Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки
Показано, что рекомбинационная активность между гомологичными плазмидами, несущими различные мутантные аллели tet-гена, сохраняется в процессе четырехступенчатой очистки экстрактов из митотических и мейотических клеток дрожжей S. cerevisiae. Реакция требует присутствия ионов Mg²⁺ и не зависит от нал...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Дата: | 1997 |
| Автор: | |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Російська |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1997
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155413 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки / В.С. Смолина // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 4. — С. 274-278. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859816324992073728 |
|---|---|
| author | Смолина, В.С. |
| author_facet | Смолина, В.С. |
| citation_txt | Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки / В.С. Смолина // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 4. — С. 274-278. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Показано, что рекомбинационная активность между гомологичными плазмидами, несущими различные мутантные аллели tet-гена, сохраняется в процессе четырехступенчатой очистки экстрактов из митотических и мейотических клеток дрожжей S. cerevisiae. Реакция требует присутствия ионов Mg²⁺ и не зависит от наличия АТР и dNTP. Молекулярная масса рекомбина- ционного комплекса равна 440–450 к Да,
Показано, що рекомбінаційна активність між гомологічними плазмідами, які несуть різні мутантні алелі tet-гена, зберігається в процесі чотирьохступеневої очистки екстрактів з мітотичних і мейотичних клітин, дріжджів S. cerevisiae. Реакція вимагає присутності іонів Mg²⁺ та не залежить від наявності АТР і dNTP. Молекулярна маса рекомбінаційного комплексу складає 440–450 кДа.
The purification procedure of the extracts from the yeast mitotic and meiotic S. cerevisiae and the recombination activity between homologous plasmids containing different mutant alleles of the fet-gene has been described. The reaction of recombination required Mg²⁺ and was ATP and dNTP-independent. The molecular weight of recombinant complex wax 440–450 kDa.
|
| first_indexed | 2025-12-07T15:22:32Z |
| format | Article |
| fulltext |
ISSN 0233-7657. Биополимеры и клетка. 1997. Т. 13. № 4
Рекомбинационный комплекс из дрожжей
Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки
В , С Смолина
Петербургский институт ядерной физики им, Б. П. Константинова РАН
188350, Гатчина Ленинградской обл.
Показано, что рекомбинационная активность между гомологичными плазмидами, несущими
различные мутантные аллели tet-гена, сохраняется в процессе четырехступенчатой очистки
экстрактов из митотических и мейотических клеток дрожжей S. cerevisiae. Реакция требует
присутствия ионов Mg*+ и не зависит от наличия АТР и dNTP. Молекулярная масса рекомбина-
ционного комплекса равна 440—450 к Да,
Введение. Генетическая рекомбинация — сложный
процесс, в результате которого происходит обмен
генетического материала ДНК. Для исследования
рекомбинации in vitro предложено несколько моде
лей. Общими для всех них являются два типа
событий, вносящих значительный вклад в понима
ние гомологической рекомбинации: 1) образование
гибридной ДНК в результате обмена нитей на
участках гомологии; 2) образование перекрестных
структур нитей ДНК, так называемых структур
Холл идея.
Для доказательства того, что эти явления на
блюдаются при генетической рекомбинации, при
меняются разные методические подходы. Одним из
самых распространенных приемов исследования эн-
зимологии рекомбинации является применение
трансферазной реакции, в которой происходит об
мен нитей на гомологичных участках.
Самые первые и обширные исследования в
этом направлении проведены на У?есЛ-белке из
Escherichia coli [1—3 ]. Стехиометрические количе
ства RecA-бслка связываются в реакции с одноце-
почечными ДНК и осуществляют перенос нитей в
3'—5-направлении, сопровождающийся гидроли
зом АТР.
АТР-зависимая трансферазная активность опи
сана для UvsX-белка бактериофага Т4 [4 ] , RecJ-
белка U. maydis [5, 6 ] . АТР-независимая трансфе-
© В. С. СМОЛИНА, 1997
разная активность была обнаружена у белков, вы
деленных из митотических и мейотических клеток
S. cerevisiae [7, 8 ], В-лимфоидных клеток человека
[9 ], миелобластов человека, клеток HeLa и семен
ников крыс [10] .
