Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun
Асимметричные соматические гибриды получены между L. esculentum Mill. (пластомный хлорофиллдефектный мутант Pl-alb 1) и L. peruvianum var. dentatum Dun. (линии 3767, 3772) в результате слияния мезофильных протопластов культурного томата с незофильными протопластами дикого вида, облученными гамма-рад...
Saved in:
| Published in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Date: | 1991 |
| Main Authors: | , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1991
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155245 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun / Я.И. Ратушняк, Н.М. Пивень, С.А. Латыпов, А.М. Самойлов, А.В. Завгородняя, Ю.Ю. Глеба // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 4. — С. 82-91. — Бібліогр.: 23 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859956946256265216 |
|---|---|
| author | Ратушняк, Я.И. Пивень, Н.М. Латыпов, С.А. Самойлов, А.М. Завгородняя, А.В. Глеба, Ю.Ю. |
| author_facet | Ратушняк, Я.И. Пивень, Н.М. Латыпов, С.А. Самойлов, А.М. Завгородняя, А.В. Глеба, Ю.Ю. |
| citation_txt | Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun / Я.И. Ратушняк, Н.М. Пивень, С.А. Латыпов, А.М. Самойлов, А.В. Завгородняя, Ю.Ю. Глеба // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 4. — С. 82-91. — Бібліогр.: 23 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Асимметричные соматические гибриды получены между L. esculentum Mill. (пластомный хлорофиллдефектный мутант Pl-alb 1) и L. peruvianum var. dentatum Dun. (линии 3767, 3772) в результате слияния мезофильных протопластов культурного томата с незофильными протопластами дикого вида, облученными гамма-радиацией в дозе 100, 200 Гр. Эти дозы радиации были суперлетальными для протопластов L. peruvianum var. dentatum. Гибридные колонии были отобраны по их способности к позеленению; восстановление у них фотосинтетической активности осуществлялось за счет переноса хлоропластов от L. peruvianum var. dentatum, в то время как протопласты L. esculentum образовывали белые колонии. Эффективность гибридизации зависела от дозы облучения протопластов дикого партнера и не превышала 6 %. Полученные гибриды по уровню плоидности, морфологическим (форма и размер куста, опушенность стебля, форма листа, число цветков, расположение пестика, окраска и размеры плодов) и биохимическим (изозимные спектры эстеразы, аспартатаминотрансферазы и кислой фосфатазы, рестриктные спектры хлоропластной и митохондриальной ДНК) признакам разделены на шесть фенотипических групп. Формообразование этих групп зависело от дозы облучения и используемой линии L. peruvianum var. dentatum.
Асиметричні соматичні гібриди одержані між L. esculentum Mill, (пластомний хлорофілдефектний мутант Pl-alb 1) та L. peruvianum var. dentatum Dun. (лінії 3767, 3772) в результаті злиття мезофільних протопластів культурного томату з мезофільними протопластами дикого виду, опроміненими гама-радіацією у дозі 100, 200 Гр. Ці дози радіації були суперлетальними для протопластів L. peruvianum var. dentatum. Гібридні колонії були відібрані по їх здібності до позеленіння; відновлення у них фотосинтетичної активності здійснювалось за рахунок переносу хлоропластів від L. peruvianum var. dentatum, в той час як протопласти L. esculentum формували білі колонії. Ефективність гібридизації залежала від дози опромінення протопластів дикого партнера і не перевищувала 6 %. Одержані гібриди по рівню плоїдності, морфологічним (форма та розмір куща, опушеність стебла, форма листя, число квітів, положення маточки, забарвлення та розміри плодів) і біохімічним (ізозимні спектри естерази, аспартатамінотрансферази і кислої фосфатази, рестриктні спектри хлоропластної та мітохондріальної ДНК) ознакам поділені на шість фенотипічних груп. Формоутворення цих груп залежало від дози опромінення та лінії L. peruvianum var. dentatum.
Asymmetric somatic hybrids between Lycopersicon esculentum Mill, (plastome chlorophyll-deficient PL alb 1 mutant) and Lycopersicon peruvianum var. dentatum Dun. (lines 3767, 3772) were obtained by mesophyll protoplast fusion. The protoplasts ot the wild tomato plants were inactivated by the lethal dosage of gamma-irradiation (100 and 200 Gy). The colonies capable of greening were selected. The observed restoration of the photosynthetic activity was because of wild type of chloroplasts were transferred from L. peruvianum var. dentatum. The hybridization efficiency dependent on irradiation dosage but never exceeded 6%. The hybrid obtained were classified into six groups on the bases of their ploidity, morphological (bush form and size, stem tomentosity, leaf form, flower quantity, pistil position, fruit size and colour) and biochemical (esterase, aspartateaminotransferase and acid phosphatase isozymes, restriction pattern of chloroplast and mitochondrial DNAs) traits. The variability of the hybrid plants of these groups dependent upon irradiation dosage and the L. peruvianum var. dentatum genotype.
|
| first_indexed | 2025-12-07T16:19:43Z |
| format | Article |
| fulltext |
Р е з ю м е
За допомогою апарату теорії мішені був визначений розмір проміжних структур, які
виникають в процесі утворення мікротрубочок. їх величина відповідає 69—77 димерам
тубуліну.
S u m m a r y
It was determined with target theory the size of intermediate structures which arized du-
ring the microtubules assembly. Their size correspond to 69—77 tubuline dimers.
СПИСОК Л И Т Е Р А Т У Р Ы
1. De Brabander Μ. Microtubules, central elements of cellular o rgan iza t ion / /Endeavour —
1982.—6, N 3 .—P. 124—134.
2. Kirschner M., Mitchison T. Beyond self-assembly: from microtubules to morphogene-
s is / /Cel l .— 1986.—45, N 2 .—P. 329—342.
3. Karecla P., Hirst E., Bayley P. Polymorphism of tubulin assembly in vitro US. Cell
S c i . - 1989.—94, N 1.—P. 479—488.
4. Дертингер Г., Юнг X. Молекулярная радиобиология.— Μ. : Атомиздат, 1973.— 248 с.
5. Прохневекий А. И., Сорочинекий Б. В. Модификация этанолом сборки микротрубо-
чек мозга // Нейрохимия — 1990 — 9, № 1 — С . 96—100.
6. Bayley P. M., Butler F. М. M., Manser Ε. J. Control of nucleation in microtubules
se l f -assembly / /FEBS Let.— 1986 —205, N 2 .—P. 230—234.
