Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп
С помощью монAT исследована экспрессия эпитопов С-домена L-цепей Ig человека κ и λтипов различных V-подгрупп. Установлено, что уровень экспрессии данного эпитопа С-домена зависит от принадлежности L-цепи к той или иной подгруппе. За допомогою монAT досліджено експресію епітопів С-домену L-ланцюгів I...
Saved in:
| Published in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Date: | 1989 |
| Main Authors: | , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1989
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154977 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп / О.В. Рохлин, А. Соломон, Д. Вайсс, А.Р. Ибрагимов, Е.Л. Арсеньева, Г.Т. Богачева // Биополимеры и клетка. — 1989. — Т. 5, № 4. — С. 37-45. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-154977 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Рохлин, О.В. Соломон, А. Вайсс, Д. Ибрагимов, А.Р. Арсеньева, Е.Л. Богачева, Г.Т. 2019-06-16T07:33:07Z 2019-06-16T07:33:07Z 1989 Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп / О.В. Рохлин, А. Соломон, Д. Вайсс, А.Р. Ибрагимов, Е.Л. Арсеньева, Г.Т. Богачева // Биополимеры и клетка. — 1989. — Т. 5, № 4. — С. 37-45. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0000D1 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154977 577.27 С помощью монAT исследована экспрессия эпитопов С-домена L-цепей Ig человека κ и λтипов различных V-подгрупп. Установлено, что уровень экспрессии данного эпитопа С-домена зависит от принадлежности L-цепи к той или иной подгруппе. За допомогою монAT досліджено експресію епітопів С-домену L-ланцюгів Ig людини κ і λ типів різних V-підгруп. Встановлено, що рівень експресії даного епітопу С-домену залежить від приналежності L-ланцюга до тієї чи іншої підгрупи. Monoclonal antibodies against three different κ-chain constant domain epitopes and three different human Ig λ-chain C-domain epitopes have been prepared. Some of the epitopes are expressed both in intact Ig molecules and in isolated L-chains, whereas other epitopes are found only in isolated λ-chains. The expression of these epitopes has been studied in 40 various myeloma κ-chain preparations belonging to four different variable subgroups, and in 52 λ-chain preparations of three V subgroups. The expression level in the above epitope of C domain is shown to depend on the variable subgroups of L-chains. This implies the existence of certain interactions between V and C domains promoting the alteration in the level of C domain epitope expression. These studies indicate that interactions of structurally distinct V domains with the C domain probably lead to local conformational changes of the C domain. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп Експресія епітопів С-домену L-ланцюгів κ і λ типів імуноглобулінів людини у білків різних варіабельних підгруп Constant domain epitope expression of human immunoglobulin L chains of the κ and λ type in proteins of different variable subgroups Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп |
| spellingShingle |
Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп Рохлин, О.В. Соломон, А. Вайсс, Д. Ибрагимов, А.Р. Арсеньева, Е.Л. Богачева, Г.Т. Структура и функции биополимеров |
| title_short |
Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп |
| title_full |
Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп |
| title_fullStr |
Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп |
| title_full_unstemmed |
Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп |
| title_sort |
экспрессия эпитопов с-домена l-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп |
| author |
Рохлин, О.В. Соломон, А. Вайсс, Д. Ибрагимов, А.Р. Арсеньева, Е.Л. Богачева, Г.Т. |
| author_facet |
Рохлин, О.В. Соломон, А. Вайсс, Д. Ибрагимов, А.Р. Арсеньева, Е.Л. Богачева, Г.Т. |
| topic |
Структура и функции биополимеров |
| topic_facet |
Структура и функции биополимеров |
| publishDate |
1989 |
| language |
Russian |
| container_title |
Биополимеры и клетка |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Експресія епітопів С-домену L-ланцюгів κ і λ типів імуноглобулінів людини у білків різних варіабельних підгруп Constant domain epitope expression of human immunoglobulin L chains of the κ and λ type in proteins of different variable subgroups |
| description |
С помощью монAT исследована экспрессия эпитопов С-домена L-цепей Ig человека κ и λтипов различных V-подгрупп. Установлено, что уровень экспрессии данного эпитопа С-домена зависит от принадлежности L-цепи к той или иной подгруппе.
За допомогою монAT досліджено експресію епітопів С-домену L-ланцюгів Ig людини κ і λ типів різних V-підгруп. Встановлено, що рівень експресії даного епітопу С-домену залежить від приналежності L-ланцюга до тієї чи іншої підгрупи.
