Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц
Киназа легких цепей миозина (КЛЦМ) играет ключевую роль в механизмах регуляции сокращения гладких мышц. Полученные нами с помощью лазерной корреляционной спектроскопии данные позволяют утверждать, что неактивированная КЛЦМ из гладких мышц в растворе в условиях близких к физиологическим, существует...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Datum: | 1995 |
| Hauptverfasser: | , , , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russian |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1995
|
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155670 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц / A.М. Филенко, А. Собешек, Э.Б. Бабийчук, B.С. Омельянюк, В.М. Данилова, Н.Б. Яновская, А.Ю. Бабенко // Биополимеры и клетка. — 1995. — Т. 11, № 2. — С. 57-68. — Бібліогр.: 25 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155670 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Филенко, А.М. Собешек, А. Бабийчук, Э.Б. Омельянюк, В.С. Данилова, В.М. Яновская, Н.Б. Бабенко, А.Ю. 2019-06-17T10:07:42Z 2019-06-17T10:07:42Z 1995 Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц / A.М. Филенко, А. Собешек, Э.Б. Бабийчук, B.С. Омельянюк, В.М. Данилова, Н.Б. Яновская, А.Ю. Бабенко // Биополимеры и клетка. — 1995. — Т. 11, № 2. — С. 57-68. — Бібліогр.: 25 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0003E1 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155670 591.175.4 Киназа легких цепей миозина (КЛЦМ) играет ключевую роль в механизмах регуляции сокращения гладких мышц. Полученные нами с помощью лазерной корреляционной спектроскопии данные позволяют утверждать, что неактивированная КЛЦМ из гладких мышц в растворе в условиях близких к физиологическим, существует в виде смеси олигомерных и димерных частиц с гидродинамическими диаметрами – 150 и 20 нм соответственно. Эти частицы очевидно находятся в динамическом равновесии. Мы не обнаружили заметных изменений в распределении различных форм киназы в растворе после ее активации при избытке как киназы, так и кальмодулина (СаМ). При значительном избытке киназы по отношению к СаМ ее активность через 5–10 мин уменьшается в несколько раз. По-видимому, наблюдаемое ингибирование киназы перед добавлением субстрата связано с медленными конформационными изменениями активированных молекул киназы, о чем свидетельствуют результаты проведенных нами флюоресцентных исследований. Подобные перестройки отмечаются и при эквимолярном соотношении киназы и СаМ, однако в этом случае они характеризуются меньшей глубиной и незначительным понижением активности КЛЦМ. Медленные конформационные перестройки в надмолекулярных структурах активированной киназы. скорее всего имеют коллективный характер и связаны с усилением взаимного влияния между молекулами киназы. приводящего к ослаблению связывания Са²⁺-СаМ. В качестве рабочей гипотезы можно предположить, что в надмолекулярных комплексах активированной киназы устанавливаются взаимодействия псевдосубстратного участка одной молекулы t активным центром соседней с возникновением стерических препятствий для связывания СаМ. Кіназа легких ланцюгів міозина (КЛЛМ) відіграє ключову роль у механізмах регуляції скорочення гладеньких м'язів. Отримані нами за допомогою лазерної кореляційної спектроскопії дані дозволяють стверджувати що неактивована КЛЛМ із гладеньких м'язів у розчині за умов, близьких до фізіологічних, існує у вигляді суміші олігомерних і димерних частинок з гідродинамічними діаметрами –150 і 20 нм відповідно. Ці частинки, очевидно, знаходяться у динамічній рівновазі. Ми не виявили помітних змін у розподілі різних форм кінази у розчині після її активації як при надлишку кінази, так і кальмодуліну (СаМ). При значному надлишку кінази відносно СаМ її активність через 5–10 хв. зменшується у декілька разів. Може бути, що спостережене пригнічення кінази перед внесенням субстрата пов'язане з повільними конформаційнимн змінами активованих молекул кінази, про що свідчать результати здійснених нами флюоресцентних досліджень. Подібні перебудови відмічаються і при еквімолярному співвідношенні кінази і СаМ, проте в цьому випадку вони менш глибокі і характеризуються незначним зниженням активності КЛЛМ. Повільні конформаційні перебудови в надмолекулярних структурах активованої кінази, скоріш за все, мають колективний характер і пов'язані з підсиленням взаємного впливу між молекулами кінази, який призводить до ослаблення зв'язування Са²⁺ -СаМ. Спираючись на вищевикладене, можна припустити, що у надмолекулярних комплексах активованої кінази мають місце взаємодії псевдосубстратної ділянки однієї молекули з активним центром сусідньої, що супроводжується появою стеричних перешкод для зв'язування СаМ. The data received by the use of lazer correlation spectroscopy (LCS) suggest