Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью

Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью

Провирус адаптированного к уткам варианта вируса Pr-RSV-C и его трансформационно-дефектного мутанта послужил основой для создания репликативно-компетентного вектора td da Pr-RSV-C е~ и вируса-помощника td da Pr-RSV-C е PSNeo, необходимого для упаковки рпликативно-дефектного ретровирусного вектора. Д...

Повний опис

Збережено в:
Бібліографічні деталі
Опубліковано в: :Биополимеры и клетка
Дата:1997
Автори: Кайда, И.В., Цыба, Л.А., Болтовец, П.Н., Кашуба, В.И.
Формат: Стаття
Мова:Russian
Опубліковано: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1997
Теми:
Генно-инженерная биотехнология
Онлайн доступ:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155648
Теги: Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью / И.В. Кайда, Л.А. Цыба, П.Н. Болтовец, В.И. Кашуба // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 5. — С. 408-415. — Бібліогр.: 27 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155648
record_format dspace
spelling Кайда, И.В.
Цыба, Л.А.
Болтовец, П.Н.
Кашуба, В.И.
2019-06-17T09:44:13Z
2019-06-17T09:44:13Z
1997
Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью / И.В. Кайда, Л.А. Цыба, П.Н. Болтовец, В.И. Кашуба // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 5. — С. 408-415. — Бібліогр.: 27 назв. — рос.
0233-7657
DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.00049F
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155648
577.21+578.828
Провирус адаптированного к уткам варианта вируса Pr-RSV-C и его трансформационно-дефектного мутанта послужил основой для создания репликативно-компетентного вектора td da Pr-RSV-C е~ и вируса-помощника td da Pr-RSV-C е PSNeo, необходимого для упаковки рпликативно-дефектного ретровирусного вектора. Для снижения вероятности включения клеточных прото-онкогенов в состав ретровирусного вектора последовательности Е-элемента, предположительно вовлеченные в этот процесс, делетированы. Было показано, что (УГб-клетки, трансформирован­ные последовательностями вируса-помощника td da Pr-RSV-C e'PS'Neo продуцируют вирусные белки, в том числе p27gag7 на уровне, необходимом для. сборки репликативно-дефектного ретровирусного вектора. Помимо этого, из-за модифицирования генома вируса-помощника не происходит включения его собственной РНК в состав вириона и сборки полноценной инфекционной вирусной частицы. Это подтверждается тестированием супернатантов упаковочных клонов методом обратной транскрипции: большинство из них не показывают включения [3Н]ТТР в реакции обратной транскрипции, характерного для репликативно-компетентного вируса.
Провірус адаптованого до качок варіанту вірусу Pr-RSV-C та його трансформаційно-дефектного мутанту став основою для створення реплікативно-компетентного вектора td da Pr-RSV-C е та. вірусу-помічника td da Pr-RSV-C е PS Neo, необхідного для упаковки реплікати&но-дефектного ретро­вірусного вектора. Для того щоб знизити вірогідність вклю­чення клітинних протоопко генів до складу ретровірусного вектора, послідовності Е-елементу, які можуть бути залучені до цього процесу, делетовано. Було показано, що QTb-клітини, трансформовані послідовностями вірусу-помічника td da PrRSV-C е PS Neo, продукують вірусні білки, зокрема p27gag, у кількості, необхідній для складання реплікативно-дефектного ретровірусного вектора. Геном вірусу-помічника модифіковано таким чином, що його власна РНК не включається до складу віріону та не відбувається складання повноцінної інфекційної частинки. Цей факт підтверджено тестуванням супернатантів пакуючих клонів методом зворотної транскрипції: більшість з них не показала включення HTTP у реакції зворотної транскрипції, характерного для регигікативно-ком­петентного вірусу,
We have constructed retroviral vector td da Pr-RSV-C e and helper virus td da Pr-RSV-C e' PS'Neo based on the duck-adapted variant of Pr-RSV-C with the extended host ranger and its transformation-defective mutant. To decrease the risk of transducing cell proto-oncogencs, E-element, supposedly involved in this process, was deleted. In order to obtain helper cell line the QT6 cells have been transfected by helper phismid p td da Pr-RSV-C e'PS~Neo. Packaging cells produce viral proteins, including p27gag, but intact helper virus is not detectable in reverse trans criptaxe assay.
Авторы выражают благодарность С В. Зубаку и А. И. Михаилику за участие в создании ретровирусных конструкций; С. М. Серову — за помощь в создании упаковочных клеток; К. Д. Маковой — за участие в получении ant\-p27gag и Л. Л. Сидорик — за помощь в отработке параметров ELISA системы для определения вирусного p27gag.
ru
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
Биополимеры и клетка
Генно-инженерная биотехнология
Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью
Створення системи для ретровірусного переносу генів за допомогою векторного вірусу на базі Pr-RSV-C з розширеною хазяйською специфічністю
A new retroviral vector system based on the duck-adapted variant of Pr-RSV-C with the extended host ranger
Article
published earlier
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
title Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью
spellingShingle Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью
Кайда, И.В.
Цыба, Л.А.
Болтовец, П.Н.
Кашуба, В.И.
Генно-инженерная биотехнология
title_short Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью
title_full Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью
title_fullStr Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью
title_full_unstemmed Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью
title_sort создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе pr-rsv-c с расширенной хозяйской специфичностью
author Кайда, И.В.
Цыба, Л.А.
Болтовец, П.Н.
Кашуба, В.И.
author_facet Кайда, И.В.
Цыба, Л.А.
Болтовец, П.Н.
Кашуба, В.И.
topic Генно-инженерная биотехнология
topic_facet Генно-инженерная биотехнология
publishDate 1997
language Russian
container_title Биополимеры и клетка
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
format Article
title_alt Створення системи для ретровірусного переносу генів за допомогою векторного вірусу на базі Pr-RSV-C з розширеною хазяйською специфічністю
A new retroviral vector system based on the duck-adapted variant of Pr-RSV-C with the extended host ranger
description Провирус адаптированного к уткам варианта вируса Pr-RSV-C и его трансформационно-дефектного мутанта послужил основой для создания репликативно-компетентного вектора td da Pr-RSV-C е~ и вируса-помощника td da Pr-RSV-C е PSNeo, необходимого для упаковки рпликативно-дефектного ретровирусного вектора. Для снижения вероятности включения клеточных прото-онкогенов в состав ретровирусного вектора последовательности Е-элемента, предположительно вовлеченные в этот процесс, делетированы. Было показано, что (УГб-клетки, трансформирован­ные последовательностями вируса-помощника td da Pr-RSV-C e'PS'Neo продуцируют вирусные белки, в том числе p27gag7 на уровне, необходимом для. сборки репликативно-дефектного ретровирусного вектора. Помимо этого, из-за модифицирования генома вируса-помощника не происходит включения его собственной РНК в состав вириона и сборки полноценной инфекционной вирусной частицы. Это подтверждается тестированием супернатантов упаковочных клонов методом обратной транскрипции: большинство из них не показывают включения [3Н]ТТР в реакции обратной транскрипции, характерного для репликативно-компетентного вируса. Провірус адаптованого до качок варіанту вірусу Pr-RSV-C та його трансформаційно-дефектного мутанту став основою для створення реплікативно-компетентного вектора td da Pr-RSV-C е та. вірусу-помічника td da Pr-RSV-C е PS Neo, необхідного для упаковки реплікати&но-дефектного ретро­вірусного вектора. Для того щоб знизити вірогідність вклю­чення клітинних протоопко генів до складу ретровірусного вектора, послідовності Е-елементу, які можуть бути залучені до цього процесу, делетовано. Було показано, що QTb-клітини, трансформовані послідовностями вірусу-помічника td da PrRSV-C е PS Neo, продукують вірусні білки, зокрема p27gag, у кількості, необхідній для складання реплікативно-дефектного ретровірусного вектора. Геном вірусу-помічника модифіковано таким чином, що його власна РНК не включається до складу віріону та не відбувається складання повноцінної інфекційної частинки. Цей факт підтверджено тестуванням супернатантів пакуючих клонів методом зворотної транскрипції: більшість з них не показала включення HTTP у реакції зворотної транскрипції, характерного для регигікативно-ком­петентного вірусу, We have constructed retroviral vector td da Pr-RSV-C e and helper virus td da Pr-RSV-C e' PS'Neo based on the duck-adapted variant of Pr-RSV-C with the extended host ranger and its transformation-defective mutant. To decrease the risk of transducing cell proto-oncogencs, E-element, supposedly involved in this process, was deleted. In order to obtain helper cell line the QT6 cells have been transfected by helper phismid p td da Pr-RSV-C e'PS~Neo. Packaging cells produce viral proteins, including p27gag, but intact helper virus is not detectable in reverse trans criptaxe assay.
issn 0233-7657
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155648
citation_txt Создание системы для переноса генов посредством ретровируса на основе Pr-RSV-C с расширенной хозяйской специфичностью / И.В. Кайда, Л.А. Цыба, П.Н. Болтовец, В.И. Кашуба // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 5. — С. 408-415. — Бібліогр.: 27 назв. — рос.
work_keys_str_mv AT kaidaiv sozdaniesistemydlâperenosagenovposredstvomretrovirusanaosnoveprrsvcsrasširennoihozâiskoispecifičnostʹû
AT cybala sozdaniesistemydlâperenosagenovposredstvomretrovirusanaosnoveprrsvcsrasširennoihozâiskoispecifičnostʹû
AT boltovecpn sozdaniesistemydlâperenosagenovposredstvomretrovirusanaosnoveprrsvcsrasširennoihozâiskoispecifičnostʹû
AT kašubavi sozdaniesistemydlâperenosagenovposredstvomretrovirusanaosnoveprrsvcsrasširennoihozâiskoispecifičnostʹû
AT kaidaiv stvorennâsistemidlâretrovírusnogoperenosugenívzadopomogoûvektornogovírusunabazíprrsvczrozširenoûhazâisʹkoûspecifíčnístû
AT cybala stvorennâsistemidlâretrovírusnogoperenosugenívzadopomogoûvektornogovírusunabazíprrsvczrozširenoûhazâisʹkoûspecifíčnístû
AT boltovecpn stvorennâsistemidlâretrovírusnogoperenosugenívzadopomogoûvektornogovírusunabazíprrsvczrozširenoûhazâisʹkoûspecifíčnístû
AT kašubavi stvorennâsistemidlâretrovírusnogoperenosugenívzadopomogoûvektornogovírusunabazíprrsvczrozširenoûhazâisʹkoûspecifíčnístû
AT kaidaiv anewretroviralvectorsystembasedontheduckadaptedvariantofprrsvcwiththeextendedhostranger
AT cybala anewretroviralvectorsystembasedontheduckadaptedvariantofprrsvcwiththeextendedhostranger
AT boltovecpn anewretroviralvectorsystembasedontheduckadaptedvariantofprrsvcwiththeextendedhostranger
AT kašubavi anewretroviralvectorsystembasedontheduckadaptedvariantofprrsvcwiththeextendedhostranger
first_indexed 2025-12-07T17:43:11Z
last_indexed 2025-12-07T17:43:11Z
_version_ 1850872317068967936

Схожі ресурси