Monoclonal antibodies against three different κ-chain constant domain epitopes and three different human Ig λ-chain C-domain epitopes have been prepared. Some of the epitopes are expressed both in intact Ig molecules and in isolated L-chains, whereas other epitopes are found only in isolated λ-chains. The expression of these epitopes has been studied in 40 various myeloma κ-chain preparations belonging to four different variable subgroups, and in 52 λ-chain preparations of three V subgroups. The expression level in the above epitope of C domain is shown to depend on the variable subgroups of L-chains. This implies the existence of certain interactions between V and C domains promoting the alteration in the level of C domain epitope expression. These studies indicate that interactions of structurally distinct V domains with the C domain probably lead to local conformational changes of the C domain.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154977 |
| citation_txt |
Экспрессия эпитопов С-домена L-цепей κ и λ типов иммуноглобулинов человека у белков различных вариабельных подгрупп / О.В. Рохлин, А. Соломон, Д. Вайсс, А.Р. Ибрагимов, Е.Л. Арсеньева, Г.Т. Богачева // Биополимеры и клетка. — 1989. — Т. 5, № 4. — С. 37-45. — Бібліогр.: 20 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT rohlinov ékspressiâépitopovsdomenalcepeiκiλtipovimmunoglobulinovčelovekaubelkovrazličnyhvariabelʹnyhpodgrupp AT solomona ékspressiâépitopovsdomenalcepeiκiλtipovimmunoglobulinovčelovekaubelkovrazličnyhvariabelʹnyhpodgrupp AT vaissd ékspressiâépitopovsdomenalcepeiκiλtipovimmunoglobulinovčelovekaubelkovrazličnyhvariabelʹnyhpodgrupp AT ibragimovar ékspressiâépitopovsdomenalcepeiκiλtipovimmunoglobulinovčelovekaubelkovrazličnyhvariabelʹnyhpodgrupp AT arsenʹevael ékspressiâépitopovsdomenalcepeiκiλtipovimmunoglobulinovčelovekaubelkovrazličnyhvariabelʹnyhpodgrupp AT bogačevagt ékspressiâépitopovsdomenalcepeiκiλtipovimmunoglobulinovčelovekaubelkovrazličnyhvariabelʹnyhpodgrupp AT rohlinov ekspresíâepítopívsdomenullancûgívκíλtipívímunoglobulínívlûdiniubílkívríznihvaríabelʹnihpídgrup AT solomona ekspresíâepítopívsdomenullancûgívκíλtipívímunoglobulínívlûdiniubílkívríznihvaríabelʹnihpídgrup AT vaissd ekspresíâepítopívsdomenullancûgívκíλtipívímunoglobulínívlûdiniubílkívríznihvaríabelʹnihpídgrup AT ibragimovar ekspresíâepítopívsdomenullancûgívκíλtipívímunoglobulínívlûdiniubílkívríznihvaríabelʹnihpídgrup AT arsenʹevael ekspresíâepítopívsdomenullancûgívκíλtipívímunoglobulínívlûdiniubílkívríznihvaríabelʹnihpídgrup AT bogačevagt ekspresíâepítopívsdomenullancûgívκíλtipívímunoglobulínívlûdiniubílkívríznihvaríabelʹnihpídgrup AT rohlinov constantdomainepitopeexpressionofhumanimmunoglobulinlchainsoftheκandλtypeinproteinsofdifferentvariablesubgroups AT solomona constantdomainepitopeexpressionofhumanimmunoglobulinlchainsoftheκandλtypeinproteinsofdifferentvariablesubgroups AT vaissd constantdomainepitopeexpressionofhumanimmunoglobulinlchainsoftheκandλtypeinproteinsofdifferentvariablesubgroups AT ibragimovar constantdomainepitopeexpressionofhumanimmunoglobulinlchainsoftheκandλtypeinproteinsofdifferentvariablesubgroups AT arsenʹevael constantdomainepitopeexpressionofhumanimmunoglobulinlchainsoftheκandλtypeinproteinsofdifferentvariablesubgroups AT bogačevagt constantdomainepitopeexpressionofhumanimmunoglobulinlchainsoftheκandλtypeinproteinsofdifferentvariablesubgroups |
| first_indexed |
2025-11-24T02:42:27Z |
| last_indexed |
2025-11-24T02:42:27Z |
| _version_ |
1850837001068085248 |
| fulltext |
5 . Efron В. Boo t s t r ap methods : another look at the jackni fe / / Ann. S ta t i s t .— 1979.—7,
N 1 . — P . 1—26.
6 Boos D. D., Monahan J. F. Boo t s t r ap me thods u s i n g prior i n f o r m a t i o n / / B i o m e f c i c a . —
1986.—73, N 1 . — P . 77—83.
7. GenBank (1986). Genetic sequence da ta bank, R. 44.0. BBN laborator ies , USA.
8. Статистические закономерности в первичных структурах функциональных областей
генома Escherichia coli. 3. Компьютерное распознавание кодирующих областей /
M Ю. Бородовский, Ю. А. Сприжицкий, Е. И. Голованов, А. А. Александров / / Mo-
лекуляр. биология.— 1986.—20, № 5 .—С. 1390—1398.
Ин-т молекуляр. генетики АН СССР, Москва Получено 06.07.88
STATISTICAL S I G N I F I C A N C E O F T H E O C C U R R E N C E O F S O M E C O M P L E X
N U C L E O T I D E C O M B I N A T I O N S : C O M P A R I S O N O F T H E DNA M O D E L S
G. M. Suboch, Yu. A. Sprizhitsky
Ins t i tu te of Molecular Genetics, Academy of Sciences of U S S R , Moscow
S u m m a r y
A scheme for mode l ing of the DNA chain as a sequence of the nucleot ide runs of diffe-
rent length is presented. The a d v a n t a g e s of such a method and r a n g e of its appl icat ion
are discussed. A procedure is sugges t ed to es t imate s ta t is t ical s igni f icance of occurrence
of some complex sequence s t ruc tures in DNA by the Monte -Car lo method. It uses a bo-
o t s t rap a lgor i thm and necess i ta tes compara t ive ly small number of ca lcula t ions . Three
d i f fe ren t models , used to derive such es t imat ions of the f requencies of homopur ine-ho-
mopyr imidine mir ror repeats in the DNA of p h a g e λ and rodent ia noncod ing reg ions are
compared .
У Д К 577.27
О. В. Рохлин, А. Соломон, Д. Вайсс, А. Р. Ибрагимов,
Е. Л. Арсеньева, Г. Т. Богачева
ЭКСПРЕССИЯ ЭПИТОПОВ С-ДОМЕНА L-ЦЕПЕЙ КАППА
И ЛЯМБДА ТИПОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ ЧЕЛОВЕКА
У БЕЛКОВ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАБЕЛЬНЫХ ПОДГРУПП
С помощью монAT исследована экспрессия эпитопов С-домена L-цепей Ig человека кап-
па и лямбда типов различных V-подгрупп. Установлено, что уровень экспрессии данно-
го эпитопа С-домена зависит от принадлежности L-цепи к той или иной подгруппе.
Введение. Легкие цепи (L-цепи) иммуноглобулинов (Ig) человека под-
разделяются на два типа, обозначаемые каппа (κ) и лямбда (λ) [1].
Примерно 60 % Ig человека содержат L-цепи κ-типа, 40 % — λ . Строе-
ние постоянного (С) домена κ-цепей контролируется единственным ге-
ном [1], тогда как строение С-домена λ-цепей определяется девятью
генами, часть из которых относится к категории псевдогенов [2, 3].
