Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform

Aim. To identify a splicing mRNA of S6K1 kinase specific for the p60-S6K1 isoform alone. Methods. RT-PCR, DNA sequencing, Western blotting. Results. RT-PCR analysis of total RNA extracted from MCF-7 cells and subsequent DNA sequencing revealed a novel S6K1 splice variant that possesses additional ex...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :Вiopolymers and Cell
Дата:2019
Автори: Zaiets, I.V., Holiar, V.V., Filonenko, V.V.
Формат: Стаття
Мова:English
Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2019
Теми:
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154396
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform / I.V. Zaiets, V.V. Holiar, V.V. Filonenko // Вiopolymers and Cell. — 2019. — Т. 35, № 2. — С. 99-106. — Бібліогр.: 24 назв. — англ.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-154396
record_format dspace
spelling Zaiets, I.V.
Holiar, V.V.
Filonenko, V.V.
2019-06-15T15:06:01Z
2019-06-15T15:06:01Z
2019
Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform / I.V. Zaiets, V.V. Holiar, V.V. Filonenko // Вiopolymers and Cell. — 2019. — Т. 35, № 2. — С. 99-106. — Бібліогр.: 24 назв. — англ.
0233-7657
DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00099B
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154396
577
Aim. To identify a splicing mRNA of S6K1 kinase specific for the p60-S6K1 isoform alone. Methods. RT-PCR, DNA sequencing, Western blotting. Results. RT-PCR analysis of total RNA extracted from MCF-7 cells and subsequent DNA sequencing revealed a novel S6K1 splice variant that possesses additional exon 1a and encodes the p60 isoform of S6K1 only. Moreover, RT-PCR and western blotting were applied to estimate the expression levels of the p60-S6K1 mRNA and protein. A heterogeneous expression of the p60-S6K1 transcript was observed; it did not correlate with the total S6K1 mRNA expression and with the protein content of p60-S6K1 in the studied cell lines. Conclusions. We provide the evidence for the existence of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform. The cell can employ two distinct pathways of the p60-S6K1 expression based on alternative translation of mRNA common for the main S6K1 isoforms mRNA and/or translation of the novel p60-S6K1 specific mRNA. Since the levels of the p60-S6K1 transcript expression do not correlate with the expression of total S6K1 mRNA, it is plausible that the p60-S6K1 isoform plays a role distinct from that of other isoforms in cellular physiology, as well as in the development of S6K1-related pathologies.
Мета. З'ясувати можливість існування сплайсової мРНК кінази S6К1 специфічної виключно для р60-S6К1 ізоформи. Методи. ЗТ-ПЛР, ДНК секвенування, Вестерн-блоттинг. Результати. ЗТ-ПЛР аналіз тотальної РНК, виділеної із клітин лінії MCF-7, з наступним секвенуванням ДНК виявив новий сплайсовий варіант мРНК S6K1, що містить додатковий екзон 1а і кодує лише p60 ізоформу S6K1. Для оцінки рівня експресії p60-S6K1 мРНК та білку було застосовано ЗТ-ПЛР та вестерн-блот. Результати. вказують на гетерогенну експресію транскрипту p60-S6K1, що не корелює ні з експресією загальної S6K1 мРНК, ні з білковим вмістом p60-S6K1 у досліджуваних клітинних лініях. Висновки. Надано докази існування нової сплайсової мРНК S6K1, яка кодує ізоформу p60-S6K1, що свідчить про існування в клітині двох незалежних шляхів експресії p60-S6K1, а саме альтернативну трансляцію спільної для головних S6K1 ізоформ мРНК та/чи трансляцію нової специфічної лише для р60-S6K1 сплайсової мРНК. Оскільки рівень експресії p60-S6K1 транскрипту в різних клітинних лініях не корелює із експресією загальної мРНК S6K1, цілком можливо, що p60-S6K1 ізоформа може відігравати відмінну від інших S6K1 ізоформ роль у клітинній фізіології, а також при розвитку патологій, які пов’язані із S6K1.