Вторым приемом по широте использования при
изучении рекомбинации in vitro является примене
ние мутантных плазмид [11, 121. С помощью этой
системы можно изучать рекомбинационную актив
ность неочищенных экстрактов из различных орга
низмов и проводить сравнительную характеристику
их активности.
Авторы работы [13] осуществили такие иссле
дования на экстрактах из клеток мышей, клеток
лилии, митотических и мейотических клеток дрож
жей.
В работе [11] с помощью электрофореза в
агарозном геле и электронного микроскопа показа
но, что клеточные экстракты дрожжей катализиру
ют реакцию рекомбинации in vitro между гомоло
гическими плазмидами, содержащими различные
мутантные аллели в тетрациклиновом гене. Иссле
дования рекомбинантной ДНК с применением
электрофореза в агарозном геле показали, что ряд
новых видов ДНК образуется во время реакции
рекомбинации. Эти новые виды ДНК мигрируют в
агарозном геле с уменьшенной электрофоретиче-
ской подвижностью по сравнению с субстратной
ДНК.
С помощью электронного микроскопа обнару-
274
жены перекрещенные структуры Холл идея — че-
тырехцепочечные интермедиаты ДНК, возникаю
щие при гомологической или сайт-специфической
генетической рекомбинации. Аналогичные резуль
таты получили и другие авторы [14] с частично
очищенными экстрактами из плаценты человека.
В данной работе приводятся результаты иссле
дования рекомбиногенной активности в процессе
частичной (четырехступенчатой) очистки экстрак
тов из митотических и мейотических клеток дрож
жей S. cerevisiae.
Известно, что в рекомбинации, помимо RecA-
белка, участвует целый ряд различных белков и
стимулирующих факторов. Как этот сложный ком
плекс поведет себя в процессе очистки? Предпола
галось, что, возможно, после первого же этапа
очистки исчезнет рекомбиногенная активность из-
за потери каких-то нуклеаз, «надрезающих» нити
ДНК, или других факторов, участвующих в реком-
бинационном процессе, как это случилось при очи
стке рекомбиногенной активности из клеток чело
века | 1 5 ] . Авторы работы [15] показали, что при
очистке R ее А- подоб ного белка действительно про
исходит разделение пиков активности этого белка
и каких-то стимулирующих факторов, необходи
мых для эффективной рскомбинационной реакции.
При смешивании этих пиков происходило восста
новление исходной активности.
Материалы и методы. Источники экстрактов
и их приготовление. Дрожжи S. cerevisiae, дипло
идные штаммы P r - 2 М А Т а / М А Т а ; SVW1
МАТа/МАТа. Клетки выращивали в среде, содер
жащей в J л 10 г пептона, 2 % глюкозы, 20 мл
дрожжевого автолизата (рН 5,0) . Инкубацию про
водили в течение 16 ч до середины логарифмиче
ской фазы. Затем клетки осаждали, промывали
холодным буфером А (50 мМ трис-HCl, рН 7,5;
1 мМ ЭДТА; 10 % сахарозы), ресуспендировали в
том же буфере (1 г/мл), охлаждали жидким азотом
и хранили при - 7 0 °С.
В случае мейотических клеток после охлажде
ния промывали споруляционной средой (0,3 %-й
ацетат натрия) и инкубировали в этой среде при
30 °С до определенного времени. После споруляции
клетки обрабатывали так же, как и вегетативные.
