Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j
Подобраны наиболее благоприятные условия гормональной стимуляции самок мышей инбредных линий ICR, СВА/Lac, C₅₇BI/6j. Определен спектр оптимальных концентраций гормонов для каждой из исследованных линий мышей. Отработаны условия культивирования зигот различной линейной принадлежности в системе in vit...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Дата: | 1997 |
| Автори: | , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1997
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155193 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j / И.Н. Вагина, Т.Г. Титок, Н.А. Сарапина, И.В. Кириченко, С.В. Евсиков, А.П. Соломко // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 3. — С. 232-238. — Бібліогр.: 27 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1860136523370856448 |
|---|---|
| author | Вагина, И.Н. Титок, Т.Г. Сарапина, Н.А. Кириченко, И.В. Евсиков, С.В. Соломко, А.П. |
| author_facet | Вагина, И.Н. Титок, Т.Г. Сарапина, Н.А. Кириченко, И.В. Евсиков, С.В. Соломко, А.П. |
| citation_txt | Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j / И.Н. Вагина, Т.Г. Титок, Н.А. Сарапина, И.В. Кириченко, С.В. Евсиков, А.П. Соломко // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 3. — С. 232-238. — Бібліогр.: 27 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Подобраны наиболее благоприятные условия гормональной стимуляции самок мышей инбредных линий ICR, СВА/Lac, C₅₇BI/6j. Определен спектр оптимальных концентраций гормонов для каждой из исследованных линий мышей. Отработаны условия культивирования зигот различной линейной принадлежности в системе in vitro. Отмечено, что важным моментом, в значительной степени обеспечивающим успех культивирования зигот в системе in vitro, является стадия развития оплодотворенных яйцеклеток, характеризующаяся временем появления и морфологическими особенностями мужского и женского пронуклеусов.
Підібрано найсприятливіші умови гормональної стимуляції самок мишей інбредних ліній ICR, СВА/Lac, C₅₇Bl/6j. Визначено спектр оптимальних концентрацій гормонів для кожної з ліній мишей, іцо вивчалася. Відпрацьовано умови культивування зигот різної лінійної приналежності в системі in vitro. Відмічено, що важливим моментом, який в значній мірі забезпечує успіх культивування зигот в системі in vitro, є стадія розвитку запліднених яйцеклітин, що характеризується часом появи та морфологічними особливостями чоловічого та жіночого пронуклеусів.
Optimal conditions for hormonal stimulation of females of ICR, CBAlLac and C₅₇Bl/6j have bean worked out The optimal concentration and spectrum of hormones for each strain was determined. Conditions for in vitro culture of zygotes of different strains were elaborated. It was determined that the important thing for successive in vitro culture of zygotes is the stage of development of fertilized ova, which is characterized by the time of appearance of maternal and paternal pronuclei.
|
| first_indexed | 2025-12-07T17:47:22Z |
| format | Article |
| fulltext |
I S S N 0 2 3 3 - 7 6 5 7 . Б и о п о л и м е р ы и к л е т к а . 1 9 9 7 . Т . 1 3 . № 3
МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ
Оптимизация системы для проведения
генетико-эмбриологических исследований
на инбредных линиях мышей.
3. Условия гормональной стимуляции самок
и культивирования in vitro зародышей на
доимплантационной стадии развития у мышей
инбредных линий ICR, CBA/Lac и C 5 7Bl/6j
И. Н. Вагина, Т. Г. Титок, Н. А. Сарапина, И. В. Кириченко,
С. В- Евсиков, А. П. Соломко
И н с т и т у т м о л е к у л я р н о й б и о л о г и и и г е н е т и к и Н А Н У к р а и н ы
2 5 2 1 4 3 , К и е в , у л . А к а д е м и к а З а б о л о т н о г о , 1 5 0
Подобраны наиболее благоприятные условия гормональной стимуляции самок мышей инбредных
линий ICR, СВЛ/Lac, C57BI/6J. Определен спектр оптимальных концентраций гормонов для
каждой из исследованных линий мышей. Отработаны условия культивирования зигот различной
линейной принадлежности в системе in vitro. Отмечено, что важным моментом, в значительной
степени обеспечивающим успех культивирования зигот в системе in vitro, является стадия
развития оплодотворенных яйцеклеток, характеризующаяся временем появления и морфологиче
скими особенностями мужского и женского пронуклеусов.
В в е д е н и е . И н б р е д н ы е л и н и и м ы ш е й п р е д с т а в л я ю т
собой у д о б н ы й м о д е л ь н ы й о б ъ е к т д л я и з у ч е н и я
д о и м п л а н т а ц и о н н о г о э м б р и о г е н е з а м л е к о п и т а ю
щ и х . О д н а к о э м б р и о л о г и ч е с к и й м а т е р и а л , п о л у
ч е н н ы й п о с л е е с т е с т в е н н о й о в у л я ц и и , о б л а д а е т р я
д о м н е д о с т а т к о в , о б у с л о в л е н н ы х а с и н х р о н н о с т ь ю
о п л о д о т в о р е н и я и о т с у т с т в и е м д о с т а т о ч н о г о к о л и
ч е с т в а э м б р и о н о в н а д о и м п л а н т а ц и о н н о й с т а д и и
р а з в и т и я . Во и з б е ж а н и е у к а з а н н ы х н е д о с т а т к о в
р а з р а б о т а н а с и с т е м а г о р м о н а л ь н о й с т и м у л я ц и и с а
м о к м ы ш е й , п р о в о ц и р у ю щ а я у н и х п о в ы ш е н н ы й
в ы х о д я й ц е к л е т о к — с у п е р о в у л я ц и ю [1 ]. Э т о у д о б
н ы й п р и е м п о л у ч е н и я б о л ь ш о г о ч и с л а з а р о д ы ш е й ,
н а х о д я щ и х с я н а о д н о й и т о й ж е с т а д и и р а з в и т и я .
У с п е ш н а я и н д у к ц и я с у п е р о в у л я ц и и з а в и с и т о т р я -
© И Н В А Г И Н А , Т. Г Т И Т О К , Н. А. С А Р А П И Н А ,
И В. К И Р И Ч Е Н К О , С В Є В С И К О В , А. П. С О Л О М К О , IV97
д а ф а к т о р о в — в о з р а с т а , м а с с ы , л и н и и ж и в о т н ы х ,
д о з ы и в р е м е н и и н ъ е к ц и и г о н а д о т р о п и н о в [ 1 — 3 ].
Д л я и з у ч е н и я р а з в и т и я з а р о д ы ш е й , п о л у ч е н
н ы х п о с л е с у п е р о в у л я ц и и и л и е с т е с т в е н н о й о в у л я
ц и и , н а д о и м п л а н т а ц и о н н о й с т а д и и и с п о л ь з у ю т
м е т о д к у л ь т и в и р о в а н и я э м б р и о н о в in vitro, п о з в о
л я ю щ и й п о д д е р ж и в а т ь и х н о р м а л ь н о е р а з в и т и е і
т е ч е н и е в с е г о э т о г о п е р и о д а .
В с о о б щ е н и я х [4 , 5] у ж е у к а з а н о н а н е о б х о д и
м о с т ь в ы п о л н е н и я р я д а у с л о в и й д л я проведение
с о в р е м е н н ы х г е н е т и ч е с к и х и м о л е к у л я р н о - б и о л о г и
ч е с к и х и с с л е д о в а н и й н а л и н е й н ы х м ы ш а х . В э т о
с т а т ь е п р е д с т а в л е н ы р е з у л ь т а т ы п о д б о р а о п т и м а л ь
н ы х д о з г о р м о н о в д л я э ф ф е к т и в н о й с у п е р о в у л я ц и
у с а м о к м ы ш е й и н б р е д н ы х л и н и й I C R , C B A / L a c
C 5 7 B l / 6 j , а т а к ж е с о з д а н ы и и з у ч е н ы у с л о в и я д л
у с п е ш н о г о п о д д е р ж а н и я р а з в и т и я з а р о д ы ш е й мы
ш е й р а з н ы х г е н о т и п о в в с и с т е м е in vitro.
2 3 2
О П Т И М И З А Ц И Я С И С Т Е М Ы Д Л Я Г Е Н Е Т И Ч Е С К И Х И С С Л Е Д О В А Н И Й
М а т е р и а л ы и м е т о д ы . В р а б о т е и с п о л ь з о в а н ы
м ы ш и л и н и й I C R , C B A / L a c , C 5 7 B l / 6 j , с о д е р ж а в ш и
еся п р и и н в е р т и р о в а н н о м с в е т о в о м р е ж и м е — 14 ч
д е н ь : 10 ч н о ч ь . Г о р м о н а л ь н у ю с т и м у л я ц и ю с а м о к
о с у щ е с т в л я л и в н у т р и б р ю ш и н н ы м в в е д е н и е м г о н а -
д о т р о п и н а с ы в о р о т к и ж е р е б ы х к о б ы л ( Г С Ж К ) , а
ч е р е з 48 ч о в у л я ц и ю и н д у ц и р о в а л и и н ъ е к ц и е й
х о р и о н и ч е с к о г о г о н а д о т р о п и н а ч е л о в е к а ( ч Х Г ) . Д а
л е е с а м о к с к р е щ и в а л и с с а м ц а м и т о й ж е л и н е й н о й
п р и н а д л е ж н о с т и . Ф а к т п о к р ы т и я у с т а н а в л и в а л и п о
н а л и ч и ю в а г и н а л ь н о й п р о б к и .
П р и е с т е с т в е н н о й о в у л я ц и и с п а р и в а н и е м ы ш е й
о б ы ч н о п р о и с х о д и т в с е р е д и н е т е м н о в о г о п е р и о д а ,
п р и и н д у ц и р о в а н н о й о в у л я ц и и — в п е р в ы е ч а с ы
п о с л е и н ъ е к ц и и ч Х Г и п о д с а д к и к с а м ц а м . П о э т о м у
п о к р ы т ы х с а м о к з а б и в а л и ч е р е з р а з н ы е п р о м е ж у т
к и в р е м е н и — п о с л е с е р е д и н ы т е м н о в о г о п е р и о д а
п р и е с т е с т в е н н о й о в у л я ц и и и ч е р е з р а з л и ч н ы е
и н т е р в а л ы в р е м е н и п о с л е в в е д е н и я ч Х Г — п р и и н
д у ц и р о в а н н о й . З и г о т ы н а с т а д и и д в у х п р о н у к л е у -
сов в ы м ы в а л и из я й ц е в о д о в р а с т в о р о м к у л ь т у р а л ь -
н о й с р е д ы . Д л я о с в о б о ж д е н и я о т к л е т о к к у м у л ю с а
з и г о т ы о б р а б а т ы в а л и р а с т в о р о м г и а л у р о н и д а з ы
(100 е д / м л ) в с р е д е М 2 . Д л я к у л ь т и в и р о в а н и я
з а р о д ы ш и п е р е н о с и л и п о 5 — 1 0 ш т у к в м и к р о к а п л и
р а з л и ч н ы х к у л ь т у р а л ь н ы х с р е д : В и т т е н а [ 6 ] , Э р л а
с д о б а в л е н и е м п и р у в а т а и л а к т а т а N a , С А Т - 5 3 5 .
М и к р о к а п л и с з а р о д ы ш а м и п о к р ы в а л и с л о е м в а з е
л и н о в о г о м а с л а ; ч а ш к и с з а р о д ы ш а м и п о м е щ а л и в
С 0 2 - и н к у б а т о р п р и 3 7 °С и п р о д у в а л и г а з о в о й
с м е с ь ю , с о с т о я щ е й и з 5 % С 0 2 и 95 % в о з д у х а .
Э м б р и о н ы к у л ь т и в и р о в а л и д о с т а д и и б л а с т о ц и с т ы ,
п р и э т о м у ч и т ы в а л и д о л ю з а р о д ы ш е й , о с т а н о в и в
ш и х с я н а р а н н и х с т а д и я х д р о б л е н и я , а т а к ж е ч и с л о
з а р о д ы ш е й , н е в с т у п и в ш и х в р а з в и т и е п о к а к и м - т о
п р и ч и н а м . С т а т и с т и ч е с к у ю о б р а б о т к у р е з у л ь т а т о в
п р о в о д и л и с и с п о л ь з о в а н и е м к р и т е р и я С т ь ю д е н т а .
Р е з у л ь т а т ы и о б с у ж д е н и е . О с о б е н н о с т и п р о в е
д е н и я э к с п е р и м е н т о в , с в я з а н н ы х с и з у ч е н и е м р я д а
п р о б л е м б и о л о г и и р а з в и т и я , з а к л ю ч а ю т с я в т о м ,
ч т о б ы н а с т а д и и д в у х п р о н у к л е у с о в и м е л о с ь о д н о
в р е м е н н о д о с т а т о ч н о б о л ь ш о е к о л и ч е с т в о о п л о д о т
в о р е н н ы х я й ц е к л е т о к . О д н а к о п р и е с т е с т в е н н о й
о в у л я ц и и в р е м е н н о й р а з б р о с э т о й с т а д и и у м ы ш е й
д о с т и г а е т 6 — 1 0 ч . Все э т о п о в л е к л о з а с о б о й
н е о б х о д и м о с т ь п р о в е д е н и я э к с п е р и м е н т о в п о о п р е
д е л е н и ю о п т и м а л ь н ы х у с л о в и й с и н х р о н и з и р о в а н
н о й о в у л я ц и и п у т е м с о з д а н и я и н в е р т и р о в а н н о г о
с в е т о в о г о п е р и о д а с у т о к и г о р м о н а л ь н о й с т и м у л я
ц и и с а м о к - д о н о р о в . Р е з у л ь т а т ы и с с л е д о в а н и й п о
п о д б о р у о п т и м а л ь н ы х д о з г о н а д о т р о п и н о в с в и д е
т е л ь с т в у ю т о л и н е й н ы х р а з л и ч и я х р е а к ц и и н а
в в о д и м ы е г о р м о н а л ь н ы е п р е п а р а т ы . П о л у ч е н н ы е
н а м и д а н н ы е с о г л а с у ю т с я с т а к о в ы м и д р у г и х а в т о
р о в [ 7 — 9 ] . В в е д е н и е с а м к а м C B A / L a c от 10 и
б о л е е е д и н и ц Г С Ж К н а о с о б ь с н и ж а е т к о л и ч е с т в о
о в у л и р у ю щ и х я й ц е к л е т о к , и п о в ы ш а е т ч и с л о а н о
м а л ь н ы х — д о 8 9 % . У с а м о к I C R а н а л о г и ч н ы е
р е з у л ь т а т ы д о с т и г а л и с ь п р и д о з и р о в к а х Г С Ж К ,
п р е в ы ш а ю щ и х в ы ш е у к а з а н н ы е в 2 , 5 — 3 р а з а . В
с в о ю о ч е р е д ь , д о з ы ч Х Г м е н е е 3 е д и н и ц н а м ы ш ь
в е д у т к с у щ е с т в е н н о м у п а д е н и ю к о л и ч е с т в а о в у л и
р у ю щ и х я й ц е к л е т о к п о ч т и в 3 р а з а к а к у с а м о к
C B A / L a c , т а к и C 5 7 B l / 6 j , а у с а м о к I C R д а ж е к
п р е к р а щ е н и ю о в у л я ц и и .
