Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов
Изучено влияние ферментов церулоплазмина (ЦП) и лакказы (ЛК) і O₂⁻ - генерирующие системы: ксантин/ксантиноксидаза и НАДН/ФМС. Показано, что кинетический механизм действия этих ферментов отличен от действия супероксиддисмутазы (СОД). Если СОД реагирует непосредственно с O₂⁻, то ЦП и ЛК взаимодейству...
Saved in:
| Published in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Date: | 1988 |
| Main Authors: | , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1988
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154049 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов / А.Г. Сергеев, А.Р. Павлов, Е.О. Жажина, В.В. Басевич, А.И. Ярополов // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 5. — С. 245-250. — Бібліогр.: 17 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859669210771226624 |
|---|---|
| author | Сергеев, А.Г. Павлов, А.Р. Жажина, Е.О. Басевич, В.В. Ярополов, А.И. |
| author_facet | Сергеев, А.Г. Павлов, А.Р. Жажина, Е.О. Басевич, В.В. Ярополов, А.И. |
| citation_txt | Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов / А.Г. Сергеев, А.Р. Павлов, Е.О. Жажина, В.В. Басевич, А.И. Ярополов // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 5. — С. 245-250. — Бібліогр.: 17 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Изучено влияние ферментов церулоплазмина (ЦП) и лакказы (ЛК) і O₂⁻ - генерирующие системы: ксантин/ксантиноксидаза и НАДН/ФМС. Показано, что кинетический механизм действия этих ферментов отличен от действия супероксиддисмутазы (СОД). Если СОД реагирует непосредственно с O₂⁻, то ЦП и ЛК взаимодействуют с предшественником O₂⁻, проявляя тем самым ярко выраженные электроакцепторные функции. Представленные результаты указывают на возможность рассмотрения ЦП в качестве универсальной оксидазы плазмы крови человека и млекопитающих.
Вивчено вплив ферментів церулоплазміну (ЦП) і лаккази (ЛК) на O₂⁻-генерувальні системи: ксантин/ксантиноксидаза і НАДН/ФМС. Показано, що кінетичний механізм дії цих ферментів різниться від дії супероксиддисмутази (СОД). Якщо СОД реагує безпосередньо з O₂⁻, то ЦП і ЛК взаємодіють з попередником O₂⁻, проявляючи тим самим яскраво виражені електроакцепторні функції. Представлені результати вказують на можливість розгляду ЦП як універсальної оксидази плазми крові людини і ссавців.
Ceruloplasmin (CP) and laccase were studied for their effect on the xanthine/xanthine oxidase (Xan/XOD) and NADH/phenasine methasulphate (PMS) O₂⁻-generating systems. It was shown that the kinetic action of these enzymes differs from that of superoxide dismulase (SOD). While SOD scavenges immediately O₂⁻, then CP and laccase react with a predecessor of O₂⁻ demonstrating clearly their role as electron acceptors. The results indicate that the CP acts as possible universal oxidase of mammalian and human serum.
|
| first_indexed | 2025-11-30T13:01:26Z |
| format | Article |
| fulltext |
1. Nomenclature committee of the International union of biochemistry (NC-IUB). No-
menclature of iron-sulfur proteins. Recommendation 1978//Biochim et biophys
acta.— 1979,—549, N 1.—P. 105—109.
2. New perspectives in ferredoxin evolution / D. 'G. Geoge, L. T. Hunt L - S L Yeh
W. C. B a r k e r / / J . Мої. Evol.— 1985.— 22, N 1.—P. 20—31.
3. Beinert H. Iron-sulfur proteins, the most numerous and diversified component of the
mitochondrial electron t r anspor t / /Adv . Exp. Med. and Biol.— 1976.— 74.— P. 137—149.
4. Chance B. Electron transfer: pathways, mechanisms and con t ro l s / /Annu Rev
Biochem.— 1977,— 46.— P. 967—980.
5. Лузиков В. И. Регуляция формирования митохондрий.— М. : Наука, 1980.— 318 с.