Перед использованием клетки оттаивали при
комнатной температуре и немедленно помещали в
ледяную баню. Добавляли КС! до концентрации
1 М, 0,5 ЭДТА (рН 8,0) до 1 мМ, PMSF до 0,1 мМ,
2-меркаптоэтанол до 10 мМ и разрушали клеточ
ные стенки прессованием. Клеточный дебрис осаж
дали при 10 000 об/мин. К супернатанту добавляли
25 %-й стрептомицин сульфат до конечной кон
центрации 5 % для удаления клеточной ДНК,
РЕКОМБИНАЦИОННЫЙ КОМПЛЕКС ИЗ Д Р О Ж Ж Е Й S. cerevisiae
выдерживали 30 мин на холоду и при повторном
центрифугировании осадок отбрасывали, к супер
натанту добавляли сульфат аммония до 70 %
насыщения, в течение 30 мин растворяли на ме
шалке и оставляли в холодильнике на несколько
часов.
Образовавшийся осадок осаждали центрифуги
рованием (10 мин, 10 000 об/мин). Осадок ресус
пендировали в буфере Б (20 мМ трис-HCl, рН 7,5;
0,1 мМ ЭДТА, 10 %-й глицерин, 10 мМ 2-меркап
тоэтанол, 0,1 мМ PMSF) и диализовали против
буфера Б с 0,07 М NaCl. Присутствие сульфата
аммония определяли 10 %-м В а С 0 2 . После диализа
экстракт осветляли центрифугированием при
10000 об/мин и получали фракцию 1. Концентра
цию белка в ней определяли спектрофотометриче-
ски. Затем диализат наносили на колонку с DEAE-
целлюлозой, белок элюировали градиентом 0,1 —
0,4 М NaCl в том же буфере (фракция 2) . Фракция
3 — очистка на колонке с Р-целлюлозой градиен
том концентрации NaCl 0,2—0,5 М. И последняя,
четвертая ступень очистки на колонке с UV—
ДНК-целлюлозой градиентом 0,2—0,5 М NaCl.
Рекомбинация in vitro. Рекомбиногенную ак
тивность определяли с использованием системы
межплазмидной рекомбинации in vitro, в основе
которой лежит восстановление функциональной
активности тетрациклинового гена в результате
гомологичной рекомбинации между двумя плазми
дами, одна из которых содержит делецию в сайте
Ват HI данного гена, другая — вставку в сайт
SalGI (рис. 1). При обработке таких плазмид экс
трактами из дрожжей и последующей трансформа
ции ими клеток Z387 Е. coli с дефектным геном
г ее А выявляли число трансформантов, приобрет
ших устойчивость к тетрациклину в результате
рекомбинации.
Реакционная смесь (50 мкл) содержала по
0,5 мкг каждой плазмиды, 35 мМ Hepes, рН 7,8;
2 мМ спермидин, 10 мМ MgCl 2, 1 мМ Д Т Т , 5 мМ
АТР, 0,1 мг/мл BSA, четыре dNTP, концентрация
каждого по 20 мМ и от 0 до 10 мкг белкового
клеточного экстракта. Контрольные образцы содер
жали те же компоненты реакционной смеси, но
вместо клеточного экстракта добавляли дистилли
рованную воду. После инкубации при 30 °С в
течение 1,5 ч ДНК в образцах очищали с помощью
экстракции фенолом и дальнейшим осаждением
двумя объемами этанола с ацетатом аммония. По
сле осаждения ДНК и тщательного высушивания
проб едва заметный осадок ДНК ресуспендировали
в 20 мкл бидистиллированной воды и использовали
для трансформации (через электропорацию) штам
ма Z387.
275
СМОЛИНА В. С
пределах 5—100 раз. В процессе очистки рекомби-
ногенная активность экстрактов повышается и не
зависит от АТР и dNTP.
В таблице приведены данные по определению
рекомбиногенной активности в процессе очистки
дрожжевого экстракта. В контрольных образцах,
где экстракта не добавляли, частота рекомбинации
соответствовала (1—2) * 10 8 .
Данные проведенных экспериментов показыва
ют, что рекомбиногенная активность из дрожжевых
экстрактов в процессе очистки вызывает рекомби
нацию двух мутантных плазмид. Более того, эта
активность в процессе очистки экстрактов из мито-
тических и мейотических клеток возрастает на 2 и
3 порядка соответственно.
