta in ing recombinant pATV-8 plasmid, produced by insertion of
the provirus DNA of RSV into pBR322 were obtained. The type of the i ransgene DNA
inheritance cannot be explained by the insertion of its copies into one chromosomal site.
In certain t ransgenic mice lines the phenotypic disorders were observed.
1. Хесин P. Б. Непостоянство генома.— Μ. : Наука , 1984.—472 с.
2. Restriction endonuclease and nucleotide sequence analysis of molecularly cloned unin-
tegrated avian tumor virus DNA: s t ructure of large terminal repeats in circle juncti-
ons / R. A. Katz, C. A. Omer, G. H. Weis et a l . / / J . Gen. Virol.—1982,—42, N 1.—
P. 346—351.
3. Rescue of a tk-plasmid f rom t ransgenic mice reveals its episomal t ransmiss ion / U. Ki-
essling, R. Becker, M. S t rause et a l . / / М о ї . and Gen. Genet.— 1986,—204, N 2,—
P. 328—333.
4. Germ line t ransmiss ion of au tonomous genetic elements in t ransgenic mouse s t ra ins /
M. Rassoulzadegan , P. Leopold, J. Vailly, F. Cuzin / / Cell.— 1986,—46, N 4,—
P. 513—519.
5. Gordon J. W. A foreign dihydrofolate reductase gene in t ransgenic mice acts as a
dominant m u t a t i o n / / М о ї . and Cell. Biol.— 1986.—6, N 6 . — P . 2158—2167.
6. An inherited limb deformity created by insertional mutagenes i s in t ransgenic m o u s e /
R. P. Woychik, T. A. Stewart , L. Y. Davis et a l . / / N a t u r e . — 1985—318, N 6041.—
P. 36—40.
7. Prenatal lethalities in mice homozygous for h u m a n growth hormone sequences inte-
grated in the germ line / E. F. Wagner , L. Covarrubias , T. A. Stewart , B. M i n t z / /
Cell.— 1983.—35, N 3 . — P . 647—655.
8. Insertion of retrovirus into first intron of I / I -co l lagen gene leads to embryonic lethal
muta t ion in mice / K. Harbers , M. Kuehn, H. Delius, R. Jaenisch // Proc. Nat. Acad.
Sci. USA.— 1984,—81, N 5 , — P . 1504—1508.
9. Covarrubias L., Nishido Y., Mintz B. Ear ly pos t implanta t ion embryo lethali ty due to
DNA rea r rangements in a t ransgenic mouse s t r a i n / / I b i d . — 1986.—83, N 16.—:
P. 6020—6024.
Ин-т молекуляр. биологии и генетики АН УССР, Киев Получено 17.06.87
УДК 577.152:577.151
ИНДУЦИРУЕМАЯ ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫМ СУБСТРАТОМ
ДИМЕРИЗАЦИЯ ЭНДОДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕАЗЫ Mval
Л. Г. Овечкина, С. Р. Попова, В. В. Зиновьев, Д. П. Вайткявичюс,
А. А. Янулайтис, Ю. А. Горбунов, Э. Г. Малыгин
Эндонуклеазы типа II, как правило, узнают симметричную нуклеотидную последова-
тельность и имеют димерную структуру типа а 2 [1]. Имеются, однако, исключения —
например, для эндодезоксирибонуклеаз Bgll и Bspl показано, что они являются моно-
мерными белками [1].
Исследование таких эндонуклеаз представляет специальный интерес, так как
структура фермента, взаимодействующего с симметричным субстратом, должна иметь
элементы симметрии. Один из возможных способов образования симметричной струк-
Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА— 1988,—Т. 4. № 5 2 6 9
|