6. Sequence and organization of the human mitochondrial genome / S Anderson
A. T. Bankier, В. C. Barrel et a l . / /Na ture .— 1981.—290, N 5806.—P. 457—465.
7. De-Pierre J. W., Ertister L. Enzymology of intracellular membranes / /Annu . Rev
Biochem.— 1977.— 46.— P. 201—262.
8. Location and nucleotide sequence of the frd B, the gene coding for the iron-sulfur of
fumarate reductase of Escherichia coli/S. T. Cole, T. Grunstrom, B. Jaurin et a l . / /
Eur. J. Biochem.— 1982,— 126, N 1,—P. 211—216.
9. Nucleotide sequence coding for the respiratory NADH dehydrogenase, UUG initiation
codon of Escherichia colij I. E. Yong, B. L. Roger, H. D. Campbell et al. / / I,bid.—
1981.— 116, N 1,—P. 165—170.
10. Cole S. T. Nucleotide sequence coding for the flavoprotein subunit A of the fumarate
reductase of Escherichia coli Ц Ibid — 1982.— 122, N 3 .—P. 479—484.
11. Commak R. Evolution and diversity in the iron-sulfur pro te ins / /Chim. scr.— 1983.—•
21, N 1,— P. 87—95.
12. Dayhoff M. O., Hunt T. L. Protein sequence database.— Washington: D. C., 1981.—
265 p.
13. Dayhoff Μ. ОBarker W. СHunt L. T. Establishing homologies in protein sequen-
ces / /Meth . Enzymol.— 1983.—91.—P. 524—545.
14. Tedro S. M., Mayer Т. E., Kamen M. D. Pr imary structure of a high potential iron-
sulfur protein from photosynthetic bacterium Thiocapsa phennigii // J. Biol. Chem.—
1974.—249, N 5 .—P. 1182—1188.
15. Fox / . L. Evolution of f lavoprote ins / /F lav ins and flavoproteins.— Amsterdam: Else-
vier, 1976.—P. 432—436.
16. Metallothionein: an exceptional metal thiolate protein / J. H. R. Kagi, J. Kojima,
M. N. Kissling, K. Lerch // Experta medica. Sulfur in biology.— Amsterdam etc.,
1980,— V. 72.— P. 223—227.
Ин-т биофизики МЗ СССР, Москва Получено 23.02.87
У Д К 588.17
ВЛИЯНИЕ ЦЕРУЛОПЛАЗМИНА,
ЛАККАЗЫ И СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗЫ
НА УРОВЕНЬ СУПЕРОКСИДРАДИКАЛОВ
А. Г. Сергеев, А. Р. Павлов, Е. О. Жажина, В. В. Басевич, А. И. Ярополов
Введение. Уровень концентрации супероксидрадикалов ( 0 2 ~ ) опреде-
ляет характер протекапия многих процессов в организме как в норме,
так и при патологии [1, 2]. Согласно современным представлениям,
одним из основных ферментов, обладающих аптиоксидантпыми свойст-
вами, является супероксиддисмутаза (СОД, КФ 1.15.1.1), которая ка-
тализирует реакцию [3]
20- + 2 Н - > Н 2 0 2 + 0 2 . (1)
Кинетические закономерности протекания реакции (1) в присут-
ствии СОД из различных объектов описаны достаточно полно [4, 5].
Опубликованные в последнее время данные об участии в этой реакции
гликопротеидов церулоплазмина, содержащих медь (ЦП, Ре ( I I ) : кис-
лород оксидоредуктаза; КФ 1.16.3.1), и лакказы (ЛК, полифеполо-
ксидаза; КФ 1.14.18.1) указывают на возможность расширения числа
ферментов-аптиоксидантов [2, 6]. Концентрация Ц П в плазме крови
человека достаточно велика ( ~ 0 , 3 мг/мл) и зависит от общего со-
стояния организма [7, 8]. Однако до настоящего времени нет единой
Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА — 1988,— Т. 4, № 5 4 — 8-411 245
Кинетические закономерности протекания реакции (1) в присут-
ствии СОД из различных объектов описаны достаточно полно [4, 5].