7. Voter W. A., Erickson H. The kinetics of microtubules assembly 11 J. Biol. Chem.—
1984.—259, N 16.— P. 10430—10438.
8. Сорочинекий Б. В., Прохневекий А. И., Гродзинекий Д. М. Модификация таксолом
процесса сборки облученных микротрубочек/ /Докл. АН СССР — 1990.—310, № 3,—
С. 735—737.
9. Coss R. D., Bamberg J. R., Dewry W. О. The affects of X irradiation on microtubules
assembly in vitro // Rad. Res.— 1981 —85, N 1 — P. 99—115.
Ин-т клеточ. биологии и генет. инженерии АН УССР, Получено 14.01.91
Киев
УДК 575.127
Я. И. Ратушняк, Η. М. Пивень, С. А. Латыпов, А. М. Самойлов,
А. В. Завгородняя, Ю. Ю. Глеба
ИЗМЕНЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ
РАСТЕНИЙ ТОМАТА МЕТОДОМ «ГАММА-СЛИЯНИЯ»
ПРОТОПЛАСТОВ LYCOPERSICON ESCULENTUM M I L L .
И L. PERUVIANUM VAR. DENTATUM DUN.
Асимметричные соматические гибриды получены между L. esculentum Mill. (пластом-
ный хлорофиллдефектный мутант Pl-alb \) и L. peruvianum var. dentatum Dun. (линии
3767, 3772) в результате слияния мезофильных протопластов культурного томата с
незофильными протопластами дикого вида, облученными гамма-радиацией в дозе
100, 200 Гр. Эти дозы радиации были суперлетальными для протопластов L. peruvia-
num var. dentatum. Гибридные колонии были отобраны по их способности к позелене-
нию; восстановление у них фотосинтетической активности осуществлялось за счет
переноса хлоропластов от L. peruvianum var. dentatum, в то время как протопласты
L. esculentum образовывали белые колонии. Эффективность гибридизации зависела от
дозы облучения протопластов дикого партнера и не превышала 6 %. Полученные гиб-
риды по уровню плоидности, морфологическим (форма и размер куста, опуиленность
стебля, форма листа, число цветков, расположение пестика, окраска и размеры плодов)
и биохимическим (изозимные спектры эстеразы, аспартатаминотрансферазы и кислой
фосфатазы, рестриктные спектры хлоропластной и митохондриальной ДНК) признакам
разделены на шесть фенотипических групп. Формообразование этих групп зависело
от дозы облучения и используемой линии L. peruvianum var. dentatum.
(Є) я . И. Ратушняк, Η. Μ. Пивень, С. А. Латыпов, Α. Μ. Самойлов, Α. В. Завгородняя,
Ю. Ю. Глеба, 1991.
82 ISSN 0233-7С57. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 6* 8а
Введение. Репродуктивная изоляция видов является основным барье-
ром для свободного комбинирования генетических систем у организ-
мов с половым размножением. Гибридизация соматических клеток рас-
тений позволяет создавать уникальные сочетания ядерных и цигоплаз-
матических генов родительских форм в обход полового скрещивания.
При этом могут преодолеваться ограничения репродуктивного цикла,
связанные с несовместимостью как на спорофитном, так и на гамето-
фитном уровне. Соматическая гибридизация с применением гамма-об-
лучения протопластов одного из партнеров дает возможность получать
асимметричные гибридные формы, содержащие полный хромосомный
набор вида-реципиента и часть хромосом вида, выступающего в роли
донора. При этом увеличивается также вероятность получения цибрид-
ных форм. Подобная интрогрессия может способствовать повышению
частоты рекомбинации в мейотическом цикле соматических гибридов
за счет увеличения уровня обмена в тех частях их генома, которые в
симметричных гибридах блокируются.
В последние годы разработаны и усовершенствованы высокоэффек-
тивные приемы культивирования протопластов, их слияния и селекции
соматических гибридов [1]. Это позволило значительно расширить чис-
ло видов, вовлекаемых в процесс парасексуальной гибридизации, в том
числе и принадлежащих к роду Lycopersicon [2—10]. Соматические
гибриды у томатов были получены в комбинациях L. esculentum Mill.+
-)-L. peruvianum Mill. [5, 8—10] и L. esculentum Mill.-\-L. peruvianum
var. dentatum Dun. [4, 7] . Часть этих растений представляла собой не
только ядерные, но и цитоплазматические гибриды. Фертильные формы
удалось выявить только в комбинации L. esculentum Mill, и L. peruvia-
num Mill. [5, 9, 10]. Д л я соматических гибридов L. esculentum Mill.-\-
-f-L. peruvianum var. dentatum Dun. только у тетраплоидного клона
формировались плоды с единичными жизнеспособными семенами.
В обычных половых кроссах виды L. esculentum и L. peruvianum var.
dentatum проявляют одностороннюю совместимость только в тех слу-
чаях, когда L. esculentum используется как материнская форма, что
полностью исключает получение гибридов с цитоплазмой дикого ви-
да [11, 12].
В настоящем исследовании предполагалось решить следующие за-
дачи: разработать эффективную систему селекции соматических гиб-
ридов L. esculentum Mill.-\-L. peruvianum var. dentatum Dun. при об-
лучении клеток дикого томата гамма-радиацией и провести оценку ге-
нетической изменчивости полученных асимметричных гибридных
растений.
Материалы и методы. В качестве одной родительской формы ис-
пользовали растения L. esculentum MUl., пластомный хлорофиллде-
фектный мутант типа albina Pl-alb 1 на основе сорта Friihe Liebe. Му-
тант выделен и изучен Самсоновой [13]. Семена любезно предоставле-
ны Т. А. Гавриленко (Всесоюз. ин-т растениеводства, Ленинград) .
