Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей

Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей

Устойчивая к пара-фторфенилаланину (ФФА) клеточная культура макротомии крася­щей (Arnebial/Macrotomia euchroma (Royle) Pauls) характеризуется пониженным уров­нем накопления нафтохинонов по сравнению с исходным клеточным штаммом и сохраняет эту особенность в течение длительного выращивания в отсутств...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Veröffentlicht in:Биополимеры и клетка
Datum:1994
1. Verfasser: Захленюк, О.В.
Format: Artikel
Sprache:Russian
Veröffentlicht: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1994
Online Zugang:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154715
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей / О.В. Захленюк // Биополимеры и клетка. — 1994. — Т. 10, № 2. — С. 32-37. — Бібліогр.: 17 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-154715
record_format dspace
spelling Захленюк, О.В.
2019-06-15T18:30:26Z
2019-06-15T18:30:26Z
1994
Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей / О.В. Захленюк // Биополимеры и клетка. — 1994. — Т. 10, № 2. — С. 32-37. — Бібліогр.: 17 назв. — рос.
0233-7657
DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0003A0
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154715
578.085:581.143.6
Устойчивая к пара-фторфенилаланину (ФФА) клеточная культура макротомии крася­щей (Arnebial/Macrotomia euchroma (Royle) Pauls) характеризуется пониженным уров­нем накопления нафтохинонов по сравнению с исходным клеточным штаммом и сохраняет эту особенность в течение длительного выращивания в отсутствие селектив­ного фактора. Наблюдается возрастание ее устойчивости к ФФА. Присутствие в среде индолилмасляной кислоты вместо индолилуксусной и кинетина стимулирует биосинтез нафтохинонов в клетках ФФА-устойчивого варианта. Корнеобразование, происходящее при таком условии в контрольной культуре, у ФФА-устойчивого варианта не прояв­ляется.
Стійка до пара-фторфенілаланіну (ФФА) суспензійна клітинна культура макротоми барвлячої (Arnebia/Macrotomia euchroma (Royle) Pauls) характеризується зниженим piвнем накопичення шиконіну в пopiвняннi з вихідним клітинним штамом i зберігає цю особливість протягом тривалого вирощування у відсутності селективного факто­ра. Водночас спостерігається зростання стійкості до ФФА. Присутність у середовищі індолілмасяної кислоти замість індолілоцтової та кінетину призводить до часткового відновлення продуктивності клітин ФФА-стійкого варіанту. Коренеутворення, що відбувається за такоу умови в контрольна культуре у ФФА-стійкого варіанту не виявлено.
Suspension culture of macrotomia dyeing (Arnebia/Macrotomia euchroma (Royle) Pauls) resistant to para-fluorophenylalanine (PFP) is characterized by low level of shikonin accumulation as compared to initial cell strain and retain this feature for a long time of growth in the absence of PFP. At the same time increase of resistance level is observed. Indolebutiric acid instead of indoleacetic acid and kinetin promote partial recovery of cell productivity. No rootformation usually observed in initial cell strain after such phytohormone exchange in medium is observed in PFP-resistant variant.
ru
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
Биополимеры и клетка
Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей
Деякі особливостs пара-фторфенілаланін-стійкої клітинної культури макротоми барвлячої
Some peculiarities of para-fluorophenylalanine resistant macrotomia dyeing cell culture
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей
spellingShingle Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей
Захленюк, О.В.
title_short Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей
title_full Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей
title_fullStr Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей
title_full_unstemmed Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей
title_sort некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей
author Захленюк, О.В.
author_facet Захленюк, О.В.