Опубликованные в последнее время данные об участии в этой реакции
гликопротеидов церулоплазмина, содержащих медь (ЦП, Ре ( I I ) : кис-
лород оксидоредуктаза; КФ 1.16.3.1), и лакказы (ЛК, полифеполо-
ксидаза; КФ 1.14.18.1) указывают па возможность расширения числа
ферментов-антиоксидантов [2, 6]. Концентрация Ц П в плазме крови
человека достаточно велика (•—• 0,3 мг/мл) и зависит от общего со-
стояния организма [7, 8]. Однако до настоящего времени нет единой
точки зрения об основной физиологической функции ЦП [9, 10]. Это
связано с противоречивым характером результатов исследовании
свойств данного фермента, в том числе его способности изменять кон-
центрацию 0~2-радикалов [6, 11]. Способность Л К влиять на уровень
0~2-радикалов в среде фактически не изучена [2]. В связи с этим в
работе рассмотрены процессы, которые протекают in vitro в системах
генерации 0~ 2 -радикалов в присутствии Ц П и Л К, проведено сравне-
ние кинетического описания этих процессов и реакций, катализиру-
емых СОД.
Материалы и методы. В работе использовали ЦП человека, полученный НИИ
эксперим. медицины им. Л. Пастера (Ленинград) и охарактеризованный ранее [12],
СОД из печени крупного рогатого скота (А2бо/А68о = 36, Ин-т биохимии АН АрмССР),
Л К из грибов Polyporus versicolor (Арм. филиал ИРЕА) и бычий сывороточный альбумин
фирмы «Serva» (ФРГ). Для получения радикалов 0 2 ~ применяли системы ксантин /
ксантиноксидаза [13] и НАДН / феназинметасульфат (ФМС) [14], в которых исполь-
зовали реагенты производства фирмы «Sigma» (США), «Calbiochem» (США), «Reanal»
(ВНР) и «Ega-chimie» (ФРГ) соответственно. Регистрацию 0 2 ~ проводили спектро-
фотометрически по образованию из нитротетразолисвого синего (НТС) диформазана
(Форм), имеющего высокий коэффициент экстинкции при λ = 560 нм.
Стандартными условиями для получения супероксидрадикала в соответствующих
системах являлись 5,9· Ю - 5 Μ ксантин, 3,5· Ю - 8 Μ ксантиноксидаза и 2 · Ю - 4 Μ НТС
(для ксантин/ксантиноксидазы) и 7 ,8 ·10- 5 Μ НАДН, М 0 ~ 5 Μ ФМС и 2 · 1 0 " 4 Μ НТС
(для НАДН/ФМС). Прямым экспериментом показано, что в области использованных
значений концентраций ферментов их влияние на процесс окисления ксантина в системе
ксантин / ксантиноксидаза отсутствует.
Изучение кинетики реакции и регистрацию спектров проводили с использованием
спектрофотометров «Hitachi-557» (Япония), «Specord М-40» (ГДР) и «LKB» (Швеция).
Для приготовления рабочих растворов применяли воду, очищенную на установке «Milli-
RO, Milli-Q» фирмы «Мііііроге» (США). Измерение рН проводили на рН-метре
О Р - 2 1 1 / 1 фирмы «Radelkis» (ВНР) . В работе использовали реактивы марок «хч»,
«осч». Анаэробные условия создавали продуванием аргоном марки «осч» в течение
30 мин с последующим добавлением 2,3· 10~"2 Μ глюкозы, 1,3· 10 - 6 Μ глюкозооксидази
и 1,3· 10~6 Μ каталазы.
Результаты и обсуждение. Наиболее часто применяемые системы
для генерации 0 -
2 - р а д и к а л о в содержат НАДН и ФМС или ксантин и
ксантиноксидазу. В этих системах образование О 2 и их регистрация
происходит в результате последовательно протекающих окислительно-
восстановительных реакций [13, 14] (схема, I и П), приводящих к
восстановлению органического красителя до Форм.