Учитывая, что рекомбинационная активность
состоит из многих компонентов, участвующих в
сложном процессе рекомбинации, и сохраняется
при очистке можно предположить, что это должен
быть какой-то высокомолекулярный комплекс.
Молекулярную массу этого комплекса опреде
ляли дважды на колонке с Sephacryl S-300 (75 х
Рис. 1 Субстраты для бесклеточной рекомбинационной систе
мы. Схема эксперимента: 1) инкубация плазмид с клеточным
экстрактом; 2) выделение ДНК из реакционной смеси; 3)
трансформация клеток Е. coli Z3&1 гее, 4) выращивание
бактерий на селективной среде; 5) выделение и рестрикцион-
ный анализ плазмидной ДНК из рекомбинантов
Общее число трансформированных бактериаль
ных клеток определяли по числу ампициллин-ре
зистентных клеток (колоний), а частоту рекомби
нации — как отношение /^/-резистентных рекомби
нантов к числу ампициллин-резистентных
трансформантов.
Результаты и обсуждение. На рис 2 показано
время появления индуцируемой рекомбинационной
активности у штаммов Рг-2 и SVW1 на споруляци-
онной среде.
Хотя оба штамма обладают 100 %-й споруля-
ционной способностью, однако время индукции
активности разное. Очевидно, для рекомбинации
требуются некоторые функции, индуцируемые во
время мейоза, и их наработка у этих штаммов
разнится по времени в 2 раза. Авторы работы [13]
показали, что у дрожжей S. cerevisiae на споруля-
ционной среде пик активности появляется в интер
вале от 5 до 7 ч.
Проведенное нами сравнение рекомбиногенной
активности митотических и мейотических клеток
показало, что при мейозе активность возрастает в
Рис. 2. Рекомбинационная активность экстрактов после перене
сения клеток на споруляционную среду. Каждая точка соответ
ствует 10 мкг экстрактного белка в инкубационной смеси.
Реакцию проводили в течение 90 мин при 30 °С
276
РЕКОМБИНАЦИОННЫЙ КОМПЛЕКС ИЗ Д Р О Ж Ж Е Й S cerevisiae
Очистка рекомбиногенной активности из экстрактов митотических и мейотических клеток дрожжей
Стадия очистки,
клетки
Удельная активность, рекомбинан-
ты/мг белка
Степень очистки
Фракция 1
мейотические
митотические
Фракция 2
мейотические
митотические
Фракция 3
мейотические
митотические
Фракция 4
мейотические
митотические
230
120
23
6,8
5.9
0,68
1,0
0,36
1,3 1 0 z
0,37 1 0 2
6,9-10^
7 , 0 - 1 0 3
4,8 10 4
1 ,3-10 4
3.2 • 10
8.3 1 0 4
53
189
369
351
2461
2243
Объем элюции, мл
Рис. 3. Определение молекулярной массы рекомбинационного
комплекса из дрожжей 5. cerevisiae. Маркерные белки взяты из
набора для калибрования высокомолекулярных белков гель-
фильтрацией фирмы «Pharmacia» (Швеция): 1 — тироглобулин;
2 — ферритин; 3 — БСА; 4 — рибонуклеаза; 5 — цитохром С
х 0,48 см) в буфере (трис-HCl, рН 7,5 с 0,1 М
NaCl) после предварительной очистки (фракция 2) .
На рис 3 показан выход (в мл) белкового пика
из дрожжевого экстракта S. cerevisiae в процессе
элюции с колонки Sephacryl S-300 в сравнении с
объемами белковых маркеров.
Ферритин с молекулярной массой 440 кДа
элюируется во фракции, соответствующей объему
элюции 20,5 мл; исследуемый белковый пик из
дрожжевого экстракта с высокой рекомбиногенной
активностью обнаружен во фракциях, соответству
ющих объему 20,5—21 мл. На основании этих
результатов можно предположить, что в рекомби-
национном процессе у дрожжей S. cerevisiae участ
вует сложный высокомолекулярный комплекс с
молекулярной массой 440—450 кДа.