В качестве другого родителя использовали растения дикого типа L.
peruvianum var. dentatum Dun. (линии 3767, 3772). Семена любезно
предоставлены А. А. Жученко и Η. Ф. Бочарниковой (Ин-т экол. гене-
тики АН МССР, Кишинев). Растения культивировали in vitro на без-
гормональной среде P [14] при температуре 2 6 ± 1 ° С , освещении
3 000 лк и 16-часовом фотопериоде. Листья 20—30-дневных асептиче-
ски выращиваемых растений мацерировали 16 ч в ферментном раство-
ре при 25 °С. Последний содержал 0 ,4% целлюлазы Onozuka R-10
(«Serva», Ф Р Г ) , 0,2 % дриселазы («Sigma», США), 0,5 M сахарозу
и 5 мМ CaCh, рН 5,6. Очистку и слияние изолированных протопластов
проводили, согласно методу Менцеля [15]. Плотность высева прото-
пластов определяли на гемоцитометре. Технология выращивания рас-
тений in vitro и выделения протопластов дикого томата (линий 3767 и
3772) аналогична вышеописанной для культурного томата. Незначи-
тельные отличия следующие. Растения этого вида культивировали на
среде MS [16] с вдвое меньшим количеством макросолей; ферментный
ISSN 0233-7С57. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 6 * 8 а
раствор содержал 0,3 % целлюлазы Onozuka R-IO и 0,15 % дрисела-
зы. Изолированные протопласты L. peruvianum var. dentatum подвер-
гали гамма-облучению дозами от 100 до 800 Гр (С0Со-источник,
10 Гр/мин). После слияния протопласты и гетерокарионы культивиро-
вали в 2 мл среды ТМ-2 [17]. Спустя 2—3 дня протопласты переноси-
ли в пластиковые чашки Петри (90 мм) со свежей средой ТМ-2. Чаш-
ки выставляли на рассеянный свет (1 000 лк ) . После 2—3 недель куль-
тивирования колонии переносили на агаризованную среду ТМ-3 и вы-
ращивали 5—8 дней при освещенности 3 000—4 000 лк. Гибридные кал-
лусы отбирали на регенерационной среде ТМ-4 по признаку позелене-
ния, поскольку протопласты L. peruvianum var. dentatum неспособны
к делению вследствие обработки гамма-лучами, тогда как каллусы L.
esculentum отличались белой окраской и слабым ростом. Д а л е е кал-
лусы выращивали в течение месяца на среде ТМ-4 при 4 000 лк, затем
зеленые протоклоны переносили на свежую среду. Эффективность сли-
яния протопластов определяли по количеству полученных зеленых кал-
лусов. Регенерацию побегов наблюдали через два месяца после нача-
ла эксперимента. Индекс регенерации определяли по количеству зеле-
ных каллусов, способных к морфогенезу. Побеги укореняли на среде
MS для выращивания растений с добавлением 0,1 мг/л нафтилуксус-
ной кислоты. Растения -регенераты высаживали в почву и испытывали
в полевых условиях.
Анализ множественных молекулярных форм ферментов эстеразы,
кислой фосфатазы и аспартатаминотрансферазы проводили в 7,5 %-ном
полиакриламидном геле [18]. Ферменты выявляли по методу [19]. Ми-
тохондрии выделяли из незрелых плодов, а пластиды — из листьев,
митохондриальную (мт) и хлоропластную (хл) Д Н К — по ранее опи-
санным методикам [20, 21] с незначительными модификациями. Д Н К
расщепляли рестрикционными эндонуклеазами PstIi SacI и EcoRl
(НПО «Фермент», Вильнюс). Полученные фрагменты разделяли в
0,8 %-ном агарозном геле. В качестве маркеров использовали фрагмен-
ты Д Н К фага λ.
В полевых условиях в течение двух вегетационных периодов у гиб-
ридных растений изучали размер куста, морфологию листьев, структу-
ру соцветий, элементы цветка, форму и строение плодов [22]. Фертиль-
ность пыльцы определяли ацетокарминовым методом, а жизнеспособ-
ность— проращиванием на смеси, содержащей 1,5% сахарозы, 0,1 %
агара и 0,005 % борной кислоты.
Д л я приготовления препаратов метафазных хромосом использова-
ли корешки клонов, растущих in vitro. Корешки обрабатывали насы-
щенным водным раствором монобромнафталина, фиксировали в ацето-
алкоголе ( 1 : 3 ) и красили в 1 %-ном ацетогематоксилине. Кариотип
каждого растения анализировали на 20—30 метафазных пластинках,
мейоз — на трех гибридных клонах, растущих в поле. Цветочные буто-
ны размером 3—5 мм фиксировали в ацетоалкоголе ( 1 : 3 ) и окраши-
вали в 1 %-ном ацетогематоксилине. Материнские клетки пыльцы про-
сматривали на временных давленых препаратах из пыльников.
Результаты и обсуждение. Были проведены 33 эксперимента по
слиянию мезофильных протопластов L. esculentum и L. peruvianum var.
dentatum. При этом в качестве партнера для слияния с культурным
томатом 24 раза использовали растения линии 3767 и 9 раз — линии
3772. При культивировании протопластов и гетерокарионов выращены
11 840 колоний, из которых отселектированы как гибридные 260 зеле-
ных каллусов. В трех экспериментах из 86 гибридных протоклонов бы-
ли получены 33 растения.
Смесь мезофильных протопластов обоих родителей и продуктов их
слияния культивировали в 2—6 мл среды ТМ-2. К концу второй недели
наблюдали массовые деления. Следует отметить, что обработка прото-
пластов дикого томата гамма-облучением дозой 10 Гр полностью по-
давляла их митотическую активность. Протопласты хлорофильного му-
танта Pl-alb 1 активно делились и формировали каллусы белого цвета.
84 ISSN 0233-7С57. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 6* 8а
Каллусы, определявшиеся как гибридные, отличались зеленой
кой и, как правило, более интенсивным ростом. Частота возник
зеленых каллусов была сравнительно низкой (менее 6 % ) и з
от дозы облучения протопластов дикого партнера. Наибольшиі
гибридных колоний наблюдался при 100—200 Гр. Сроки реге:
побегов и их укоренения для каждого протоклона были разл:
Рис. 1
Часть отобранных гибридных каллусов (до 5 0 % ) погибала и.
генерировала побеги. В среднем индекс регенерационной спс
гибридных протоклонов составил 40 %.
Морфологическую оценку соматических гибридов проводи
левых условиях на примере 22 клонов. Гибридные растения х<
зовались индетерминантным типом куста, который обычно
100—110 см в высоту и был сильно облиственным. Особенност
логии стеблей, листьев, соцветий, цветков и плодов L. escuU
peruvianum var. dentatum (линий 3767, 3772) и их соматиче*
ридов, полученных при дозах облучения 100 и 200 Гр, предст
табл. 1. На рис. 1 показана морфология цветков L. esculent
сорт Friihe Liebe); L. peruvianum var. dentatum (б—линия ί
линия 3772); соматических гибридов (г—1В\ д — 2F- е —
12С- з — IF- и — SH).
