Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека
Одним из наиболее перспективных методов для изучения открытой недавно субклеточной организации ряда метаболических процессов и механизмов их протекания в высших эукариотах является использование пермеабилизованных клеток. Существующие методы пермеабилизации предлагают довольно жесткую обработку мемб...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Datum: | 1997 |
| 1. Verfasser: | |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1997
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154654 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека / Б.С. Негруцкий // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 1. — С. 70-74. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862574658104066048 |
|---|---|
| author | Негруцкий, Б.С. |
| author_facet | Негруцкий, Б.С. |
| citation_txt | Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека / Б.С. Негруцкий // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 1. — С. 70-74. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Одним из наиболее перспективных методов для изучения открытой недавно субклеточной организации ряда метаболических процессов и механизмов их протекания в высших эукариотах является использование пермеабилизованных клеток. Существующие методы пермеабилизации предлагают довольно жесткую обработку мембран, приводящую к потере интегральности внутриклеточного содержимого. В настоящей работе для пермеабилизации клеток животных и человека использован детергент мягкого действия, растительный гликозид сапонин. Это вещество оказалось практически единственным из тестированных, использование которого позволило обеспечить, с одной стороны, существенную сохранность внутриклеточной организации и, с другой, – доступ экзогенных макромолекул внутрь клетки. Разработаны щадящие условия перфорации цитоплазматических мембран, отличающиеся для прикрепленных к поверхности и находящихся в суспензии клеток. Показана высокая функциональная активность пермеабилизованных клеток и доступность интерьера клеток флюоресцентно меченным белкам.
Одним з найперспективніиіих методів вивчення відкритої недавно субклітинної організації ряду метаболічних процесів і механізмів їх протікання у вищих еукаріотах є використання пермеабілізованних клітин. Існуючі методи пермеабілізації пропонують доволі жорстку обробку мембран, що призводить до втрати інтегральності вмісту клітин. У цій роботі для пермеабілізації клітин тварин і людини використано детергент м'якої дії – рослинний глікозид сапонін. Ця речовина виявилася практично єдиною із тестованих, використання якої дозволило забезпечити, з одного боку, значне збереження внутрішньоклітинної організації і, з другого, – доступ екзогенних макромолекул всередину клітин. Розроблено м'які умови перфорації цитоплазматичних мембран, які різняться для прикріплених до поверхні і перебуваючих у суспензії клітин. Показано високу функціональну активність пермеабілізованих клітин та доступність інтер'єру клітин флюоресцентно міченим білкам.
The permeabilized cell system appears one of the most promising methods to study recently discovered subcellular organization of some metabolic processes and the functional mechanisms involved. The existing permeabilization procedures offer rather harsh membrane treatment which leads to the loss of cell integrity. The plant glycoside saponin was used to permeabilize human and animal cells in this work. The saponin treatment is found to provide both essential conservation of intracetlular organization and unlimited access of exogenous macromolecutes to the inside of cell. The permeabilization conditions are slightly different for immobilized cells and cells in suspension. High functional activity of permeabilized cells as well as the availability of the interior of cells to fluorescently labeled macromolecules are demonstrated.
|
| first_indexed | 2025-11-26T11:52:03Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-154654 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-11-26T11:52:03Z |
| publishDate | 1997 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Негруцкий, Б.С. 2019-06-15T17:25:50Z 2019-06-15T17:25:50Z 1997 Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека / Б.С. Негруцкий // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 1. — С. 70-74. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00046A https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154654 577 Одним из наиболее перспективных методов для изучения открытой недавно субклеточной организации ряда метаболических процессов и механизмов их протекания в высших эукариотах является использование пермеабилизованных клеток. Существующие методы пермеабилизации предлагают довольно жесткую обработку мембран, приводящую к потере интегральности внутриклеточного содержимого. В настоящей работе для пермеабилизации клеток животных и человека использован детергент мягкого действия, растительный гликозид сапонин. Это вещество оказалось практически единственным из тестированных, использование которого позволило обеспечить, с одной стороны, существенную сохранность внутриклеточной организации и, с другой, – доступ экзогенных макромолекул внутрь клетки. Разработаны щадящие условия перфорации цитоплазматических мембран, отличающиеся для прикрепленных к поверхности и находящихся в суспензии клеток. Показана высокая функциональная активность пермеабилизованных клеток и доступность интерьера клеток флюоресцентно меченным белкам. Одним з найперспективніиіих методів вивчення відкритої недавно субклітинної організації ряду метаболічних процесів і механізмів їх протікання у вищих еукаріотах є використання пермеабілізованних клітин. Існуючі методи пермеабілізації пропонують доволі жорстку обробку мембран, що призводить до втрати інтегральності вмісту клітин. У цій роботі для пермеабілізації клітин тварин і людини використано детергент м'якої дії – рослинний глікозид сапонін. Ця речовина виявилася практично єдиною із тестованих, використання якої дозволило забезпечити, з одного боку, значне збереження внутрішньоклітинної організації і, з другого, – доступ екзогенних макромолекул всередину клітин. Розроблено м'які умови перфорації цитоплазматичних мембран, які різняться для прикріплених до поверхні і перебуваючих у суспензії клітин. Показано високу функціональну активність пермеабілізованих клітин та доступність інтер'єру клітин флюоресцентно міченим білкам. The permeabilized cell system appears one of the most promising methods to study recently discovered subcellular organization of some metabolic processes and the functional mechanisms involved. The existing permeabilization procedures offer rather harsh membrane treatment which leads to the loss of cell integrity. The plant glycoside saponin was used to permeabilize human and animal cells in this work. The saponin treatment is found to provide both essential conservation of intracetlular organization and unlimited access of exogenous macromolecutes to the inside of cell. The permeabilization conditions are slightly different for immobilized cells and cells in suspension. High functional activity of permeabilized cells as well as the availability of the interior of cells to fluorescently labeled macromolecules are demonstrated. Автор глубоко признателен проф. М. Дойчеру (США) и проф. В. Меллеру (Нидерланды) за возможность проведения экспериментов в их лабораториях, а также Др. Р. Стапуленису (Литва) — за консультации и поддержку. Часть работы была осуществлена в ходе выполнения краткосрочного проекта FEBS. Данная работа частично финансировалась Министерством по делам науки и технологии Украины (грант № 5.4/73). ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Клеточная биология Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека М`який та ефективний метод пермеабілізації клітин тварин і людини Gentle and effective mehod to permeabilize the animal and human cell membrane Article published earlier |
| spellingShingle | Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека Негруцкий, Б.С. Клеточная биология |
| title | Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека |
| title_alt | М`який та ефективний метод пермеабілізації клітин тварин і людини Gentle and effective mehod to permeabilize the animal and human cell membrane |
| title_full | Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека |
| title_fullStr | Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека |
| title_full_unstemmed | Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека |
| title_short | Мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека |
| title_sort | мягкий и эффективный метод пермеабилизации клеток животных и человека |
| topic | Клеточная биология |
| topic_facet | Клеточная биология |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154654 |
| work_keys_str_mv | AT negruckiibs mâgkiiiéffektivnyimetodpermeabilizaciikletokživotnyhičeloveka AT negruckiibs mâkiitaefektivniimetodpermeabílízacííklítintvarinílûdini AT negruckiibs gentleandeffectivemehodtopermeabilizetheanimalandhumancellmembrane |