Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту

Розроблено ферментні біосенсори на основі холінестераз та електрохімічних перетворювачів для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту в водних розчинах. Біоселективні мембрани на поверхні перетворювачів отримували іммобілізацією холінестераз у білковій мембрані за допомогою поперечної...

Full description

Saved in:

Bibliographic Details
Published in:	Биополимеры и клетка
Date:	1998
Main Author:	Солдаткін, О.П.
Format:	Article
Language:	Ukrainian
Published:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1998
Subjects:	Структура и функции биополимеров
Online Access:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154152
Tags:	Add Tag No Tags, Be the first to tag this record!
Journal Title:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Cite this:	Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту / О.П. Солдаткін // Биополимеры и клетка. — 1998. — Т. 14, № 1. — С. 23-28. — Бібліогр.: 10 назв. — укр.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

_version_	1860239213665976320
author	Солдаткін, О.П.
author_facet	Солдаткін, О.П.
citation_txt	Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту / О.П. Солдаткін // Биополимеры и клетка. — 1998. — Т. 14, № 1. — С. 23-28. — Бібліогр.: 10 назв. — укр.
collection	DSpace DC
container_title	Биополимеры и клетка
description	Розроблено ферментні біосенсори на основі холінестераз та електрохімічних перетворювачів для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту в водних розчинах. Біоселективні мембрани на поверхні перетворювачів отримували іммобілізацією холінестераз у білковій мембрані за допомогою поперечної зшивки ферментів з білком-носієм (бичачим сироватковим альбуміном) у насичених парах глутарового альдегіду. Визначено оптимальні умови функціонування та основні характеристики розроблених ферментних сенсорів. Разработаны ферментные биосенсоры на основе холинэстераз и электрохимических преобразователей для анализа пестицидов, ионов тяжелых металлов и гипохлорита в водных растворах. Биоселективные мембраны на поверхности преобразователей получали иммобилизацией холинэстераз в белковой мембране с помощью поперечной сшивки ферментов с белком-носителем (бычьим сывороточным альбумином) глутаровым альдегидом. Определены оптимальные условия работы разработанных ферментных сенсоров и изучены их основные рабочие характеристики. The enzyme biosensors based on cholinesterases and electrochemical transducers were developed for the analysis of pesticides, heavy metal ions and hypochlorite species in water solutions. Bioselective membranes on the transducers surface were formed by cross-linking of cholinesterases with bovine serum, albumin in saturated glu-taraldchyde vapour. Working characteristics of the biosensors developed were studied and optimized.
first_indexed	2025-12-07T18:27:53Z
format	Article
fulltext	ISSN 0233-7657. Биополимеры и клетка. І998. Т. 14. № 1 Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту О. П. Солдаткін Інститут молекулярної біології та генетики НАН України 252143, Київ, вул. Академіка Заболотного, 150 Розроблено ферментні біосенсори на основі холінестераз та електрохімічних перетворювачів для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту в водних розчинах. Біоселективні мембрани на поверхні перетворювачів отримували іммобілізацією холінестераз у білковій мемб рані за допомогою поперечної зшивки ферментів з білком-носієм (бичачим сироватковим аль буміном) у насичених парах глутарового альдегіду. Визначено оптимальні умови функціонування та основні характеристики розроблених ферментних сенсорів. Вступ. На сьогодні у народному господарстві вико ристовується багато різноманітних хімічних речо вин, частина з