При помощи изучения множественных молекулярных фор
зы (рис. 2: Le — L. esculentum Pl-alb 1; Lp 1, Lp2 — соответст
нии 3772 и 3767 L. peruvianum var. dentatum; остальные де
их соматические гибриды), кислой фосфатазы и аспартатамин<
разы подтверждена гибридность по ядру для 16 форм. По ит<
анализов растения клона 1С оказались идентичными культу]
мату. Наличие чужеродного пластома подтверждали данными,
ными при расщеплении х л Д Н К эндонуклеазами EcoRI и Sac*
таты исследований 23 регенерантов показали, что у всех ι
форм, в том числе и у клона 1С, х л Д Н К идентична дикому тоъ
ISSN 0233-7667. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 4
«схождение митохондриального генома определяли на основе анализа
спектров рестрикции мтДНК, используя эндонуклеазу PstI. У семи
изученных гибридных форм м т Д Н К оказалась идентичной культурно-
му томату.
Оба родительских партнера имеют набор хромосом 2 я = 2 х = 2 4 .
При изучении хромосомных чисел у 17 отобранных растений независи-
мого происхождения было обнаружено, что у них размах плоидности
составляет от 24 до 60 хромосом. Большинство растений клонов 1В,
ID—5D, 7D, 8D, I lD—13D были гетероплоидными с модальным числом
хромосом 2я = 4х = 48. Часть гибридов представляла собой анеуплоиды,
содержащие 2п = 4х = 47 (клоны 8D и 13D). Значительное количество
растений гибридных клопов (2С, ЗС, 5С, 7С и 8С) имело пентаплоид-
ньіГі или близкий к нему набор хромосом 2п = 5 х = 6 0 . Нами была так-
же идентифицирована форма 1С, содержащая 24 хромосомы ( 2 п =
= 2х = 24) без каких-либо признаков миксоплоидии. Сопоставление
цитологического анализа хромосомных чисел и электрофореграмм мно-
жественных молекулярных форм энзимов гамма-гибридов позволит πο-
τ а б л и ц а 1
Общая морфологическая характеристика растений L. esculentum, L. peruvianum var. dentatum
№ клона
Морфология
Стебель
Высота, см Опушенность
Лист
Размер, см Окраска
L. esculentum, сорт Frii', е
Liebe
L. peruvianum var. ώ nta-
tum, линия 3767
IB
IC
2С
ЗС
5С
7.С
8С
12С
IF
2F
5F
L.peruvianum var. denta-
tum,, линия 3772
ID
2D
3D
4D
5D
7D
8D
I l D
12D
13D
IH
ЗН
Высокий, 110
Высокий, 135
Высокий, 110
Средний, 65
Высокий, IO1O
То же
Высокий, 140
Высокий, 100
То же
Густоопушен-
ії ый
Неопушенный
То же
Густоопушен-
ны й
Слабоопушен-
ный
То же
Неопушенный
То же
Слабоопушен-
ный
Неопушенный
Средний, 22
Средний, 16
То же
Мелкий, 12
То же
Средний, 16
Средний, 23
То же
»
Средний, 15
Слабоопушен- То же
ный
То же »
Темно-зеленая
То же
»
Светло-зеленая
Темно-зенелая
То же
Светло-зеленая
То же
Неопушенный
Темно-зеленая
То же
П р и м е ч а н и е . Клоны, обозначенные буквами В, С, D, получены при облучении протоплас
вития цветков не отмечати.
86 ISSN 0233-7С57. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 6* 8а
лучить более подробную информацию о том, какие именно хромосомы
облученного партнера-донора утеряны.
Анализ родительских клеток пыльцы, проведенный на растениях
клона IB и 5С, показал, что мейоз у них является нерегулярным. В ди-
акинезе отмечены различные пропорции квадривалентов, бивалентов и
унивалентов, что приводило к аномальному происхождению стадий ме-
тафаза 1 и анафаза 1. Результатом высокого уровня нарушений в ме-
йозе было формирование нежизнеспособных тетрад и как следствие —
стерильности пыльцы. Незначительное количество фертильной пыльцы
было обнаружено у клонов IB, 7D, ЗН, IF, 2F и 5F (менее 9 % ) . Одна-
ко тест на ее жизнеспособность дал отрицательный результат (см.
табл. 2) . У клонов ID—4D, 8D и I lD—13D пыльца была не только
фертильной (до 76 %) , но и жизнеспособной (до 15 % ) .
Исходя из морфологического, биохимического и цитологического
анализа (табл. 1 и 2) полученные нами соматические гибриды можно
разделить на шесть типов. Один из наиболее многочисленных представ-
лен растениями клонов ID—5D, 7D, 8D, I lD—13D. Все они имели
тетраплоидный или близкий к нему набор хромосом (2я = 48), проме-
(линий 3767у 3772) и их соматических гибридов
Морфология
Соцветие
Положение
Плод
Положение
пестика в
Длина, см Число цветков цветке Масса, г Окраска Число гнезд
Среднее, 13
Среднее, 16
Короткое или
среднее
Короткое, 9
Короткое, 5
То же
Очень много
(38)
Очень много
(41)
Малое (5)
To же
Малое (3)
То же
Короче тычи-
нок
Длиннее тычи-
нок
Короче тычи-
нок
То же
Длиннее Т Ы Ч И -
НОК
То же
Мелкие или Красная
средние, 30—60'
Очень мелкие, Светло-зе-
2—З1 леная
Мелкие, 1*5—2'5 Оранжевая
Очень мелкие, Красная
4—8
Очень мелкие, То же
10'—20'
То же »
Малое или
среднее (2—4)
Малое (2)
Малое (2—3')
Малое (2—3)
Малое или
среднее (2—4)
То же
Среднее, 15
Короткое, 10
Короткое или
среднее
Короткое, 7
Среднее, 15'
Среднее, 18
Среднее, 12
То же
Малое (5)
Среднее (7)
То же
Очень много
(3-2)
То же
Короче тычи-
нок
То же
Длиннее тычи-
нок
То же
Мелкие, 15—26 Оранжевая Малое (2—3)
Желтая
То же
Очень мелкие,
5—11
То же
Малое или
среднее (2—4)
То же
Очень мелкие,
2—3
Очень мелкие,
2—5
То же
Светло-зе-
леная
Желтая
То же
Среднее (10') Длиннее тычи- Очень мелкие, Желтая
нок 5—15
Малое (2)
То же
Малое (2—3)
тов L. peruvianum var. dentatum дозой 200 Гр; F, Η—дозой 100 Γρ. На растениях клона IH раз-
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 87
жуточную морфологию листьев. Анализ изоферментов эстеразы и ас-
партатаминотрансферазы подтвердил их гибридность по ядру. Рестрик-
ционный анализ х л Д Н К с помощью эндонуклеазы SacI показал, что
растения этих клонов обладают пластомом L. peruvianum var. dentatum.
