Фагозависимый суперсинтез β-галактозидазы Escherichia coli и разработка способа ее очистки

• Published in: Биополимеры и клетка
• Date: 1998
• Main Authors: Черных, С.И., Славченко, И.Ю., Горлов, Ю.И., Терентьев, А.Г., Гавриш, Т.Г., Кордюм, В.А.
• Format: Article
• Language: Russian
• Published: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1998
• Subjects: Структура и функции биополимеров
• Online Access: https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/154987
• Journal Title: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Cite this: Фагозависимый суперсинтез β-галактозидазы Escherichia coli и разработка способа ее очистки / С.И. Черных, И.Ю. Славченко, Ю.И. Горлов, А.Г. Терентьев, Т.Г. Гавриш, В.А. Кордюм // Биополимеры и клетка. — 1998. — Т. 14, № 2. — С. 127-131. — Бібліогр.: 9 назв. — рос.

Разработан способ получения фермента β-галактозидазы (ЕС 3.2.1.23) в клетках Е. coli с использованием бактериофага. Выход фермента составлял 700 ед. активности в 1 мл культуральной среды. Накопление фермента в культуральной среде позволило использовать для предварительной очистки β-галактозидазы мембранную технику. Сконцентрированный и частично очищенный препарат β-галактозидазы доочищали методом лиганд-аффинной хроматографии. Конечный препарат β-галактозидазы характеризовался высокой степенью очистки и нативности. Процессы получения и очистки фермента β -галактозидазы были выполнены в опытно-промышленном варианте. Розроблено спосіб одержання ферменту β-галактозидази (ЕС 3.2.1.23) у клітинах Е. coli з використанням бактеріофага. Вихід ферменту складав 700 од. активності в 1 мл культурального середовища. Накопичення ферменту в культуральному середовищі дозволило використати для попередньої очистки β-галактозидази мембранну техніку. Сконцентрований та частково очищений препарат β-галактозидази доочищували методом ліганд-афінної хроматографії. Кінцевий препарат β-галактозидази характеризувався високим ступенем очистки і нативності. Процеси отримання і очистки ферменту β -галактозидази The phagedependent method of obtaining of β-galactosidase (EC 3.2.1.23) E. coli has been worked out. The yield was up 700 U of enzyme activity per ml of cultural fluid. Accumulation of enzyme in cultural medium has permitted to use membrane method for preliminary purification of β-galactosidase. Concentrated and partially purified preparation of β-galactosidase has been purified by ligand-affinity chromatography. Pure preparation of β-galactosidase has characterized by high purity and nativeness. The process of obtaining and purification of β-galactosidase were made in pilot scale.