publishDate 1994
language Russian
container_title Биополимеры и клетка
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
format Article
title_alt Деякі особливостs пара-фторфенілаланін-стійкої клітинної культури макротоми барвлячої
Some peculiarities of para-fluorophenylalanine resistant macrotomia dyeing cell culture
description Устойчивая к пара-фторфенилаланину (ФФА) клеточная культура макротомии крася­щей (Arnebial/Macrotomia euchroma (Royle) Pauls) характеризуется пониженным уров­нем накопления нафтохинонов по сравнению с исходным клеточным штаммом и сохраняет эту особенность в течение длительного выращивания в отсутствие селектив­ного фактора. Наблюдается возрастание ее устойчивости к ФФА. Присутствие в среде индолилмасляной кислоты вместо индолилуксусной и кинетина стимулирует биосинтез нафтохинонов в клетках ФФА-устойчивого варианта. Корнеобразование, происходящее при таком условии в контрольной культуре, у ФФА-устойчивого варианта не прояв­ляется. Стійка до пара-фторфенілаланіну (ФФА) суспензійна клітинна культура макротоми барвлячої (Arnebia/Macrotomia euchroma (Royle) Pauls) характеризується зниженим piвнем накопичення шиконіну в пopiвняннi з вихідним клітинним штамом i зберігає цю особливість протягом тривалого вирощування у відсутності селективного факто­ра. Водночас спостерігається зростання стійкості до ФФА. Присутність у середовищі індолілмасяної кислоти замість індолілоцтової та кінетину призводить до часткового відновлення продуктивності клітин ФФА-стійкого варіанту. Коренеутворення, що відбувається за такоу умови в контрольна культуре у ФФА-стійкого варіанту не виявлено. Suspension culture of macrotomia dyeing (Arnebia/Macrotomia euchroma (Royle) Pauls) resistant to para-fluorophenylalanine (PFP) is characterized by low level of shikonin accumulation as compared to initial cell strain and retain this feature for a long time of growth in the absence of PFP. At the same time increase of resistance level is observed. Indolebutiric acid instead of indoleacetic acid and kinetin promote partial recovery of cell productivity. No rootformation usually observed in initial cell strain after such phytohormone exchange in medium is observed in PFP-resistant variant.
issn 0233-7657
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154715
citation_txt Некоторые особенности пара-фторфенилаланин-устойчивой клеточной культуры макротомии красящей / О.В. Захленюк // Биополимеры и клетка. — 1994. — Т. 10, № 2. — С. 32-37. — Бібліогр.: 17 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT zahlenûkov nekotoryeosobennostiparaftorfenilalaninustoičivoikletočnoikulʹturymakrotomiikrasâŝei
AT zahlenûkov deâkíosoblivostsparaftorfenílalanínstíikoíklítinnoíkulʹturimakrotomibarvlâčoí
AT zahlenûkov somepeculiaritiesofparafluorophenylalanineresistantmacrotomiadyeingcellculture
first_indexed 2025-11-26T19:17:25Z
last_indexed 2025-11-26T19:17:25Z
_version_ 1850770963440861184
fulltext УДК 578.085:581.143.6 О. В. Захленюк НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ПАРА-ФТОРФЕНИЛАЛАНИН-УСТОЙЧИВОЙ КЛЕТОЧНОЙ КУЛЬТУРЫ МАКРОТОМИИ КРАСЯЩЕЙ Устойчивая к пара-фторфенилаланину (ФФА) клеточная культура макротомии крася­ щей (ArnebialMacrotomia euchroma (Royle) Pauls) характеризуется пониженным уров­ нем накопления нафтохинонов по сравнению с исходным клеточным штаммом и со­ храняет эту особенность в течение длительного выращивания в отсутствие селектив­ ного фактора. Наблюдается возрастание ее устойчивости к ФФА. Присутствие в среде индолилмасляной кислоты вместо индолилуксусной и кинетина стимулирует биосинтез нафтохинонов в клетках ФФА-устойчивого варианта. Корнеобразование, происходящее при таком условии в контрольной культуре, у ФФА-устойчивого варианта не прояв­ ляется. Введение. Лара-фторфенилаланин (ФФА) и его биологические эффекты привлекают внимание специалистов разного профиля. Изучение дейст­ вия ФФА на цитологическом уровне, в частности выявление его спо­ собности вызывать гаплоидизацию клеток у грибов [1], привело к по­ явлению ряда работ цитогенетического характера. Этими исследовани­ ями показано, что результатом действия ФФА могут быть различные из­ менения хромосомных чисел в клетках интактных растений [2], у куль­ тивируемых in vitro клеток и получаемых из них растений-регенерантов [3, 4]. В основе подобных изменений лежит способность ФФА приво­ дить к структурным модификациям веретена деления клеток, что было выявлено у клеток как животного [5], так и растительного [6] проис­ хождения. ФФА рассматривается как специфический индуктор анеупло- идии у растений [2]. Обнаружен также ряд физиологических эффектов ФФА. Как антиметаболит, вызывающий нарушения на уровне биосин­ теза и/или функционирования белков, он оказывает ингибирующее влия­ ние на рост растений [7]. Вместе с тем известно, что в довольно широ­ ком диапазоне концентраций он стимулирует удлинение колеоптилей овса, угнетая при этом фенилаланин-зависимый синтез фенольных инги­ биторов роста [8]. В условиях in vitro ФФА способствует корнеобразо- ванию в первичном каллусе табака, а у устойчивых к его повышенным дозам каллусных тканей табака и мака — стимулирует эмбриогенез [9]. Получение устойчивых к повышенным дозам ФФА линий культивируе­ мых клеток многих видов растений выявило характерные изменения ме­ таболизма клеток, проявляющиеся, прежде всего, в виде суперпродукции свободного фенилаланина или увеличения содержания фенольных со­ единений [10]. Последнее обстоятельство представляет особый интерес в связи с возможностью использования ФФА в качестве индуктора на­ правленных изменений вторичного метаболизма культивируемых клеток растений, что, в свою очередь, важно для создания биотехнологий полу­ чения практически ценных продуктов вторичного обмена. Есть резуль­ таты, подтверждающие эту возможность. Показано, например, что ус­ тойчивость к ФФА сочетается с усиленным накоплением капсаицина в культивируемых клетках Capsicum annuum [11] и розмариновой кис­ ее) О. В. Захленюк, 1994 32 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1994. Т. 10. № 2 лоты —в клетках Anchuza officinalis [12]. С подобной целью нами бы­ ла получена устойчивая к ФФА клеточная культура макротомии кра­ сящей, являющейся продуцентом красного нафтохинонового пигмента шиконина, известного как натуральный краситель и как лекарственное средство. Предполагалось, что в случае суперпродукции и дальнейшей метаболизации свободного фенилаланина можно будет наблюдать уве­ личение накопления нафтохинонов. Однако полученный ФФА-устойчи- вый вариант клеточной культуры макротомии характеризовался пони­ женной продуктивностью по накоплению как биомассы, так и шико­ нина [13]. В настоящей работе приведены результаты последующего изучения особенностей данного варианта культуры в сравнении с ис­ ходным клеточным штаммом, что представляет интерес для выяснения природы ФФА-устойчивости у изучаемого объекта. Материалы и методы. В качестве контроля использовали штамм суспензионной культуры макротомии красящей АЕ80-2 (АтеЫа/Мас- rotomia euchroma (Royle) Pauls, сем. Boraginaceae), полученный нами с помощью двукратной процедуры клонирования мелких клеточных аг­ регатов. Материалом для клонирования служила суспензионная куль­ тура (штамм 80) производства ПО «ВИЛР» (Москва) [14]. Клеточ­ ную суспензию штамма АЕ80-2 выращивали в среде Мурасиге — Скуга с модификациями по [14] в колбах объемом 250 мл, содержащих 50 мл среды, на качалке (60—80 об/мин) при температуре 24+1 °С без ос­ вещения. Интервал пересадок