Другой наиболее многочисленный тип растений состоит из пяти
клонов (2С, ЗС, 5С, 7С и 8С). Все они имеют сходную с культурным
томатом морфологию листа с искривлением центральной жилки по ти-
1 2 D 7 D В О L p l L p 2 I e I l D 4 D 3 D 1 С
пу мутации entire. У растений данного типа рестриктные спектры
х л Д Н К оказались идентичными спектрами х л Д Н К L. peruvianum var.
Cieniatumi а рестриктные спектры мтДНК соответствовали спектру
мтДНК L. esculentum. Электрофорез эстеразы обнаружил, что ядерный
геном этих растений является гибридным. Число хромосом у различных
клонов находилось в пределах 2п=54—60.
Растения клона 1С, близкие по своей морфологии ко второй груп-
пе, отличались от нее картофельным типом листа без искривления
Т а б л и ц а 2
Морфологическая, цитогенетическая и биохимическая характеристика некоторых
асимметричных гибридов
Морфо- Жизнеспособ-
Биохимический анализ
№ клона
Морфо- Жизнеспособ- Количество № клона логия
листа
ность
пыльцы, % хромосом Эсте-
разы х л Д Н К м т Д Н К
L. esculentum E
L. peruvianum var. dentatum,
линии 3767, 3772 P
IB Г
1С E
2C ME
ЗС ME
5C ME
1С ME
8C ME
ΙΟ Г
2D Г
3D Г
4D Г
7D Г
8D Г
I l D Г
12D Г
13>D Г
79,6 24 E E E
83',2 24 P P P
0 42, 4'6, 4'8 Е + Р P E
— 24 E P —
0 56, 58 Е + Р P E
0 60 Е + Р P E
0 56, 58, 60 Е + Р P E
0 54, 56 Е + Р P E
0' 56 Е + Р P E
1,1 44, 46 Е + Р P —
11,0 46 Е + Р P —
2,7 46, 47 Е + Р P —
2,0і 48 Е + Р P —
0' 46 Е + Р P —
11,0 43, 47 Е + Р P —
1,1 44, 46, 4-7 Е + Р P —
15,3 48 Е + Р P —
9,9 47 Е + Р P —
П р и м е ч а н и е . E — L. esculentum тип; P — L. peruvianum тип; Г — промежуточный
гибридный тип; ME — мутантная вариация культурного типа.
88 ISSN 0233-7С57. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 6* 8а
центральной жилки. Анализ изоформ эстеразы, аспартатаминотранс-
феразы, кислой фосфатазы и рестриктных спектров х л Д Н К выявил, что
форма 1С имеет ядро, унаследованное от L. esculentum, и пластом L.
peruvianum var. dentatum. Метафазные клетки корешков содержали
2^ = 24 хромосомы (см. табл. 2) . Все эти данные указывают на то, что
растения 1С являются цитоплазматическими гибридами (цибридами).
К четвертому типу были отнесены растения клона IB π 12С с
морфологическими признаками строения листа, характерными для вида
L. peruvianum var. dentatum. На электрофореграмме множественных
молекулярных форм эстеразы соматического гибрида IB обнаружены
полосы обоих родителей, однако их спектр больше соответствовал рас-
пределению полос, типичному для дикого томата. Х л Д Н К этого клона
была идентичной L. peruvianum var. dentatum. Растения клона IB об-
ладали хромосомными наборами на тетраплоидном уровне 2я = 42—48.
Морфологические особенности двух последних типов (пятый тип —
клоны IF, 2F и 3F; шестой тип — клоны IH и 2Н) приведены в табл. 1.
Биохимическую и цитологическую оценку этих растений не проводили.
В полевых условиях соматические гибриды характеризовались вы-
сокой жизнеспособностью, обильно цвели и завязывали большое ко-
личество плодов красной, оранжевой и желтой окраски. Средняя мас-
са и размер одного плода были промежуточными между массой и раз-
мером плодов родительских видов (L. esculentum — 30—60 г и 50 мм,
L. peruvianum var. dentatum — 3 г и 15 мм) и составляли от 2—5 г и
20 мм до 25 г и 30 мм соответственно. Следует отметить, что у растений
комбинации L. esculentum-\-L. peruvianum var. dentatum, полученных
без гамма-облучения протопластов, как и у половых межвидовых гиб-
ридов Fi, форма листьев, окраска и размер плодов наследуются с до-
минированием типа L. peruvianum var. dentatum [6, 23]. Некоторые
из них завязывали единичные жизнеспособные семена. При самоопыле-
нии соматических гибридов IB, 2С, ЗС, 5С, 8С формировались партено-
карпические плоды с абортивными зародышами.
Цитологическое исследование материнских клеток пыльцы сомати-
ческих гибридов показало, что на всех стадиях мейоза происходят на-
рушения, типичные для отдаленных гибридов томата [12, 22]. В про-
фазе обнаружено около 98 % мейоцитов с мульти- и унивалентами. Ано-
мальность развития материнских клеток пыльцы на стадиях анафазы
I и II была связана с отставанием отдельных хромосом или хромосом-
ных пар и образованием хроматидных и хромосомных мостов. Особо
следует отметить большое количество (12—18%) мейотических клеток
с фрагментами и мостами, что свидетельствует о наличии у них гетеро-
зиготности по парацентрическим инверсиям. Подобные нарушения у
половых межвидовых гибридов томата происходят с гораздо более низ-
кой частотой и их резкое увеличение у соматических гибридов может
быть одним из последствий воздействия гамма-облучения на ядро про-
топластов дикого партнера. Вероятно, из-за этих аномалий и формиру-
ются микроспоры с нарушенным хромосомным балансом, что и приво-
дит к образованию абортивной пыльцы. Остается пока невыясненным
также и вопрос о роли ядерно-цитоплазматических взаимоотношений в
микроспорогенезе, что также может иметь место при отдаленной
гибридизации.