яких може утворювати стійкі ток сичні комплекси. Ц е призводить до забруднення води, повітря та грунтів і є надзвичайно шкідливим як для людей, так і тварин. Очевидно, що концен трації токсичних агентів повинні строго контролю ватися у продуктах харчування та питній воді. Фосфорорганічні пестициди, важкі метали та гіпо хлорит є представниками подібних забруднювачів. Класичні методи, що традиційно застосовують ся в лабораторіях якості води для визначення гіпохлориту, пестицидів та іонів важких металів, характеризуються кількома етапами, використан ням шкідливих реагентів та значним терміном аналізу [ І , 2]. До того ж тут необхідне складне обладнання, що значно підвищує вартість аналізу. Тому створення дешевих, простих, точних та се лективних аналітичних систем на основі біосен- сорів для визначення токсичних забруднювачів на вколишнього середовища є дуже актуальним. У даній публікації пропонується розробка фер ментних сенсорів на основі холінестераз та по тенціометричних і кондуктометричних перетворю вачів для аналізу органофосфорних пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту в водних розчинах. М а т е р і а л и і м е т о д и . Ацетилхолінестераза (AXE) (ЕС 3.1.1.7) із електричного вугря з ак - © О. II. С О Л Д А Т К І Н , і 9 9 8 тивністю 225 од. а к т . / м г , бутирилхолінестераза (БХЕ) (ЕС 3.1.1.8) із сироватки коня з активністю 266 од. акт . /мг , бичачий сироватковий альбумін (БСА) , ацетилхолінхлорид, бутирилхолінхлорид, діізопропілфторфосфат (ДФФ) та піридин-2-аль- доксимметилйодид (ПАМ-2) було отримано з фірми «Sigma» (США) , гіпохлорит натрію — з «А1- drich» (США), трис, натрієва сіль Е Д Т А та 25 %-й водний розчин глутарового альдегіду (ГА) — з «Мегск» ( Ф Р Н ) . Солі важких металів та всі інші р е а к т и в и б у л и в і т ч и з н я н о г о в и р о б н и ц т в а з кваліфікацією «осч» та «хч». Дистильована та біди- стильована вода використовувалася для приготу вання аналітичних зразків , буферів та інших роз чинів. Іммобілізація ферменту. Мембрану, що місти ла іммобілізований фермент, та референтну фор мували наступним методом. Краплю розчину, що містив 3,6 % АХЕ чи 5 % Б Х Е , 5 % БСА та 10 % гліцерин у 10—20 мМ фосфатному буфері, рН 7,5 (у випадку сенсора для визначення іонів важких металів використовували 5 мМ трис~НгЮ 3 буфер, рН 7,5) , наносили на чутливу область одного з двох рН-чутливих польових транзисторів (рН-ПТ) диференційної пари. На інший р Н - П Т цієї ж пари (контрольний) наносили краплю суміші, яка місти ла 10 % БСА і 10 % гліцерин у тому ж самому буфері. Біоселективні мембрани наносили на кон- дуктометричні перетворювачі аналогічним чином. Після цього сенсорний чип вміщували на 30 хв в насичені пари глутарового альдегіду, а потім про- СОЛДАТКІН О. П. сушували при кімнатній температурі протягом 15— 20 хв. Конструкція сенсора та схема вимірювання. Використано напівпровідникові структури, на кож ній з яких розміщена диференційна пара р Н - П Т чи кондуктометричних гребінчастих електродів. Кон струкція, спосіб упаковки чипів та схеми вимі рювання наведено в роботах [3, 4 ] . Процедура вимірювання концентрацій субст рата та інгібіторів. Сенсорний чип занурювали в комірку з робочим буфером і вимочували протягом кількох хвилин для врівноваження мембранної си стеми та отримання стабільної базової лінії. Чут ливість біосенсора до концентрацій субстрата (аце тилхоліну чи бутирилхоліну) вимірювали при кім натній температурі і інтенсивному перемішуванні. Концентрацію субстрата змінювали в комірці, до даючи різні порції 50 мМ аналіту. Неспецифічні зміни, пов 'язані з коливаннями температури, рН та електричними наведеннями, які могли мати місце в аналізованому зразку, пригнічували завдя ки використанню диференційної схеми вимірювань [З, 4 ] . Процедура біосенсорного визначення концент рації інгібіторів була складнішою і включала такі етапи: 1. Вимочування в робочому буфері (фосфатно му чи T P H C - H N 0 3 , рН 7,2—7,5) протягом кількох хвилин для врівноваження мембранної системи та отримання стабільного базового сигналу. 