Дослідження структурно-функціональних властивостей імуногенного фрагмента Кі-67 антигену та отримання до нього полі- і моноклональних антитіл

• Опубліковано в: : Біополімери і клітина
• Дата: 2005
• Автори: Тихонкова, І.О., Лізогубов, В.В., Хожаєнко, Ю.В., Довгопола, О.О., Коровін, С.І., Овчаренко, Г.В., Усенко, В.С., Роднін, М.В., Філоненко, В.В.
• Формат: Стаття
• Мова: Ukrainian
• Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 2005
• Теми: Короткі повідомлення
• Онлайн доступ: https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155318
• Назва журналу: Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
• Цитувати: Дослідження структурно-функціональних властивостей імуногенного фрагмента Кі-67 антигену та отримання до нього полі- і моноклональних антитіл / І.О. Тихонкова, В.В. Лізогубов, Ю.В. Хожаєнко, О.О. Довгопола, С.І. Коровін, Г.В. Овчаренко, В.С. Усенко, М.В. Роднін, В.В. Філоненко // Біополімери і клітина. — 2005. — Т. 21, № 2. — С. 180-183. — Бібліогр.: 9 назв. — укр.

Дослідження особливостей функціонування асоційованих з пухлиною антигенів дає змогу розшири­ти уявлення щодо молекулярних механізмів онкогенезу. Раніше нами ідентифіковано ядерний білок Kі-67 як один із автоантигенів меланоми людини, а кДНК імуногенного фрагмента Kі-67 антигену клоновано в рЕТ23d вектор та експресовано у клітинах бактерій. В представленій роботі рекомбінантний пептид Kі-67, очищений з лізатів клітин бактерій, використано як антиген для отримання полі- і моноклональних антитіл Одержані антитіла застосовано для визначення локалізації Kі-67 антигену в клітинах аденокарциноми молочної залози. Методом імунодот-блот-аналізу встановлено, що одержаному рекомбінантному фрагменту Kі-67 антигену розміром 18 кДа притаманні ДНК-зв'язувальні властивості. Исследование особенностей функционирования ассоциирован­ных с опухолью антигенов дает возможность расширить представления о молекулярных механизмах онкогенеза. Ранее нами идентифицирован ядерный белок Kі-67 как один из аутоантигенов меланомы человека, а к ДНК иммуногенного фрагмента Kі-67 антигена клонирована в pET23d вектор и экспрессирована в клетках бактерий. В представленной рабо­те рекомбинантный пептид Ki-67, очищенный из лизатов клеток бактерий, использован как антиген для получения поли- и моноклональных антител. Выделенные антитела при­менены для определения локализации Ki-67 антигена в клет­ках аденокарциноми молочной железы Методом иммунодотблот-анализа установлено, что полученный рекомбинантный фрагмент Kі-67 антигена размером 18 кДа обладает ДНК-связывающими свойствами. The study of tumor-associated antigens function is a prerequisite for understanding the molecular mechanisms of oncogenesis. Earlier we have determined the nuclear protein Ki-67 as an autoantigen in human melanoma. cDNA of immunogenic fragment of Ki-67 has been cloned into pET23d vector and expressed in bacterial cells. The recombinant fragment of Ki-67 has been purified from the bacterial cell lysate has been used as an antigen for the production of polyclonal and monoclonal antibodies with following detection of Ki-67 in Breast adenocarcinomas. We have shown by the immunodot-blot analysis that the 18 kDa recombinant fragment of Ki-67 possesses a DNA-binding activity.