Таким образом, в результате слияния протопластов L. esculentum
Pl-alb 1 с облученными суперлетальными дозами гамма-радиации про-
топластами L. peruvianum var. dentatum нами получены асимметрич-
ные гибридные растения с новым соотношением ядерных и цитоплазма-
тических детерминант родительских видов. Причем использование та-
кой системы селекции оказалось весьма эффективным. Полученные в
экспериментах гамма-гибриды характеризовались спектром изменчиво-
сти по целому ряду изученных признаков. Это может быть обусловле-
но как необычной генетической конституцией (например, гибридное яд-
р о + п л а с т о м дикого вида и митохондрион культурного томата; ядро
культурного томата и пластом дикого вида) , так и несбалансированно-
ISSN 0233-7667. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 89
стью количества хромосом. Как следствие таких нарушений вполне
реально проявление и неаллельного взаимодействия отдельных генов,
что может приводить к появлению совершенно новых признаков.
Р е з ю м е
Асиметричні соматичні гібриди одержані між L. esculentum Mill, (пластомний хлоро-
філдефектний мутант Pl-alb 1) та L. peruvianum var. dentatum Dun. (лінії 3767, 3772)
в результаті злиття мезофільних протопластів культурного томату з мезофільними про-
топластами дикого виду, опроміненими гама-радіацією у дозі 100, 200 Гр. Ці дози
радіації були суперлетальними для протопластів L. peruvianum var. dentatum. Гібридні
колонії були відібрані по їх здібності до позеленіння; відновлення у них фотосинтетич-
ної активності здійснювалось за рахунок переносу хлоропластів від L. peruvianum var.
dentatum, в той час як протопласти L. esculentum формували білі колонії. Ефективність
гібридизації залежала від дози опромінення протопластів дикого партнера і не пере-
вищувала 6 %. Одержані гібриди по рівню плоїдності, морфологічним (форма та роз-
мір куща, опушеність стебла, форма листя, число квітів, положення маточки, забарвлен-
ня та розміри плодів) і біохімічним (ізозимні спектри естерази, аспартатамінотрансфе-
рази і кислої фосфатази, рестриктні спектри хлоропластної та мітохондріальної ДНК)
ознакам поділені на шість фенотипічних груп. Формоутворення цих груп залежало від
дози опромінення та лінії L. peruvianum var. dentatum.
S u m m a r y
Asymmetric somatic hybrids between Lycopersicon esculentum Mill, (plastome chlo-
rophyll-deficient PL alb 1 mutant) and Lycopersicon peruvianum var. dentatum Dun.
(lines 3767, 3772) were obtained by mesophyll protoplast fusion. The protoplasts ot
the wild tomato plants were inactivated by the lethal dosage of gamma-irradiation (100
and 200 Gy). The colonies capable of greening were selected. The observed restoration
of the photosynthetic activity was because of wild type of chloroplasts were transferred
from L. peruvianum var. dentatum. The hybridization efficiency dependent on irradiation
dosage but never exceeded 6 % . The hybrid obtained were classified into six groups on
the bases of their ploidity, morphological (bush form and size, stem tomentosity, leaf
form, flower quantity, pistil position, fruit size and colour) and biochemical (esterase,
aspar ta teaminotransferase and acid phosphatase isozymes, restriction pattern of chlo-
roplast and mitochondrial DNAs) traits. The variability of the hybrid plants of these
groups dependent upon irradiation dosage and the L. peruvianum var. dentatum genotype.
ОПИСОК Л И Т Е Р А Т У Р Ы
1. Gleba Υ. Y., Sytnik К. Μ. Protoplast fusion. Genetic engineering in higher p l an t s /
Ed. R. Schoerman.— Berlin: Springer, 1984.—P. 220.
2. O'Connell Μ. A., Hanson M. R. Regeneration of somatic hybrid plants formed between
Lycopersicon esculentum and L. pentiellii // Theor. and Appl. Genet.— 1987.— 75,
N 1.—P. 83—89.
3. Adams T. L., Quiros C. F. Somatic hybridization between Lycopersicon peruvianum
and L. pennellii: regenerating ability and antibiotic resistance as selection sys tems/ /
Plant S c i . - 1985.—40, N 3 .—P. 209—219.
4. Соматическая гибридизация Lycopersicon esculentum Mill, и Lycopersicon peruvia-
num v. dentatum / Η. M. Пивень, О. К. Махорина, И. К. Комарницкий и др. // Био-
полимеры и клетка.— 1986.—2, № 3 — С. 136—140.
5. Somatic hybrid plants of Lycopersicon esculentum Mill, and Lycopersicon peruvianum
Mill. / A. Kinsara, S. N. Patnaik, E. C. Cocking, J. B. P o w e r / / J . Plant Physiol.—
1986.— 125, N 3 — P 225—234.
6. Tan M. M. C. Somatic hybridization and cybridization in some Solanaceae: Ph.
D. Thesis.—Amsterdam: Free Univ., 1987.—P. 124.
7. Культура изолированных протопластов — источник новых генетических форм в
роде Lycopersicon I Η. М. Пивень, О. К. Махорина, С. У. Илюбаев, Я. И. Ратушняк //
Гаметная и зиготная селекция растений : Тез. докл.— Кишинев, 1987.— С. 173—176.
в. Somatic hybridization between tomato and other Lycopersicon or Solanum species/
A. ZfvIcer, S. Izhar, O. Soferman et a l . / E d s K- J. Puite et al. // Progr. in plant pro-
toplast res.—Dordrecht: Kluwer, 1988.—P. 225—226.
9. Wijbrandi J. Isolation and characterization of somatic hybrids between Lycopersicon
esculentum and Lycopersicon peruvianum: Ph. D. Thesis.— Wageningen: Agr.
Univ., 1989,—P. 112.
90 ISSN 0233-7667. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 90
10. Morphological and molecular characterization of fertile tetraploid somatic hybrids
produced by protoplast electrofusion and PEG-induced fusion between Lycopersicon
esculentum Mill, and Lycopersicon peruvianum Mill. / L. H. San, F. Vedel, D. Si-
hachakr, R. Remy/ /MoL and Gen. Genet.— 1990,—221, N 1.—P. 17—26.
11. McGuire D. C., Rick С. M. Self-incompatibility in species of Lycopersicon sect.
Eriopersicon and hybrids with Lycopersicon esculentum Ц Hilgardia.— 1985.— 23,
N 2 .—P. 101—124.
12. Косова A. #., Кику В. Η. Цитоэмбриология томата.— Кишинев: Штиинца, 1986.—
С. 230.