2. Ацетилхолін (чи бутирилхолін) додавали у комірку до концентрації 0,25 мМ. Відповідний кі нетичний чи стаціонарний відгук біосенсора на концентрацію субстрата слугував показником ка талітичної активності іммобілізованого ферменту і використовувався в наступних розрахунках для оцінки ефекту пригнічення ферменту відповідними концентраціями інгібітора. 3. Після відмивки сенсора від субстрата від повідним робочим буфером останній занурювали в розчин аналізованого інгібітора в дистильованій воді (рН 6,0—6,5) на певний термін. 4. Після інтенсивної відмивки біосенсора робо чим буфером протягом 2—3 хв відповідний кіне тичний чи стаціонарний відгук біосенсора на кон центрацію субстрата визначали, як у пункті 2. Ступінь пригнічення ферменту оцінювали, по рівнюючи відгуки біосенсора на 0,25 мМ концент рацію субстрата до і після інкубації сенсора в аналізованому розчині інгібітора. Сенсор реактиву- вали, використовуючи Ї0 мМ розчин ЕДТА (у випадку інгібування іонами важких металів [4 ]) чи 0,1 мМ ПАМ-2 (інгібування органофосфорними пестицидами [5]) у робочому буфері. Результати та обговорення . В основі роботи ферментного сенсора на основі р Н - П Т лежить ре єстрація локальної зміни рН у мембрані, що мі стить фермент, яка відбувається за рахунок фер ментативних реакцій і пропорційна концентрації субстрата в аналізованій пробі. У випадку кондук- тометричного перетворювача реєструється локаль на зміна провідності в мембрані як результат про ходження тих ж е ферментативних реакцій. Холін- естерази каталізують розщеплення ацетилхоліну та бутирилхоліну до холіну та оцтової чи масляної кислоти і таким чином локально закислюють сере довище та змінюють провідність у мембрані. Ці ферменти можуть бути основою при створенні по тенціометричних та кондуктометричних сенсорів і використовуватися для прямого аналізу субстратів [6 ], У свою чергу відомо, що холінестерази чутливі до фосфорорганічних пестицидів та іонів важких металів як інгібіторів [ 5 ] , тому сенсори на основі цих ферментів можуть використовуватися і в інгі- біторному аналізі [7, 8 ]. Визначення ацетилхоліну. У попередніх екс периментах вивчали оптимальні умови роботи сен сора на основі АХЕ та р Н - П Т . Так , було отримано калібрувальні криві АХЕ біосенсора при визначенні концентрацій ацетилхоліну. Виміри проводили в стаціонарному режимі. Я к видно з рис. 1, лінійний динамічний діапазон біосенсора при аналізі ацетил холіну знаходився між 0,02 і 1,0 мМ концент раціями субстрата при визначеннях у режимі мак симальних відгуків. Визначення пестицидів. Ацетилхолінестераза містить в активному центрі залишок серину, який бере участь у каталітичному розщепленні ацетил холіну. Органофосфорні пестициди можуть зв ' я зу ватися з цим залишком серину, інактивуючи фер мент необоротно. Відмивка сенсора робочим буфе ром не відновлювала активності ферменту. Лише використання ПАМ-2 як реактиватора холінестераз призводило до відновлення активності ферменту [5 ] . Д Ф Ф , один із представників органофосфорних пестицидів, є класичним інгібітором холінестераз. У даній публікації зроблено спробу визначення пестицидів (на прикладі Д Ф Ф ) за допомогою біо сенсора на основі ацетилхолінестерази та р Н - П Т . Датчик занурювали в розчин, що містить інгібітор, і витримували протягом різних термінів. Було по казано, що при збільшенні часу інкубації сенсора з інгібітором величина відгуку падала і відповідно зростала чутливість сенсора до концентрацій інгі бітора. Так , вибираючи час інкубації , можна регу