246 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1988.—Т. 4, № 5
Изучение влияния Ц П и Л К на скорость образования супероксид-
радикалов показало, что обе оксидазы подобно СОД подавляли реак-
ции образования Форм (рис. 1). В качестве контрольной представлена
активность бычьего сывороточного альбумина, который не влиял на
процесс образования Форм. Интервалы рН, в которых ЦП, Л К и С О Д
проявляли данную активность, также совпадают. Сравнение удельных,
активностей СОД и Ц П обнаружило меньшую (в 50—100 раз) эффек-
тивность действия последнего, что хорошо согласуется с результатами
Рис. 1. Зависимость активности СОД ( / ) , ЦП (2) и ЛК (5) от концентрации фер-
ментов в ксантин/ кеаптнноксидазнои системе генерирования супероксидрадикала
Fig. 1. Catalytic activity of SOD (curve / ) , CP (curve 2) and LC (curve 3) in the
.xanthine / XOD (^" -gene ra t ing system. Dependence on enzyme concentration
Рис. 2. Уменьшение поглощения меди первого тина в молекуле ЦП в результате взаи-
модействия с НАДН в анаэробных условиях: / - исходное поглощение меди первого
типа; 2—поглощение после взаимодействия; 3 - после реокислсния на воздухе
Fig. 2. Decrease in the first type copper absorbance in CP as a result of interaction with
NADH under anaerobic conditions: curve 1 — initial absorption of the first-type copper:
curve 2 — absorption after the interaction with NADH; curve 3 — alter the reoxidation
by oxygen
предыдущих исследований [6]. Эффективность ингибирования у Л К
оказалась в два раза меньше по сравнению с ЦП.
Подобное сравнение изменений, происходящих в 0~2-генерирую-
щих системах в присутствии ЦП, Л К и СОД, свидетельствовало об
аналогии свойств этих ферментов и было интерпретировано как про-
явление способности Ц П катализировать реакцию (1). Это служило
основанием для использования систем, разработанных для определения
активности СОД, в экспериментах по изучению свойств Ц П [6, 14],
Однако представленные па рис. 2 результаты свидетельствуют о вос-
становлении Ц П Н А Д Н в анаэробных условиях. Процесс восстанов-
ления меди первого типа является обратимым, и при переходе от
анаэробных условий к аэробным происходит реокисление простетиче-
ской группы молекулы ЦП. Поэтому подавление Ц П и Л К образования
О 2-радикалов в системе Н А Д Н / Ф М С / Н Т С может быть следствием
окисления Н А Д Н или ФМСН этими ферментами. Таким образом,
использование данной системы для изучения способности Ц П и Л К
влиять па уровень 0~2 -радикалов представляется неоправданным из -за
сложности объяснения получаемых результатов.
Сравнение зависимости накопления Форм при окислении ксаитина
(рис. 3, кривая 1) с зависимостью изменения концентрации мочевой
кислоты в ходе реакции (кривая 2) показывает, что реакция восста-
новления НТС в генерирующей системе обладает заметным лаг-перио-
дом, соответствующим предстационарпой фазе накопления супероксид-
радикалов. После достижения стационарной концентрации О 2 ско-
рость восстановления НТС определяется скоростью окисления ксанти-
на, которая зависит только от содержания ксаитина и концентрации
ксаитиноксидазы. Уменьшение концентрации НТС в 2—3 раза не при-
водило ни к изменению скорости накопления Форм, пи к уменьшению
его содержания после завершения реакции. Это свидетельствовало о
Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А — 1988 — Т. 4, № 5 247
В присутствии ферментов, обладающих СОД-активностью, лаг-
период реакции восстановления НТС должен уменьшаться, так как
в знаменателе выражения (4) содержится слагаемое, пропорциональ-
ное концентрации фермента. Действительно, оказалось, что в присут-
ствии СОД величина лаг-периода заметно уменьшается (рис. 3, кри-
вые 2 и 3). В отличие от СОД, Ц П и ЛК, ингибируя восстановление
НТС в данных условиях, не уменьшали величины лаг-периода (рис. 3,
кривая 4). В этом случае логичным представляется вывод о том, что
ЦП и Л К заметно не меняют скорости диспропорционирования 0~2 .
