Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae
Авторами показано, что у дрожжей Saccharomyces cerevisiae регуляция экспрессии генов ADE2 и ADE1, вызванная экзогенным аденином, осуществляется на предтрансляционном уровне. Авторы предполагают, что экспрессия четырех генов пуринового биосинтеза ADE4, ADE2, ADE1 и ADE13 одновременно регулируется экз...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Datum: | 1987 |
| Hauptverfasser: | , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1987
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155287 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae / В.В. Аленин , В.Д. Домкин, А.А. Ковалева, М.Н. Смирнов // Биополимеры и клетка. — 1987. — Т. 3, № 6. — С. 325-326. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859632331005886464 |
|---|---|
| author | Аленин, В.В. Домкин, В.Д. Ковалева, А.А. Смирнов, М.Н. |
| author_facet | Аленин, В.В. Домкин, В.Д. Ковалева, А.А. Смирнов, М.Н. |
| citation_txt | Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae / В.В. Аленин , В.Д. Домкин, А.А. Ковалева, М.Н. Смирнов // Биополимеры и клетка. — 1987. — Т. 3, № 6. — С. 325-326. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Авторами показано, что у дрожжей Saccharomyces cerevisiae регуляция экспрессии генов ADE2 и ADE1, вызванная экзогенным аденином, осуществляется на предтрансляционном уровне. Авторы предполагают, что экспрессия четырех генов пуринового биосинтеза ADE4, ADE2, ADE1 и ADE13 одновременно регулируется экзогенным аденином на транскрипционном уровне.
Авторами показано, що у дріжджів Saccharomyces cerevisiae регуляція експресії генів ADE2 і ADE1, викликана екзогенним аденіном, здійснюється на передтрансляційному рівні. Автори припускають, що експресія чотирьох генів пуринового біосинтезу ADE4, ADE2, ADE1 і ADE13 одночасно регулюється екзогенним аденіном на транскрипційному рівні.
Exogenous adenine has been studied for its influence on the expression of ADE2 and ADE1 genes coding for the primary structure of enzymes: AIR-carboxylase (EC 4.1.1.21) and SAICAR-synthetase (EC 6.3.2.6) in yeast Saccharomyces cerevisiae. It is shown that under the repression conditions (cultivation of yeasts on the complete PEPP medium containing 0.5 g/1 of adenine, concentration of mRNAs necessary for translation of both AIR-carboxylase and SAICAR-synthetase is lower than under nonrepressed conditions (PEPP medium). The activities of the mentioned enzymes are observed to decrease under the repression. The data obtained permit supposing that expression of ADE2 and ADEl genes as well as of two other purine biosynthesis genes — ADE4 and ADE13 is regulated simultaneously by exogenous adenine at the transcriptional level.
|
| first_indexed | 2025-12-07T13:12:05Z |
| format | Article |
| fulltext |
УДК 577.151
РЕГУЛЯЦИЯ ЭКЗОГЕННЫМ АДЕНИНОМ
ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ ADE2 И ADE1,
КОДИРУЮЩИХ СТРУКТУРУ ДВУХ ФЕРМЕНТОВ ПУРИНОВОГО
БИОСИНТЕЗА У ДРОЖЖЕЙ SACCHAROMYCES CEREVISIAE
В. В. Аленин, В. Д. Домкин, А. А. Ковалева, Μ. Н. Смирнов
Известно, что активность некоторых ферментов, непосредственно участвующих в био-
синтезе пуриновых нуклеотидов de novo, уменьшается при добавлении аденина в среду
культивирования дрожжей [1]. К таким ферментам относятся ФРПФ-амидотрансфера-
за (КФ 2.4.2.14) [2], АИР-карбоксилаза (КФ 4.1.1.21) [3], САИКАР-синтетаза (6.3.2.6)
[3] и аденилосукцинатлиаза (КФ 4.3.2.2) [4]. У дрожжей Saccharomyces cerevisiae
первичную структуру этих ферментов кодируют соответственно гены ADE4, ADE2,
ADEl и ADE13.