лювати чутливість біосенсора до Д Ф Ф . Але значне зб ільшення часу передінкубаці ї призводить до Б І О С Е Н С О Р И НА О С Н О В І Х О Л І Н Е С Т Е Р А З Д Л Я АНАЛІЗУ П Е С Т И Ц И Д І В Рис. 3. Калібрувальні криві для визначення концентрацій солей важких металів: 1 — інгібування солями Cu(N0 3 )2 , чи Cd(N0 3 ) 2 , чи Co<N0 3 ) 2 , чи S r ( N 0 3 ) 2 , чи Ag(N0 3 ) ; 2 — Pb(N03>2; і — Hg(N0 3 )2- Виміри відгуків сенсора і відповідно залишкової активності іммобілізованої БХЕ (%) здійсювали в 10 мМ Tpnc-HN0 3 буфері, рН 7,5, при інтенсивному пере мішуванні та кімнатній температурі Рис. 4. Залишкова активність ацетилхолінестерази після внесен ня 100 мкМ NaOCl протягом різного часу: 1 — без інгібування; 2 — 10; 3 — 20; 4 — 30; 5 — 45; 6 — 60 хв. Виміри здій снювали в 10 мМ фосфатному буфері, рН 7,2, при інтенсивному перемішуванні та кімнатній температурі суттєвого зростання загального часу аналізу. Тому необхідно вибирати якусь оптимальну величину. В даному аналізі обрано час інкубації біосенсора з інгібітором 10 хв. Калібрувальна крива для визна чення цього пестициду за допомогою біосенсора представлена на р и с 2. Мінімальна концентрація Д Ф Ф , що може бути визначена за допомогою отриманої калібрувальної кривої, складала 10 1 0 М. Отримана чутливість аналізу була вищою, ніж у випадку визначення Д Ф Ф класичними методами. Повторне застосування сенсорного чипа для визначення Д Ф Ф було можливим за умови викори стання реактиватора ПАМ-2 для відмивки сенсора. Було показано, що після реактивації сенсорний відгук може відновлюватися майже повністю, а біосенсор такого типу можна повторно використо вувати кілька разів [ 5 — 7 ] . Відхилення між ви мірами не перевищувало 10 % . Визначення іонів важких металів. Бутирил- холінестераза, іммобілізована на поверхні елект рохімічних детекторів, використана при розробці біосенсорів для визначення концентрації бутирил- холінхлориду та вивчення ефектів інгібування пес тицидами [6, 7 ]. Подібний підхід було застосовано у данній работі для селективного визначення іонів важких металів у водному розчині. 25 СОЛДАТКІН О. П Калібрувальні криві для аналізу іонів важких металів кондуктометричним біосенсором представ лені на рис. 3. Як видно, тільки H g 2 + та Р Ь 2 + у концентраціях, нижчих за 100 мкМ, сильно при гнічують ферментативну активність БХЕ. Інші іо ни, які тестувалися, не виявляли помітного впливу на ферментативну активність у цих ж е концент раціях. Показано, що пригнічення бутирилхолін- естерази іонами ртуті та свинцю є необоротним, як і у випадку уреази та алкогольоксидази [4, 9 ]. Повторне використання сенсорного чипа для визначення іонів важких металів було можливим тільки після реактивації іммобілізованої БХЕ за допомогою ЕДТА [4, 9 ] . Відхилення між вимірами не перевищувало 15 % . Визначення гіпохлориту, Інгібіторний тест по казав , що максимальний рівень сигналу біосенсора та швидкість його наростання при аналізі ацетил холіну зменшувалися при попередній обробці сен сора розчином гіпохлориту, а ступінь інгібування ферменту суттєво залежав від терміну інкубації з інгібітором (рис. 4 ) . Так , при інкубації АХЕ сенсо ра у 0,1 мМ розчині NaOCl протягом 45 хв 80— 90 % відгуку інгібувалося. Крім того, чим вищою була концентрація гіпохлориту, тим швидшим був інгібіторний ефект. Як можна бачити з рис. 4, ступінь пригнічення залежить також від концент рації субстрата. Максимальний інгібіторний ефект гіпохлориту на відгук АХЕ сенсора був виявлений для концентрації ацетилхоліну 0,25 мМ і вище. Залежність відгуку біосенсора від концентрації NaOCl представлено на рис. 5 (стаціонарний режим вимірювань). Час інкубації сенсора в розчині, який містив гіпохлорит, становив 20 хв. Відгуки сенсора на 0,25 мМ концентрацію ацетилхоліну вимірю вали в 10 мМ фосфатному буфері, рН 7,2. Міні мально детектована концентрація гіпохлориту ста новила 0,01 мМ. Ці дані добре корелюють з резуль татами, отриманими при інактивації клітин Е, соїі гіпохлоритом [10] . Але при необхідності мінімаль но детектовану концентрацію інгібітора можна зменшити, збільшуючи час інкубації біосенсора в аналізованому зразку , який містить гіпохлорит (див. рис. 4) . ПАМ-2 — відомий реактиватор активності хо- лінестераз після їх інактивації фосфорорганічними сполуками [5, 7 ] — в нашому випадку не віднов лював активності біосенсора. Після обробки АХЕ сенсора 0,1 мМ ПАМ-2 протягом ЗО—40 хв біо- сенсор не відновлював активності , пригніченої гіпо хлоритом. Цей факт може бути використаний як основа для висновку стосовно того, що механізм інгібування АХЕ гіпохлоритом відрізняється від такого фосфорорганічними пестицидами. - т — • • і » 1 • 1 ' 1 • » » »— 0 100 200 300 Концентрація гіпохлориту, мкМ Рис. 5. Калібрувальна крива для визначення концентрацій NaOCl при вимірах в режимі стаціонарних відгуків. Виміри відгуків сенсора і відповідно залишкової активності іммобі лізованої БХЕ (%) здійснювали при концентрації ацетилхо- лінхлориду 0,25 мМ в 10 мМ фосфатному буфері, рН 7,2, при інтенсивному перемішуванні та кімнатній температурі Вивчення селективності гіпохлоритчутливого АХЕ сенсора та механізму пригнічення холінес- терази гіпохлоритом є наступним етапом представ лених досліджень. Таким чином, на основі наведених результатів можна зробити такі висновки. Було створено по тенціометричні та кондуктометричні ферментні сенсори на основі холінестераз, чутливі до ацетил холіну та бутирилхоліну. На базі цих сенсорів розроблено біохімічну процедуру визначення орга- нофосфорних пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту в водних розчинах. Основні робочі характеристики розроблених сенсорів на основі хо лінестераз представлено нижче: Мінімально детектована концентрація складає 10~ 1 0 М для Д Ф Ф , 1 0 6 М для іонів ртуті, 5 10 6 М для іонів свинцю та 1 0 5 М для гіпохлориту (зна чення рН для інгібіторного розчину становило 6,0—6,5) . Величина інгібіторного впливу на біо- сенсор залежить від концентраці ї субстрата та тер міну експозиції сенсора в розчині інгібітора, що може бути використано відповідно для підвищення чутливості сенсорів при аналізі інгібіторів. Необхідно відмітити, що сенсор на основі АХЕ продемонстрував здатність до реактивації 1 0 4 М концентрацією ПАМ-2 після інгібування пестици дами і відсутність такої у випадку інгібування гіпохлоритом, що свідчить про різні механізми, які лежать в основі пригнічення. Сенсор на основі БХЕ 26 Б І О С Б Н С О Р И НА О С Н О В І Х О Л І Н Е С Т Е Р А З Д Л Я АНАЛІЗУ П Е С Т И Ц И Д І В Основні робочі характеристики біосенсорів на основі холінестераз Пряме визначення ацетилхоліну (АХЕ сенсор) Режим визначення Лінійний динамічний діапазон Час відгуку Тривалість аналізу Операційна стабільність Стаціонарний відгук 0,02—0,5 мМ 1—2 хв 2—3 хв 8 год Інгібіторний аналіз діізопропілфторфосфату (АХЕ сенсор) Режим визначення Стаціонарний відгук Лінійний динамічний діапазон 10 1 0 — 1 0 7 М Час відгуку 1—2 хв Т р и в а л і с т ь а н а л і з у , в к л ю ч а ю ч и і н к у б а ц і ю з інгібітором 15 хв Операційна стабільність 5—7 раз Інгібіторний аналіз Hg + та Pb + (БХЕ сенсор) Режим визначення Стаціонарний відгук Лінійний динамічний діапазон 10 6 — 1 0 4 М (для Hg 2 + ) 5 - Ю ' 6 — Ю - 4 М (для РЬ 2 + ) Час відгуку 1—2 хв Т р и в а л і с т ь а н а л і з у , в к л ю ч а ю ч и і н к у б а ц і ю з інгібітором 15 хв Операційна стабільність 10—15 аналізів Інгібіторний аналіз гіпохлориту (АХЕ сенсор) Режим визначення Лінійний динамічний діапазон Час відгуку Тривалість аналізу , включаючи передінкубацію Операційна стабільність