Объяснение экспериментально наблюдаемого ингибирующего действия
Ц П и Л К (рис. 1) может быть связано с их влиянием на стадии реак-
ции, предшествующие образованию 0~2 . Можно предположить, что
ингибирование образования 0~ 2 вызвано взаимодействием Ц П и Л К
с ксантиноксидазой. Тогда следовало ожидать, что при взаимодействии
Ц П с окисленной формой ксаитиноксидазы будет наблюдаться умень-
шение скорости превращения ксантина. Однако ингибирования реакции
образования мочевой кислоты не было обнаружено даже при концент-
рации ЦП, достаточной для уменьшения па 70 % скорости восстанов-
ления НТС. Это дает основание предположить, что Ц П взаимодействует
с восстановленными формами ксаитиноксидазы, превращения которых
не лимитирует скорость окисления ксантина при рН<<8,5 [15].
В самом деле, при рН = 9,5, когда скорость превращения ксантина
ограничивается скоростью окисления восстановленной формы ксаити-
ноксидазы [15], в присутствии Ц П и Л К происходит увеличение У э ф
т
реакции окисления ксантина (рис. 4). Это свидетельствует о взаимо-
действии данных оксидаз с восстановленной формой ксаитиноксидазы.
Таким образом, полученные результаты указывают на то, что Ц П и ЛК
подавляют образование 0~2 , катализируя окисление восстановленных
форм ксаитиноксидазы.
Следовательно, действие ЦП, Л К и СОД, формально приводящее
к одному и тому же результату — снижению концентрации 0~2-ради-
калов,— связано с протеканием принципиально различающихся реак-
ций. Отличие состоит в том, что изменение уровня 0~ 2 в системе
ксаитин/ксантиноксидаза/НТС в случае СОД (схема, III) происходит
за счет непосредственного катализа реакции диспропорционирования
образования 0~ 2 (1). Действие Ц П и Л К (схема, IV) является опо-
248 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА.— 1988.— Т. 4, № 5
том, что вклад реакции спонтанного диспропорционирования в общую
скорость процесса превращения супероксидрадикалов чрезвычайно мал
и его можно не рассматривать. Конечная концентрация Форм не за-
висела и от концентрации ксаитиноксидазы. При низких концентрациях
0~2 с к о р о с т и их превращения ферментами в стационарных условиях
можно считать пропорциональными концентрации [0~ 2 ] . В таком слу-
чае при малой глубине реакции (ос<СО,1) и избытке ксантина скорости
накопления 0~ 2 и Форм описываются следующими уравнениями:
где &Эф и &'Эф — эффективные константы скорости генерации 0~ 2 и
восстановления НТС супероксидрадикалом соответственно; k" — кон-
станта скорости превращения 0~ 2 исследуемым ферментом; КсОДвос —
восстановленная форма ксаитиноксидазы. Интегрирование уравнений
(2, 3) приводит к выражению, определяющему величину лаг-периода
реакции восстановления НТС:
средованным и связано не с реакцией (1), а с изменением эффектив-
ности процессов образования О
Представленная схема (III и IV) объясняет отмеченный экспери-
ментальный факт подавления образования Н 2 0 2 в присутствии Ц П при
сравнении с концентрацией Н 2 0 2 , определяемой в тех ж е условиях
в 0"2-геперирующих системах, в присутствии СОД [6].
Учитывая необычайно широкую субстратную специфичность ЦП в
оксидазпых реакциях [1, 2], возможность его электрохимического вос-
А становления [16], наличия прямого вза-
имодействия с гидратировапиыми элект-
ронами и карбоний-ионами [17], можно
предположить, что способность Ц П сни-
жать уровень О 2 определяется ярко вы-
раженными электроноакцепторпыми
свойствами фермента. Вполне вероятно,
что при этом не следует принципиально
Ί/ν, усл. ед.