Строение вариабельных (У) доменов L-цепей определяется нескольки-
ми десятками генов, и их разнообразие увеличивается в процессе диф-
ферепцировки В-лимфоцитов за счет генных перестроек и соматических
мутаций [1]. Как по особенностям первичной структуры, так и по им-
мунохимическим свойствам V-доменов κ-цепи можно разбить на четыре
V-подгруппы, а λ-цепи — на шесть У-подгрупп [1]. В ряде лабораторий
получены моноклональные антитела (монАТ) к С-доменам κ- и λ-цепей
[4, 5], однако экспрессия соответствующих антигенных детерминант
(эпитопов) не изучена у индивидуальных белков различных !/-подгрупп
κ- и λ-цепей. Между тем существуют косвенные данные, указывающие
па то, что V-домен способен влиять на активность определенных эпи-
37 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА 1989. Т. Г>. .Ni· 4
топов, локализованных в С-домене [6]. Следовательно, необходимо
установить, существует ли зависимость между экспрессией эпитопов
С-домена L-цепей и их принадлежностью к той или иной У-подгруппе.
Исследование этого вопроса имеет существенное значение по той при-
чине, что монАТ используются для определения уровня Ig в норме и
патологии, и в частности, выявление миеломных L-цепей является диаг-
ностическим тестом при злокачественных новообразованиях В-лим-
фоцитов.
В настоящей работе с помощью монАТ исследована экспрессия раз-
личных эпитопов С-домена у миеломных κ-цепей человека четырех ва-
риабельных подгрупп и λ-цепей — трех У-подгрупп.
Материалы и методы. Индивидуальные κ- и λ-цепи выделяли из мочи, а миелом-
ные Ig — из сыворотки миеломных больных с помощью ионообменной хроматографии
или электрофореза в певиконовом блоке [7]. Д л я иммунизации использовали κ-цепи
Rod, относящиеся к Vk I I I подгруппе, и λ-цепи Ant , относящиеся к Vχ I I I подгруппе.
П р е п а р а т ы L-цепей были иммунохимически типированы с помощью поликлональных
антисьі'вороток, полученных ранее [8, 9] . Д л я получения гибридом к κ -цепям мышам
линии BALB/с трехмесячного возраста вводили при первой иммунизации внутрибрю-
шинно 200 мкг антигена κ -Rod без адъюванта , спустя 21 день проводили повторную
иммунизацию. В случае λ-цепей мышей иммунизировали первично 100 мкг λ-цепей Ant ,
повторно — через шесть недель. Затем через три дня после второй иммунизации клетки
селезенки брали для слияния с миеломными клетками мыши линии X63.Ag8.653 [10].
Слияние проводили по методу Келера и Мильштейна [11] с помощью полиэтиленгли-
коля, как описано ранее [12]. Д л я культивирования гибридом использовали среду
RPMI-1640 («Flow», Англия) , фетальную сыворотку крупного рогатого скота и пласти-
ковую посуду тон ж е фирмы. Первичный скрининг гибридомных клонов осуществляли
с помощью радиоиммунологического анализа (РИА) [12]. С этой целью 2 мкг антиге-
на сорбировали в лунках гибких полихлорвиниловых плат («Flow») в 100 мкл буфер-
ного раствора , с о д е р ж а щ е г о 0,15 M NaCl, 0,01 M Na-фосфатных солей, р Н 7,5. После
часовой инкубации при комнатной температуре платы отмывали тем ж е буферным
раствором с добавлением 0,05 % твин-20, в лунки вносили культуральную среду, инку-
бировали в течение 1 ч, отмывали и вносили в лунки кроличьи антитела к L-цепям I g
мыши, меченные 125I, с удельной активностью около IO6 и м п - м и н - 1 - м к г - 1 белка. В к а ж -
дую лунку вносили по 0,2 мкг меченых антител. В случае κ-цепей проверены 344 пер-
вичные гибридомные популяции, из которых 48 оказались положительными. Клониро-
вано 13 популяций. В случае λ-цепей проверена на продукцию антител 391 популяция,
из них положительных — 45, клонировано 9. Все отобранные клоны наращивались в
асцитной форме. Д л я получения глобулиновой фракции к асцитной жидкости добавля -
ли 18 % Na 2 SO 4 , осадок растворяли и проводили диализ против буферного раствора ,
с о д е р ж а щ е г о 0,15 M NaCl , 0,2 M H 3 BO 3 , р Н 8,0. Как правило, на долю монАТ прихо-
дилось от 60 до 90 % белка. Д л я проведения иммуноферментного анализа (ИФА) пре-
п а р а т ы антигенов или антител конъюгировали с пероксидазой хрена («Sigma», С Ш А )
с помощью гетеробифункционального агента S P D P («Pharmac ia» , США) [13]. И Ф А
проводили на тех ж е платах, что и Р И А , и в том ж е буферном растворе. Д л я прояв-
ления ферментативной активности использовали ортофенилендиамин («S igma») , ре-
акцию останавливали добавлением 2 н. раствора H 2 SO 4 . Уровень реакции определяли
с помощью ELISA-ридера MR 580 фирмы «Dynatech» (США) при длине волны
490 нм. Д л я ковалентной иммобилизации антигенов или антител на аминоцбллюлозе
пользовались методом Гурвича [14].
Результаты и обсуждение. M O I I A T к э п и т о п а м С-д О м е н а
κ - ц е п е й Ig ч е л о в е к а . Результаты, приведенные в табл. 1, пока-
зывают, что монАТ к κ-цепям можно разбить, по крайней мере, на три
группы. К первой относятся монАТ 6Е7, 10D9 и 3D5, одинаково хорошо
взаимодействующие с изолированными κ-цепями и с интактными моле-
кулами Ig. Ко второй группе относятся шесть препаратов монАТ, хо-
рошо реагирующих с изолированными κ-цепями, по не взаимодейству-
ющих с интактными молекулами Ig. В третью группу входит единствен-
ный препарат монАТ — 9Е7, реагирующий с частной идиотипической де-
терминантой У-домена κ-цепи Rod, использованной для иммунизации,
38 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА 1989. Т. Г>. .Ni· 4
T а б л и ц а 1
Взаимодействие монАТ к у-цепям Ig человека с различными препаратами L-цепей
и Ig человека различных классов и подклассов
Interact ion of топ Ab against human Ig κ-chains with L-chains and human Ig
of different isotypes
Антитела
Антигены
GE7 10D9 3D5 2D9 1В9 J 1Е9 7С5 7СЗ 8F3 9Е7
κ IK Rod
κ III Mos
κ I Cro
П у л нормальных L-цепей
IgG ί и : Ban *, Sche *, Hoch *
Io-G2 и : Os* , Ei, 236 *, Gol
IgGS и : Rey *, Stu '
IgG4 κ : Stoe *, Spa *, Bru *, Bro, Gel
Нормальный I g G **
Нормальный IgA**
IgM κ : Bob, Gur, Sal, Kri
I g G l λ Dol
IgC2 λ Sant
λ III Ant
λ II Bai
+ + +
+ + +
+ + +
+ і +
+ + +
+ + +
+ dr +
+ + +
+ + +
+ + +
+ + +
+ + + + + + +
+ + + + + + -
+ + + + + + -
+ + + + + + -
—
—
I
M
I
!