Т а к и м о б р а з о м , у д а л о с ь п о д о б р а т ь о п т и м а л ь
н ы е д о з ы Г С Ж К ( с у х а я , П о к р о в с к и й з а в о д б и о п р е
п а р а т о в , п а р т и я 13) д л я р а з л и ч н ы х л и н и й м ы ш е й :
I C R — 1 0 — 1 2 ед . ; C B A / L a c — 5 — 6 ед . ; C 5 7 B l / 6 j —
6 — 8 ед . н а о д н у с а м к у . Т а к ж е п о д о б р а н ы о п т и
м а л ь н ы е д о з ы ч Х Г ( М о с к о в с к и й , э н д о к р и н н ы й з а
в о д ) : I C R — 6 ед . , C B A / L a c — 4 е д . , C 5 7 B l / 6 j — 5
ед . н а о д н о ж и в о т н о е . К р о м е т о г о , в ы я с н и л о с ь , ч т о
н а и б о л ь ш и й э ф ф е к т д о с т и г а е т с я п р и в в е д е н и и ч Х Г
з а 1 2 — 1 3 ч д о с е р е д и н ы т е м н о в о г о п е р и о д а и н в е р
т и р о в а н н ы х с у т о к , к о г д а и н д у ц и р о в а н н а я о в у л я ц и я
с о в п а д а е т с п е р и о д о м е с т е с т в е н н о й о в у л я ц и и у
м ы ш е й . В в е д е н и е г о р м о н о в р а н ь ш е и п о з ж е э т о г о
с р о к а в е д е т к у в е л и ч е н и ю к о л и ч е с т в а н е о п л о д о т в о -
р е н н ы х и а н о м а л ь н ы х я й ц е к л е т о к . Н а и б о л е е о п т и
м а л ь н ы й в о з р а с т с а м о к , п р и к о т о р о м д о с т и г а ю т с я
н а и в ы с ш и е п о к а з а т е л и с и н х р о н и з а ц и и о в у л я ц и и ,
л е ж и т в и н т е р в а л е 4 — 7 н е д е л ь . П р и с о б л ю д е н и и
п е р е ч и с л е н н ы х у с л о в и й п о л у ч е н о н е т о л ь к о б о л ь
ш е е к о л и ч е с т в о я й ц е к л е т о к н а с а м к у , н о т а к ж е
у в е л и ч и л о с ь ч и с л о з и г о т п о с р а в н е н и ю с к о н т р о л е м
( р и с . 1 ) .
Д л я с о з д а н и я у с л о в и й у с п е ш н о г о п о д д е р ж а н и я
р а з в и т и я з а р о д ы ш е й м ы ш е й в с и с т е м е in vitro б ы л и
ICR СБА CSJB)/6j
Р и с . 1. Р е з у л ь т а т ы о в у л я ц и и у г о р м о н а л ь н о с т и м у л и р о в а н н ы х
с а м о к т р е х л и н и й : / , 2 — с у п е р о в у л я ц и я я й ц е к л е т к и и з и г о т ы
с о о т в е т с т в е н н о ; 3, 4 — к о н т р о л ь я й ц е к л е т к и и з и г о т ы . Д о с т о
в е р н о с т ь р а з л и ч и й м е ж д у к о н т р о л е м и о п ы т о м : *р > 0 , 9 5 ; ***р >
> 0 , 9 9 9
2 3 3
ВАГИНА И. H И Д Р
Р и с . 2 . С е з о н н а я д и н а м и к а р а з в и т и я п р о н у к л е у с о в в з и г о т а х м ы ш е й л и н и и I C R п р и е с т е с т в е н н о й о в у л я ц и и (а) и п о с л е
с у п е р о в у л я ц и и (б): I — з и м а ; 2 — в е с н а ; 3 — л е т о ; 4 — о с е н ь
и с п ы т а н ы р а з л и ч н ы е к у л ь т у р а л ь н ы е с р е д ы . Л у ч
ш е й п о р е з у л ь т а т а м и с п ы т а н и й б ы л а п р и з н а н а
с р е д а В и т т е н а [6 ], д л я п р и г о т о в л е н и я к о т о р о й
и с п о л ь з о в а л и р е а к т и в ы о с о б о й ч и с т о т ы . В н е с е н и е в
к у л ь т у р а л ь н у ю с р е д у N a - с о л и Э Д Т А [ 1 0 ] п о в ы с и
л о в ы х о д м о р у л и б л а с т о ц и с т п р и к у л ь т и в и р о в а н и и
in vitro. Н а м и б ы л и и с п ы т а н ы т р и к о н ц е н т р а ц и и
Э Д Т А — 10, 100 и 2 0 0 м к М . О к а з а л о с ь , ч т о д л я
з и г о т л и н и и I C R и C 5 7 B l / 6 j о п т и м а л ь н о й я в л я е т с я
к о н ц е н т р а ц и я 100 м к М , а д л я л и н и и C B A / L a c —
2 0 0 м к М . К о н ц е н т р а ц и я Э Д Т А 10 м к М б ы л а м а л о
э ф ф е к т и в н о й . Э т и р е з у л ь т а т ы м о г у т у к а з ы в а т ь н а
г е н о т и п и ч е с к и е р а з л и ч и я в ч у в с т в и т е л ь н о с т и з и г о т
р а н н и х с т а д и й к н а л и ч и ю в к у л ь т у р а л ь н о й с р е д е
и о н о в т я ж е л ы х м е т а л л о в .
П а р а л л е л ь н о с н а л а ж и в а н и е м к у л ь т у р ы з а р о
д ы ш е й м ы ш е й р е ш а л и в т о р у ю з а д а ч у — о п р е д е л е
н и е в р е м е н н ы х п а р а м е т р о в ч е т к о г о п р о я в л е н и я
п р о н у к л е у с о в к а к о д н о г о и з к р и т е р и е в о ш ю д о т в о -
р я е м о с т и я й ц е к л е т о к . В е с ь п е р и о д о т п р о н и к н о в е
н и я с п е р м и я в я й ц е к л е т к у и д о п р о ф а з ы п е р в о г о
д е л е н и я п о д р а з д е л я е т с я н а т р и с т а д и и , к а ж д а я и з
к о т о р ы х о х а р а к т е р и з о в а н а п о м о р ф о л о г и ч е с к и м
о с о б е н н о с т я м п р о н у к л е у с о в [ 1 1 ] . П е р в а я с т а д и я —
н а ч а л о ф о р м и р о в а н и я п р о н у к л е у с о в ( п р о и с х о д и т
у п л о т н е н и е х р о м а т и н а , ф о р м и р о в а н и е о б о л о ч е к
п р о н у к л е у с о в ) ; в т о р а я — з а в е р ш е н и е и х ф о р м и р о
в а н и я ( п р о и с х о д и т у в е л и ч е н и е и х о б ъ е м а ) ; т р е
т ь я — с т а д и я з р е л ы х п р о н у к л е у с о в ( п р о н у к л е у с ы
п е р е м е щ а ю т с я к ц е н т р у и с б л и ж а ю т с я ) .
З а т е м о т б и р а л и и а н а л и з и р о в а л и з и г о т ы с
д в у м я ч е т к о в ы р а ж е н н ы м и п р о н у к л е у с а м и . Д и н а
м и к а р а з в и т и я п р о н у к л е у с о в в у с л о в и я х е с т е с т в е н
н о й о в у л я ц и и и п о с л е с у п е р о в у л я ц и и п р е д с т а в л е н а
н а р и с . 2 а, б, н а п р и м е р е з и г о т л и н и и I C R .
