Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами

Исследовано распределение серил-тРНК синтетазы (CepPC) в органах и тканях различных представителей позвоночных с использованием иммунохимических методов исследования. Показано, что наибольшее относительное содержание данного фермента отмечено в печени всех исследуемых представителей позвоночных (от...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Дата:	1992
Автори:	Аверина, Т.И., Драговоз, В.А., Роднин, Н.В., Сидорик, Л.Л.
Формат:	Стаття
Мова:	Russian
Опубліковано:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1992
Назва видання:	Биополимеры и клетка
Теми:	Структура и функции биополимеров
Онлайн доступ:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155089
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами / Т.И. Аверина, В.А. Драговоз, Н.В. Роднин, Л.Л. Сидорик // Биополимеры и клетка. — 1992. — Т. 8, № 6. — С. 26-30. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155089
record_format	dspace
spelling	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1550892025-02-23T20:19:11Z Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами Дослідження розподілу серил-тРНК синтетази у тканинах вищих еукаріот імунохімічними методами The investigation of SerRS distribution in tissues of higher eukaryotes with immunochemical methods Аверина, Т.И. Драговоз, В.А. Роднин, Н.В. Сидорик, Л.Л. Структура и функции биополимеров Исследовано распределение серил-тРНК синтетазы (CepPC) в органах и тканях различных представителей позвоночных с использованием иммунохимических методов исследования. Показано, что наибольшее относительное содержание данного фермента отмечено в печени всех исследуемых представителей позвоночных (от рыб до человека). Обнаружено наличие высокомолекулярных весьма устойчивых комплексов CepPC с другими белками, сохраняющихся в лизатах эукариотических тканей даже в денатурирующих условиях. Досліджено розподіл серил-тРНК синтетази (СерРС) в органах та тканинах різних представників хребетних з використанням Імунохімічних методів дослідження. Показано, що найбільший відносний вміст даного ферменту відзначено у печінці усіх досліджених представників хребетних (від риби до Людини). Встановлено наявність високо-молекулярних, доволі стійких комплексів СерРС з іншими білками, які зберігаються у лізатах еукаріотичних тканин навіть за умов денатурації. The immunochemical approach to the study of enzyme distribution in eukaryotes (in different organs and tissues) gives a possibility to determine not only quantity of the protein but the molecular weight of the subunit without purification. The study of aminoacyl-tRNA synthetases distribution in different organs and tissues, comparison of the protein quantity determined by immunochemical methods with the enzyme activity is important for the study of so-called uncanonic functions of this class enzymes, We have studied the distribution of Ser RS in organs and tissues of the different species of Vertebrates by immunochemical methods. It is shown that the highest Ser RS level is observed in the liver (from fish to humans). Ser RS partially exists in the form of high-molecular complex that is stable in the lysates even under denaturating conditions. Авторы выражают благодарность Г. К. Ковалевой (ИМБ РА Н им. Энгельгардта, Москва) за предоставленный препарат триптофанилтРН К синтетазы; О. В. Скоробогатько (Ин-т биохимии им. Баха, Москва) — за предоставленный препарат лакказы. 1992 Article Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами / Т.И. Аверина, В.А. Драговоз, Н.В. Роднин, Л.Л. Сидорик // Биополимеры и клетка. — 1992. — Т. 8, № 6. — С. 26-30. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00033D https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155089 577.152.6 ru Биополимеры и клетка application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Структура и функции биополимеров Структура и функции биополимеров
spellingShingle	Структура и функции биополимеров Структура и функции биополимеров Аверина, Т.И. Драговоз, В.А. Роднин, Н.В. Сидорик, Л.Л. Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами Биополимеры и клетка
description	Исследовано распределение серил-тРНК синтетазы (CepPC) в органах и тканях различных представителей позвоночных с использованием иммунохимических методов исследования. Показано, что наибольшее относительное содержание данного фермента отмечено в печени всех исследуемых представителей позвоночных (от рыб до человека). Обнаружено наличие высокомолекулярных весьма устойчивых комплексов CepPC с другими белками, сохраняющихся в лизатах эукариотических тканей даже в денатурирующих условиях.