Кінетичний/Стаціонарний відгук 1 0 5 — 1 0 4 м 20 с /1—2 хв 25 хв Одноразове використання був чутливим до реактиваці ї Е Д Т А після інгі бування іонами важких металів. Виявлений фено мен різної чутливості біосенсорів, пригнічуваних різними інгібіторами, до реактиваторів може бути використано як тест селективності при аналізі неві домих зразків водних розчинів, щоб розділити ефе кти інгібування сенсорів фосфорорганічними пести цидами, іонами важких металів та гіпохлоритом. Частину цієї роботи було виконано завдяки фінансовій підтримці Міністерства у справах науки 27 С О Л Д А Т И Н О N. та технологій (проект № 5 .4 /74 Державного фонду фундаментальних досліджень). А. П. Солдатки к Биосенсоры на основе холинэстераз для анализа пестицидов, ионов тяжелых металлов и гипохлорита Резюме Разработаны ферментные биосенсоры на основе холинэстераз и электрохимических преобразователей для анализа пестици дов, ионов тяжелых металлов и гипохлорита в водных рас творах. Биоселективные мембраны на поверхности преобразо вателей получали иммобилизацией холинэстераз в белковой мембране с помощью поперечной сшивки ферментов с белком- носителем (бычьим сывороточным альбумином) глутаровым альдегидом. Определены оптимальные условия работы разра ботанных ферментных сенсоров и изучены их основные рабо чие характеристики. А. P. Soldatkin Biosensors based on cholinesterases for the analysis of pesticides, heavy metal ions and hypochlorite species Summary The enzyme biosensors based on cholinesterases and electrochemical transducers were developed for the analysis of pesticides, heavy metal ions and hypochlorite species in water solutions. Bioselective membranes on the transducers surface were formed by cross-linking of cholinesterases with bovine serum albumin in saturated glu- taraldchyde vapour. Working characteristics of the biosensors deve loped were studied and optimized. СПИСОК ЛІТЕРАТУРИ 1. Handbook of analytical chemistry / Ed. L. Meites.—New York etc.: McGraw-Hill Book Company, 1963. 2. Baylocq-Ferrier D.t Baillet-Guffroy A., Pellerin F. Methodes generales d'analyse quantitative. Titrage par iodomctrie / / Traite: Analyse et Caracterisation / Ed. C. Genty—Paris: Techniques de ringenieur, 1995.—P. 330-1—330-8. 3. Shutga A. A., Netchiporuk L. I., Sandrovsky A. K. et ai ISFET operation with non-isolated substrate directly exposed to the solution, the Nu-substrate ISFET / / Sensors and Actuators.— 1995.—30.—P. 101 — 105. 4. Zhylyak G. A., Dzyadevich S. K, Korpan Y. I. et ai Application of urease conductometric biosensor for heavy-metal ion determination / / Ibid.—24—25.—P. 145—148. 5. Tran-Minh C. Immobilised enzyme probes for determining inhibitors / / Ion-Selec. Electrode Rev.—1985.—7.—P. 41 — 75. 6. Nyamsi Hendji A. M.f Jaffrezic-Renault N.f Martelet C. et ai Enzyme biosensor based on a micromachined interdigitated conductometric transducer: application to the detection of urea, glucose, acetyl- and butyrylcholine chlorides / / Sensors and Actuators В.—1994.—21.—P. 123—129. 7. Nyamsi Hendji A. M., Jaffrezic-Renault N.t Martelet C. et ai Sensitive detection of pesticides using a differential ISFET- based system with immobilised cholinesterases / / Anal. chim. acta.—1993.—281.—P. 3—11. 8. Dzyadevich S. K, Shutga A. A., Soldatkin A. P. et ai Conductometric biosensors based on cholinesterases for sensi tive detection of pesticides / / Electroanalysis.—1994 —6.— P. 752—758. 9. Korpan Y. /., Soldatkin A. P.t Gonchar M. V. et ai A novel enzyme biosensor specific for formaldehyde based on pH-sen- sitive field effect transistors / / J. Chem. Technol. and Biotech- nol.—1997.—68, № 2.—P. 209—213. 10. Albrich J. M., Hurst J. K. Oxidative inactivation of Escherichia coli by hypochlorous acid / / FEBS Lett.—1982.—144, № 1.—P. 157—161. Надійшла до редакції 30.10.97 28