I
I
I
—
— —
II ρ π Μ t ч а н π е. В лунки полихлорвипиловых плат вносили по 0,5 мкг антигена в
объеме 50 мкл, затем такое ж е количество монАТ мыши, и взаимодействие проявля-
лось с помощью меченных пероксидазой козлиных антител к L-цепям мыши
(по 0,05 мкг в лунку) , предварительно сорбированных на Ig человека. Знаком « + »
обозначено наличие взаимодействия, знаком « — » — отсутствие. Большинство монАТ
мыши относится к изотипу I g G l , за исключением двух м о н А Т — 1 0 D 9 и 3D5 I g M
класса и 8F3 — IgC2b подкласса.
Препараты получены от д-ра Ф. Шквазила , Ин-т клип, и эксперим. онкологии,
Берн, Швейцария; ** препараты поставлены фирмой «Сарреї», США. Остальные L-це-
пи и Ig выделены нами из сывороток миеломных больных, полученных от
проф. Е. В. Чернохвостовой ( М Н И И Э М им. Г. Н. Габричевского М З Р С Ф С Р ) .
T а б л ! і і і а 2
Конкурентное взаимодействие между мечеными и немечеными монАТ к у-цепям
при их реакции с иммуносорбентом γ,-Rod
Conipedtive sorption of labelled and unlabelled anii-y chain monAb's
on immunosorbent K-Rod
Меченые монАТ
І іемечсн ыо
монАТ 6Е7 3D5 1В9 1Е9 2D9
6E7 + + * + +
10D9 + + + +
3D5 - + +
2D9 — —
IB 9 — + **
1E9 — —
7C5 — —
7C3 — —
8F9 — +
— * * *
— —
— —
+4-
H-+ + + + +
+ + + + + +
+ + + + + +
+ + + + + +
Il ρ и μ e ч а η и е. Радиоиммуиологический анализ антител с помощью иммуносорбен-
тов подробно о писан ранее [12]. К а ж д а я порция иммуносорбента с о д е р ж а л а 1 мкг
κ-цепей Rod, ковалентно фиксированных на диазоцеллюлозе. К осадку сорбента вна-
чале добавляли немеченые монАТ, инкубировали в течение 1 ч, отмывали и добавляли
препарат меченных 125I монАТ. Количество немеченых монАТ, добавлявшихся к им-
муносорбенту, было следующим (мкг) : 0,02; 0,05; 0,1; 0,2; 0,5; 1,0; 10,0; 100,0. Удель-
ная активность меченых монАТ составляла (1—2)-IO 6 и м п - м и н - ^ м к г - 1 . К к а ж д о й
порции иммуносорбента прибавляли от 0,5 до 1 мкг меченых антител. При использо-
вании одноименных монАТ реакция выходила на плато, начиная с добавления 1 мкг
белка, торможение на уровне плато составляло 60—80 %.
*· *** Торможение Р И А 60—80; 30—60; < 3 0 % соответственно.
ISSN ( 2 -7:557. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА 1989. Т. 5. №> 4 39
так как последующий анализ 40 индивидуальных миеломных κ-цепей
четырех различных У-подгрупп не выявил пи одной реагирующей цепи.
Дальнейшее определение специфичности монАТ проводили с помо-
щью конкурентного взаимодействия с антигеном κ-Rod меченых и неме-
ченых монАТ (табл. 2) . Очевидно, что если меченые и немеченые
монАТ взаимодействуют с одним и тем
70 γ о же эпитопом или с пространственно
сближенными эпитопами, то в таком слу-
чае немеченое монАТ будет препятство-
вать присоединению к антигену меченых
Рис. 1. Торможение иммуноадсорбции при взаимодействии монАТ 6Е7 с антигеном
κ-Rod, меченным пероксидазой, с помощью немеченого белка κ -Rod (а) и то же при
взаимодействии монАТ 7СЗ (О · ) , 6Е7 (О О ) и 1В9 ( X X )
с иммуногеном κ-Rod, меченным пероксидазой (б) : а — монАТ наносили в лунку в
объеме 50 мкл в количестве 0,1 мкг, инкубировали в течение 1 ч при комнатной тем-
пературе и после отмывки вносили немеченый тестируемый белок, инкубировали 1 ч,
отмывали и добавляли меченный пероксидазой κ -Rod в количестве 0,05 мкг. После до-
бавления проявляющего субстрата (ортофенилендиамин) определяли при длине вол-
ны 490 нм оптическую плотность, которая в отсутствие конкурирующего белка нахо-
дилась в интервале м е ж д у 1,0 и 1,5 единицами; б — для торможения использовали
40 различных миеломных κ-цепей четырех У-подгрупп. На к а ж д о й вертикальной линии,
соответствующей данной индивидуальной κ-цепи, соответствующими символами пока-
зан тот уровень торможения иммуноадсорбции, которого достигает на уровне плато
реакции (5 мкг препарата) данная κ-цепь при взаимодействии с монАТ. Н и ж е перечис-
лены шифры κ-цепей (на рисунке они даны слева направо) , использованные в наших
опытах: I подгруппа — Gal, Kel, Scu, King, Cro, Dru, BJ6, Hau, Mil, Ed, Wms 1 Joh,
Lor, Rick, Lyle, Rob; II подгруппа — Nic, Zine, Can, Nim, Pa t , Mon, Lay; III подгруп-
п а — McKin, Qak, Shi, Loc, McCar, Bre, Cole, Mai, Mos, Reed, Ti; IV подгруппа — Burns ,
Kal, Leη, Gol, Dun
Fig. 1. Inhibi t ion of immunoadso rp t ion d u r i n g in teract ion between monAb 6E7 and pe-
roxidase- label led an t igen κ-Rod u s i n g unlabel led protein κ-Rod (a) and -the s a m e d u r i n g
in teract ion of monAb 73C, 6E7 and 1B9 with peroxidase- label led immunogen κ-Rod (6) :
a — 0.1 μ g of monAb in the vo lume of 50 μ ΐ w a s adsorbed on plast ic d u r i n g 1 h at a