format	Article
author	Аверина, Т.И. Драговоз, В.А. Роднин, Н.В. Сидорик, Л.Л.
author_facet	Аверина, Т.И. Драговоз, В.А. Роднин, Н.В. Сидорик, Л.Л.
author_sort	Аверина, Т.И.
title	Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами
title_short	Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами
title_full	Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами
title_fullStr	Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами
title_full_unstemmed	Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами
title_sort	исследование распределения серил-трнк синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate	1992
topic_facet	Структура и функции биополимеров
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155089
citation_txt	Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами / Т.И. Аверина, В.А. Драговоз, Н.В. Роднин, Л.Л. Сидорик // Биополимеры и клетка. — 1992. — Т. 8, № 6. — С. 26-30. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.
series	Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv	AT averinati issledovanieraspredeleniâseriltrnksintetazyvtkanâhvysšihéukariotimmunohimičeskimimetodami AT dragovozva issledovanieraspredeleniâseriltrnksintetazyvtkanâhvysšihéukariotimmunohimičeskimimetodami AT rodninnv issledovanieraspredeleniâseriltrnksintetazyvtkanâhvysšihéukariotimmunohimičeskimimetodami AT sidorikll issledovanieraspredeleniâseriltrnksintetazyvtkanâhvysšihéukariotimmunohimičeskimimetodami AT averinati doslídžennârozpodíluseriltrnksintetaziutkaninahviŝiheukaríotímunohímíčnimimetodami AT dragovozva doslídžennârozpodíluseriltrnksintetaziutkaninahviŝiheukaríotímunohímíčnimimetodami AT rodninnv doslídžennârozpodíluseriltrnksintetaziutkaninahviŝiheukaríotímunohímíčnimimetodami AT sidorikll doslídžennârozpodíluseriltrnksintetaziutkaninahviŝiheukaríotímunohímíčnimimetodami AT averinati theinvestigationofserrsdistributionintissuesofhighereukaryoteswithimmunochemicalmethods AT dragovozva theinvestigationofserrsdistributionintissuesofhighereukaryoteswithimmunochemicalmethods AT rodninnv theinvestigationofserrsdistributionintissuesofhighereukaryoteswithimmunochemicalmethods AT sidorikll theinvestigationofserrsdistributionintissuesofhighereukaryoteswithimmunochemicalmethods
first_indexed	2025-11-25T01:53:54Z
last_indexed	2025-11-25T01:53:54Z
_version_	1849725429241348096
fulltext	Структура и функция биополимеров УДК 577.152.6 Т. И. Аверина, В. А. Драговоз, Н. В. Роднин, Л. Л. Сидорик ИССЛЕДОВАНИЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ СЕРИЛ-тРНК СИНТЕТАЗЫ В ТКАНЯХ ВЫСШИХ ЭУКАРИОТ ИММУНОХИМИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ Исследовано распределение серил-тРНК синтетазы (CepPC) в органах и тканях раз- личных представителей позвоночных с использованием иммунохимических методов исследования. Показано, что наибольшее относительное содержание данного фермента отмечено в печени всех исследуемых представителей позвоночных (от рыб до челове- ка). Обнаружено наличие высокомолекулярных весьма устойчивых комплексов CepPC с другими белками, сохраняющихся в лизатах эукариотических тканей даже в дена- турирующих условиях. Введение. Различные органы и ткани высших эукариот отличаются сте- пенью метаболизма и соответственно уровнями активности аминоацил- т Р Н К синтетаз, что может быть связано как с интенсивностью белково- го синтеза, так и с - аминокислотным составом синтезируемых белков. Одна из аминоацил-тРНК синтетаз высших эукариот — серил-тРНК синтетаза (CepPC) печени быка (КФ 6 .1 .1 .4)—исследована нами ра- нее [1]. Установлено, что CepPC — фермент типа а 2 с молекулярной массой (м. м.) около 120 000. Получены моноспецифические поликло- нальные антитела к CepPC печени быка методом аффинной