культуры 14 сут. ФФА-устойчивый вариант культуры, полученный ступенчатой се­ лекцией клеток штамма АЕ80-2 [13], выращивали в среде с аналогом в концентрации 100 мг/мл и в контрольной среде. Содержание нафтохинонов в образцах клеточной суспензии опре­ деляли по содержанию шиконина. Для этого клеточную суспензию экс­ трагировали подкисленным спиртом (1 мл конц. H2S04/1 л EtOH) при подогреве до 60 °С. Из спиртовых экстрактов нафтохиноны извлекали жидким парафином, а из парафиновых — 5 %-м раствором КОН, в ко­ тором все нафтохиноны (ацильные производные шиконина) гидролизу- ются с образованием шиконина. Щелочные растворы измеряли фотоко- лориметрически. Для активации корнеобразования у контрольного штамма в среду вместо индолилуксусной кислоты (ИУК) и кинетина вносили индолилмасляную кислоту (ИМК) в количестве 0,3—1,0 мг/л. На такую же среду переносили ФФА-устойчивый вариант культуры после выра­ щивания его в среде, содержащей 100 мг/л ФФА. В работе использовали ФФА, синтезированный в Ин-те молекуляр. биологии и генетики АН Украины. ФФА вносили в питательную среду до автоклавирования. Опыты осуществляли в 3—5-кратной повторности. Результаты и обсуждение. Для выявления различий у ФФА-устой- чивой суспензионной культуры макротомии и исходного клеточного штамма изучали их реакцию на воздействие ИМК, оценивая при этом продуктивность клеток и их способность к корнеобразованию, а также проверяли дозовую зависимость роста и накопления нафтохинонов в присутствии ФФА у обоих вариантов культуры после длительного их выращивания в контрольной среде. На примере культивируемых клеток воробейника — одного из про­ дуцентов шиконина было установлено, что синтетические ауксины (2,4-Д и а-НУК) угнетают биосинтез нафтохинонов, тогда как природ­ ный ауксин (ИУК) способствует лучшему их накоплению и одновре­ менно лучшему росту культуры [15]. ИМК относится к группе синте­ тических ауксинов, однако, как показали результаты настоящего ис­ следования, она не угнетает процесс биосинтеза Нафтохинонов в куль­ туре клеток макротомии. Перенос клеток контрольного штамма и его ФФА-устойчивого варианта, выращиваемого в течение 15 пассажей в присутствии ФФА, на контрольную среду, в которой ИУК и кинетин заменены на ИМК, выявил у них одинаковое по направленности изме- ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1994. Т. 10. №2 3 — 3-847 33 нение продуктивности клеток (рис. 1, варианты К\ и Ф\). Реакция кон­ трольного штамма при этом оказалась значительно слабее, чем устой­ чивого варианта, продуктивность которого повышалась в 6 раз по срав­ нению с уровнем, наблюдаемым у него на среде с ФФА. Однако вос- становление биосинтетической активности ФФА-устойчивых клеток бы­ ло лишь частичным по отношению к контрольному штамму и состави­ ло 56,5 % от его уровня. Кроме того, отмеченная стимуляция биосин­ теза нафтохинонов оказалась зависимой от присутствия ИМК. Возврат к xf ф fy q>z Рис. 1. Содержание шиконина в клеточной суспензии исходного штамма макротомии (Я — контрольная среда; К\ — среда с ИМК) и ФФА-устойчивого варианта (Ф — контрольная среда, содержащая 100 мг/л ФФА; Ф\ — среда с ИМК; Фг — контроль­ ная среда после среды с ИМК). Приведенные значения представляют усредненные за 3—5 пассажей данные. В каждом пассаже анализировали по 3—5 субкультур Рис. 2. Дозовая зависимость роста контрольной (1) и устойчивой к ФФА (2) клеточ­ ных культур макротомии через 14 сут выращивания на средах с ФФА. Размер ино- кулята для (1)—28%, для (2) — 32% от конечного прироста (соответственно 0,27 и 0,23 мг сухой массы на 25 мл среды) ФФА-устойчивого варианта со среды с ИМК на контрольную среду, со­ держащую или не содержащую ФФА, сразу приводил к снижению содержания шиконина до характерного для этого варианта уровня, со­ ставляющего в среднем 8 % от уровня контрольного штамма (рис. 1, вариант Ф2). При последующем выращивании ФФА-устойчивого вари­ анта на контрольной среде в течение 29 пассажей постепенно проис­ ходило некоторое усиление накопления нафтохинонов, однако их уро­ вень в среднем не превышал 25,2 % от уровня контроля. Для проверки устойчивости после длительного выращивания (в те­ чение 1,5 лет) в среде без селективного фактора ФФА-устойчивый ва­ риант культуры переносили на среды, содержащие от 80 до 320 мг/л ФФА (рис. 2). Как видно из рисунка, ФФА-устойчивый вариант сохра­ нил устойчивость к данному антиметаболиту и, кроме того, обнаружил устойчивость к более высоким дозам ФФА по сравнению с той (100 мг/л), при которой он был отселектирован. Последующая провер­ ка показала, что этот вариант способен нормально расти при концент­ рации ФФА 320 мг/л. Подобное изменение степени устойчивости было отмечено в случае ФФА-устойчивой клеточной линии табака, получен­ ной при установленной для нее ранее летальной дозе ФФА 18 мг/л, а спустя несколько лет эта линия обнаружила нормальный рост при кон­ центрации аналога 120 мг/л [16]. Из анализа кривых дозовой зависимости роста исследуемых вари­ антов культуры макротомии следует также, что повышение уровня ус­ тойчивости к ФФА проявилось не только у ФФА-устойчивого варианта, но и у чувствительного к нему контрольного штамма. Следует отметить, что за прошедший период этот штамм подвергался постоянному отбору наиболее продуктивных по накоплению шиконина субкультур и перио­ дическому отбору фракций мелких клеточных агрегатов суспензии. Это привело к значительному повышению продуктивности культуры. Про- 34 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1994. Т. 10. .\? 2 изошедшие при этом изменения вторичного метаболизма клеток могли способствовать повышению их устойчивости к стрессовым воздействи­ ям. Снижение чувствительности по мере роста клеток в условиях in vitro было обнаружено для контрольной клеточной линии табака в ци­ тируемой выше работе [16]. При попытке повторного получения от этой линии устойчивого к ФФА варианта оказалось, что летальной для нее была доза, в 3 раза превышающая ранее установленную. Не выявив у.чувст- | вительной линии изменений по таким па- | д0 раметрам, как уровень накопления фе- * $$ нольных соединений, активность ФАЛ- •* ** | 20 I /7 Рис. 3. Содержание шиконипа в контрольной (/) ^ - - и устойчивой к ФФА (2) клеточных культурах **и ^и макротомии через 14 сут роста на среде с ФФА ФЩмг/л- лиазы, а также активность поступления ФФА в клетки, авторы пришли к выводу о том, что изменение чувствительности клеток могло быть обусловлено условиями культивирования, в частности, плотностью под­ вергаемой обработке клеточной популяции, так как использованные ими инокуляты ткани по массе более чем в 2 раза превышали исходные. Результаты изучения зависимости накопления нафтохинонов от со­ держания ФФА в среде у контрольного штамма, а также у ФФА-устой- чивого варианта после 1,5 лет его выращивания в среде без селектив­ ного фактора представлены на рис. 3. У контрольного штамма по мере возрастания концентрации ФФА наряду с угнетением роста клеток (см. рис. 2) наблюдали снижение уровня накопления нафтохинонов, что со­ гласуется с полученными ранее данными [13]. В случае ФФА-устопчи- вого варианта уровень накопления нафтохинонов тоже снижался, но это снижение не превышало 30 % при всех использованных концент­ рациях ФФА. Одной из особенностей роста контрольного штамма культуры мак- ротомии является отсутствие видимых признаков морфогенеза на кон­ трольной среде. При замене в среде ИУК и кинетина на ИМК у него начинается обильное корнеобразование. Перенос ФФА-устойчивого ва­ рианта через 15 пассажей роста в