that inactive MLCK under conditions close to the physiological exists as mixture of oligomeric and dimeric particles with hydrodynamic diameters about 150 and 20 nm, respectively. These particles should be in dynamic equilibrium. We could not discover noticeable alteration in different kinase species distribution at both kinase or calmodulin excess in solution. At considerable excess of kinase over calmodulin the activity of the former is decreased several times after 5 to 10 min from the moment of its activation. Observed kinase inhibition in the preincubation time (before addition of substrate) must be connected with slow conformational rearrangements of activated kinase molecules which is directly confirmed by the results of our fluorescent studies. Such conformational rearrangements accompanied by the reduction of MLCK towards CaM affinity take place also at equimolar ratios of kinase to CaM, but in this case they are characterised by the lesser depth and insignificant MLCK activity decrease. Slow conformation changes in supramolecular structures of activated kinase are believed to have collective character and to be connected with intensification of mutual influence of kinase molecules leading to reduction of CaM binding. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц Надмолекулярна організація і активність кінази легких ланцюгів міозина гладеньких м'язів Supramolecular organisation and activity of smooth muscle myosin light chain kinase Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц |
| spellingShingle |
Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц Филенко, А.М. Собешек, А. Бабийчук, Э.Б. Омельянюк, В.С. Данилова, В.М. Яновская, Н.Б. Бабенко, А.Ю. |
| title_short |
Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц |
| title_full |
Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц |
| title_fullStr |
Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц |
| title_full_unstemmed |
Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц |
| title_sort |
надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц |
| author |
Филенко, А.М. Собешек, А. Бабийчук, Э.Б. Омельянюк, В.С. Данилова, В.М. Яновская, Н.Б. Бабенко, А.Ю. |
| author_facet |
Филенко, А.М. Собешек, А. Бабийчук, Э.Б. Омельянюк, В.С. Данилова, В.М. Яновская, Н.Б. Бабенко, А.Ю. |
| publishDate |
1995 |
| language |
Russian |
| container_title |
Биополимеры и клетка |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Надмолекулярна організація і активність кінази легких ланцюгів міозина гладеньких м'язів Supramolecular organisation and activity of smooth muscle myosin light chain kinase |
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155670 |
| citation_txt |
Надмолекулярная организация и активность киназы легких цепей миозина гладких мышц / A.М. Филенко, А. Собешек, Э.Б. Бабийчук, B.С. Омельянюк, В.М. Данилова, Н.Б. Яновская, А.Ю. Бабенко // Биополимеры и клетка. — 1995. — Т. 11, № 2. — С. 57-68. — Бібліогр.: 25 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT filenkoam nadmolekulârnaâorganizaciâiaktivnostʹkinazylegkihcepeimiozinagladkihmyšc AT sobešeka nadmolekulârnaâorganizaciâiaktivnostʹkinazylegkihcepeimiozinagladkihmyšc AT babiičukéb nadmolekulârnaâorganizaciâiaktivnostʹkinazylegkihcepeimiozinagladkihmyšc AT omelʹânûkvs nadmolekulârnaâorganizaciâiaktivnostʹkinazylegkihcepeimiozinagladkihmyšc AT danilovavm nadmolekulârnaâorganizaciâiaktivnostʹkinazylegkihcepeimiozinagladkihmyšc AT ânovskaânb nadmolekulârnaâorganizaciâiaktivnostʹkinazylegkihcepeimiozinagladkihmyšc AT babenkoaû nadmolekulârnaâorganizaciâiaktivnostʹkinazylegkihcepeimiozinagladkihmyšc AT filenkoam nadmolekulârnaorganízacíâíaktivnístʹkínazilegkihlancûgívmíozinagladenʹkihmâzív AT sobešeka nadmolekulârnaorganízacíâíaktivnístʹkínazilegkihlancûgívmíozinagladenʹkihmâzív AT babiičukéb nadmolekulârnaorganízacíâíaktivnístʹkínazilegkihlancûgívmíozinagladenʹkihmâzív AT omelʹânûkvs nadmolekulârnaorganízacíâíaktivnístʹkínazilegkihlancûgívmíozinagladenʹkihmâzív AT danilovavm nadmolekulârnaorganízacíâíaktivnístʹkínazilegkihlancûgívmíozinagladenʹkihmâzív AT ânovskaânb nadmolekulârnaorganízacíâíaktivnístʹkínazilegkihlancûgívmíozinagladenʹkihmâzív AT babenkoaû nadmolekulârnaorganízacíâíaktivnístʹkínazilegkihlancûgívmíozinagladenʹkihmâzív AT filenkoam supramolecularorganisationandactivityofsmoothmusclemyosinlightchainkinase AT sobešeka supramolecularorganisationandactivityofsmoothmusclemyosinlightchainkinase AT babiičukéb supramolecularorganisationandactivityofsmoothmusclemyosinlightchainkinase AT omelʹânûkvs supramolecularorganisationandactivityofsmoothmusclemyosinlightchainkinase AT danilovavm supramolecularorganisationandactivityofsmoothmusclemyosinlightchainkinase AT ânovskaânb supramolecularorganisationandactivityofsmoothmusclemyosinlightchainkinase AT babenkoaû supramolecularorganisationandactivityofsmoothmusclemyosinlightchainkinase |