С р а в н е н и е в р е м е н н ы х п а р а м е т р о в р а з в и т и я
п р о н у к л е у с о в п р и е с т е с т в е н н о й и и н д у ц и р о в а н н о й
о в у л я ц и и с в и д е т е л ь с т в у е т о с у щ е с т в е н н ы х р а з л и
ч и я х . Т а к , п р и и н д у ц и р о в а н н о й о в у л я ц и и к 2 3 -
м у ч п о с л е в в е д е н и я ч Х Г с в ы ш е 8 0 % з и г о т б ы л и
с ч е т к о в и д и м ы м и п р о н у к л е у с а м и , в т е ч е н и е п о
с л е д у ю щ и х 2 — 3 ч к о л и ч е с т в о и х д о с т и г а л о м а к с и
м у м а , а з а т е м р е з к о с н и ж а л о с ь к 2 6 - м у ч . П р и
э т о м о б а п р о н у к л е у с а , о б ъ е д и н я я с ь , в с т у п а л и в
м е т а ф а з н у ю с т а д и ю р а з в и т и я . П о с л е с у п е р о в у л я
ц и и у с а м о к н а б л ю д а л а с ь с и н х р о н и з а ц и я п о в р е м е
н и р а з в и т и я п р о н у к л е у с о в , а д и н а м и к а о п л о д о т в о -
р я е м о с т и я й ц е к л е т о к б ы л а о д н о н а п р а в л е н н о й н е з а
в и с и м о о т в р е м е н и года ( см . р и с . 2 , б). В т о ж е
в р е м я у с а м о к с е с т е с т в е н н о й о в у л я ц и е й о б н а р у ж е н
б о л ь ш о й р а з б р о с п о в р е м е н и р а з в и т и я п р о н у к л е у
с о в . Э т о т а к ж е п о д т в е р ж д а е т с я п о я в л е н и е м д о 5 %
з и г о т , п р о ш е д ш и х п е р в о е д е л е н и е д р о б л е н и я , ч е г о
н е н а б л ю д а л о с ь у с а м о к с и н д у ц и р о в а н н о й о в у л я -
2 3 4
О П Т И М И З А Ц И Я С И С Т Е М Ы Д Л Я Г Е Н Е Т И Ч Е С К И Х И С С Л Е Д О В А Н И Й
ц и е й . У с а м о к с е с т е с т в е н н о й о в у л я ц и е й о т м е ч е н ы
к о л е б а н и я п о в р е м е н и р а з в и т и я п р о н у к л е у с о в в
з и г о т а х в з а в и с и м о с т и о т в р е м е н и г о д а . Т а к ,
о с е н ь ю и з и м о й п и к п р и х о д и л с я н а 1 4 — 1 5 ч п о с л е
с е р е д и н ы т е м п о в о г о п е р и о д а , в е с н о й э т о т п и к с м е
щ а л с я и п р и х о д и л с я н а 1 3 — 1 4 ч , а л е т о м р а с т я г и
в а л с я с 14 д о 16 ч (см . р и с . 2 , а). Э т и р е з у л ь т а т ы
с в и д е т е л ь с т в у ю т о н е р а в н о м е р н о с т и с о з р е в а н и я и
о в у л я ц и и я й ц е к л е т о к у п о л о в о з р е л ы х с а м о к п р и
е с т е с т в е н н о м т е ч е н и и э т о г о п р о ц е с с а , т а к к а к г о р
м о н а л ь н ы й ф о н у н и х н а х о д и т с я в з а в и с и м о с т и о т
в р е м е н и года . О б н а р у ж е н о т а к лее, ч т о д л я с а м о к
и с с л е д у е м ы х л и н и й х а р а к т е р н ы с в о и о с о б е н н о с т и
п о с к о р о с т и о п л о д о т в о р е н и я и ф о р м и р о в а н и я п р о
н у к л е у с о в . Т а к , у с а м о к C 5 7 B l / 6 j э т о т п р о ц е с с
п р о и с х о д и л н а 1,5—2 ч б ы с т р е е , ч е м у с а м о к I C R
и C B A / L a c . У п о с л е д н и х ч е р е з 13 ч п о с л е с е р е д и н ы
т е м н о в о г о п е р и о д а п р о н у к л е у с ы в ы я в л я л и с ь т о л ь к о
у 4 0 % з и г о т . С у щ е с т в о в а н и е л и н е й н ы х р а з л и ч и й
по с к о р о с т и ф о р м и р о в а н и я п р о н у к л е у с о в у м ы ш е й
о т м е ч а л о с ь р а н е е [ 1 2 — 1 4 ] . Р е з у л ь т а т ы к у л ь т и в и
р о в а н и я з и г о т м ы ш е й т р е х л и н и й , п о л у ч е н н ы х в
о д и н в р е м е н н о й и с е з о н н ы й п е р и о д ы , т а к ж е с в и д е
т е л ь с т в у ю т о с у щ е с т в о в а н и и о п р е д е л е н н ы х м е ж л и
н е й н ы х р а з л и ч и й в и х с п о с о б н о с т и э ф ф е к т и в н о
п р о х о д и т ь с т а д и и р а з в и т и я д о б л а с т о ц и с т в у с л о в и
я х in vitro ( т а б л . I ) . Н е с м о т р я н а о д и н а к о в ы й
в о з р а с т , у с п е ш н е е в с е г о р а з в и в а л и с ь з и г о т ы м ы ш е й
л и н и и C 5 7 B L / 6 j — 6 0 % б л а с т о ц и с т , з а т е м C B A / L a c
— 4 2 % , а з и г о т ы л и н и и I C R в п р е о б л а д а ю щ е м
к о л и ч е с т в е о с т а н а в л и в а л и с ь на д в у к л е т о ч н о й с т а
д и и . В е с ь м а в е р о я т н о , ч т о в о с н о в е м е ж л и н е й н ы х
р а з л и ч и й р а з в и т и я з и г о т в с и с т е м е in vitro л е ж а т
и х г е н о т и п и ч е с к и е о с о б е н н о с т и , в ы р а ж а ю щ и е с я в
н е р а в н о м е р н ы х т е м п а х с о з р е в а н и я о п л о д о т в о р е н
н ы х я й ц е к л е т о к . И з в е с т н о , ч т о п р и к у л ь т и в и р о в а
н и и з и г о т м ы ш е й н е к о т о р ы х л и н и й и х р а з в и т и е
б л о к и р у е т с я на д в у б л а с т о м е р н о й с т а д и и [ 1 5 — 1 8 ] .
О д н о к л е т о ч н ы е з а р о д ы ш и м ы ш е й к р а й н е ч у в с т в и
т е л ь н ы к ряду а г е н т о в и , в ч а с т н о с т и , к с о л я м
т я ж е л ы х м е т а л л о в . П о э т о м у п р и д о б а в л е н и и к
к у л ь т у р а л ь н о й с р е д е а г е н т о в , с в я з ы в а ю щ и х т я ж е
л ы е м е т а л л ы (в т о м ч и с л е Э Д Т А ) , м о ж н о к у л ь т и
в и р о в а т ь in vitro о д н о к л е т о ч н ы е з а р о д ы ш и о т н е к о
т о р ы х л и н и й м ы ш е й , у к о т о р ы х н а б л ю д а л с я б л о к в
р а з в и т и и на д в у к л е т о ч н о й с т а д и и [ 1 0 ] . П о - в и д и м о
м у , в ц и т о п л а з м е т а к и х з а р о д ы ш е й о т с у т с т в у ю т
ф а к т о р ы , н е о б х о д и м ы е д л я п р е о д о л е н и я б л о к а н а
д в у к л е т о ч н о й с т а д и и , т . е. д л я у с п е ш н о г о п р о д о л
ж е н и я р а з в и т и я in vitro [ 1 7 , 1 9 ] . Н а л и ч и е э т и х
ф а к т о р о в з а в и с и т о т г е н е т и ч е с к и х о с о б е н н о с т е й
я й ц е к л е т к и и о п р е д е л я е т с я а к т и в н о с т ь ю м а т е р и н
с к и х г е н о в е щ е в о о г е н е з е [20 , 21 ].
В о з м о ж н о , э т о о б у с л о в л е н о р а з н ы м з а п а с о м
м Р Н К , р а з л и ч н о й а к т и в н о с т ь ю р я д а ф е р м е н т о в ,
р а з л и ч н о й с т р у к т у р о й и о с о б е н н о с т я м и ф у н к ц и и
м и т о х о н д р и й и о т л и ч и я м и в п р о н и ц а е м о с т и п л а з
м а т и ч е с к о й м е м б р а н ы я й ц е к л е т к и , с п о с о б с т в у ю щ и
м и р а з в и т и ю з и г о т in vitro д о б о л е е п о з д н и х с т а д и й .
О д н а к о п р и р о д а э т и х ц и т о п л а з м а т и ч е с к и х ф а
к т о р о в д о с и х п о р о с т а е т с я н е в ы я с н е н н о й .
