Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек
С помощью аппарата теории мишени был определен размер промежуточных структур, которые возникают в процессе сборки микротрубочек. Их величина соответствует 69–77 димерам тубулина. За допомогою апарату теорії мішені був визначений розмір проміжних структур, які виникають в процесі утворення мікротрубо...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Datum: | 1991 |
| 1. Verfasser: | |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1991
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155243 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек / Б.В. Сорочинский // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 4. — С. 80-82. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859881789095411712 |
|---|---|
| author | Сорочинский, Б.В. |
| author_facet | Сорочинский, Б.В. |
| citation_txt | Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек / Б.В. Сорочинский // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 4. — С. 80-82. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | С помощью аппарата теории мишени был определен размер промежуточных структур, которые возникают в процессе сборки микротрубочек. Их величина соответствует 69–77 димерам тубулина.
За допомогою апарату теорії мішені був визначений розмір проміжних структур, які виникають в процесі утворення мікротрубочок. їх величина відповідає 69–77 димерам тубуліну.
It was determined with target theory the size of intermediate structures which arized during the microtubules assembly. Their size correspond to 69–77 tubuline dimers.
|
| first_indexed | 2025-12-07T15:52:48Z |
| format | Article |
| fulltext |
УДК 576.Э2
Б. В. Сорочинский
ПРИЛОЖЕНИЕ ТЕОРИИ МИШЕНИ
ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ПОЛИМЕРИЗАЦИИЛ МИКРОТРУБОЧЕК
С помощью аппарата теории мишени был определен размер промежуточных структур,
которые возникают в процессе сборки микротрубочек. Их величина соответствует 69—
77 димерам тубу лина.
Введение. Система микротрубочек является центральным звеном в
клеточной организации [1]. Обеспечение процессов внутриклеточной по-
движности, кеппинг рецепторов, участие в образовании эндомембран-
ной системы, компартментализация биохимических процессов, регуля-
ция синтеза белков и нуклеиновых кислот, формирование веретена де-
ления и участие в межклеточных взаимодействиях — вот далеко не
полный перечень тех функций, которые реализуются благодаря цито-
скелетным структурам.
Классические представления о цитоскелете заключались в том, что
это статическая опорная структура клеток. Современные исследования
характеризуют клеточный скелет как высокодинамичную структуру, ко-
торая постоянно обновляется и перестраивается в процессе прохожде-
ния клеток по циклу [2]. Особенности системы микротрубочек как ди-
намических структур во многом предопределяют выполнение свойст-
венных им функций и зависят от способности к самосборке белков,
формирующих микротрубочки. Белки микротрубочек полимеризуются
in vitro при определенных условиях среды (температура, рН, наличие
Mg2+ и GTP, отсутствие Ca2+). Условия реакционной среды сильно вли-
яют на образование микротрубочек и морфологию собранных струк-
тур [3].
Наиболее распространенные методы в изучении процессов полиме-
ризации микротрубочек — электронная микроскопия, седиментационный
анализ, методы структурной химии. В этом сообщении приводятся ре-
зультаты, демонстрирующие возможность использования теории мише-
ни для изучения процесса сборки микротрубочек. Теорию мишени мож-
но рассматривать как часть теории попадания, описывающей взаимо-
действие ионизирующего излучения с веществом. Основная идея тео-
рии мишени заключается в попытке на основе физических факторов
определить число попаданий с тем, чтобы вычислить объем мишени.
Теорию мишени ранее широко использовали для расчета молекулярной
массы различных ферментов и, несмотря на определенные сложности,
эти результаты дали удивительно хорошее совпадение с величинами,
определяемыми физико-химическими методами [4].
Материалы и методы. Микротрубочки выделяли из мозга крупно-
го рогатого скота двумя циклами полимеризации — деполимеризации,
как это описано ранее [5]. Сборку микротрубочек индуцировали по-
вышением температуры растворов до 37 °С и добавлением GTP до кон-
центрации 1 мМ. Регистрировали процесс сборки по изменению оптиче-
ской плотности растворов, измерения проводили на спектрофотометре
DU-8 «Вескшап» (США), длина волны 360 нм, интервалы между изме-
рениями 1 мин.
Растворы микротрубочек облучали гамма-лучами 60Co при мощ-
ности экспозиционной дозы 0,20 Гр/с и температурах 0 и 20 °С.
Результаты и обсуждение. Полимеризация микротрубочек в раство-
ре начинается с образования центров нуклеации, размер которых оце-
нивается в несколько димеров тубулина [6]. Механизмы роста микро-
трубочек на дальнейших стадиях их образования не совсем ясны. Среди
нерешенных остается вопрос о том, как происходит присоединение ту-
булина из раствора к центрам нуклеации, что, собственно, и является
С> Б. В. Сорочинский, 1991.