13. Самсонова И. А. Изучение изменчивости пластома томата. 1. Характеристика
пластомного мутанта томата/ /Генетика.— 1970.— 6, № 1.— С. 36—41.
14. Chloroplast t ransfer in Nicotiana based on metabolic complementation between irra-
diated and iodoacetate treated protoplasts / V. A. Sidorov, L. Menczel, F. Nagy,
P. Maliga / / P l a n t a . - 1981.— 152, N 4 .—P. 341—345.
15. Streptomycin resistant and sensitive somatic hybrids of Nicotiana tabacum-\-Nicotiana
knightiana: correlation of resistance to N. tabacum plastids / L. Menczel, F. Nagy,
Z. R. Kiss, P. Maliga / /Theor. and Appl. Genet.— 1981.—59, N 3 ,—P. 191 — 195.
16. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with to-
bacco tissue cul tures / /Phys io l . Plant.— 1962 — 15, N 3 ,—P. 473—497.
17. Shahin E. A. Totipotency of tomato protoplas ts / /Theor . and Appl. Genet— 1985.—
69, N 3.— P. 235—240.
18. Brewer G. J. An introduction to isozyme techniques.—New York: Acad, press, 1970.—
P. 230.
19. Maurer H. R. Disk electrophoresis and related techniques of poly-acrylamide gel
electrophoresis.— Berlin: Walter de Gruyter, 1976.— P. 187.
20. Wilson A. /., Chourey P. S. A rapid inexpensive method for the isolation of restrictable
mitochondrial DNA from various plant sources // Plant Cell Rep.— 1984.— 3, N 6.—
P. 237—239.
21. Bookjans G., Stummann B. M., Henningsen K. W. Preparation of chloroplast DNA
from pea plastids isolated in a medium of high ionic s t r eng th / /Ana l Biochem.—
1984,— 141, N 4,— P. 244—247.
22. Широкий унифицированный классификатор СЭВ и международный классификатор
СЭВ рода Lycopersicoti Тоигп. / Под. ред. Е. Я. Глущенко и др. // Генет. ресурсы.—
Л. : Изд-во ВНИИР им. Н. И. Вавилова, 1979.—С. 1—35.
23. Грати И. Г. Цитологические основы формообразования и создания идентифици-
рованного генофонда у томата: Автореф. дис. ... д-ра биол. наук.— Тирасполь,
1986.— 32 с.
Ин-т клеточ. биологии и гснет. инженерии АН УССР, Получено 14.01.91
Киев
УДК 577.1.11:632.938
Г. Ю. Перковская, А. М. Бейдер, А. П. Дмитриев
ИНДУЦИРОВАНИЕ УСТОЙЧИВОСТИ ЛУКА К БОЛЕЗНЯМ
С ПОМОЩЬЮ БИОГЕННЫХ ИНДУКТОРОВ
Методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ) проведен анализ жирных кислот
спиртового экстракта мицелия фитопатогенного гриба Botrytis allii Мипп. Показано
наличие Cis и С20 ненасыщенных жирных кислот. Проведенные полевые испытания пре-
парата, содержащего смесь Cis ненасыщенных жирных кислот, и арахидоновой кислоты
подтверждают возможность использования этих кислот в качестве биогенных индук-
торов. Разработан способ повышения устойчивости растений к болезням, включающий
предпосевную обработку семян биогенными индукторами защитных реакций.
Введение. В последние годы обнаружены метаболиты фитопатогенных
микроорганизмов, которые распознаются растением-хозяином и служат
индукторами защитных реакций. Д о настоящего времени мало извест-
но об активном начале индукторов устойчивости растений (элиситоров),
выделенных из микроорганизмов [1].
Ранее [2] нами показано, что элиситор из мицелия Botrytis allii
Мипп. индуцировал накопление фитоалексинов 1д и 2д и повышал бо-
лезнеустойчивость лука. Обнаруженные в цитоплазме В. allii индукто-
ры защитных реакций оказались высокомолекулярными соединениями
<g) Г. Ю. Перковская, А. М. Бейдер, А. П. Дмитриев, 1991.
ISSN 0233-7667. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 4 91
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155245 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T16:19:43Z |
| publishDate | 1991 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Ратушняк, Я.И. Пивень, Н.М. Латыпов, С.А. Самойлов, А.М. Завгородняя, А.В. Глеба, Ю.Ю. 2019-06-16T14:36:31Z 2019-06-16T14:36:31Z 1991 Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun / Я.И. Ратушняк, Н.М. Пивень, С.А. Латыпов, А.М. Самойлов, А.В. Завгородняя, Ю.Ю. Глеба // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 4. — С. 82-91. — Бібліогр.: 23 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0002E6 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155245 575.127 Асимметричные соматические гибриды получены между L. esculentum Mill. (пластомный хлорофиллдефектный мутант Pl-alb 1) и L. peruvianum var. dentatum Dun. (линии 3767, 3772) в результате слияния мезофильных протопластов культурного томата с незофильными протопластами дикого вида, облученными гамма-радиацией в дозе 100, 200 Гр. Эти дозы радиации были суперлетальными для протопластов L. peruvianum var. dentatum. Гибридные колонии были отобраны по их способности к позеленению; восстановление у них фотосинтетической активности осуществлялось за счет переноса хлоропластов от L. peruvianum var. dentatum, в то время как протопласты L. esculentum образовывали белые колонии. Эффективность гибридизации зависела от дозы облучения протопластов дикого партнера и не превышала 6 %. Полученные гибриды по уровню плоидности, морфологическим (форма и размер куста, опушенность стебля, форма листа, число цветков, расположение пестика, окраска и размеры плодов) и биохимическим (изозимные спектры эстеразы, аспартатаминотрансферазы и кислой фосфатазы, рестриктные спектры хлоропластной и митохондриальной ДНК) признакам разделены на шесть фенотипических групп. Формообразование этих групп зависело от дозы облучения и используемой линии L. peruvianum var. dentatum. Асиметричні соматичні гібриди одержані між L. esculentum Mill, (пластомний хлорофілдефектний мутант Pl-alb 1) та L. peruvianum var. dentatum Dun. (лінії 3767, 3772) в результаті злиття мезофільних протопластів культурного томату з мезофільними протопластами дикого виду, опроміненими гама-радіацією у дозі 100, 200 Гр. Ці дози радіації були суперлетальними для протопластів L. peruvianum var. dentatum. Гібридні колонії були відібрані по їх здібності до позеленіння; відновлення у них фотосинтетичної активності здійснювалось за рахунок переносу хлоропластів від L. peruvianum var. dentatum, в той час як протопласти L. esculentum формували білі колонії. Ефективність