Р е з у л ь т а т ы к у л ь т и в и р о в а н и я з и г о т л и н и и ICR
( т а б л . 2) с в и д е т е л ь с т в у ю т о т о м , ч т о и х р а з в и т и е
б л о к и р у е т с я н а д в у к л е т о ч н о й с т а д и и . В т о ж е
в р е м я у с п е х р а з в и т и я з и г о т э т о й л и н и и , п о л у ч е н
н ы х н а 3 — 4 ч п о з ж е , п о в ы ш а л с я д о 37 % (см.
т а б л . 2 ) . В и д н о , ч т о 9 2 % т а к и х з и г о т ( п о л у ч е н н ы х
ч е р е з 1 6 — 1 8 ч п о с л е с е р е д и н ы т е м н о в о г о п е р и о д а )
п р о д о л ж а л и р а з в и в а т ь с я и 3 7 % и з н и х д о с т и г л и
с т а д и и б л а с т о ц и с т ы . Н о т о л ь к о 4 % з и г о т , п о л
у ч е н н ы х о т с а м о к ч е р е з 1 2 — 1 3 ч п о с л е с е р е д и н ы
т е м н о в о г о п е р и о д а , р а з в и в а л и с ь д о б л а с т о ц и с т и
п о ч т и п о л о в и н а и з н и х н е в с т у п а л а в р а з в и т и е .
Т а к а я ж е з а в и с и м о с т ь у с п е х а р а з в и т и я з и г о т in
vitro о т и х б и о л о г и ч е с к о г о в о з р а с т а ( с т а д и и р а з в и
т и я ) н а б л ю д а л а с ь и в с л у ч а е г о р м о н а л ь н о й с т и м у
л я ц и и с а м о к ( т а б л . 3 ) . П р и ч е м э т а з а в и с и м о с т ь
в ы я в л е н а у м ы ш е й в с е х т р е х л и н и й . Н а и б о л е е
у с п е ш н о р а з в и в а л и с ь з и г о т ы , п о л у ч е н н ы е о т с а м о к
м ы ш е й ч е р е з 2 6 — 2 8 ч п о с л е в в е д е н и я ч Х Г . П р и
э т о м ч и с л о з и г о т л и н и й I C R и C 5 7 B 1 / 6 J , р а з в и в
ш и х с я д о с т а д и и б л а с т о ц и с т а , б ы л о з н а ч и т е л ь н о
б о л ь ш е , ч е м б л а с т о ц и с т , р а з в и в ш и х с я и з з и г о т ,
п о л у ч е н н ы х ч е р е з 2 3 — 2 5 ч п о с л е в в е д е н и я ч Х Г
( р а з л и ч и я д о с т о в е р н ы п р и р > 0 , 9 9 9 ) .
М ы т а к ж е к у л ь т и в и р о в а л и д в у к л е т о ч н ы е з а р о
д ы ш и м ы ш е й л и н и и I C R , н а х о д я щ и е с я н а р а з н ы х
с т а д и я х р а з в и т и я ( т а б л . 4 ) . Р а н н и е д в у к л е т о ч н ы е
з а р о д ы ш и ( п о л у ч е н н ы е о т с а м о к с е с т е с т в е н н о й
о в у л я ц и е й ч е р е з 1 6 — 1 8 ч п о с л е с е р е д и н ы т е м н о в о
го п е р и о д а ) п о ч т и в с е о с т а н а в л и в а л и с ь в с в о е м
р а з в и т и и и т о л ь к о е д и н и ц ы д о с т и г а л и с т а д и и б л а -
с т о ц и с т ы . С л е д о в а т е л ь н о , с р е д и з а р о д ы ш е й м ы ш е й ,
р а з в и в а в ш и х с я в м а т е р и н с к о м о р г а н и з м е , т а к ж е
м о ж н о н а й т и з а б л о к и р о в а н н ы е н а д в у к л е т о ч н о й
с т а д и и . Н е и с к л ю ч е н о , ч т о и в э т о м с л у ч а е п р о я в
л я е т с я о т с у т с т в и е в ц и т о п л а з м е з и г о т ф а к т о р о в ,
н е о б х о д и м ы х д л я н а ч а л ь н ы х и д а л ь н е й ш и х с т а д и й
д р о б л е н и я . Н а п р о т и в , б о л е е 8 0 % п о з д н и х ( п о л у
ч е н н ы х ч е р е з 3 7 — 4 0 ч п о с л е с е р е д и н ы т е м н о в о г о
п е р и о д а ) д в у к л е т о ч н ы х з а р о д ы ш е й в с т у п а л и в р а з
в и т и е и 4 5 % и з н и х д о с т и г а л и с т а д и и б л а с т о ц и -
с т ы . В о з м о ж н о , э т о с в я з а н о с т е м , ч т о в п о з д н и х
д в у к л е т о ч н ы х з а р о д ы ш а х п р о и с х о д и т а к т и в а ц и я
с в о е г о г е н о м а . Д в у к л е т о ч н а я с т а д и я я в л я е т с я у н и
к а л ь н о й н е т о л ь к о в с л е д с т в и е т о г о , ч т о в э т о в р е м я
а к т и в и р у е т с я г е н о м з а р о д ы ш а , н о и п о т о м у , ч т о
т о л ь к о у д в у к л е т о ч н ы х з а р о д ы ш е й о д н о в р е м е н н о
2 3 5
ВАГИНА И. Н. И Д Р .
Таблица 1
Результаты культивирования зигот линий ICR, CBA/Lac, C57BI/6J, полученных от самок через 14—15 ч после середины
темпового периода суток в летний период
П р и м е ч а н и е . Р а з л и ч и я д о с т о в е р н ы м е ж д у 1 и 2 ; І и 3 (***р > 0 , 9 9 9 ) .
Таблица 2
Результаты культивирования зигот линии ICR, полученных от самок через различные интервалы времени после середины
темнового периода суток
П р и м е ч а н и е . Р а з л и ч и я д о с т о в е р н ы м е ж д у 1 и 2 (*р > 0 , 9 5 ) ; 1 и 3 (***р > 0 , 9 9 9 ) .
Таблица 3
Результаты развития зигот линий ICR, CBA/Lac, C57BI/6J in vitro, полученных от самок после суперовуляции через разные
интервалы времени после введения чХГ
П р и м е ч а н и е . Р а з л и ч и я д о с т о в е р н ы м е ж д у 1 и 2 (*р > 0 , 9 5 ; ***р > 0 , 9 9 9 ) .
2 3 6
О П Т И М И З А Ц И Я С И С Т Е М Ы Д Л Я Г Е Н Е Т И Ч Е С К И Х И С С Л Е Д О В А Н И Й
Таблица 4
Результаты культивирования двуклеточных зародышей линии ICR, полученных через разные интервалы времени после
середины темнового периода, суток
П р и м е ч а н и е . Р а з л и ч и я д о с т о в е р н ы м е ж д у 1 и 2 (***р > 0 , 9 9 9 ) .
т р а н с л и р у ю т с я к а к м а т е р и н с к и е м Р Н К , т а к и
м Р Н К з а р о д ы ш а . И з м е н е н и я с п е к т р а б е л к о в в ы р а
ж е н ы во в р е м si д в у к л е т о ч н о й с т а д и и с и л ь н е е , ч е м
н а л ю б о й д р у г о й с т а д и и д р о б л е н и я [ 2 2 — 2 4 ]. Все
и з м е н е н и я н а д в у к л е т о ч н о й с т а д и и , в к л ю ч а я а к т и
в а ц и ю г е н о в з а р о д ы ш а и х а р а к т е р н ы е п а т т е р н ы
б е л к о в о г о с и н т е з а , а т а к ж е р а з р у ш е н и е м а т е р и н
с к о й м Р Н К , о с у щ е с т в л я ю т с я с о г л а с н о з а п р о г р а м
м и р о в а н н о м у в о о г е н е з е р и т м у , т . е. н а с т у п а ю т
т о г д а , к о г д а б л а с т о м е р ы д о с т и г н у т о п р е д е л е н н о г о
б и о л о г и ч е с к о г о в о з р а с т а [ 2 3 ] .