хромато- графии и исследованы некоторые иммунохимические свойства данного белка [2]. Иммунохимический подход позволяет получить не только ка- чественно новую информацию о некоторых структурно-функциональных свойствах белков, но и прямо определить относительное содержание ис- следуемого белка, которое не во всех случаях совпадает с уровнем фер- ментативной активности. Известно также , что аминоацил-тРНК синте- тазы функционируют в составе высокомолекулярных мультиферментных комплексов (так называемых кодосом), и компартментализация мета- болических процессов в клетке играет важную роль в функционирова- нии белоксинтезирующего аппарата [3]. Изучение распределения CepPC в органах и тканях высших эукариот также важно и с точки зре- ния поиска наиболее богатого данным ферментом органа, так как выде- ление и очистка синтетаз эукариот до гомогенного состояния—весьма трудоемкий процесс, и нахождение «суперпродуцента» облегчило бы эту задачу. Материалы и методы. Материалами исследования служили: пе- чень, почки, мозг и сердце мыши; печень, почки, мозг, поджелудочная железа кролика; печень, гипофиз и поджелудочная железа быка; печень рыбы, печень курицы; печень и сердце человека. Органы заморожены при —70 °С. CepPC печени быка выделяли по описанному методу [1]. Поликлональные антитела к CepPC печени быка получали по мо- дифицированному методу Бейли, как описано ранее [2]. Синтез аффин- © Т. И. Аверина, В. А. Драговоз, Η. В. Роднин, Л. Л. Сидорик, 1990 26 ISSN 0233-7(357. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1992. Т. 8. № б 26 ной колонки с высокоочищенным препаратом CepPC печени быка и им- муноаффинную очистку антител к CepPC осуществляли по [2]. П о л у ч е н и е л и з а т о в т к а н е й . Ткань мелко нарезали нож- ницами и гомогенизировали в гомогенизаторе Поттера в RIPA-буфере (20 мМ трис-HCl (рН 7,5), 1 мМ ЭДТА, 1 %-й NP-40, 1 %-й дезоксихо- лат Na, 0,15 M NaCl) . Непосредственно перед использованием в буфер добавляли фенилметилсульфонилфторид до концентрации 2,5 мМ. Го- могенаты тканей центрифугировали при 30 ООО g 30 мин. Содержание суммарного белка в лизатах определяли по Бредфорду [4]. И м м у н о ф е р м е н т н ы й а н а л и з (Е L I S А) . Полученные лизаты адсорбировали в лунки 96-луночных планшетов («Flow Labora- tory», Англия) (100 мкг суммарного белка в 0,1 мл ФСБ, рН 7,5) при 4 °С в течение ночи либо при 37 °С в течение 2—3 ч. После отмывки ФСБ, содержащим 0,1 %-й твин-20 (ФСБ-Т) , свободные сайты адсорб- ции блокировали 0,3 %-м БСА в ФСБ-Т, и в лунки добавляли моноспе- цифические поликлональные антитела к CepPC (100 мкг/мл ФСБ-Т) . Инкубацию с антителами проводили в течение 1 ч при 20 °С. Все даль- нейшие процедуры проводили при 20 °С. Затем лунки отмывали от не- связавшихся антител ФСБ-Т и добавляли биотинилированные антитела козы против цельной молекулы IgG кролика («ДиаГен», Москва) , инку- бация 1 ч. Лунки отмывали 3—4 раза ФСБ-Т и добавляли авидин, конъ- югированный с пероксидазой хрена, инкубация 20 мин. После отмывки 5—б раз ФСБ-Т и ФСБ продукт реакции визуализировали добавлением ABTS («Sigma», США) (0,5 мг/мл) в 50 мМ цитратном буфере (рН 7,5) и 0,05 %-й H2O2. Реакцию останавливали, добавляя 0,3 % азида Na в цитратном буфере (рН 7,5) и результат ее обсчитывали количест- венно на «Multiscan» («Titertek», Финляндия — Англия) . И м м у н о б л о т и н г . Белки лизатов тканей разделяли электро- форетически в градиентном ( 7 — 2 2 % ) полиакриламидном геле в при- сутствии DS-Na [5] (пластины 9 Х І 2 см, толщина геля 1 мм), на до- рожку наносили 100 мкг суммарного белка. После этого белки перено- сили на нитроцеллюлозные фильтры ВА-85 («Schleicher und Schiill», Германия) методом пассивного переноса. Далее иммуноблотинг