room tempera ture , washed , and then unlabel led ana lyzed protein was added. Af te r 1 h
incubat ion and w a s h i n g of unlabel led protein 0.05 ,ug of peroxidase-x-Rod c o n j u g a t e w a s
added fol lowed by incubat ion wi th developing r eagen t (or thophenylenediamine) and me-
asu remen t of optical densi ty at w a v e l e n g t h of 490 nm. In the absence of competi t ive
protein optical dens i ty w a s as h igh as 1-1.5 optical units , б — I n h i b i t i o n w a s per formed
us ing 40 d i f ferent myeloma κ -chains be long ing to 4 var iable subgroups . Each ver t i ca l
line co r responds to a cer ta in κ-chain; special m a r k s indicate p la teau levels of inhibit ion
(reached u s ing 5 f ig of inhibitor) by its κ-chain. The inhibitor pro te ins used in the ex-
per iments are the fo l lowing ( f rom left to r i g h t ) : I subgroup — Gal, Kel, Scu, King, Cro,
Dru, BJ6, Hau , Mil, Ed, Wms, Joh, Lor, Rick, Lyle, Rob; II subgroup — Nic, Zine, Can,
Nim, Pa t , Mon, Lay; I I I subgroup — McKin, Quak, Shi, Loc, McCar, Bre, Cole, Mai, Mos,
Reed, Ti; IV subgroup — Burns , Kal, Len, Gol, Dun
монАТ. Из табл. 2 видно, что монАТ, реагирующие с изолированными
κ-цепями, можно разбить на две группы: большинство монАТ входит
в одну группу, а к другой группе принадлежит единственное монАТ
7СЗ, распознающее иной эпитоп, чем остальные монАТ.
Таким образом, мопАТ к С-домену κ-цепей (т. е. все монАТ, за
исключением 9Е7) распределяются по трем группам и для дальнейшей
работы мы отобрали по одному монАТ из каждой группы соответст-
40 I S S N 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А 1989. Т. Г>. .Ni· 4
венно 6Е7, IB9 и 7СЗ. Эпитопы С-домена и κ-цепей мы в дальнейшем
будем обозначать по шифрам монАТ.
Уровень экспрессии эпитопов С-домена у индивидуальных миелом-
ных белков κ-типа мы исследовали с помощью реакции торможения им-
муноадсорбции в системе ИФА. Для этого антиген κ-Rod был конъюги-
рован с пероксидазой хрена и использован в дальнейших опытах в ка-
честве меченого антигена. Торможение иммуноадсорбции в этой систе-
Т а б л и ц а 3
Статистический анализ данных по взаимодействию трех монАТ с 40 препаратами
миеломных κ-цепей четырех вариабельных подгрупп
Statistical analysis of interactions between 3 monAb's and 40 preparations
of myeloma κ chains belonging to 4 variable subgroups
Вариабельная
подгруппа
Число
исследованных
κ-цепей
Средние арифметические значения торможения иммуноадсорбции
(см. рис. 1, б) для монАТ
Вариабельная
подгруппа
Число
исследованных
κ-цепей
6Е7* 7СЗ** 1Β9***
I 16 7 1 + 9 61 + 11 6 1 + 5
II 7 4 5 + 1 1 6 3 + 1 7 4 5 + 1 3
I I I 12 5 3 + 5 6 3 + 1 4 6 6 + 9
IV 5 6 5 + 2 2 5 4 + 5 7 3 + 4
* Различия достоверны при p < 0 , 0 1 м е ж д у I, II и I, I I I подгруппами и при ρ < 0 , 0 5 —
между II и IV подгруппами; ** достоверных различий м е ж д у подгруппами нет;
*** различия достоверны при ρ < 0 , 0 1 между следующими подгруппами: I, II ; I, IV;
II, I I I и II, IV.
ме показано на рис. 1,а. При анализе результатов реакции миеломных
κ-цепей с монАТ (рис. 1,6) обращает на себя внимание тот факт, что
эпитопы 6Е7, 7СЗ и 1В9 могут совершенно по-разному экспрессировать-
ся у одного и того же белка. Для того чтобы выяснить закономерности
экспрессии различных эпитопов С-домена κ-цепей у индивидуальных
представителей четырех вариабельных подгрупп, мы подвергли резуль-
таты (рис. 1,6) статистической обработке, представленной в табл. 3,
откуда видно, что у белков различных У-подгрупп имеются существен-
ные отличия в уровне экспрессии эпитопов С-домена. Так, экспрессия
эпитопа 6Е7 среди κ-цепей I подгруппы достоверно выше (при уровне
значимости (р) меньше 0,01), чем у κ-цепей II и III подгрупп. Уровень
экспрессии эпитопа 1В9 у белков II подгруппы достоверно ниже по
сравнению с белками остальных вариабельных подгрупп. В то же время
экспрессия эпитопа 7СЗ находится примерно на одинаковом уровне у
белков всех вариабельных подгрупп. Это означает, что выявленные раз-
личия между подгруппами для эпитопов 6Е7 и 1В9 не связаны с дена-
турацией κ-цепей отдельных подгрупп, а касаются локальных различий
в антигенной активности.
М о н А Т к λ-ц е π я м Ig ч е л о в е к а . Из девяти препаратов
монАТ, реагирующих с λ-цепями, четыре специфичны к С-домену, что
было установлено при исследовании их взаимодействия с нормальными
и миеломными Ig и L-цепями по той же методике, что и для κ-цепей
(см. табл. 1).
Эпитопное картирование антител к С-домену λ-цепей, проведенное
тем же методом, что и в случае κ-цепей, показало, что монАТ реаги-
руют с тремя различными эпитопами С-домена (табл. 4), причем эпи-
топ 6В11, в основном, экспрессирован на изолированных L-цепях, т. е.