Цель. Выяснить возможность существования сплайсинговой мРНК киназы S6К1 специфической исключительно для р60-S6К1 изоформы. Методы. ОТ-ПЦР, ДНК секвенирование, Вестерн-блоттинг. Результаты. ОТ-ПЦР анализ тотальной РНК, выделенной из клеток линии MCF-7, с последующим секвенированием ДНК выявил новый сплайсовый вариант S6K1, содержит дополнительный экзон 1а и кодирует только изоформу p60-S6K1. Далее были использованы ОТ-ПЦР и вестерн-блоттинг для оценки уровней p60-S6K1 мРНК и белка. Результаты показали гетерогенную экспрессию транскрипта p60-S6K1, экспрессия которого не коррелировала ни с тотальной S6K1 мРНК, ни с белковым содержанием p60-S6K1 в исследуемых клеточных линиях. Выводы. Предоставлены доказательства существования нового сплайсового варианта S6K1, который кодирует изоформу p60-S6K1, что указывает на существование в клетке двух независимых путей экспрессии p60-S6K1 изоформы, а именно альтернативную трансляцию общей для основных изоформ мРНК и/или трансляцию новой специфичной лишь для p60-S6K1 сплайсовой мРНК. Поскольку уровень экспрессии p60-S6K1 транскрипта в различных клеточных линиях не коррелируют с экспрессией тотальной S6K1 мРНК, можно предположить, что p60-S6K1 изоформа может играть отличную то других S6K1 изоформ роль в клеточной физиологии, а также при развитии патологий, которые связаны с S6K1.
en
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
Вiopolymers and Cell
Structure and Function of Biopolymers
Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform
Ідентифікація нового сплайсового варіанту S6K1, який кодує ізоформу p60-S6K1.
Идентификация нового сплайсового варианта S6K1, который кодирует изоформу p60-S6K1.
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform
spellingShingle Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform
Zaiets, I.V.
Holiar, V.V.
Filonenko, V.V.
Structure and Function of Biopolymers
title_short Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform
title_full Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform
title_fullStr Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform
title_full_unstemmed Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform
title_sort identification of a novel s6k1 splice variant coding for the p60-s6k1 isoform
author Zaiets, I.V.
Holiar, V.V.
Filonenko, V.V.
author_facet Zaiets, I.V.
Holiar, V.V.
Filonenko, V.V.
topic Structure and Function of Biopolymers
topic_facet Structure and Function of Biopolymers
publishDate 2019
language English
container_title Вiopolymers and Cell
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
format Article
title_alt Ідентифікація нового сплайсового варіанту S6K1, який кодує ізоформу p60-S6K1.
Идентификация нового сплайсового варианта S6K1, который кодирует изоформу p60-S6K1.
description Aim. To identify a splicing mRNA of S6K1 kinase specific for the p60-S6K1 isoform alone. Methods. RT-PCR, DNA sequencing, Western blotting. Results. RT-PCR analysis of total RNA extracted from MCF-7 cells and subsequent DNA sequencing revealed a novel S6K1 splice variant that possesses additional exon 1a and encodes the p60 isoform of S6K1 only. Moreover, RT-PCR and western blotting were applied to estimate the expression levels of the p60-S6K1 mRNA and protein. A heterogeneous expression of the p60-S6K1 transcript was observed; it did not correlate with the total S6K1 mRNA expression and with the protein content of p60-S6K1 in the studied cell lines. Conclusions. We provide the evidence for the existence of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform. The cell can employ two distinct pathways of the p60-S6K1 expression based on alternative translation of mRNA common for the main S6K1 isoforms mRNA and/or translation of the novel p60-S6K1 specific mRNA. Since the levels of the p60-S6K1 transcript expression do not correlate with the expression of total S6K1 mRNA, it is plausible