| first_indexed |
2025-12-07T20:32:13Z |
| last_indexed |
2025-12-07T20:32:13Z |
| _version_ |
1850882951447838720 |
| description |
Киназа легких цепей миозина (КЛЦМ) играет ключевую роль в механизмах регуляции сокращения гладких мышц. Полученные нами с помощью лазерной корреляционной спектроскопии данные позволяют утверждать, что неактивированная КЛЦМ из гладких мышц в растворе в условиях близких к физиологическим, существует в виде смеси олигомерных и димерных частиц с гидродинамическими диаметрами – 150 и 20 нм соответственно. Эти частицы очевидно находятся в динамическом равновесии. Мы не обнаружили заметных изменений в распределении различных форм киназы в растворе после ее активации при избытке как киназы, так и кальмодулина (СаМ). При значительном избытке киназы по отношению к СаМ ее активность через 5–10 мин уменьшается в несколько раз. По-видимому, наблюдаемое ингибирование киназы перед добавлением субстрата связано с медленными конформационными изменениями активированных молекул киназы, о чем свидетельствуют результаты проведенных нами флюоресцентных исследований. Подобные перестройки отмечаются и при эквимолярном соотношении киназы и СаМ, однако в этом случае они характеризуются меньшей глубиной и незначительным понижением активности КЛЦМ. Медленные конформационные перестройки в надмолекулярных структурах активированной киназы. скорее всего имеют коллективный характер и связаны с усилением взаимного влияния между молекулами киназы. приводящего к ослаблению связывания Са²⁺-СаМ. В качестве рабочей гипотезы можно предположить, что в надмолекулярных комплексах активированной киназы устанавливаются взаимодействия псевдосубстратного участка одной молекулы t активным центром соседней с возникновением стерических препятствий для связывания СаМ.
Кіназа легких ланцюгів міозина (КЛЛМ) відіграє ключову роль у механізмах регуляції скорочення гладеньких м'язів. Отримані нами за допомогою лазерної кореляційної спектроскопії дані дозволяють стверджувати що неактивована КЛЛМ із гладеньких м'язів у розчині за умов, близьких до фізіологічних, існує у вигляді суміші олігомерних і димерних частинок з гідродинамічними діаметрами –150 і 20 нм відповідно. Ці частинки, очевидно, знаходяться у динамічній рівновазі. Ми не виявили помітних змін у розподілі різних форм кінази у розчині після її активації як при надлишку кінази, так і кальмодуліну (СаМ). При значному надлишку кінази відносно СаМ її активність через 5–10 хв. зменшується у декілька разів. Може бути, що спостережене пригнічення кінази перед внесенням субстрата пов'язане з повільними конформаційнимн змінами активованих молекул кінази, про що свідчать результати здійснених нами флюоресцентних досліджень. Подібні перебудови відмічаються і при еквімолярному співвідношенні кінази і СаМ, проте в цьому випадку вони менш глибокі і характеризуються незначним зниженням активності КЛЛМ. Повільні конформаційні перебудови в надмолекулярних структурах активованої кінази, скоріш за все, мають колективний характер і пов'язані з підсиленням взаємного впливу між молекулами кінази, який призводить до ослаблення зв'язування Са²⁺ -СаМ. Спираючись на вищевикладене, можна припустити, що у надмолекулярних комплексах активованої кінази мають місце взаємодії псевдосубстратної ділянки однієї молекули з активним центром сусідньої, що супроводжується появою стеричних перешкод для зв'язування СаМ.
The data received by the use of lazer correlation spectroscopy (LCS) suggest that inactive MLCK under conditions close to the physiological exists as mixture of oligomeric and dimeric particles with hydrodynamic diameters about 150 and 20 nm, respectively. These particles should be in dynamic equilibrium. We could not discover noticeable alteration in different kinase species distribution at both kinase or calmodulin excess in solution. At considerable excess of kinase over calmodulin the activity of the former is decreased several times after 5 to 10 min from the moment of its activation. Observed kinase inhibition in the preincubation time (before addition of substrate) must be connected with slow conformational rearrangements of activated kinase molecules which is directly confirmed by the results of our fluorescent studies. Such conformational rearrangements accompanied by the reduction of MLCK towards CaM affinity take place also at equimolar ratios of kinase to CaM, but in this case they are characterised by the lesser depth and insignificant MLCK activity decrease. Slow conformation changes in supramolecular structures of activated kinase are believed to have collective character and to be connected with intensification of mutual influence of kinase molecules leading to reduction of CaM binding.
|