Т а к и м о б р а з о м , р е з у л ь т а т ы н а ш и х э к с п е р и
м е н т о в по к у л ь т и в и р о в а н и ю з а р о д ы ш е й м ы ш е й
р а н н и х с т а д и й с в и д е т е л ь с т в у ю т о т о м , ч т о у с п е х
р а з в и т и я т а к и х з а р о д ы ш е й in vitro з а в и с и т о т и х
г е н о т и п и ч е с к и х о с о б е н н о с т е й и б и о л о г и ч е с к о г о
в о з р а с т а . С л е д у е т о б р а т и т ь в н и м а н и е , ч т о д л я м ы
ш е й л и н и и I C R н о р м а л ь н о е р а з в и т и е д о с т а д и и
б л а с т о ц и с т ы in vitro о б е с п е ч и в а е т с я п р и к у л ь т и в и
р о в а н и и п о з д н и х з и г о т и п о з д н и х д в у к л е т о ч н ы х
з а р о д ы ш е й , а у с п е х к у л ь т и в и р о в а н и я т а к и х з а р о
д ы ш е й м о ж н о п о в ы с и т ь п р и и с п о л ь з о в а н и и с п е ц и
а л ь н ы х к у л ь т у р а л ь н ы х с р е д [ 2 5 — 2 7 ] .
/, М. Вагіна, Т. Г. Тіток, П. А. Сарапіна, I. В. Кириченко,
С. В. Євсіков, О. П. Соломко
О п т и м і з а ц і я с и с т е м и д л я п р о в е д е н и я г е н е т и к о - е м б р і о л о г і ч н и х
д о с л і д ж е н ь на і н б р е д н и х л і н і я х м и ш е й . 3 . У м о в и г о р м о н а л ь н о ї
с т и м у л я ц і ї с а м о к і к у л ь т и в у в а н н я in vitro з а р о д к і в н а
д о і м п л а н т а ц і й н і й с т а д і ї р о з в и т к у у м и ш е й і н б р е д н и х л і н і й I C R ,
C B A / L a c та C 5 7 B I / 6 j
Р е з ю м е
Підібрано найсприятливіші умови гормональної стимуляції
самок мишей інбредних ліній ICR, СВА/Іхіс, C57Bl/6J. Визна
чено спектр оптимальних концентрацій гормонів для кожної з
ліній мишей, іцо вивчалася. Відпрацьовано умови культивуван
ня зигот різної лінійної приналежності в системі in vitro.
Відмічено, що важливим моментом, який в значній мірі
забезпечує успіх культивування зигот в системі in vitro, є
стадія розвитку запліднених яйцеклітин, що характери
зується часом появи та морфологічними особливостями чо
ловічого та жіночого пронуклеусів.
І. N. Vagyna, Т. G. Titok, N. A. Sarapina, Y. V. Kirichenko,
S. V. Evsikov, A. P. Solomko
O p t i m i z a t i o n of t h e s y s t e m for e m b r y o g e n e t i c s t u d i e s o n inbred
s t ra ins of m i c e . 3 . C o n d i t i o n s of h o r m o n a l s t i m u l a t i o n of f e m a l e s a n d
in vitro c u l t u r e of p r e i m p l a n t a t i o n e m b r y o s of I C R , C B A / L a c a n d
C 5 7 B l / 6 j m o u s e s t ra ins
S u m m a r y
Optimal conditions for hormonal stimulation of females of ICR,
CBA/Lac and C57Bl/6j have been worked out. The optimal
concentration and spectrum of hormones for each strain, was
determined. Conditions for in vitro culture of zygotes of different
strains were elaborated. It was determined that the important thing
for successive in vitro culture of zygotes is the stage of development
of fertilized ova, which is characterized by the time of appearance
of maternal and paternal pronuclei.
С П И С О К Л И Т Е Р А Т У Р Ы
1. Gates A. H. M e t h o d s in m a m m a l i a n embryology I F d . J.
D a n i e l . — S a n F r a n c i s c o : F r e e m a n C o . , 1 9 7 1 . — P . 6 4 - — 7 5 .
2 . Дыбан А. П. О п ы т ы н а з а р о д ы ш а х м л е к о п и т а ю щ и х / /
М е т о д ы б и о л о г и и р а з в и т и я / П о д р е д . Б . Л . А с т а у р о в . — М.:
Н а у к а , 1 9 7 4 . — С . 2 2 0 — 2 2 1 .
3 . Манк М. Б и о л о г и я р а з в и т и я м л е к о п и т а ю щ и х . М е т о д ы . —
М.: М и р , 1 9 9 0 . — 3 9 3 с.
4 . Столица. М. Р., Морозова Л. М., Соломко A. II. О п т и
м и з а ц и я с и с т е м ы д л я п р о в е д е н и я г е н е т и к о - э м б р и о л о г и -
ч е с к и х и с с л е д о в а н и й н а и н б р е д н ы х л и н и я х м ы ш е й . 1.
С р а в н и т е л ь н а я о ц е н к а с е з о н н о й п л о д о в и т о с т и с а м о к м ы
ш е й л и н и й B A L B / c L a c , C 5 7 B 1 / 6 J и I C R / / Б и о п о л и м е р ы и
к л е т к а . — 1 9 9 2 . — 8 , № 2 — С . 4 9 — 5 2
5 . Морозова Л. М., Сталина М. Р., Соломко А. П. О п т и
м и з а ц и я с и с т е м ы д л я п р о в е д е н и я генетико-эмбриолиги-
ч е с к и х и с с л е д о в а н и й на и н б р е д н ы х л и н и я х м ы ш е й . 2 .
С р а в н е н и е с п о с о б н о с т и к о п л о д о т в о р е н и ю in vitro у и н -
2 3 7
ВАГИНА И. Н. И Д Р .
б р е д н ы х л и н и й м ы ш е й C 5 7 B I / 6 J и B A L B / c L a c / / Т а м
ж е . — № 3 — С . 3 3 — 3 6 .
6. Wkitten W. К. N u t r i e n t r e q u i r e m e n t s for the cu l ture of
p r e i m p l a n t a t i o n e m b r y o n s in vitro II A d v . B i o s c i . — 1 9 7 1 . —
6 . — P . 1 2 9 — 1 3 9 .
7 . Hogan В., Constantini F., Lacy E. et al M a n i p u l a t i n g the
m o u s e e m b r y o . A l a b o r a t o r y m a n u a l . — N e w York: C o l d S p r i n g
H a r b o r L a b . , 1 9 8 6 . — 3 3 2 p .
8 . Spearow J. L. C h a r a c t e r i z a t i o n of g e n e t i c d i f f e r e n c e s in
h o r m o n e - i n d u c e d o v u l a t i o n r a t e in m i c e / / J. R e p r o d . P e r t . —
1 9 8 8 . — 8 2 . — P . 7 9 9 — 8 0 6 .
9 . Голубица А. H., Амстиславский С. Я., Файзулин P. 3. и
др. С у п е р о в у л я т о р н а я р е а к ц и я у р а з н ы х л и н и й м ы ш е й в
о т в е т н а п в е д е н и е г о н а д о т р о п н ы х п р е п а р а т о в / / П р о б л е м ы
с о х р а н е н и я и п о д д е р ж а н и я г е н е т и ч е с к и х к о л л е к ц и й л а б о
р а т о р н ы х ж и в о т н ы х . К о н с е р в а ц и я г е н е т и ч е с к и х р е с у р с о в :
С б . н а у ч . т р . — П у щ и н о , 1 9 9 1 . — С . 9 3 — 9 7 .
10 . Abramczuk Solter D., Koprowski H. T h e b e n e f i c i a l e f f e c t
of E D T A on d e v e l o p m e n t of m o u s e o n e - c e l l e m b y o s in
c h e m i c a l l y d e f i n e d m e d i u m / / D e v e l o p . B i o l . — 1 9 7 7 . — 6 1 ,
N 2 . — P . 3 7 8 — 3 8 3 .