Ю
6G
Рис. 3. Накопление мочевой кислоты (1) и Форм (2—4) при окислении ксантина ксан-
тиноксидазой (рН 8,0) в присутствии 3·10~7 Μ ЦП (4), 9-10~9 Μ СОД (3) и в их
отсутствие (2)
Fig. 3. Accumulation of uric acid (curve 1) and difonnazan (curve 2-4) in the course
of xanthine oxidation under the action of XOD in the presence of 3 -Ю- 7 Μ CP (curved) ,
9 - Ю - 9 Μ SOD (curve 3) and in their absence (curve 2)
Рис. 4. Зависимость скорости накопления мочевой кислоты от концентрации ксантина
при рН 9,5 в координатах Лайнуивера—Берка: 1 — в отсутствие ЦП; 2•—в присут-
ствии 6,4· ΙΟ"7 Μ ЦП
Fig. 4. The Lineweare-Burk plot. Rate of uric acid accumulation in the absence of CP
(curve 1) and in the presence of 6.4· Ю - 7 Μ CP (curve 2), pH 9.5
различать механизмы процессов, лежащих в основе оксидазной актив-
ности ЦП, и способности уменьшать концентрацию 0 _
2 - Таким образом
объясняются полифункциональная активность и многообразие свойств,
проявляемых ЦП, который можно рассматривать в качестве унпвер
сальной оксидазы плазмы крови человека и млекопитающих.
THE INFLUENCE OF CERULOPLASMIN, LACCASE AND SUPEROXIDE
DISMUTASE ON THE LEVEL OF SUPEROXIDE RADICALS
A. G. Sergeev, A. R. Pavlov, E. O. Zhazhina, V. V. Basevich, A. I. Yaropolov
A. N. Bach Institute of Biochemistry, Academy of Sciences of the USSR, Moscow
S u m m a г у
Ceruloplasmin (CP) and laccase were studied for their effect on the xanthine/xanthine
oxidase (Xan/XOD) and NADH/phenasine methasulphate (PMS) 0 2 ~-genera t ing systems.
It was shown that the kinetic action of these enzymes differs from that of superoxide
dismutase (SOD). While SOD scavenges immediately 0 2 ~ , then CP and laccase react
with a predecessor of 0 2 ~ demonstrat ing clearly their role as electron acceptors. The
results indicate that the CP acts as possible universal oxidase of mammalian and human
serum.
Б И О П О Л И М Е Р Ы и КЛЕТКА,— 1988 — Т. 4, № 5 24Р
1. Lovstcul R. A. Catecholamine stimulation of copper dependent haemolysis: protective
action of superoxide dismutase, catalase, hydroxyl radical scavengers and serum
proteins (ceruloplasmin, albumin and apo t rans fe r r in / /Ac ta pharmacol. et toxicol.—
1984,— 54, N 5.— P. 340—345.
2 Rijden L. Ceru loplasmin/ /Copper proteins and copper enzymes.— Florida: CRC press,
1984.— V. З,- P. 38—100.
3. Fridovich I. Superoxide d ismutases / /Adv. Enzymol.— 1974.— 41.— P. 36—97.
4. Klug D., Rabani J., Fridovich I. A direct demonstration of the catalytic action of
superoxide dismutase through the use of pulse radiolysis // J. Biol. Chem — 1972.—
247, N 15.—P. 4839—4842.
5 Kirbij T. W., Fridovich / . A picomolar spectrophotometry assay for superoxide dismu-
t a s e / / A n a l . Biochem.— 1982.— 127, N 2 .—P. 435—440.
6 Ceruloplasmin: a scavenger of superoxide radical / G. Goldstein, Η. B. Kaplan,
II. S. Edelson, G. W e i s m a n / / J . Biol. Chem.—1979,—254, N 10.—P. 4040—4045.
7 Guttcridge J. M. C., Stocks J. Ceruloplasmin. Physiological and pathological perspec-
tives / /CRC Crit. Rev. Clin. Lab. Sci.— 1981.— 14.—P. 257—330.
8. Wolf P. L. Ceruloplasmin: method and clinical use/ / Ibid.—1982.— 17.—P. 229—245.
9. Fricden E. Ceruloplasmin/7 Copper in the environment .—New York: Wilev, 1979.—
Pt 2, - P. 241—276.
10. Laurie S. / / . Mohammed E. S. Ceruloplasmin: the enigmatic copper protein // Coord.
Chem. Revs.— 1980.— 33, N 3 .—P. 279 312.
11. ESR evidence of superoxide radical dismutation by human ceruloplasmin / A. Plonka,
D. Metodiewa, A. Zgirski et a l . / /Biochem. and Biophvs. Res. Communs.—1980.—
95, N 3.— P. 978—984.