80 ISSN 0233-7667. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4
полимеризацией микротрубочек. По-видимому, на начальных этапах
сборки микротрубочек образуются сначала двухмерные ленточные
структуры, замыкающиеся вспоследствии в трубчатые образования [7].
Однако размер таких ленточных структур точно не определен. Мы по-
пытались рассчитать их молекулярную массу, используя формальный
аппарат теории мишени.
Процедура расчетов заключалась в следующем. Было изучено вли-
яние ионизирующего излучения на процесс полимеризации микротрубо-
чек, построены дозовых кривые и определено значение D37, что
необходимо для расчета объема ми-
шени [4].
Образование микротрубочек в
растворе сопровождается изменени-
ем их оптической плотности [8].
Кривые изменения оптической плот-
ности микротрубочек в процессе по-
лимеризации можно разбить на не-
сколько участков — лаг-фаза (0—
4 мин), фаза резкого возрастания
оптической плотности (4—12 мин) и
выход кривых на плато (12—
15 мин). По-видимому, эти части
Кривой описывают соответственно " 200 400 600 ООО 1000 1200
нуклеацию и латеральный рост мик- Облучение,Гр
ротрубочек, их элонгацию и прекра-
щение полимеризации, которое достигается при равновесной концент-
рации молекул тубулина в растворе и в составе собранных стоуктуо.
Ионизирующее излучение ингибирует процесс сборки микротрубочек
и это явление имеет дозовую зависимость [8]. Ингибирование
сборки микротрубочек после облучения может быть обусловлено
радиационно-химическими процессами в белках, формирующих эти
структуры [9].
На рисунке приведены дозовые кривые, описывающие в полулога-
рифмических координатах относительную величину абсорбции конт-
рольных и облученных микротрубочек (/, 2 — облучение при 0 и 20 °С
соответственно). Графики построены по значениям абсорбции раство-
ров на 5 мин после начала полимеризации, поскольку задача исследо-
вания заключалась в определении размера промежуточных структур,
характерных для процесса образования микротрубочек. Для дальней-
ших расчетов допускали, что кривые отражают одноударные процессы.
С практической точки зрения это не очень существенное ограничение
[4]. Экстраполяция кривых позволяет определить значение D37 при-
мерно в 700 Гр для образцов, облученных при температуре 20°С, и в
780 Гр для образцов, облученных при 0°С. Допуская, что средняя ве-
личина энергии на первичную ионизацию равняется 60 Эв, можно пос-
ле некоторых преобразований получить формулу для расчета молеку-
лярной массы (ММ) мишени [4]:
MM — 5,8· 1011 /D37.
Подставляя в формулу значения D37, которые определены из гра-
фиков, можно получить значения, соответствующие молекулярной
массе агрегатов, состоящих из 69 (облучение при 0 °С) и 77 димеров
тубулина (20°С). Известно, что микротрубочки состоят из 13 прото-
филаментов [6]. Если предположить, что и ленточные образования
формируются таким же числом протофиламентов, то их линейный раз-
мер будет соответствовать 5—6 димерам тубулина.
Таким образом, теория мишени позволяет получить вполне разум-
ные значения для размеров тех промежуточных структур, которые об-
разуются в процессе полимеризации микро-рубочек.
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 б — 1-284 81
Р е з ю м е
За допомогою апарату теорії мішені був визначений розмір проміжних структур, які
виникають в процесі утворення мікротрубочок. їх величина відповідає 69—77 димерам
тубуліну.
S u m m a r y
It was determined with target theory the size of intermediate structures which arized du-
ring the microtubules assembly. Their size correspond to 69—77 tubuline dimers.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. De Brabander Μ. Microtubules, central elements of cellular organization//Endeavour —
1982.—6, N 3.—P. 124—134.
2. Kirschner M., Mitchison T. Beyond self-assembly: from microtubules to morphogene-
s is / /Cel l .— 1986.—45, N 2.—P. 329—342.
3. Karecla P., Hirst EBayley P. Polymorphism of tubulin assembly in vitro US. Cell
S c i . - 1989.—94, N 1.—P. 479—488.
4. Дертингер Г., Юнг X. Молекулярная радиобиология.— Μ. : Атомиздат, 1973.— 248 с.
5. Прохневекий А. И., Сорочинекий Б. В. Модификация этанолом сборки микротрубо-
чек мозга // Нейрохимия.— 1990 — 9, № 1 — С . 96—100.
6. Bayley P. M., Butler F. М. M., Manser Ε. J. Control of nucleation in microtubules
se l f -assembly/ /FEBS Let.— 1986 —205, N 2 .—P. 230—234.