гібридизації залежала від дози опромінення протопластів дикого партнера і не перевищувала 6 %. Одержані гібриди по рівню плоїдності, морфологічним (форма та розмір куща, опушеність стебла, форма листя, число квітів, положення маточки, забарвлення та розміри плодів) і біохімічним (ізозимні спектри естерази, аспартатамінотрансферази і кислої фосфатази, рестриктні спектри хлоропластної та мітохондріальної ДНК) ознакам поділені на шість фенотипічних груп. Формоутворення цих груп залежало від дози опромінення та лінії L. peruvianum var. dentatum. Asymmetric somatic hybrids between Lycopersicon esculentum Mill, (plastome chlorophyll-deficient PL alb 1 mutant) and Lycopersicon peruvianum var. dentatum Dun. (lines 3767, 3772) were obtained by mesophyll protoplast fusion. The protoplasts ot the wild tomato plants were inactivated by the lethal dosage of gamma-irradiation (100 and 200 Gy). The colonies capable of greening were selected. The observed restoration of the photosynthetic activity was because of wild type of chloroplasts were transferred from L. peruvianum var. dentatum. The hybridization efficiency dependent on irradiation dosage but never exceeded 6%. The hybrid obtained were classified into six groups on the bases of their ploidity, morphological (bush form and size, stem tomentosity, leaf form, flower quantity, pistil position, fruit size and colour) and biochemical (esterase, aspartateaminotransferase and acid phosphatase isozymes, restriction pattern of chloroplast and mitochondrial DNAs) traits. The variability of the hybrid plants of these groups dependent upon irradiation dosage and the L. peruvianum var. dentatum genotype. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Клеточная биология Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun Зміна генетичної структури рослин томату методом «гамма-злиття» протопластів Lycopersicum esculentum Mill. і L. peruvianum var. Dentatum Dun. Changes of the genetic constitution of the tomato plants by «gamma-fusion» of Lycopersicon esculentum Mill, and Lycopersicon peruvianum var. dentatum dun. protoplasts Article published earlier |
| spellingShingle | Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun Ратушняк, Я.И. Пивень, Н.М. Латыпов, С.А. Самойлов, А.М. Завгородняя, А.В. Глеба, Ю.Ю. Клеточная биология |
| title | Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun |
| title_alt | Зміна генетичної структури рослин томату методом «гамма-злиття» протопластів Lycopersicum esculentum Mill. і L. peruvianum var. Dentatum Dun. Changes of the genetic constitution of the tomato plants by «gamma-fusion» of Lycopersicon esculentum Mill, and Lycopersicon peruvianum var. dentatum dun. protoplasts |
| title_full | Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun |
| title_fullStr | Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun |
| title_full_unstemmed | Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun |
| title_short | Изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов Lycopersicon esculentum Mill. и L. peruvianum var. dentatum dun |
| title_sort | изменение генетической структуры растений томата методом «гамма-слияния» протопластов lycopersicon esculentum mill. и l. peruvianum var. dentatum dun |
| topic | Клеточная биология |
| topic_facet | Клеточная биология |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155245 |
| work_keys_str_mv | AT ratušnâkâi izmeneniegenetičeskoistrukturyrasteniitomatametodomgammasliâniâprotoplastovlycopersiconesculentummillilperuvianumvardentatumdun AT pivenʹnm izmeneniegenetičeskoistrukturyrasteniitomatametodomgammasliâniâprotoplastovlycopersiconesculentummillilperuvianumvardentatumdun AT latypovsa izmeneniegenetičeskoistrukturyrasteniitomatametodomgammasliâniâprotoplastovlycopersiconesculentummillilperuvianumvardentatumdun AT samoilovam izmeneniegenetičeskoistrukturyrasteniitomatametodomgammasliâniâprotoplastovlycopersiconesculentummillilperuvianumvardentatumdun AT zavgorodnââav izmeneniegenetičeskoistrukturyrasteniitomatametodomgammasliâniâprotoplastovlycopersiconesculentummillilperuvianumvardentatumdun AT glebaûû izmeneniegenetičeskoistrukturyrasteniitomatametodomgammasliâniâprotoplastovlycopersiconesculentummillilperuvianumvardentatumdun AT ratušnâkâi zmínagenetičnoístrukturiroslintomatumetodomgammazlittâprotoplastívlycopersicumesculentummillílperuvianumvardentatumdun AT pivenʹnm zmínagenetičnoístrukturiroslintomatumetodomgammazlittâprotoplastívlycopersicumesculentummillílperuvianumvardentatumdun AT latypovsa zmínagenetičnoístrukturiroslintomatumetodomgammazlittâprotoplastívlycopersicumesculentummillílperuvianumvardentatumdun AT samoilovam zmínagenetičnoístrukturiroslintomatumetodomgammazlittâprotoplastívlycopersicumesculentummillílperuvianumvardentatumdun AT zavgorodnââav zmínagenetičnoístrukturiroslintomatumetodomgammazlittâprotoplastívlycopersicumesculentummillílperuvianumvardentatumdun AT glebaûû zmínagenetičnoístrukturiroslintomatumetodomgammazlittâprotoplastívlycopersicumesculentummillílperuvianumvardentatumdun AT ratušnâkâi changesofthegeneticconstitutionofthetomatoplantsbygammafusionoflycopersiconesculentummillandlycopersiconperuvianumvardentatumdunprotoplasts AT pivenʹnm changesofthegeneticconstitutionofthetomatoplantsbygammafusionoflycopersiconesculentummillandlycopersiconperuvianumvardentatumdunprotoplasts AT latypovsa changesofthegeneticconstitutionofthetomatoplantsbygammafusionoflycopersiconesculentummillandlycopersiconperuvianumvardentatumdunprotoplasts AT samoilovam changesofthegeneticconstitutionofthetomatoplantsbygammafusionoflycopersiconesculentummillandlycopersiconperuvianumvardentatumdunprotoplasts AT zavgorodnââav changesofthegeneticconstitutionofthetomatoplantsbygammafusionoflycopersiconesculentummillandlycopersiconperuvianumvardentatumdunprotoplasts AT glebaûû changesofthegeneticconstitutionofthetomatoplantsbygammafusionoflycopersiconesculentummillandlycopersiconperuvianumvardentatumdunprotoplasts |