прово- дили, как описано ранее [2]. Результаты и обсуждение. Результаты, представленные в таблице, показывают распределение CepPC в тканях высших эукариот— от рыб до человека. Видно, что наибольшее содержание CepPC (в пересчете Распределение CepPC в органах позвоночных по данным метода ELISA (ОД405 на 100 мкг суммарного белка) Объект исследования Отряд (подотряд) Печень Сердце Почки Мозг П о д ж е л у д о ч - ная железа Бык Парнокопытные 2,440±0,041 1,045± 0 ,643± (жвачные) ±0,016 ±0,0216 Кролик Грызуны 2,545 ±0,007 1,906± 2,280±0,048 1,722± 1,945±0,072 (зайцеобразные) ±0,086 ±0,025 1,945±0,072 Мышь Грызуны 1,216±0,046 0,946± 1,173 ±0,027 1,244 ± — Грызуны ±0,045 ±0 ,045 Курица Куриные 0 709+0,003 — — — — Карп Карповые 0,402 ±0,054 — — — — Человек Приматы 2,651 ±0,091 0,527 ± .— — — Приматы ± 0 077 Контроль Высокоочищенный препарат CepPC 1,399± печени быка ±0,048 То же печени кролика 1,237± ±0,011 Триптофанил-тРНК синтетаза подже- 0,050=4= лудочной железы быка ±0,028 Лакказа 0,079 ± ±0,014 П р и м е ч а н и е . В каждом случае приведены средние значения из пяти определений. ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1992. Т. 8. № 6 о7 на одинаковое количество суммарного белка) отмечалось в печени ис- следуемых организмов, достигающее максимальных значений у кроли- ка (представитель отряда грызунов), быка (отряд парнокопытных) и человека (отряд приматов) . Высокое содержание CepPC в печени и почках кролика коррелирует с известными физиологическими данными о высоком уровне метаболизма в данных органах, обусловленного их защитно-выводящей функцией. В качестве положительного контроля ис- пользовали высокоочищенные препараты CepPC печени быка и печени кролика, в качестве отрицательного — высокоочищенные препараты Рис. 1. Иммунохимическое изучение распределения CepPC в различных органах пред- ставителя позвоночных (кролика). Иммуноблотинг супернатантов (0,1 мг суммарного белка) после центрифугирования клеточных лизатов при 30 000 g (1 — печень; 2 — сердце; 3 — почки; 4 — поджелудочная железа; 5 — мозг кролика), а также высоко- очищенных препаратов триптофанил-тРНК синтетазы поджелудочной железы быка (6), CepPC печени кролика (7) с моноспецифическими поликлональными антителами к CepPC печени быка. Здесь и на рис. '2 положение маркеров указано слева, субъеди- ницы высокоочищенного препарата CepPC — справа триптофанил-тРНК синтетазы поджелудочной железы быка и грибного фермента лакказы. Видно, что антитела к CepPC печени быка не взаи- модействуют ни с триптофанил-тРНК синтетазой, ни с лакказой, что указывает на высокую специфичность полученных антител. Возмож- ность применения моноспецифических поликлональных антител к CepPC печени быка для перекрестных экспериментов на других представите- лях высших эукариот показана нами в предыдущих исследованиях по иммунохимическому перекресту CepPC из различных организмов [2]. На рис. 1 представлены результаты иммунохимического изучения распределения CepPC в различных органах представителя высших эукариот. Видно, что в лизатах всех органов кролика обнаруживается основная полоса с подвижностью, соответствующей таковой у высоко- очищенного препарата CepPC печени кролика (дорожка 7). Не отме- чено никакого взаимодействия с высокоочищенным препаратом тригі- тофанил-тРНК синтетазы (дорожка 6). Наиболее интенсивны полосы, проявляемые в лизате печени кролика, что соответствует и данным им- муноферментного анализа. В некоторых случаях моноспецифические поликлональные антитела проявляют полосы с м. м. выше, чем соот- ветствующие подвижности субъединицы высокоочищенного препарата СерРС: это может объясняться существованием высокомолекулярных комплексов синтетаз с другими белками в лизатах органов, которые