В литературе не существует единого мнения относительно того, на каком из
этапов реализации генетической информации осуществляется регуляция активностей
указанных ферментов, вызванная экзогенным аденином. Авторы недавно опубликован-
ной работы [5] считают, что в случае гена ADE4 регуляция, вызванная экзогенным
аденином, осуществляется на транскрипционном уровне, поскольку повышение кон-
центрации аденина в культуральной среде приводит к одновременному уменьшению
активности ФРПФ-амидотрансферазы и концентрации соответствующей ей мРНК. Авто-
ры работ [3, 4, 6], в которых исследовалось влияние повышенных концентраций адени-
на в культуральной среде на активности ФРПФ-амидотрансферазы, АИР-карбоксилазы
и САИКАР-синтетазы у прототрофного штамма дрожжей 15В-П4 и у полученных из
него пуриновых ауксотрофов, полагают, что регуляция осуществляется на посттранс-
ляционном уровне, хотя и не исключают возможности других механизмов регуляции.
Нами проведено изучение влияния экзогенного аденина на экспрессию генов
ADE2 и ADE1. Клетки прототрофного штамма 15В-П4 выращивали, как описано в
работе [3], в нерепрессибельных (среда ПЕПФО) и репрессибельных (среда ПЕПФО,
содержащая 0,5 г /л аденина) условиях до середины логарифмической фазы роста.
Выделенную из дрожжевых клеток полиаденилированную м Р Н К [7] наносили на
нитроцеллюлозные фильтры по методу [8]. В точку брали от 0,5 до 8 мкг полиадени-
лированной мРНК. Гибридизацию с радиоактивными зондами, имеющими удельную
радиоактивность (1,5—3) - IO7 имп/мин на мкг ДНК, проводили по описанным мето-
дикам [7]. В качестве зондов использовали фрагменты структурной части генов
Радиоавтограф дот-блот-гибридизации полиаденилированной мРНК,
выделенной из клеток дрожжей, выращенных на средах ПЕПФО (П)
и ПЕПФО, содержащей 0,5 г/л аденина ( П + А ) . В точку наносили
по 4 (а) и 8 мкг (б) полиаденилированной мРНК, выделенной с по-
мощью хроматографии на олиго(сІТ) -целлюлозе. В качестве зонда ис-
пользовали Hindi 11-EcoRI-фрагмент структурной части гена ADEl
[91, меченный (a - 3 2 P)-dCTP
Dot-blot-hybridization of polyadenylated mRNA from the yeast cells grown on P E P P (P)
and P E P P with 0.5 g/1 of adenine ( P + A ) media. 4 μ£ (a) and 8 μ^ (б) of polyadenylated
mRNA purified by the oligo(dT)-cellulose chromatography was applied to each dot. The
(a - 3 2 P)-dCTP labelled HindIII-EcoRI f ragment of the structural part of the ADEl gene
[9] was used as a probe
ADE2 и ADEly которые метили методом ник-трансляции, используя дезоксицитидин-5'-
(а - 3 2 Р) трифосфат. Типичный радиоавтограф дот-блот-гибридизации мРНК, выделен-
ной из клеток, выращенных в репрессибельных и нерепрессибельных условиях, пред-
ставлен на рисунке.
Результаты гибридизации показали, что концентрация матриц, необходимых для
трансляции как АИР-карбоксилазы, так и САИКАР-синтетазы в условиях репрессии
примерно в два раза ниже, чем в нерепрессибельных условиях. При репрессии наблю-
дается также и уменьшение активностей АИР-карбоксилазы [3] и САИКАР-синтета-
зы [3J примерно в два раза. Поскольку концентрация матриц определяется соотноше-
Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. — 1987. — Т. 3, № G 325
ниєм скоростей их синтеза и распада, то одновременное уменьшение активностей ука-
занных ферментов и концентраций соответствующих им м Р Н К является результатом
предтрансляциопных событий. Наиболее вероятно, что в условиях репрессии умень-
шается количество матриц, транскрибирующихся с генов ADE2 и ADE1. Однако нельзя
исключить, что регуляция, вызванная экзогенным аденином, осуществляется на более
поздних предтрансляционных этапах, связанных с созреванием и деградацией мРНК.