12. Кинетическое исследование оксидазной реакции церулоплазмина / Ε. Л. Саснко,
О. Б. Сиверина, В. В. Басевич, А. И. Ярополов//Биохимия.— 1986.— 51, № 6,—
С. 1017—1021.
13. McCord /. ΜFridovich I. Superoxide dismutase: an enzymic function for erythro-
cuprein (hemocuprcin) / / J . Biol. Chem.—1969,—244, N 22.— P. 6049—6055.
14. Nishikitni H., Rao Ν. Α., Vagi K. The occurrence of superoxide anion in the reaction
of reduced phenazine methosulfatc and molecular oxygen // Biochem. and Biophvs
Res. Communs.— 1972,—46, N 2,—P. 849—854.
15. Van Iieuvellen A. Kinetic studies of electron transport reactions at low temperatures
in xanthine oxidase/ / Ibid .— 1975.—64, N 3 . - - P . 963-969.
16. Еиндилис А. Л., Ярополов А. И., Березин И. В. Роль механизма действия фермен-
та в проявлении его электрокаталитических свойств / /Докл. АН СССР.— 1987.—
293, № 2,— С. 383—386.
17. Механизм антиоксидантного действия церулоплазмина / А. И. Ярополов, А. Г. Сер-
геев, В. В. Басевич и д р . / / Т а м же.— 1986.— 291, № 1.—С. 237—241.
Ин-т биохимии им. А. Н. Баха АН СССР, Москва Получено 24.02.87
УДК 578.22
ЭФФЕКТИВНЫЙ МЕТОД ВКЛЮЧЕНИЯ ДНК
В РЕКОНСТРУИРОВАННЫЕ ОБОЛОЧКИ ВИРУСА СЕНДАЙ
В. В. Власов, Ю. Д. Кренделев, Μ. Н. Оваидер,
А. С. Райт, В. Е. Репин, Ф. П. Свинарчук
Введение чужеродной Д Н К в клетки эукариот и последующее изучение
ее экспрессии — один из самых прямых способов исследования функции
генетического материала. Однако методы генетической трансформации
эукариотических клеток еще далеки от совершенства. Предложенные
к настоящему времени способы переноса генов (преципитация с каль-
ций-фосфатом, прямая микроипъекция в ядро клетки, электропорация
и некоторые другие) либо чрезмерно трудоемки, либо применимы не
ко всем типам клеток [1, 2]. Перспективными выглядят работы по
трансформации с помощью плазмид, упакованных в ретровирусподоб-
ные частицы. Однако они требуют предварительной работы по созда-
нию соответствующих векторов и их упаковки [3]. Возможно, комп-
ромиссным решением может быть использование плазмид, упакованных
в вирусные оболочки в системе in vitro. Первые опыты в этом направ-
лении уже проделаны [4]. Достигнутая эффективность упаковки пока
невелика, соотношение нуклеиновая кислота : белок оболочки в полу-
ченных частицах не превосходит 10% этого соотношения с вирусе [4].