локализован на внутренней поверхности С-домена. Для дальнейшей
работы мы использовали монАТ 6D10, IG5G7 и 6В11 и исследовали
экспрессию соответствующих эпитопов у индивидуальных миеломных
белков λ-типа с помощью реакции торможения иммуноадсорбции. Для
этого антиген λ-Ant был конъюгирован с пероксидазой хрена и исполь-
ISSN ( 2 -7:557. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА 1989. Т. 5. №> 4 41
зовап в качестве меченого антигена. Реакцию проводили так же, как и
в случае κ-цепей (рис. 1, я) .
Взаимодействие 60 миеломных λ-цепей с тремя различными монАТ
показано па рис. 2, а результаты статистического анализа этого взаи-
модействия представлены в табл. 5. В случае λ-цспей выявлена та же
закономерность, что и для κ-цепей, а именно: белки различных V-под-
Т а б л и ц а 4
Конкурентное взаимодействие между мечеными и немечеными монАТ к к-цепям
при их реакции с иммуносорбентом λ-Ant
Competitive interaction of labelled and unlabelled anti-λ chain monAb's
with λ-Ant immunoadsorbent
П р и м е ч а л и е. Р е а к ц и ю ставили так же , как описано в табл. 2.
* Обозначения те же, что в табл . 2.
групп достоверно отличаются по уровню экспрессии отдельных эпитопов
С-домена λ-цепсй.
L-цегіи Ig содержат 210—220 аминокислотных остатков, организо-
ванных в два домена — N-концевой (вариабельный) и С-концевой (пос-
тоянный), примерно одинаковых но числу остатков и общей простран-
ственной организации. Каждый домен имеет два слоя β-структуры —
наружный, обращенный к раствору, и внутренний, аминокислотные ос-
татки которого обеспечивают контакты между доменами L- и Я-цепей.
Антигенсвязывающий центр формируется в результате взаимодействия
VL- И Vtf-доменов, а контакты между CL- И С#1-доменами приводят к
образованию межцепочечной дисульфидной связи между L- и //-цепя-
ми. Взаимодействие доменов L- и Я-цепей исследовано достаточно под-
робно [15], однако мало что известно о характере взаимодействия Vl-
и C l - д о м є і і о в . Так, рентгеноструктурный анализ димеров λ-цепей чело-
века Mcg показал, что существует контакт между остатком 82 У-доме-
тіа и 174 С-домена [16]. Установлено, что взаимодействие У-домепа с
Я-цепью вызывает конформационные изменения в С-концевом районе
С-домена [17]. Исследование спектра КД и кристаллизационных
свойств λ-цепей Mcg показало, что взаимодействие этого белка с бис(ди-
питрофепил)лизином, происходящее за счет У-доменов, приводит к
аллостерическим конформационным изменениям С-домена [18]. Изу-
чение констант ассоциации (KA) при взаимодействии интактпых II- и
L-цепей по сравнению с изолированными доменами обнаружило, что
высокоаффинное взаимодействие между H- и L-цепями с KA, равной
1010 M-I j складывается из относительно слабых взаимодействий между
VL И Vh И между Cl и ChU Ka для которых составляет всего лишь око-
ло 10° М - 1 [19]. Отсюда следует, что должно существовать коопера-
тивное взаимодействие между V- и С-доменами в пределах одной цепи.
Имеются также косвенные иммуиохимические данные о влиянии У-до-
мена на антигенную активность детерминант, локализованных в С-до-
меие: активность аллотипов С-домена L-цепей человека резко снижа-
ется в результате расщепления L-цепи на V- и С-домены [20].
Таким образом, литературные данные указывают на то, что между
V- и С-домепами L-цепи существует определенное взаимодействие, и
этот вывод основан на двух группах экспериментальных фактов: 1) изо-
лированный С-домен, полученный с помощью протеолитического рас-
щепления L-цепи, имеет иные конформационные свойства по сравпе-
42 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА 1989. Т. Г>. .Ni· 4
пию с нптактной L-цепыо; 2) в результате взаимодействия V-домена
/—цепи с Я-цепью или с лигандом наблюдаются аллостерические кон-
фирмационные изменения в С-домене.
В пашей работе конформационное состояние С-домена оценива-
лось по антигенной активности отдельных эпитопов. Хорошо известно,
что антигенная активность данного эпитопа является отражением кон-
формационного состояния того участка белка, где можно говорить о
каких-то локальных конформационных изменениях. Мы исследовали
Рис. 2. Торможение иммуноадсорбции при взаимодействии монАТ 1G5G7 ( · ) , 6D10
(О) и 6ВІ1 ( X ) с иммуногеном λ-Ant, меченным пероксидазой. Методика описана в
подписи к рис. 1. Н и ж е перечислены шифры λ-цепей, использованных в наших опытах:
I подгруппа: Wise, Van, Сохе, She, Slo, Hud, Bed, San, Max, Cut, Atk, Car, Loc; II под-
группа: Goan, Wal, Pie, Bos, Мог, Eve, Nei, Sla, Smi, Cot, Hag , Lev, Fain, Bar, Bro,
Bur, Hil!, Win; III подгруппа: Tex, Ree, Bau, Clem, Kro, Rhea, Dun, Coli, Kir, Cor, Wit t ,
Dox, Wins, Peck, Мог, Han, Cla, Dell, Kern, Hil, Del; IV подгруппа: Sh, Whi; V под-
группа: Meg, Во; VI подгруппа: Gar, Sut, The, Mor
Fio-. 2. Inliihition of interact ion of monAb ' s 1G5G7 ( · ) , 6D10 ( O ) and B611 ( X ) with
the pcroxi'dasc-lahcllcd irrimunogen λ-Ant . React ion w a s per formed as described in the
legend of Fig. 1. The myeloma chains used are the fo l lowing: I subgroup — Wise, Van,
Coxe, She, Slo, Hud, Bed, San, Max, Cut, Atk, Car, Loc; II subgroup — Goan, Wal, Pie,
Bos. Мог, Eve, \ e i , Sla, Smi, Cot, Hag , Lev, Fain, Bar, Bro, Bur, Hill, Win; III subgro-
u p — T e x , Ree, Bau, Clem, Kro, Rhea, Dun, Cob, Kir, Cor, Witt , Dox, Wins, Peck, Мог,
Han, Cla, Dell, Kern, Hil, Del; IV subgroup — Sb, Wbі; V subgroup — Meg; Во; VI sub-
group — Gar, Sui, The, Mor
актив .[гость трех разных эпитопов С-домена κ- и λ-цепей у миеломных
белков различных вариабельных подгрупп и установили принципиально
новый факт, а именно: антигенная активность определенных участков
С-домена зависит от строения вариабельного домена L-цеии. Это озна-
чает, что в зависимости от структуры У-домена могут происходить ло-
кальные копформационные изменения в С-домене.