среде, содержащей 100 мг/л ФФА, на среду с указанным выше изменением гормонального состава пока­ зал, что этот вариант утратил способность к корнеобразованию при данных условиях. Осталось неясным, произошла ли потеря этой спо­ собности сразу с приобретением клетками устойчивости к аналсг\- или позже. В работах [9, 17] на примере ФФА-устойчивых клеточных куль­ тур табака показано, что их способность к регенерации растении про­ является в течение 7—9 месяцев с момента получения этих линии, а затем утрачивается. В отличие от подавления корнеобразования, на­ блюдаемого в ФФА-устойчивой культуре макротомии, первичное воз­ действие ФФА на эксплантаты листьев табака способствовало тому, что появление первичного каллуса сопровождалось интенсивным корнеоб- разованием [9]. Однако и этот процесс был ограничен во времени, так как при дальнейшем пассировании каллуса на средах с ФФА корнеоб­ разование прекратилось. Изменение со временем характера вызывае­ мых ФФА физиологических эффектов зависит не только от длитель­ ности воздействия аналогом, но и от его концентрации. Отмеченное в работе [9] корнеобразование у первичного каллуса табака наблюдали при 20—60 мг/л ФФА, тогда как у устойчивых к 80—100 мг/л ФФА каллусов проявлялась в индуцирующих условиях иная морфогенная ре­ акция — эмбриогенез и регенерация растений. Приведенные в настоящей работе результаты свидетельствуют о том, что устойчивость к повышенным дозам ФФА и низкая по сравне­ нию с исходным штаммом продуктивность ФФА-устойчивого варианта суспензионной клеточной культуры макротомии сохраняются независи- 1-SSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1994. Т. 10. № 2 ,45 мо от присутствия антиметаболита в среде и в течение длительного вре­ мени. Тем не менее, снижение продуктивности данного варианта куль­ туры, по-видимому, обусловлено частично обратимыми метаболически­ ми превращениями в клетках, так как содержание нафтохинонов зна­ чительно повышается в присутствии ауксина ИМК, используемого в физиологических дозах. Сохранение способности расти при высоких до­ зах ФФА является характерной чертой ФФА-устойчивых клеточных ли­ ний растений. В ряде случаев такие линии расцениваются как мутант- ные. Предложено использовать признак ФФА-устойчивости как гене­ тический маркер [17]. Однако мутационная природа ФФА-устойчивос­ ти культивируемых клеток растений на сегодня не является доказан­ ной [16], и вопрос о природе устойчивости к данному антиметаболиту остается дискуссионным. О. В. Захленюк ДЕЯК1 ОСОБЛИВОСТ1 ПАРА-ФТОРФЕН1ЛАЛАН1Н-СТ1ЙК01 КЛ1ТИНН01 КУЛЬТУРИ МАКРОТОМИ БАРВЛЯЧ01 Р е з ю м е Стшка до яара-фторфешлаланшу (ФФА) суспензшна кл1тинна культура макротоми барвлячоТ (Arnebia/Macrotomia euchroma (Royle) Pauls) характеризуеться зниженим piBHeM накопичення шиконшу в пopiвняннi з вих1дним кл1тинним штамом i 36epirae цю особлившть протягом тривалого вирощування у BUCVTHOCTI селективного факто­ ра. Водночас спостер1гаеться зростання стшкосп до ФФА. Присутшсть у середовиши шдсшлмаслянсн КИСЛОТИ замклъ шдолшоцтовоТ та кшетину призводить до часткового в!дновлення продуктивное^ клгтин ФФА-стшкого вар1анту. Коренеутворення, що в1д- буваеться за такоУ умови в контрольна культуре у ФФА-стшкого вар1анту не виявлено. О. V. Zakhlenjuk SOME PECULIARITIES OF PARA-FLUOROPHENYLALANINE RESISTANT MACROTOMIA DYEING CELL CULTURE S u m m a r y Suspension culture of macrotomia dyeing (Arnebia/Macrotomia euchroma (Royle) Pa­ uls) resistant to para-fluorophenylalanine (PFP) is characterized by low level of shiko- nin accumulation as compared to initial cell strain and retain this feature for a long time of growth in the absence of PFP. At the same time increase of resistance level is observed. Indolebutiric acid instead of indoleacetic acid and kinetin promote partial re­ covery of cell productivity. No rootformation usually observed in initial cell strain after such phytohormone exchange in medium is observed in PFP-resistant variant. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Lhoas P. Mitotic hapioidization by treatment of Aspergillus niger diploids with p- fluorophenylalanine // Nature.— 1961.— 190, № 4777.—P. 744. 2. Banks P., Britten E. J., Gordon G. H. Para-fluorophenylalanine-induced chromosome number changes in higher plants. I. Maize // Genome.— 1989.— 32.— P. 962—966. 3. Niizeki M. Studies on plant cell and tissue culture. IV. Effect of para-fluoropheny­ lalanine on haploid and diploid cells of tobacco plant in vitro // ,J. Faculty Agric. Hokkaido Univ.—1974.—57, № 4.—P. 349—356. 4. Fukui i{., Niizeki H. Artificial reduction of chromosome number in Fragaria nanasa following treatment with p-fluorophenylalanine//Plant Tissue Culture : Proc. 5 Int. Congr. Plant Tissue and Cell Culture (Tokyo and Lake Jamanaka, 1982).— Tokyo, 1982.—P. 427—428. 5. Sisken J. E. The effects of p-AL-fluorophenylalanine on chromosome movement and cytokinesis of human amnion cells in culture//Chromosoma.— 1973.—44.—P. 91—98. 6. Левенко Б. А., Кифорак О. В. Влияние фторфенилаланина на культуру тканей томата и гаплопаппуса//Эксперим. генетика растений.— Киев : Наук, думка, 1977.— С. 138—142. 7. Nooden L. D., Thimann К. V. Action of inhibitors of RNA and protein synthesis on cell enlargement//Plant Physiol.—1966.—41.—P. 157—164. 38 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1994. Г. 10. №'2 8. Orkwiszewski J. A. J., Hopkins W. G. Effect of fluorophenylalanine on /.-phenyla­ lanine ammonialyase activity in Avena coleoptiles // Amer. J. Bot.— 1974.— 61, N 4.— p. 433—436. 9. Захленюк О. В., Костенюк И. А. Некоторые цито- и морфогенетические эффекты яара-фторфенилаланина в культуре тканей Nicotiana tabacum и Papaver bractea- tum Л Биополимеры и клетка—1991.— 7, № 5.— С. 66—71. 10. Berlin I., Widholm J. Correlation between phenylalanine ammonialyase activity and phenolic biosynthesis in p-fluorophenylalanine sensitive and resistant tobacco and carrot cell cultures//Plant Physiol.—1977.—59.—P. 550—553. 11. Salgado-Garciglia R., Ochoa-Alejo N. Increased capsaicin content in PFP-resistant cells of chili pepper (Capsicum annuum L.)// Plant Cell Rep.— 1990.— 8.— P. 617—620. 12. Quesnel A. A., Ellis В. Е. Comparison of UV irradiation and p-Fluorophenylalanine as selective agents for production of aromatic compounds in plant cell cultures / / J. Biotechnology.— 1989.—10.—P. 27—38. 13. Zakhlenjuk O. V., Vidmachenko T. V., Kunakh V. A. et al. Comparative characteris­ tics of shikonin accumulating Arnebia euchroma suspension culture and it's p-fluo- rophenylalanine-resistant variant//Acta Horticulture.— 1993.— 330.— P. 293—298. 14. Давыденков В. #., Патудин А. В., Попов Ю. Г. и др. Культура клеток АгпеЫа euchroma (Royle) jonst.— новый источник получения шиконина // Хим.-фарм. журнал.— 1991.—№ '1.—С. 53—56. 1'5. Tabata M., Fujita Y. Production of shikonin by plant cell cultures // Biotechnol. in plant sci. Relevance to agriculture in eighties/Ed. M. Zaitlin.— New York : Acad. press, 1985.—P. 207—218. 16. Quesnel A. A., Ellis В. Е. Population responses in tobacco cell cultures during se­ lection for resistance to par a-fluoro phenylalanine 11 Plant Sci.— 1987.— 49 — P. 223—229. 17. Flick С. E., Jensen R. A., Evans D. A. Isolation, protoplast culture and plant rege­ neration of PFP-resistant variants of Nicotiana tabacum Su/Su//Z. Pflanzen.— 1981.— 103.— P. 239—245. Ин-т молекуляр. биологии и генетики АН Украины, Киев Получено 23.11.93 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1994. Т. 10. № 2 37

Ähnliche Einträge