Исследуемая рекомбиногенная активность из
дрожжевых экстрактов 5. cerevisiae по своим свой
ствам аналогична АТР-независимой рекомбиноген
ной активности, описанной другими авторами в
клетках дрожжей [7, 8 ] и млекопитающих [9, 10] .
Рекомбиногенная активность из дрожжевых
экстрактов отличается в процессе очистки от ак
тивности экстрактов из клеток человека [15] .
Автор благодарит А. Т. Ахмедова, М. Л. Бек-
кера, С. М. Нарыжного и Е. А. Намсараева за
обсуждение результатов.
277
СМОЛИНА В. С.
В. С. С мол і на
Рекомбінаційний комплекс з дріжджів Saccharomyces cerevisiae
у процесі очистки
Резюме
Показано, що рекомбінаційна активність між гомологічними
плазмідами, які несуть різні мутантні алелі let-гена, збе
рігається в процесі чотирьохступеневої очистки екстрактів з
мітотичних і мейотичних клітин, дріжджів S. cerevisiae. Ре
акція вимагає присутності іонів Mg та не залежить від
наявності АТР і dNTP. Молекулярна маса рекомбінаційного
комплексу складає 440—450 кДа.
V. S. Smolina
The recombination complex from the yeast of Sacckaromyces
cerevisiae in purification procedure
Summary
The purification procedure of the extracts from the yeast mitotic and
meiotic S. cerevisiae and the recombination activity between ho
mologous plasmids containing different mutant alleles of the
tet-ggne has been described. The reaction of recombination required.
Mg and was ATP and dNTP-independent. The molecular weight
of recombinant complex was 440—450 kDa.
СПИСОК Л И Т Е Р А Т У Р Ы
1. Radding С. M. The mechanism of conversion deletions and
insertions / / Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol .—1978.—
43 .—P. 1315—1316 .
2. Radding С. M. Recombination on activities of E. coli RecA
protein / / Cell. — 1 9 8 1 . — 2 5 . — P . 3—10.
3. Redding С. M. Homologous pairing and strand exchange in
genetic recombination / / Annu. Rev. Genet .—1982.—16.—
P. 405—437.
4. Formoza T. A., Alberts В. M. DNA-synthesis dependent on
genetic recombination: characterization of a reaction catalyzed
by purified bacteriophage T4 protein / / Cel l .—1988.—47.—
P. 793—808 .
5. Kmiec E. В., Holloman M. K. Homologous pairing of DNA
molecules promouted by a protein from Ustilago II Ibid.—
1982.—29.—P. 367—374 .
6. Kmiec E. В., Holloman W. K. Synapsis promouted by Ustilago
reel protein / / Ibid. 1984 .—36.—P. 5 9 3 - - 5 9 8 .
7. Kolodner R., Evans D. П., Morrison P. T. Purification and
characterization of an activity from Sacch. cerevisiae that
catalyzes homologous pairing and strand exchange / / Proc.
Nat. Acad. Sci. USA.— 1987 .—84, N 1 6 — P . 5580—5584 .
8. Sugino A., Nitiss J . , Resnick M. A. ATP-independent DNA
strand transfer catalyzed by protein (s) from meiotic cells of
the yeast Saccharomyces cerevisiae II Ibid.—1988.—85.—
P. 3883—3887.
9. Hsieh P., Meyn M. S., Camerini-Otero R. D. Partial purifica
tion and characterization of a recombinase from human cells / /
Cel l .—1986.—44.—P. 8 8 5 — 8 9 4 .
10. Ахмедов А. Т., Намсараев E. А., Зайцева E. M. и др.
Изучение рекомбинационной активности в экстрактах кле
ток млекопитающих / / Биополимеры и клетка.—1990.—6,
№ 2.—С. 38—45 .