Эти изменения ν κ-цепей затрагивали как наружную, так и внут-
реннюю поверхности С-домепа. Действительно, для κ-цепей второй
V-подгруппы отмечена пониженная активность эпитопов 6Е7 и 1В9. Эпи-
топ 6Е7 локализован на наружной поверхности С-домена, тогда как
1 В 9 — п а внутренней. Но в то же время конформационные изменения
у белков этой подгруппы затрагивают не весь С-домен, а отдельные
его участки, гак как экспрессия эпитопа 7СЗ остается неизменной. Ес-
тественно, что выявленные различия не связаны с особенностями ис-
пользованных монАТ: те же монАТ реагируют совершенно по-другому
с С-доменом белков других У-подгрупп.
Несколько иные результаты получены при исследовании λ-цепей.
В этом случае выявлена пониженная экспрессия эпитопа IG5Q7 белков
I подгруппы и эпитопа 6D10 у белков I и II подгрупп. Оба эти эпитопа
локализованы на наружной поверхности С-домена λ-цепей. В то же
время эпитоп 6В11, локализованный на внутренней поверхности С-доме-
па, экспрееснруется на одинаково высоком уровне у λ-цепей всех под-
групп. Интерпретация результатов, полученных при исследовании λ-це-
пен, затруднена тем обстоятельством, что для λ-цепей известно несколь-
ко изотипов С-доменов, и мы не знаем изотипической принадлежности
всех исследованных нами препаратов. Возможно, в процессе перестрой-
ки генов λ-цепей происходит избирательное объединение У-генов данной
ISSN ( 2 -7:557. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА 1989. Т. 5. №> 4 43
подгруппы с определенным С-геном, и пониженная экспрессия данного
эпитопа характерна для определенного изотипа С-домена, а не является
результатом взаимодействия V- и С-доменов λ-цепи.
В отличие от λ-цепей результаты исследования κ-цепей можно ин-
терпретировать однозначно. Строение х-цепей Ig человека контроли-
руется единственным геном и поэтому структура С-домеиа одинакова
у белков всех У-подгрупп. Следовательно, зависимость экспрессии эпи-
Т а б л и д а 5
Статистический анализ данных по взаимодействию монАТ с 52 препаратами
миеломных X-цепей трех V-подгрупп
Statistical analysis of interactions between monAb's and 52 preparations of myeloma X
chains belonging to З V subgroups
У-подгруппа
Число
исследованных
λ-цепей
Средние арифметические значения торможения иммуноадсорбции
(см. рис. 2) для монАТ
У-подгруппа
Число
исследованных
λ-цепей
1G5G7* 6D10** 6B11***
I 13 4 3 ± 9 44-1-5 7 9 + 6
II 18 574-8 5 3 ± 6 8 1 ± 5
I I I 21 6 4 ± 7 6 5 ± 5 80-4-4
* Р а з л и ч и я достоверны при ρ < 0 , 0 5 м е ж д у I, II подгруппами, при ρ < 0 , 0 0 1 м е ж д у
I, I I I подгруппами; м е ж д у II и I I I достоверных различий нет; ** различия достоверны
при р < 0 , 0 5 м е ж д у I, II подгруппами, при ρ С 0 , 0 0 1 м е ж д у I, I I I и II , I I I подгруппа-
ми; *** достоверных различий м е ж д у подгруппами нет.
топа С-домепа от принадлежности данной κ-цепи к той или иной !/-под-
группе можно объяснить тем, что структурные различия между У-до-
менами различных У-подгрупп отражаются на конформациоином со-
стоянии С-домеиа κ-цепей. Пониженная экспрессия данного эпитопа у
κ-цепей определенной У-подгруппы никогда не сопровождалась сниже-
нием активности всех исследованных эпитопов. Это свидетельствует о
том, что в результате взаимодействия У- и С-доменов происходят ло-
кальные конформационные изменения С-домена.
Выявленная закономерность имеет прямое практическое приложе-
ние: количественное определение содержания L-цепей можно проводить
только с помощью монАТ, которые в равной мере взаимодействуют с
белками различных У-подгрупп или же следует использовать такое со-
четание разных монАТ, которое обеспечит выявление любой L-цепи вне
зависимости от ее принадлежности к той или иной У-подгруппе.
С П И С О К Л И Т Е Р А Т У Р Ы
1. Solomon A. L igh t cha in i m m u n o g l o b u l i n s : s t r uc tu r a l -gene t i c c o r r e l a t e s / / B l o o d . —
1986.—68, N 3 . — P . 603—610.
2. Clustered a r r a n g e m e n t of i m m u n o g l o b u l i n c o n s t a n t r eg ion genes in m a n / P . A. Hie-
ter, G. F. Hol l is , S. J . Ko r smeye r et a l . / / N a t u r e . — 1981 .—294, N 5 8 3 7 . — P . 536—
539.
3. Identification of th ree new I g λ- l ike genes in m a n / H. C h a n g , E. Dmi t rovsky , P . A. Hi-
eter et a l . / / J . Exp . Med .— 1986.—163, N 2 , — P . 425—435.
4. Detection of f ree κ cha ins in h u m a n se rum a n d ur ine u s i n g pa i r s of m o n o c l o n a l an-
t ibodies r e a c t i n g wi th Ck ep i topes not ava i l ab l e on who le i m m u n o g l o b u l i n s /
N. R. L ing , J . Lowe, D. H a r d i e et a l . / / C l i n . Exp. Immuno l .— 1983.—52, N І.-ч
P. 234—240.
5. Cross-reactive v a r i a b l e r eg ion assoc ia ted ep i topes of h u m a n g G l p a r a p r o t e i n de-
teched by a m o n o c l o n a l an t i body pane l / L. C. Walke r , S. Dhut , W. M. G r e g o r y ,
J. A. H a b e s h a w / / I m m u n o l o g y . — 1987.—61, N 3 . — P . 247—254.
6. Solomon A. Bence J o n e s p ro t e in s and l igh t cha ins of i m m u n o g l o b u l i n s . 14. C o n f o r -
m a t i o n a l dependency and molecu la r loca l iza t ion of the kappa and l a m b d a an t igen ic
d e t e r m i n a n t s / / S c a n d . J . I m m u n o l . — 1976.—5, N 6 . — P . 685—695.