Следует отметить, что в использованных нами условиях репрессии наблюдается
примерно двукратное уменьшение активностей ФРПФ-амидотрансферазы [6] и аде-
нилосукцинатлиазы [4]. Полученные результаты дают основание предположить, что
экспрессия четырех генов — ADE4, ADE2, ADEl и ADE13 — а, возможно, и других
генов пуринового биосинтеза одновременно регулируется экзогенным аденином на
транскрипционном уровне.
Авторы признательны А. П. Перевозчикову и В. Н. Яковлеву за консультации
и помощь в освоении ряда методик, а также А. Н. Мясникову за предоставленные
штаммы бактерий Е. Coli1 несущие гены ADE2 и ADEl в составе мультикопийных плаз-
мид, и Ю. В. Андрейчуку за помошь в работе по получению зондов.
REGULATION OF E X P R E S S I O N OF ADE2 AND ADEl G E N E S CODING
FOR THE STRUCTURE OF TWO YEAST SACCHAROMYCES CEREVISIAE
P U R I N E BIOSYNTHESIS ENZYMES BY E X O G E N O U S A D E N I N E
V. V. Alenin, V. D. Domkin, A. A. Kovaleva, M. N. Smirnov
Biological Inst i tute of A. A. Zhdanov University, Leningrad
S u m m a r y
Exogenous adenine has been studied for its influence on the expression of ADE2 and
ADEl genes coding for the primary s t ructure of enzymes: AIR-carboxylase (EC 4.1.1.21)
and SAICAR-synthetase (EC 6.3.2.6) in yeast Saccharomyces cerevisiae. It ;s shown that
under the repression condit ions (cultivation of yeasts on the complete P E P P medium
conta in ing 0.5 g/1 of adenine, concentrat ion of mRNAs necessary for t rans la t ion of both
AIR-carboxylase and SAICAR-synthetase is lower than under nonrepressed condit ions
( P E P P medium) . The activities of the mentioned enzymes are observed to decrease under
the repression. The data obtained permit supposing that expression of ADE2 and ADEl
genes as well as of two other purine biosynthesis genes — ADE4 and ADE13 is regu-
lated s imultaneously by exogenous adenine at the t ranscript ional level.
1. Jones E. WFink G. R. Regulat ion of amino acid and nucleotide biosynthesis in
y e a s t / / М о ї . biology of the yeast Saceharomyces metabolism and gene e x p r e s s i o n /
Eds J. M. St ra thern , E. W. Jones, J. R. Broach .—New York : Cold Spr ing Harbor
Lab., 1982,— P. 171—287.
2. Gross T. SWoods R. A. Regulat ion of de novo purine nucleotide synthesis by enzy-
me repression in Saccharomyees cerevisiae // Heredity.— 1972.— 28, pt 2 . - - P . 275.
3. Изучение регуляции биосинтеза пуринов у дрожжей Saccharomyees cerevisiae /
Д. Э. Дрейлиня, Α. X. Фундули, Т. С. Тюлякова и др. / / Вестн. Лепингр. ун-та —
1981.—2, № 9 .—С. 93—97.
4. Регуляция экзогенным аденином активности ферментов биосинтеза пуриновых ну-
клеотидов de novo у дрожжей / / В. В. Аленин, В. Д . Домкин, В. В. Сиренко,
Μ. Н. С м и р н о в / / Т е з . докл. III Всесоюз. конф. «Биосинтез ферментов микроорга-
низмами».— Кобулети, 1986.— С. 154.