11. Symington L. S., Fogarty L. М., Kolodner R. Genetic recom
bination of homologous plasmids catalyzed by cell-free extracts
of Saccharomyces cerevisiae II Cell .—1983. — 3 5 , N 3. —
P. 805—813 .
12. Symington L. S. Plasmid recombination intermediates gene
rated in a Saccharomyces cerevisiae cell-free recombination
system / / Мої. and Cell. Biol. — 1 9 8 5 . — 5 . — P . 2361—2368.
13. Hotta Y.y Tabata S., Rouchard R. A. et al. General recombina
tion mechanism in extracts of meiotic cells / / Chromosoma.—
1985 .—93.—P. 1 4 0 — 1 5 1 .
14. Kucherlapati R. S.t Spencer /., Moore P. D. Homologous
recombination catalyzed by human cell extracts / / Мої. and
Cell. Bio l .—1985.—5, N 4 .—P. 7 1 4 — 7 2 0 .
15. Ganea D. P., Moore I. Ch., Kucherlapati R. Characterization
of an ATP-dependent strand transferase from human cells / /
Ibid. — 1 9 8 7 . — 7 . — P . 3 1 2 4 — 3 1 3 0 .
УДК 577.15
Поступила в редакцию 13.01.97
278
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155413 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-07T15:22:32Z |
| publishDate | 1997 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Смолина, В.С. 2019-06-16T19:48:09Z 2019-06-16T19:48:09Z 1997 Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки / В.С. Смолина // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 4. — С. 274-278. — Бібліогр.: 15 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00048A https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155413 577.15 Показано, что рекомбинационная активность между гомологичными плазмидами, несущими различные мутантные аллели tet-гена, сохраняется в процессе четырехступенчатой очистки экстрактов из митотических и мейотических клеток дрожжей S. cerevisiae. Реакция требует присутствия ионов Mg²⁺ и не зависит от наличия АТР и dNTP. Молекулярная масса рекомбина- ционного комплекса равна 440–450 к Да, Показано, що рекомбінаційна активність між гомологічними плазмідами, які несуть різні мутантні алелі tet-гена, зберігається в процесі чотирьохступеневої очистки екстрактів з мітотичних і мейотичних клітин, дріжджів S. cerevisiae. Реакція вимагає присутності іонів Mg²⁺ та не залежить від наявності АТР і dNTP. Молекулярна маса рекомбінаційного комплексу складає 440–450 кДа. The purification procedure of the extracts from the yeast mitotic and meiotic S. cerevisiae and the recombination activity between homologous plasmids containing different mutant alleles of the fet-gene has been described. The reaction of recombination required Mg²⁺ and was ATP and dNTP-independent. The molecular weight of recombinant complex wax 440–450 kDa. Автор благодарит А. Т. Ахмедова, М. Л. Беккера, С. М. Нарыжного и Е. А. Намсараева за обсуждение результатов. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки Рекомбінаційний комплекс з дріжджів Saccharomyces cerevisiae у процесі очистки The recombination complex from the yeast of Saccharomyces cerevisiae in purification procedure Article published earlier |
| spellingShingle | Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки Смолина, В.С. Структура и функции биополимеров |
| title | Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки |
| title_alt | Рекомбінаційний комплекс з дріжджів Saccharomyces cerevisiae у процесі очистки The recombination complex from the yeast of Saccharomyces cerevisiae in purification procedure |
| title_full | Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки |
| title_fullStr | Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки |
| title_full_unstemmed | Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки |
| title_short | Рекомбинационный комплекс из дрожжей Saccharomyces cerevisiae в процессе очистки |
| title_sort | рекомбинационный комплекс из дрожжей saccharomyces cerevisiae в процессе очистки |
| topic | Структура и функции биополимеров |
| topic_facet | Структура и функции биополимеров |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155413 |
| work_keys_str_mv | AT smolinavs rekombinacionnyikompleksizdrožžeisaccharomycescerevisiaevprocesseočistki AT smolinavs rekombínacíiniikomplekszdríždžívsaccharomycescerevisiaeuprocesíočistki AT smolinavs therecombinationcomplexfromtheyeastofsaccharomycescerevisiaeinpurificationprocedure |