7 .Solomon A. L igh t cha ins of i m m u n o g l o b u l i n s / / Meth . E n z y m o l . — 1985.—116.—
P . 1 0 1 — 1 2 1 .
44 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА 1989. Τ. 5. .Vq 4
S. Human kappa l ight chain subgroup ana lys i s with synthet ic pept ide- induced ant i sera /
G. J. S i lverman, D. A. Carson, A. Solomon, S. F o n g / / J . Immunol . Meth.— 1986—
95, N 2,— P. 249—257.
9 Solomon A., Weiss D. T. Serological ly defined V region s u b g r o u p s of h u m a n l ight
c h a i n s / / J . Immunol .— 1987.—139, N 3 , — P . 824—830.
10. A new mouse myeloma cell line tha t has lost immunoglobul in expression, but permi t s
the cons t ruc t ion of an t ibody-secre t ing / J. F. Kearney, A. Radbruch , B. L iesegang ,
K. R a j e w s k y / / I b i d . — 1979.—123, N 4 . — P . 1548—1550.
11 Kohler G., Milstein C. Cont in ious cu l tures of fused cells secre t ing an t ibody of pre-
defined s p e c i f i c i t y / / N a t u r e . — 1975.—256, N 5508 .—P. 495—497.
12. Monoclonal an t ibodies a g a i n s t common and I g k - I a a l lotypic de t e rminan t s of ra t im-
munog lobu l in kappa chain cons tan t d o m a i n / V . V. Cherepakhin, Α. V. Chervonsky,
Α. V. Fi latov, О. V. R o k h l i n / / I m m u n o l . Lett .— 1985.—10, N 2 . — P . 217—221.
13 Carlsson JDrevin H., Axen R. P ro te in t l i iolat ion and reversible prote in-prote in con-
juga t i on / / Biochem. J.— 1978.—173, N 3 . — P . 723—737.
14. Гурвич A. E., Кузовлева О. Б., Туманова Α. Ε. Получение белково-целлюлозных
комплексов (иммуносорбентов) в форме суспензий, способных связывать большие
количества а н т и т е л / / Б и о х и м и я . — 1961.—26, № 4.— С. 803—811.
15 Alzari P. M., Lascombe М. В., Poljak R. / . Three-dimensional s t ruc tu re of ant ibodi-
es / / A n n . Rev. Immunol .— 1988.—6.—P. 555—580.
16. Structure of a λ- type Bence-Jones protein at 3,5 A resolut ion / M. Schiffer , R. L. Gir-
ling, Iv R. Ely, A. B. E d m u n d s o n / / B i o c h e m i s t r y . — 1973.—12, N 2 3 . — P . 4620—4631.
17. Xon-covalent associa t ion of heavy and l ight chains of h u m a n immunog lobu l in G:
s tudies u s ing l ight chain labelled with a f luorescent probe / I. Alexandru , D. I. Kells,
К. Л. Dor r ing ton , M. I v l e i n / / М о ї . Immunol .—1980.—17, N 7 . — P . 1351 — 1363.
18. Edmundson A. B., Ely K. R., Herron J. A search for s i te-f i l l ing l i gands in the M c g
Bence-Jones dimer: crystal b ind ing s tudies of f luorescent c o m p o u n d s / / I b i c ! . —
1984—21, N 7 . — P . 561—576.
19. Equilibrium and kinetic aspects of the interact ion of isolated, var iab le and cons t an t
domains of l ight chain with the Fdx f r a g m e n t of immunoglobu l in G / M. Klein,
C. Kortan, D. I. Kells, Iv J. D o r r i n g t o n / / B i o c h e m i s t r y . — 1979.—18, N 8 — P . 1473—
1481.
20. Solomon A., McLaughlin C. L., Steinberg A. G. Bence Jones pro te ins and l ight cha ins
of immunoglobul ins . 3. Inv ant igeneci ty : a genet ic express ion with serologic depen-
dency on the intact kappa chain molecule / / Immunochemis t ry .— 1970.—7, N 8 —
P. 709—715.
Всесоюз. кардиол. науч. центр АМН СССР, Москва Получено 04.11.88
Мел. центр ун-та Теннеси, Ноксвилл, С Ш А
C O N S T A N T DOMAIN E P I T O P E E X P R E S S I O N O F H U M A N I M M U N O G L O B U L I N
L C H A I N S O F T H E K A P P A AND LAMBDA TYPE IN P R O T E I N S
O F D I F F E R E N T V A R I A B L E S U B G R O U P S
О. V. Rokhlin, A. Solomon *, D. Vasse *, A. R. Ibragimov, E. L. Arsenieva,
G. T. Bogacheva
All-Union Cardio logica l Research Centre,
Academy of Medical Sciences of the USSR, Moscow
Depa r tmen t of Medicine, Univers i ty of Tennessee, Knoxville, Tennessee, U S A *
S u m m a r у
Monoclonal ant ibodies aga in s t three d i f ferent κ-chain cons tan t domain epi topes and
three d i f ferent h u m a n Ig λ-chain C-domain epi topes have been prepared . Some of the
epi topes are expressed both in intact Ig molecules and in isolated L-chains , whereas
o ther epi topes are found only in isolated L-chains . The express ion of these epi topes has
been studied in 40 var ious myeloma κ-chain p repa ra t ions be long ing to four d i f ferent
var iable subgroups , and in 52 λ-chain p repa ra t ions of three V subgroups . The expression
level in the above epitope of C domain is shown to depend on the va r iab le s u b g r o u p s of
L-chains. This implies the existence of cer tain in terac t ions between V and C doma ins
p r o m o t i n g the a l tera t ion in the level of C domain epitope expression. These s tudies indi-
ca te tha t in terac t ions of s t ruc tu ra l ly dist inct V domains with the C domain probably
lead to local confo rmat iona l changes of the C domain .
I S S N ( 2 -7:557. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА 1989. Т. 5. №> 4 45
|