that the p60-S6K1 isoform plays a role distinct from that of other isoforms in cellular physiology, as well as in the development of S6K1-related pathologies. Мета. З'ясувати можливість існування сплайсової мРНК кінази S6К1 специфічної виключно для р60-S6К1 ізоформи. Методи. ЗТ-ПЛР, ДНК секвенування, Вестерн-блоттинг. Результати. ЗТ-ПЛР аналіз тотальної РНК, виділеної із клітин лінії MCF-7, з наступним секвенуванням ДНК виявив новий сплайсовий варіант мРНК S6K1, що містить додатковий екзон 1а і кодує лише p60 ізоформу S6K1. Для оцінки рівня експресії p60-S6K1 мРНК та білку було застосовано ЗТ-ПЛР та вестерн-блот. Результати. вказують на гетерогенну експресію транскрипту p60-S6K1, що не корелює ні з експресією загальної S6K1 мРНК, ні з білковим вмістом p60-S6K1 у досліджуваних клітинних лініях. Висновки. Надано докази існування нової сплайсової мРНК S6K1, яка кодує ізоформу p60-S6K1, що свідчить про існування в клітині двох незалежних шляхів експресії p60-S6K1, а саме альтернативну трансляцію спільної для головних S6K1 ізоформ мРНК та/чи трансляцію нової специфічної лише для р60-S6K1 сплайсової мРНК. Оскільки рівень експресії p60-S6K1 транскрипту в різних клітинних лініях не корелює із експресією загальної мРНК S6K1, цілком можливо, що p60-S6K1 ізоформа може відігравати відмінну від інших S6K1 ізоформ роль у клітинній фізіології, а також при розвитку патологій, які пов’язані із S6K1. Цель. Выяснить возможность существования сплайсинговой мРНК киназы S6К1 специфической исключительно для р60-S6К1 изоформы. Методы. ОТ-ПЦР, ДНК секвенирование, Вестерн-блоттинг. Результаты. ОТ-ПЦР анализ тотальной РНК, выделенной из клеток линии MCF-7, с последующим секвенированием ДНК выявил новый сплайсовый вариант S6K1, содержит дополнительный экзон 1а и кодирует только изоформу p60-S6K1. Далее были использованы ОТ-ПЦР и вестерн-блоттинг для оценки уровней p60-S6K1 мРНК и белка. Результаты показали гетерогенную экспрессию транскрипта p60-S6K1, экспрессия которого не коррелировала ни с тотальной S6K1 мРНК, ни с белковым содержанием p60-S6K1 в исследуемых клеточных линиях. Выводы. Предоставлены доказательства существования нового сплайсового варианта S6K1, который кодирует изоформу p60-S6K1, что указывает на существование в клетке двух независимых путей экспрессии p60-S6K1 изоформы, а именно альтернативную трансляцию общей для основных изоформ мРНК и/или трансляцию новой специфичной лишь для p60-S6K1 сплайсовой мРНК. Поскольку уровень экспрессии p60-S6K1 транскрипта в различных клеточных линиях не коррелируют с экспрессией тотальной S6K1 мРНК, можно предположить, что p60-S6K1 изоформа может играть отличную то других S6K1 изоформ роль в клеточной физиологии, а также при развитии патологий, которые связаны с S6K1.
issn 0233-7657
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154396
citation_txt Identification of a novel S6K1 splice variant coding for the p60-S6K1 isoform / I.V. Zaiets, V.V. Holiar, V.V. Filonenko // Вiopolymers and Cell. — 2019. — Т. 35, № 2. — С. 99-106. — Бібліогр.: 24 назв. — англ.
work_keys_str_mv AT zaietsiv identificationofanovels6k1splicevariantcodingforthep60s6k1isoform
AT holiarvv identificationofanovels6k1splicevariantcodingforthep60s6k1isoform
AT filonenkovv identificationofanovels6k1splicevariantcodingforthep60s6k1isoform
AT zaietsiv ídentifíkacíânovogosplaisovogovaríantus6k1âkiikoduêízoformup60s6k1
AT holiarvv ídentifíkacíânovogosplaisovogovaríantus6k1âkiikoduêízoformup60s6k1
AT filonenkovv ídentifíkacíânovogosplaisovogovaríantus6k1âkiikoduêízoformup60s6k1
AT zaietsiv identifikaciânovogosplaisovogovariantas6k1kotoryikodiruetizoformup60s6k1
AT holiarvv identifikaciânovogosplaisovogovariantas6k1kotoryikodiruetizoformup60s6k1
AT filonenkovv identifikaciânovogosplaisovogovariantas6k1kotoryikodiruetizoformup60s6k1
first_indexed 2025-12-07T15:52:08Z
last_indexed 2025-12-07T15:52:08Z
_version_ 1850865330179538944