1 1 . Нониаиівили E. Л/ . , Дыбан А. П. П а р т е н о г е н е т и ч е с к о е
р а з в и т и е я й ц е к л е т о к м ы ш е й , и н д у ц и р о в а н н о е э т и л о в ы м
с п и р т о м и т е п л о в ы м ш о к о м in vitro и in situ II О б щ .
з а к о н о м е р н о с т и и к о н т р о л . м е х а н и з м ы р а н н е г о э м б р и о
г е н е з а м л е к о п и т а ю щ и х в н о р м е и п а т о л о г и и . — Л е н и н г р а д :
Н а у к а , 1 9 8 5 — С . 2 2 — 3 0 .
12 . Luthardt F. W., Donahue R. P r o n u c l e a r D N A s y n t h e s i s in
m o u s e e g g s / / E x p . Ce l l R e s . — 1 9 7 3 . — 8 2 . — P . 1 4 3 — 1 4 5 .
1 3 . Krishna M., Generoso W. M. T i m i n g of s p e r m p e n e t r a t i o n ,
p r o n u c l e a r f o r m a t i o n , p r o n u c l e a r D N A s y n t h e s i s a n d first
c l e a v a g e in na tura l l y o v u l a t e d m o u s e e g g s / / J. E x p . Z o o l . —
1 9 7 7 . — 2 0 2 . — P . 2 4 5 — 2 5 5 .
1 4 . Ifowlett S. K., Bolton V. N. S e q u e n c e a n d r e g u l a t i o n of
m o r p h o l o g i c a l a n d m o l e c u l a r e v e n t s d u r i n g t h e first ce l l c y c l e
of m o u s e e m b r y o g e n e s i s / / J. E m b r y o l . E x p . M o r p h o l . —
1 9 8 5 — 8 7 . — P . 1 7 5 — 2 0 6 .
1 5 . Kaufman M. //., Sachs L. C o m p l e t e p r e i m p l a n t a t i o n d e v e l o p
m e n t in c u l t u r e of p a r t h e n o g e n e t i c m o u s e e m b r y o s / / I b i d . —
1 9 7 6 . — 3 5 . — P . 1 7 9 — 1 9 0 .
16 . Graham C. F.t Lehtonen F. F o r m a t i o n a n d c o n s e q u e n c e s of
cel l p a t t e r n s in p r e i m p l a n t a t i o n m o u s e d e v e l o p m e n t / / I b i d . —
1 9 7 9 . — 4 9 — P . 2 7 7 — 2 9 4 .
1 7 . Goddard M. J., Pratt H. P. M. C o n t r o l of e v e n t s d u r i n g ear ly
c l e a v a g e of the m o u s e e m b r y o : A n a n a l y s i s of the « 2 - c e l l ЬІоск»
/ / I b i d . — 1 9 8 3 . — 7 3 . — P . 11 — 1 3 3 .
1 8 . Дыбан А. П. Р а н н е е р а з в и т и е м л е к о п и т а ю щ и х . — Л . : H a y
к а , 1 9 8 8 — 2 2 8 с.
1 9 . Gulyas В., Wood М., Whittingham D. F u s i o n o n o o c y t e s a n d
d e v e l o p m e n t of o o c y t e fus ion p r o d u c t s in t h e m o u s e / /
D e v e l o p . Bio l . — 1 9 8 4 . - 1 0 1 . — P . 2 4 6 — 2 5 0 .
2 0 . Muggleton-Harris A. L, Whittingham D. G., Wilson I,
C y t o p l a s m i c contro l of p r e i m p l a n t a t i o n d e v e l o p m e n t in vivo in
t h e m o u s e / / N a t u r e . — 1 9 8 2 . — 2 2 9 . — P . 4 6 0 — 4 6 2 .
2 1 . Pratt H. P. M., Muggelton-Harris A. L. C y c l i n g c y t o p l a s m i c
fac tors that p r o m o t e mi tos i s in t h e c u t u r e d 2 - c e l l m o u s e e m b r y o
/ / D e v e l o p m e n t . — 1 9 8 8 . — 1 0 4 . — P . 1 1 5 — 1 2 0 .
2 2 . Van Blerkom J. P r o t e i n s y n t h e s i s d u r i n g o o g e n e s i s / / B i o l o g y
of Fer t i l i za t ion / E d s A. M o n r o y , C . M e t z . — N e w Y o r k ,
1 9 8 3 . — P . 2 8 9 — 3 2 0 .
2 3 . Bolton К N., Oades P. J., Johnson M. M. T h e r e l a t i o n s h i p
b e t w e e n c l e a v a g e , D N A r e p l i c a t i o n a n d g e n e e x p r e s s i o n in the
m o u s e 2 - c e l l e m b r y o / / J. F^mbryol. E x p . M o r p h o l . — 1 9 8 4 . —
7 9 . — P . 1 3 9 — 1 6 3 .
2 4 . Johnson M. H.y Mc Connel G., Van Blerkom J. P r o g r a m m e d
d e v e l o p m e n t in the m o u s e e m b r y o / / I b i d . — 1 9 8 4 . — 8 3 . —
P . 1 9 7 — 2 3 1 .
2 5 . Chatot C. L., Liomek C. A., Bavister B. D. et al. A n i m p r o v e d
c u l t u r e m e d i u m s u p p o r t s d e v e l o p m e n t of r a n d o m bred 1 -cel l
m o u s e e m b r y o s in vitro II J. R e p r o d . Fert i l . — 1 9 8 9 . — 8 6 . —
P . 6 7 9 — 6 8 8 .
2 6 . Lawitts J. A., Biggers J. D. O p t i m i z a t i o n of m o u s e e m b r y o
c u l t u r e m e d i a u s i n g s i m p l e x m e t h o d s / / I b i d . — 1 9 9 1 . — 9 1 . —
P . 5 4 3 — 5 5 6 .
2 7 . Lawitts J. A., Biggers J. D. O v e r c o m i n g the 2 - c e l l b lock by
m o d i f y i n g c o m p o n e n t s in a m o u s e e m b r y o cu l ture m e d i u m / /
B io l . R e p r o d . — 1 9 9 1 . — 4 5 . — P . 2 4 5 — 2 5 1 .