5. Mantsala P., Zalkiti Н. Nucleotide sequence of Saccharomyees cerevisiae ADE4 en-
coding g lu tamine phosphoribosylpyrophosphate a m i d o t r a n s f e r a s e / / J . Biol. Chem.—
1984.— 259, N 13 — P . 8478—8484.
6. Влияние мутаций, затрагивающих биосинтез пуринов de novo на активность фермен-
та ФРПФ-амидотрансферазы у дрожжей / Д . Э. Дрейлиня, Т. С. Тюлякова, Т. Р. Сой-
дла и д р . / / В е с т и . Ленингр. ун-та.— 1981.— 1, № 3 ,—С. 117—118.
7. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Д. Молекулярное клонирование.— М. : Мир, 1984.—
479 с.
8. Determinalion of t issue-type plasminogen-act ivaior mRNA in human and non-human
cell lines by dot-hybridization / G. Opdenakker, A. Billian, G. Volckaert, P De So-
mer / / Biochem. J.— 1985.— 231, N 2.— P. 309—313.
9. Нуклеотиднал последовательность гена ADEl дрожжей Saccharotnyces cerevisiae j
Α. Η. Мясников, Ю. А. Плавник, К. В. Саснаускас и др. / / Б и о о р г . химия.— 1986 —
12, № 4 .—С. 555—558.
Л Г У им. А. А. Ж д а н о в а Получено 23.01.87
326 Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. — 1987. — Т. 3. № 6
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155287 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T13:12:05Z |
| publishDate | 1987 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Аленин, В.В. Домкин, В.Д. Ковалева, А.А. Смирнов, М.Н. 2019-06-16T15:35:04Z 2019-06-16T15:35:04Z 1987 Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae / В.В. Аленин , В.Д. Домкин, А.А. Ковалева, М.Н. Смирнов // Биополимеры и клетка. — 1987. — Т. 3, № 6. — С. 325-326. — Бібліогр.: 9 назв. — рос. 0233-7657 DOI:http://dx.doi.org/10.7124/bc.000207 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155287 577.151 Авторами показано, что у дрожжей Saccharomyces cerevisiae регуляция экспрессии генов ADE2 и ADE1, вызванная экзогенным аденином, осуществляется на предтрансляционном уровне. Авторы предполагают, что экспрессия четырех генов пуринового биосинтеза ADE4, ADE2, ADE1 и ADE13 одновременно регулируется экзогенным аденином на транскрипционном уровне. Авторами показано, що у дріжджів Saccharomyces cerevisiae регуляція експресії генів ADE2 і ADE1, викликана екзогенним аденіном, здійснюється на передтрансляційному рівні. Автори припускають, що експресія чотирьох генів пуринового біосинтезу ADE4, ADE2, ADE1 і ADE13 одночасно регулюється екзогенним аденіном на транскрипційному рівні. Exogenous adenine has been studied for its influence on the expression of ADE2 and ADE1 genes coding for the primary structure of enzymes: AIR-carboxylase (EC 4.1.1.21) and SAICAR-synthetase (EC 6.3.2.6) in yeast Saccharomyces cerevisiae. It is shown that under the repression conditions (cultivation of yeasts on the complete PEPP medium containing 0.5 g/1 of adenine, concentration of mRNAs necessary for translation of both AIR-carboxylase and SAICAR-synthetase is lower than under nonrepressed conditions (PEPP medium). The activities of the mentioned enzymes are observed to decrease under the repression. The data obtained permit supposing that expression of ADE2 and ADEl genes as well as of two other purine biosynthesis genes — ADE4 and ADE13 is regulated simultaneously by exogenous adenine at the transcriptional level. Авторы признательны А. П. Перевозчикову и В. Н. Яковлеву за консультации и помощь в освоении ряда методик, а также А. Н. Мясникову за предоставленные штаммы бактерий Е. Coli1 несущие гены ADE2 и ADEl в составе мультикопийных плазмид, и Ю. В. Андрейчуку за помошь в работе по получению зондов. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Краткие сообщения Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae Регуляція екзогенним аденіном експресії генів ADE2 і ADE1, що кодують структуру двох ферментів пуринового біосинтезу у дріжджів Saccharomyces cerevisiae Regulation of expression of ADE2 AND ADE1 genes coding for the structure of two yeast Saccharomyces cerevisiae purine biosynthesis enzymes by exogenous adenine Article published earlier |
