Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші
Раніше ми виявили, що трансформуюча. активність факторів росту в сироватці крові хворих на СНІД і саркому Капоші є значно вищою, ніж у сироватці крові здорових донорів. Цю активність оцінювали за здатністю сироватки індукувати субстратнезалежний ріст нормальних фібробластів миші лінії NIH-3T3 у нап...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Datum: | 1997 |
| Hauptverfasser: | , , , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Ukrainisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1997
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155691 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші / Р.С. Стойка, І.А. Якимович, С.В. Антоненко, О.В. Барбашева, А.Л. Воронцова, Ю.Й. Кудрявець, О.О. Фільченков // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 6. — С. 497-502. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859993857472593920 |
|---|---|
| author | Стойка, Р.С. Якимович, І.А. Антоненко, С.В. Барбашева, О.В. Воронцова, А.Л. Кудрявець, Ю.Й. Фільченков, О.О. |
| author_facet | Стойка, Р.С. Якимович, І.А. Антоненко, С.В. Барбашева, О.В. Воронцова, А.Л. Кудрявець, Ю.Й. Фільченков, О.О. |
| citation_txt | Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші / Р.С. Стойка, І.А. Якимович, С.В. Антоненко, О.В. Барбашева, А.Л. Воронцова, Ю.Й. Кудрявець, О.О. Фільченков // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 6. — С. 497-502. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Раніше ми виявили, що трансформуюча. активність факторів росту в сироватці крові хворих на СНІД і саркому Капоші є значно вищою, ніж у сироватці крові здорових донорів. Цю активність оцінювали за здатністю сироватки індукувати субстратнезалежний ріст нормальних фібробластів миші лінії NIH-3T3 у напіврідкому культу рольному середовищі, що містило 0,33 % агару. У цій роботі показано, що лікування хворих на саркому Капоші лафероном (рекомбінантний α2b-інтерферон) супроводжувалося значним зниженням рівня трансформуючої активності в сироватці крові, яке позитивно корелювало із суттєвим покращанням стану їх здоров'я. Для вивчення ролі транеформуючих факторів росту в модулюванні цитопатичного ефекту ВІЛ-інфекції було використано лінію МТ-4 Т-лімфобластоїдних клітин, інфікованих BRU-штамом ВІЛ-I (модель гострої літичної інфекції) або ІІІВ-штамом цього вірусу (модель хронічної інфекції). Цитопатичні ефекти ВІЛ визначали, підраховуючи відсоток мертвих клітин та кількість клітинних синцитіїв. Крім того, встановлювали вміст білка р24. Показано, що трансформуючий фактор росту β та/або епідермальний фактор росту (аналог трансформуючого фактора росту α) збільшували негативні впливи ВІЛ-1 в експериментальній моделі гострої інфекції. Впчив цих факторів не був таким однозначним, коли аналізували результати дослідження клітинної моделі хронічної інфекції. Отже, ВІЛ-інфекція супроводжується зростанням трансформуючої активності факторів росту в сироватці крові хворих на СНІД, і ці фактори росту можуть бути відповідальними за цитопатичні ефекти, які спостерігаються у хворих на СНІД
Ранее мы обнаружили, что трансформирующая активность факторов роста в сыворотке крови больных СПИДом и саркомой Капоиш значительно выше, чем. в сыворотке крови здоровых доноров. Эту активность оценивали по способности сывороток индуцировать субстратнезависимый рост нормальных мышиных фибробластов линии N/И-ЗТЗ в полужидкой среде, содержащей 0,33 % агара. В данной работе показано, что лечение больных саркомой Капоши лафероном (рекомбинантный α2b-интерферон) сопровождалось значительным снижением уровня трансформирующей активности в сыворотке крови, положительно коррелировавшим с существенным улучшением состояния их здоровья. Дш изучения роли трансформирующих факторов роста в модулировании цитопатического эффекта инфекции ВИЧ была использована MT-4-линия Т-лимфобласпюидных клеток, инфицированных либо BRU-штаммом ВИЧ-I (модель острой литической инфекции), либо IIIВ-штаммом этого вируса (модель хронической инфекции). Цитопатические эффекты ВИЧ определяли, подсчитывая процент мертвых клеток и количество клеточных синцитиев. Кроме того, определяли содержание вирусного белка р24. Показано, что трансформирующий фактор роста β и/или эпидермальныи факпюр роста (аналог трансформирующего фактора роста α) усиливали отрицательные влияния ВИЧ-I в экспериментальной модели острой инфекции. Действие этих факторов не было столь однозначным при анализе результатов исследования клеточной модели хронической инфекции. Таким образом, ВИЧ-инфекция сопровождается увеличением трансформирующей активности факторов роста в сыворотке крови больных СПИДом, что может вызывать цитопатические эффекты, наблюдаемые у больных СПИДом.
