Разработка стратегии получения рекомбинантных одноцепочечных антител против поверхностных клеточных биомаркеров на примере антигена CD34 человека

• Date: 2010
• Main Authors: Николаев, Ю.С., Горбатюк, О.Б., Цапенко, М.В.
• Format: Article
• Language: Russian
• Published: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2010
• Series: Вiopolymers and Cell
• Subjects: Molecular and Cell Biotechnologies
• Online Access: https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154210
• Journal Title: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Cite this: Разработка стратегии получения рекомбинантных одноцепочечных антител против поверхностных клеточных биомаркеров на примере антигена CD34 человека / Ю.С. Николаев, О.Б. Горбатюк, М.В. Цапенко // Вiopolymers and Cell. — 2010. — Т. 26, № 6. — С. 492-498. — Бібліогр.: 12 назв. — рос.

Антитела против поверхностных клеточных белков выполняют важную функцию в процедурах детектирования, определения стадии дифференциации и выделения целевых популяций клеток. Поверхностные клеточные антигены часто имеют сложную структуру внеклеточного участка молекулы, характеризующуюся сильным гликозилированием и стабилизированную дисульфидными связями. При этом получение антител против таких белков является нетривиальной задачей. Цель. Разработать стратегию получения рекомбинантных антител против поверхностных клеточных биомаркеров. Методы. Конструирование библиотеки кДНК генов VH и VL иммуноглобулинов животных, иммунизированных рекомбинантным антигеном, и использование биопеннинга на антиген-позитивных клетках для обогащения исходной библиотеки последовательностями целевых антител. Детектирование и отбор клонов – продуцентов целевых антител осуществляли с помощью высокопродуктивных автоматизированных систем. Результаты. Получена панель из пяти антител, распознающих антиген на поверхности CD34-позитивных клеток. Выводы. Предложенная стратегия может быть использована для получения антител против поверхностных клеточных антигенов.