| spellingShingle | Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae Аленин, В.В. Домкин, В.Д. Ковалева, А.А. Смирнов, М.Н. Краткие сообщения |
| title | Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae |
| title_alt | Регуляція екзогенним аденіном експресії генів ADE2 і ADE1, що кодують структуру двох ферментів пуринового біосинтезу у дріжджів Saccharomyces cerevisiae Regulation of expression of ADE2 AND ADE1 genes coding for the structure of two yeast Saccharomyces cerevisiae purine biosynthesis enzymes by exogenous adenine |
| title_full | Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae |
| title_fullStr | Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae |
| title_full_unstemmed | Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae |
| title_short | Регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ADE2 и ADE1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей Saccharomyces cerevisiae |
| title_sort | регуляция экзогенным аденином экспрессии генов ade2 и ade1, кодирующих структуру двух ферментов пуринового биосинтеза у дрожжей saccharomyces cerevisiae |
| topic | Краткие сообщения |
| topic_facet | Краткие сообщения |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155287 |
| work_keys_str_mv | AT aleninvv regulâciâékzogennymadeninomékspressiigenovade2iade1kodiruûŝihstrukturudvuhfermentovpurinovogobiosintezaudrožžeisaccharomycescerevisiae AT domkinvd regulâciâékzogennymadeninomékspressiigenovade2iade1kodiruûŝihstrukturudvuhfermentovpurinovogobiosintezaudrožžeisaccharomycescerevisiae AT kovalevaaa regulâciâékzogennymadeninomékspressiigenovade2iade1kodiruûŝihstrukturudvuhfermentovpurinovogobiosintezaudrožžeisaccharomycescerevisiae AT smirnovmn regulâciâékzogennymadeninomékspressiigenovade2iade1kodiruûŝihstrukturudvuhfermentovpurinovogobiosintezaudrožžeisaccharomycescerevisiae AT aleninvv regulâcíâekzogennimadenínomekspresíígenívade2íade1ŝokoduûtʹstrukturudvohfermentívpurinovogobíosintezuudríždžívsaccharomycescerevisiae AT domkinvd regulâcíâekzogennimadenínomekspresíígenívade2íade1ŝokoduûtʹstrukturudvohfermentívpurinovogobíosintezuudríždžívsaccharomycescerevisiae AT kovalevaaa regulâcíâekzogennimadenínomekspresíígenívade2íade1ŝokoduûtʹstrukturudvohfermentívpurinovogobíosintezuudríždžívsaccharomycescerevisiae AT smirnovmn regulâcíâekzogennimadenínomekspresíígenívade2íade1ŝokoduûtʹstrukturudvohfermentívpurinovogobíosintezuudríždžívsaccharomycescerevisiae AT aleninvv regulationofexpressionofade2andade1genescodingforthestructureoftwoyeastsaccharomycescerevisiaepurinebiosynthesisenzymesbyexogenousadenine AT domkinvd regulationofexpressionofade2andade1genescodingforthestructureoftwoyeastsaccharomycescerevisiaepurinebiosynthesisenzymesbyexogenousadenine AT kovalevaaa regulationofexpressionofade2andade1genescodingforthestructureoftwoyeastsaccharomycescerevisiaepurinebiosynthesisenzymesbyexogenousadenine AT smirnovmn regulationofexpressionofade2andade1genescodingforthestructureoftwoyeastsaccharomycescerevisiaepurinebiosynthesisenzymesbyexogenousadenine |