весьма устойчивы к протеолизу и д а ж е воздействию детергентов [6, 7] . На рис. 2 приведены данные по исследованию распределения СерРС в печени различных представителей класса позвоночных (от рыб до человека) методом иммуноблотинга. Видно, что во всех случаях проявляется основная полоса с м. м. около 64 000, что соответствует подвижности субъединицы СерРС печени быка (дорожка 7). Наличие проявляемых полос с большей молекулярной массой, как и в предыду- щем эксперименте, можно объяснить существованием СерРС в клетке в составе прочных макромолекулярных комплексов. Такие комплексы 28 ISSN 0233-7(357. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1992. Т. 8. № б 28 можно получить как при определенных условиях гомогенизации тканей [8, 9], так и независимо от этих условий, что отмечалось ранее в неко- торых работах. Наиболее интенсивно данные комплексы проявляются у кроликов (отряд зайцеобразных), отличающихся высокой степенью метаболизма и уровнем биосинтеза белка именно в печени. Иммунохимический подход к исследованию распределения фермен- тов в различных органах и тканях высших эукариот позволяет опреде- лить не только относительное количественное содержание интересующе- го нас белка, но и молекулярную массу субъединиц фермента, не очи- Рис. 2. Изучение распределения CepPC в печени различных представителей позвоноч- ных. Иммуноблотинг клеточных лизатов (супернатант, 30 000 g, 100 мкг суммарного белка) с моноспецифическими поликлональными антителами к CepPC печени быка (1 — печень рыбы; 2 — печень курицы; 3 — печень мыши; 4 — печень кролика; 5 — печень быка; 6 — печень человека; 7 — высокоочищенный препарат CepPC печени быка) щая еги до гомогенного состояния. Это весьма существенно для амино- ацил-тРНК синтетаз высших эукариот, так как имеющиеся на сегодняш- ний день методы их очистки до гомогенного состояния очень трудоем- ки и малоэффективны. Изучение распределения аминоацил-тРНК синтетаз в различных органах и тканях, сравнение количества белка, определяемого иммуно- химическими методами, с уровнем его ферментативной активности важ- ны и с точки зрения дальнейшего исследования нетрадиционных (так называемых неканонических) функций данного класса ферментов [10—12]. Хорошим примером тому могут служить результаты определе- ния значительных межвидовых отличий в содержании триптофанил- т Р Н К синтетазы в различных организмах [10]. Наряду с уже извест- ными неканоническими функциями для некоторых синтетаз, такими как синтез ApiA [11], участие в сплайсинге [12], в регуляции инициации трансляции [13], не исключено, что мы сможем обнаружить и новые функции этих ферментов. Авторы выражают благодарность Г. К. Ковалевой (ИМБ Р А Н им. Энгельгардта, Москва) за предоставленный препарат триптофанил- т Р Н К синтетазы; О. В. Скоробогатько (Ин-т биохимии им. Баха , Москва) — за предоставленный препарат лакказы. S u m m a r y . The immunochemical approach to the study of enzyme distribution in eukaryotes (in different organs and tissues) gives a possibility to determine not only quantity of the protein but the molecular weight of the subunit without purification. The study of aminoacyl-tRNA synthetases distribution in different organs and tissues, comparison of the protein quantity determined by immunochemical methods with the enzyme activity is important for the study of so-called uncanonic functions of this clas* enzymes. ISSN 0233-7(357. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1992. Т. 8. № б 29 We have studied the distribution of Ser RS in organs and tissues of the different species of Vertebrates by immunochemical methods. It is shown that the highest Ser RS level is observed in the liver (from fish to humans). S e r R S partially exists in the form of high-molecular complex that is stable in the lysates even under denaturating conditions. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Гудзера О. И., Сидорик Л. Л., Золотухина И. М. и др. Исследование серил-тРНК синтетазы быка иммунохимическими методами // Биополимеры и клетка.— 1990.— 6.—С. 105—107. 2. Sidorik L. L., Gudzera О. 1., Dragovoz V. A. et al. Immunochemical non-cross- reactivity between eukaryotic and prokaryotic seryl-tRNA synthetases // FEBS Lett.— 1991.—292.—P. 76—78. 3. Киселев Л. JI., Фаворова О. О., Лаврик О. И. Биосинтез белков от аминокислот до аминоацил-тРНК.— М. : Наука, 1984.— 408 с. 4. Bradford Μ. Μ. A rapid and sensitive method for determination of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding // Anal. Bio- chem.— 1976.— 72.— P. 248—254. 5. Laemmli U. K. Cleavage proteins during the assembly of the head of bacteriopha- ge T 4 // Nature.— 1970.—227.—P. 670—675. 6. Dang С. V., Dang С. V. Higher eukaryotic aminoacyl-tRNA synthetases in physio- logic and pathologic states /і/ Мої. and Cel. Biochem.— 1986.— 71.—P. 107. 7. Mirande M., Gache Y., Le Corre D., Waller J.-P. Seven mammalian aminoacyl-tRNA synthetases copurified as high molecular weight antities are associated within the same complex // EMBO J .—1982.—1.—P. 733. 8. Kellerman Ov Brevet A., Tonetti H.} Waller J.-P. Macromolecular complexes of ami- noacyl-tRNA synthetases from eukaryotes. 1. Extensive precipitation and characte- rization of the high-molecular weight complexes of seven aminoacyl-tRNA syntheta- ses from sheep liver /I/ Eur. J. Biochem.— 1979.— 99.— P. 541. 9. Yang D. C. H., Garcia J. V., Johnson Y. D., Wahab S. Multienzyme complexes of mammalian aminoacyl-tRNA synthetases // Curr. Top. Cel. Regul.— 1985.— 26.— P. 325. 10. Киселев Л. Л. Аминоацил-тРНК синтетазы (кодазы) и их неканонические функ- ции // Молекуляр. биология.— >19'90.— 24.— С. 1445. 11. Wahal S. ZYang D. С. Н. Synthesis of diadenosine S r - ^ -P 1 -PMet r aphospha t e by lysyl-tRNA synthetase and a multienzyme complex of aminoacyl-tRNA synthetases from rat liver // J. Biol. Chem.— 1985.— 260.—P. 5281. 12. Majumder A. L., Akins R. A., Wilkincon J.-G. et al. Involvement of tyrosyl-tRNA synthetase in splicing of group 1 introns in Neurospora crassa mitochondria: Bio- , chemical and immunochemical analysis of splicing activity // Мої. and Cell. Biol.— 1989.—9.—P. 2089. 13. Pollard J. W., Galprine A. RClemens M. J. A novel role for aminoacyl-tRNA syn- thetases in the regulation of polypeptide chain initiation // Eur. J. Biochem.— 1989.— 182.—P. 1. Ин-т молекуляр. биологии и генетики АН Украины, Киев Получено 22.05.92 УДК 577.217:616.127 Т. К. Машанаускас, JI. JI. Иванов, Г. А. Родовичюс, JI. Ю. Лукошявичюс, А. К. Прашкявичюс БИОСИНТЕЗ БЕЛКА В БЕСКЛЕТОЧНЫХ СИСТЕМАХ ИЗ ПЕЧЕНИ КРОЛИКА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИШЕМИИ МИОКАРДА Изучен уровень биосинтеза белка в бесклеточных системах из печени кролика в норме- и через 12 ч после воспроизведения экспериментальной ишемии миокарда (ЭИМ). Показано, что повышение уровня включения /14C/ лейцина в продукт трансляции в бесклеточной белоксинтезирующей системе при ЭИМ связано с увеличением актив- ности аминоацил-тРНК синтетаз. Электрофоретический анализ продуктов трансляции с последующей авторадиографией указал на перераспределение при ЭИМ в спектре синтезируемых в бесклеточной системе белков. © Т. К. Машанаускас, JI. Jl. Иванов, Г. А. Родовичюс, JT. Ю. Лукошявичюс, А. К. Прашкявичюс, 1992 30 ISSN 0233-7(357. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1992. Т. 8. № б 30

Исследование распределения серил-тРНК синтетазы в тканях высших эукариот иммунохимическими методами

Репозитарії

Схожі ресурси