7. Voter W. A., Erickson H. The kinetics of microtubules assembly 11 J. Biol. Chem.—
1984.—259, N 16.— P. 10430—10438.
8. Сорочинекий Б. В., Прохневекий А. И., Гродзинекий Д. М. Модификация таксолом
процесса сборки облученных микротрубочек//Докл. АН СССР — 1990.—310, № 3,—
С. 735—737.
9. Coss R. D., Bamberg J. R., Dewry W. О. The affects of X irradiation on microtubules
assembly in vitro // Rad. Res.— 1981 —85, N 1.—P. 99—115.
Ин-т клеточ. биологии и генет. инженерии АН УССР, Получено 14.01.91
Киев
УДК 575.127
Я. И. Ратушняк, Η. М. Пивень, С. А. Латыпов, А. М. Самойлов,
А. В. Завгородняя, Ю. Ю. Глеба
ИЗМЕНЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ
РАСТЕНИЙ ТОМАТА МЕТОДОМ «ГАММА-СЛИЯНИЯ»
ПРОТОПЛАСТОВ LYCOPERSICON ESCULENTUM M I L L .
И L. PERUVIANUM VAR. DENTATUM DUN.
Асимметричные соматические гибриды получены между L. esculentum Mill. (пластом-
ный хлорофиллдефектный мутант Pl-alb \) и L. peruvianum var. dentatum Dun. (линии
3767, 3772) в результате слияния мезофильных протопластов культурного томата с
незофильными протопластами дикого вида, облученными гамма-радиацией в дозе
100, 200 Гр. Эти дозы радиации были суперлетальными для протопластов L. peruvia-
num var. dentatum. Гибридные колонии были отобраны по их способности к позелене-
нию; восстановление у них фотосинтетической активности осуществлялось за счет
переноса хлоропластов от L. peruvianum var. dentatum, в то время как протопласты
L. esculentum образовывали белые колонии. Эффективность гибридизации зависела от
дозы облучения протопластов дикого партнера и не превышала 6 %. Полученные гиб-
риды по уровню плоидности, морфологическим (форма и размер куста, опуиленность
стебля, форма листа, число цветков, расположение пестика, окраска и размеры плодов)
и биохимическим (изозимные спектры эстеразы, аспартатаминотрансферазы и кислой
фосфатазы, рестриктные спектры хлоропластной и митохондриальной ДНК) признакам
разделены на шесть фенотипических групп. Формообразование этих групп зависело
от дозы облучения и используемой линии L. peruvianum var. dentatum.
(Є) я . И. Ратушняк, Η. Μ. Пивень, С. А. Латыпов, Α. Μ. Самойлов, Α. В. Завгородняя,
Ю. Ю. Глеба, 1991.
82 ISSN 0233-7067. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155243 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T15:52:48Z |
| publishDate | 1991 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Сорочинский, Б.В. 2019-06-16T14:35:19Z 2019-06-16T14:35:19Z 1991 Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек / Б.В. Сорочинский // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 4. — С. 80-82. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0002E5 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155243 576.32 С помощью аппарата теории мишени был определен размер промежуточных структур, которые возникают в процессе сборки микротрубочек. Их величина соответствует 69–77 димерам тубулина. За допомогою апарату теорії мішені був визначений розмір проміжних структур, які виникають в процесі утворення мікротрубочок. їх величина відповідає 69–77 димерам тубуліну. It was determined with target theory the size of intermediate structures which arized during the microtubules assembly. Their size correspond to 69–77 tubuline dimers. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Клеточная биология Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек Додаток до теорії мішені для вивчення полімеризації мікротрубочок Application of the target theory for the investigation of microtubules polymerization Article published earlier |
| spellingShingle | Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек Сорочинский, Б.В. Клеточная биология |
| title | Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек |
| title_alt | Додаток до теорії мішені для вивчення полімеризації мікротрубочок Application of the target theory for the investigation of microtubules polymerization |
| title_full | Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек |
| title_fullStr | Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек |
| title_full_unstemmed | Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек |
| title_short | Приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек |
| title_sort | приложение теории мишени для изучения полимеризациил микротрубочек |
| topic | Клеточная биология |
| topic_facet | Клеточная биология |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155243 |
| work_keys_str_mv | AT soročinskiibv priloženieteoriimišenidlâizučeniâpolimerizaciilmikrotruboček AT soročinskiibv dodatokdoteoríímíšenídlâvivčennâpolímerizacíímíkrotrubočok AT soročinskiibv applicationofthetargettheoryfortheinvestigationofmicrotubulespolymerization |