250 Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А , - 1 9 8 8 , - Т . 4. М> 5
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-154049 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-30T13:01:26Z |
| publishDate | 1988 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Сергеев, А.Г. Павлов, А.Р. Жажина, Е.О. Басевич, В.В. Ярополов, А.И. 2019-06-15T06:27:33Z 2019-06-15T06:27:33Z 1988 Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов / А.Г. Сергеев, А.Р. Павлов, Е.О. Жажина, В.В. Басевич, А.И. Ярополов // Биополимеры и клетка. — 1988. — Т. 4, № 5. — С. 245-250. — Бібліогр.: 17 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000232 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154049 588.17 Изучено влияние ферментов церулоплазмина (ЦП) и лакказы (ЛК) і O₂⁻ - генерирующие системы: ксантин/ксантиноксидаза и НАДН/ФМС. Показано, что кинетический механизм действия этих ферментов отличен от действия супероксиддисмутазы (СОД). Если СОД реагирует непосредственно с O₂⁻, то ЦП и ЛК взаимодействуют с предшественником O₂⁻, проявляя тем самым ярко выраженные электроакцепторные функции. Представленные результаты указывают на возможность рассмотрения ЦП в качестве универсальной оксидазы плазмы крови человека и млекопитающих. Вивчено вплив ферментів церулоплазміну (ЦП) і лаккази (ЛК) на O₂⁻-генерувальні системи: ксантин/ксантиноксидаза і НАДН/ФМС. Показано, що кінетичний механізм дії цих ферментів різниться від дії супероксиддисмутази (СОД). Якщо СОД реагує безпосередньо з O₂⁻, то ЦП і ЛК взаємодіють з попередником O₂⁻, проявляючи тим самим яскраво виражені електроакцепторні функції. Представлені результати вказують на можливість розгляду ЦП як універсальної оксидази плазми крові людини і ссавців. Ceruloplasmin (CP) and laccase were studied for their effect on the xanthine/xanthine oxidase (Xan/XOD) and NADH/phenasine methasulphate (PMS) O₂⁻-generating systems. It was shown that the kinetic action of these enzymes differs from that of superoxide dismulase (SOD). While SOD scavenges immediately O₂⁻, then CP and laccase react with a predecessor of O₂⁻ demonstrating clearly their role as electron acceptors. The results indicate that the CP acts as possible universal oxidase of mammalian and human serum. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов Вплив церулоплазміну, лаккази і супероксиддисмутази на рівень супероксидрадикалів The influence of ceruloplasmin, laccase and superoxide dismutase on the level of superoxide radicals Article published earlier |
| spellingShingle | Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов Сергеев, А.Г. Павлов, А.Р. Жажина, Е.О. Басевич, В.В. Ярополов, А.И. Структура и функции биополимеров |
| title | Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов |
| title_alt | Вплив церулоплазміну, лаккази і супероксиддисмутази на рівень супероксидрадикалів The influence of ceruloplasmin, laccase and superoxide dismutase on the level of superoxide radicals |
| title_full | Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов |
| title_fullStr | Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов |
| title_full_unstemmed | Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов |
| title_short | Влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов |
| title_sort | влияние церулоплазмина, лакказы и супероксиддисмутазы на уровень супероксидрадикалов |
| topic | Структура и функции биополимеров |
| topic_facet | Структура и функции биополимеров |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154049 |
| work_keys_str_mv | AT sergeevag vliânieceruloplazminalakkazyisuperoksiddismutazynaurovenʹsuperoksidradikalov AT pavlovar vliânieceruloplazminalakkazyisuperoksiddismutazynaurovenʹsuperoksidradikalov AT žažinaeo vliânieceruloplazminalakkazyisuperoksiddismutazynaurovenʹsuperoksidradikalov AT basevičvv vliânieceruloplazminalakkazyisuperoksiddismutazynaurovenʹsuperoksidradikalov AT âropolovai vliânieceruloplazminalakkazyisuperoksiddismutazynaurovenʹsuperoksidradikalov AT sergeevag vplivceruloplazmínulakkaziísuperoksiddismutazinarívenʹsuperoksidradikalív AT pavlovar vplivceruloplazmínulakkaziísuperoksiddismutazinarívenʹsuperoksidradikalív AT žažinaeo vplivceruloplazmínulakkaziísuperoksiddismutazinarívenʹsuperoksidradikalív AT basevičvv vplivceruloplazmínulakkaziísuperoksiddismutazinarívenʹsuperoksidradikalív AT âropolovai vplivceruloplazmínulakkaziísuperoksiddismutazinarívenʹsuperoksidradikalív AT sergeevag theinfluenceofceruloplasminlaccaseandsuperoxidedismutaseonthelevelofsuperoxideradicals AT pavlovar theinfluenceofceruloplasminlaccaseandsuperoxidedismutaseonthelevelofsuperoxideradicals AT žažinaeo theinfluenceofceruloplasminlaccaseandsuperoxidedismutaseonthelevelofsuperoxideradicals AT basevičvv theinfluenceofceruloplasminlaccaseandsuperoxidedismutaseonthelevelofsuperoxideradicals AT âropolovai theinfluenceofceruloplasminlaccaseandsuperoxidedismutaseonthelevelofsuperoxideradicals |