id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-154152
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
issn	0233-7657
language	Ukrainian
last_indexed	2025-12-07T18:27:53Z
publishDate	1998
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
record_format	dspace
spelling	Солдаткін, О.П. 2019-06-15T08:58:38Z 2019-06-15T08:58:38Z 1998 Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту / О.П. Солдаткін // Биополимеры и клетка. — 1998. — Т. 14, № 1. — С. 23-28. — Бібліогр.: 10 назв. — укр. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0004B4 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154152 Розроблено ферментні біосенсори на основі холінестераз та електрохімічних перетворювачів для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту в водних розчинах. Біоселективні мембрани на поверхні перетворювачів отримували іммобілізацією холінестераз у білковій мембрані за допомогою поперечної зшивки ферментів з білком-носієм (бичачим сироватковим альбуміном) у насичених парах глутарового альдегіду. Визначено оптимальні умови функціонування та основні характеристики розроблених ферментних сенсорів. Разработаны ферментные биосенсоры на основе холинэстераз и электрохимических преобразователей для анализа пестицидов, ионов тяжелых металлов и гипохлорита в водных растворах. Биоселективные мембраны на поверхности преобразователей получали иммобилизацией холинэстераз в белковой мембране с помощью поперечной сшивки ферментов с белком-носителем (бычьим сывороточным альбумином) глутаровым альдегидом. Определены оптимальные условия работы разработанных ферментных сенсоров и изучены их основные рабочие характеристики. The enzyme biosensors based on cholinesterases and electrochemical transducers were developed for the analysis of pesticides, heavy metal ions and hypochlorite species in water solutions. Bioselective membranes on the transducers surface were formed by cross-linking of cholinesterases with bovine serum, albumin in saturated glu-taraldchyde vapour. Working characteristics of the biosensors developed were studied and optimized. uk Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту Биосенсоры на основе холинэстераз для анализа пестицидов, ионов тяжелых металлов и гипохлорита Biosensors based on cholinesterases for the analysis of pesticides, heavy metal ions and hypochlorite species Article published earlier
spellingShingle	Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту Солдаткін, О.П. Структура и функции биополимеров
title	Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту
title_alt	Биосенсоры на основе холинэстераз для анализа пестицидов, ионов тяжелых металлов и гипохлорита Biosensors based on cholinesterases for the analysis of pesticides, heavy metal ions and hypochlorite species
title_full	Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту
title_fullStr	Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту
title_full_unstemmed	Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту
title_short	Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту
title_sort	біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту
topic	Структура и функции биополимеров
topic_facet	Структура и функции биополимеров
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154152
work_keys_str_mv	AT soldatkínop bíosensorinaosnovíholínesterazdlâanalízupesticidívíonívvažkihmetalívtagípohloritu AT soldatkínop biosensorynaosnoveholinésterazdlâanalizapesticidovionovtâželyhmetallovigipohlorita AT soldatkínop biosensorsbasedoncholinesterasesfortheanalysisofpesticidesheavymetalionsandhypochloritespecies

Біосенсори на основі холінестераз для аналізу пестицидів, іонів важких металів та гіпохлориту

Institution

Similar Items