У Д К 5 7 7 . 2 1 8
П о с т у п и л а в р е д а к ц и ю 1 4 . 1 1 . 9 6
2 3 8
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155193 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T17:47:22Z |
| publishDate | 1997 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Вагина, И.Н. Титок, Т.Г. Сарапина, Н.А. Кириченко, И.В. Евсиков, С.В. Соломко, А.П. 2019-06-16T10:36:06Z 2019-06-16T10:36:06Z 1997 Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j / И.Н. Вагина, Т.Г. Титок, Н.А. Сарапина, И.В. Кириченко, С.В. Евсиков, А.П. Соломко // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 3. — С. 232-238. — Бібліогр.: 27 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000484 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155193 577.218 Подобраны наиболее благоприятные условия гормональной стимуляции самок мышей инбредных линий ICR, СВА/Lac, C₅₇BI/6j. Определен спектр оптимальных концентраций гормонов для каждой из исследованных линий мышей. Отработаны условия культивирования зигот различной линейной принадлежности в системе in vitro. Отмечено, что важным моментом, в значительной степени обеспечивающим успех культивирования зигот в системе in vitro, является стадия развития оплодотворенных яйцеклеток, характеризующаяся временем появления и морфологическими особенностями мужского и женского пронуклеусов. Підібрано найсприятливіші умови гормональної стимуляції самок мишей інбредних ліній ICR, СВА/Lac, C₅₇Bl/6j. Визначено спектр оптимальних концентрацій гормонів для кожної з ліній мишей, іцо вивчалася. Відпрацьовано умови культивування зигот різної лінійної приналежності в системі in vitro. Відмічено, що важливим моментом, який в значній мірі забезпечує успіх культивування зигот в системі in vitro, є стадія розвитку запліднених яйцеклітин, що характеризується часом появи та морфологічними особливостями чоловічого та жіночого пронуклеусів. Optimal conditions for hormonal stimulation of females of ICR, CBAlLac and C₅₇Bl/6j have bean worked out The optimal concentration and spectrum of hormones for each strain was determined. Conditions for in vitro culture of zygotes of different strains were elaborated. It was determined that the important thing for successive in vitro culture of zygotes is the stage of development of fertilized ova, which is characterized by the time of appearance of maternal and paternal pronuclei. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Молекулярные механизмы дифференциации Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j Оптимізація системи для проведения генетико-ембріологічних досліджень на інбредних лініях мишей. 3. Умови гормональної стимуляції самок і культивування in vitro зародкі в на доімплантаційній стадії розвитку у мишей інбредних ліній ICR, CBA/Lac та C₅₇BI/6j Optimization of the system for emhryogenetic studies on inbred strains of mice. 3. Conditions of hormonal stimulation of females and in vitro culture of preimplanlation embryos of ICR, CBA/Lac and C₅₇Bl/6j mouse strains Article published earlier |
| spellingShingle | Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j Вагина, И.Н. Титок, Т.Г. Сарапина, Н.А. Кириченко, И.В. Евсиков, С.В. Соломко, А.П. Молекулярные механизмы дифференциации |
| title | Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j |
| title_alt | Оптимізація системи для проведения генетико-ембріологічних досліджень на інбредних лініях мишей. 3. Умови гормональної стимуляції самок і культивування in vitro зародкі в на доімплантаційній стадії розвитку у мишей інбредних ліній ICR, CBA/Lac та C₅₇BI/6j Optimization of the system for emhryogenetic studies on inbred strains of mice. 3. Conditions of hormonal stimulation of females and in vitro culture of preimplanlation embryos of ICR, CBA/Lac and C₅₇Bl/6j mouse strains |
| title_full | Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j |
| title_fullStr | Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j |
| title_full_unstemmed | Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j |
| title_short | Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C₅₇Bl/6j |
| title_sort | оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей. 3. условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий icr, cba/lac и c₅₇bl/6j |
| topic | Молекулярные механизмы дифференциации |
| topic_facet | Молекулярные механизмы дифференциации |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155193 |
| work_keys_str_mv | AT vaginain optimizaciâsistemydlâprovedeniâgenetikoémbriologičeskihissledovaniinainbrednyhliniâhmyšei3usloviâgormonalʹnoistimulâciisamokikulʹtivirovaniâinvitrozarodyšeinadoimplantacionnoistadiirazvitiâumyšeiinbrednyhliniiicrcbalacic57bl6j AT titoktg optimizaciâsistemydlâprovedeniâgenetikoémbriologičeskihissledovaniinainbrednyhliniâhmyšei3usloviâgormonalʹnoistimulâciisamokikulʹtivirovaniâinvitrozarodyšeinadoimplantacionnoistadiirazvitiâumyšeiinbrednyhliniiicrcbalacic57bl6j AT sarapinana optimizaciâsistemydlâprovedeniâgenetikoémbriologičeskihissledovaniinainbrednyhliniâhmyšei3usloviâgormonalʹnoistimulâciisamokikulʹtivirovaniâinvitrozarodyšeinadoimplantacionnoistadiirazvitiâumyšeiinbrednyhliniiicrcbalacic57bl6j AT kiričenkoiv optimizaciâsistemydlâprovedeniâgenetikoémbriologičeskihissledovaniinainbrednyhliniâhmyšei3usloviâgormonalʹnoistimulâciisamokikulʹtivirovaniâinvitrozarodyšeinadoimplantacionnoistadiirazvitiâumyšeiinbrednyhliniiicrcbalacic57bl6j AT evsikovsv optimizaciâsistemydlâprovedeniâgenetikoémbriologičeskihissledovaniinainbrednyhliniâhmyšei3usloviâgormonalʹnoistimulâciisamokikulʹtivirovaniâinvitrozarodyšeinadoimplantacionnoistadiirazvitiâumyšeiinbrednyhliniiicrcbalacic57bl6j AT solomkoap optimizaciâsistemydlâprovedeniâgenetikoémbriologičeskihissledovaniinainbrednyhliniâhmyšei3usloviâgormonalʹnoistimulâciisamokikulʹtivirovaniâinvitrozarodyšeinadoimplantacionnoistadiirazvitiâumyšeiinbrednyhliniiicrcbalacic57bl6j AT vaginain optimízacíâsistemidlâprovedeniâgenetikoembríologíčnihdoslídženʹnaínbrednihlíníâhmišei3umovigormonalʹnoístimulâcíísamokíkulʹtivuvannâinvitrozarodkívnadoímplantacíiníistadíírozvitkuumišeiínbrednihlíníiicrcbalactac57bi6j AT titoktg optimízacíâsistemidlâprovedeniâgenetikoembríologíčnihdoslídženʹnaínbrednihlíníâhmišei3umovigormonalʹnoístimulâcíísamokíkulʹtivuvannâinvitrozarodkívnadoímplantacíiníistadíírozvitkuumišeiínbrednihlíníiicrcbalactac57bi6j AT sarapinana optimízacíâsistemidlâprovedeniâgenetikoembríologíčnihdoslídženʹnaínbrednihlíníâhmišei3umovigormonalʹnoístimulâcíísamokíkulʹtivuvannâinvitrozarodkívnadoímplantacíiníistadíírozvitkuumišeiínbrednihlíníiicrcbalactac57bi6j AT kiričenkoiv optimízacíâsistemidlâprovedeniâgenetikoembríologíčnihdoslídženʹnaínbrednihlíníâhmišei3umovigormonalʹnoístimulâcíísamokíkulʹtivuvannâinvitrozarodkívnadoímplantacíiníistadíírozvitkuumišeiínbrednihlíníiicrcbalactac57bi6j AT evsikovsv optimízacíâsistemidlâprovedeniâgenetikoembríologíčnihdoslídženʹnaínbrednihlíníâhmišei3umovigormonalʹnoístimulâcíísamokíkulʹtivuvannâinvitrozarodkívnadoímplantacíiníistadíírozvitkuumišeiínbrednihlíníiicrcbalactac57bi6j AT solomkoap optimízacíâsistemidlâprovedeniâgenetikoembríologíčnihdoslídženʹnaínbrednihlíníâhmišei3umovigormonalʹnoístimulâcíísamokíkulʹtivuvannâinvitrozarodkívnadoímplantacíiníistadíírozvitkuumišeiínbrednihlíníiicrcbalactac57bi6j AT vaginain optimizationofthesystemforemhryogeneticstudiesoninbredstrainsofmice3conditionsofhormonalstimulationoffemalesandinvitrocultureofpreimplanlationembryosoficrcbalacandc57bl6jmousestrains AT titoktg optimizationofthesystemforemhryogeneticstudiesoninbredstrainsofmice3conditionsofhormonalstimulationoffemalesandinvitrocultureofpreimplanlationembryosoficrcbalacandc57bl6jmousestrains AT sarapinana optimizationofthesystemforemhryogeneticstudiesoninbredstrainsofmice3conditionsofhormonalstimulationoffemalesandinvitrocultureofpreimplanlationembryosoficrcbalacandc57bl6jmousestrains AT kiričenkoiv optimizationofthesystemforemhryogeneticstudiesoninbredstrainsofmice3conditionsofhormonalstimulationoffemalesandinvitrocultureofpreimplanlationembryosoficrcbalacandc57bl6jmousestrains AT evsikovsv optimizationofthesystemforemhryogeneticstudiesoninbredstrainsofmice3conditionsofhormonalstimulationoffemalesandinvitrocultureofpreimplanlationembryosoficrcbalacandc57bl6jmousestrains AT solomkoap optimizationofthesystemforemhryogeneticstudiesoninbredstrainsofmice3conditionsofhormonalstimulationoffemalesandinvitrocultureofpreimplanlationembryosoficrcbalacandc57bl6jmousestrains |