Earlier we found that the transforming activity of growth factors in blood serum of AIDS and Kaposi's sarcoma patients was considerably higher than that in healthy donors' blood serum. This activity was estimated by studying the ability of serum to induce anchorage-independent growth of NIH-3T3 mouse fibroblasts in the semisolid culture medium supplemented with 0.33 % agar. Here we showed that the treatment of Kaposi's sarcoma patients with laferon (recombinant α2b-interferon) caused a significant decrease in the level of transforming activity in blood serum of all treated patients and this decrease positively correlated with a substantial improvement of their health state. Two cellular models were used for the study of the role of transforming growth factors in the modulation of cytopathogenic effects of HIV-1 infection - MT-4 line of T-lymplwblastoid cells infected with BRU strain of HIV-l (model of acute lytical infection) and the same cells infected with IIIB virus strain (model of chronic infection). Cytopathogenic virus effects were estimated by counting the part of dead cells and the number of giant cells. The amount of p24 virus protein was also determined. It was found that transforming growth factor beta and I or epidermal growth factor (transforming growth factor alpha analogue) increased the negative HIV-l effects in the experimental model of acute infection. The action of these cytokines was not so uniform in the case when the cellular model of chronic infection was use in the study. Thus, HIV-I infection is accompanied by the increased transforming activity of growth factors in blood serum of AIDS and Kaposi's sarcoma patients and these growth factors could be responsible for cytopathogenic effects observed in AIDS patients. This could partially explain why the successful treatment of Kaposi's sarcoma patients with α2b-interferon is accompanied by an decrease of the transforming growth factors activity in blood serum of the treated patients.
|
| first_indexed | 2025-12-07T16:33:39Z |
| format | Article |
| fulltext |
I S S N 0 2 3 3 - 7 6 5 7 . Б и о п о л и м е р ы и к л е т к а . 1 9 9 7 . Т . 1 3 . № 6
ВИРУСЫ И КЛЕТКА
Дослідження ролі транеформуючих факторів
росту у хворих на СНІД та саркому Капоші
Р. С. Стойка, І. А. Якимович, С В. Антоненко1, О. В. Барбашева1,
А- Л. Воронцова2, КХ Й. Кудрявець2, О. О. Фільченков2
В і д д і л е н н я р е г у л я т о р н и х с и с т е м к л і т и н и І н с т и т у т у б і о х і м і ї і м . О . В . П а л л а д і н а Н А Н У к р а ї н и
2 9 0 0 0 5 , Л ь в і в , в у л . Д р а г о м а н о в а , 1 4 / 1 6
* Н а у к о в о - д о с л і д н и й і н с т и т у т е п і д е м і о л о г і ї т а і н ф е к ц і й н и х з а х в о р ю в а н ь і м . Л . В . Г р о м а ш е в с ь к о г о М О З У к р а ї н и
2 5 2 0 3 8 , К и ї в , у з в і з П р о т а с і в Я р , 4
2
І н с т и т у т е к с п е р и м е н т а л ь н о ї п а т о л о г і ї , о н к о л о г і ї і р а д і о б і о л о г і ї ім . Р . Є . К а в е ц ь к о г о Н А Н У к р а ї н и
2 5 2 0 2 2 , К и ї в , в у л . В а с и л ь к і в с ь к а , 4 5
Раніше ми виявили, що трансформуюча. активність факторів росту в сироватці крові хворих на
СНІД і саркому Капоші є значно вищою, ніж у сироватці крові здорових донорів. Цю активність
оцінювали за здатністю сироватки індукувати субстратнезалежний ріст нормальних фібро
бластів миші лінії NIH-3T3 у напіврідкому культу рольному середовищі, що містило 0,33 % агару.
У цій роботі показано, що лікування хворих на саркому Капоші лафероном ( рекомбінантний
а2Ь-інтерферон) супроводжувалося значним зниженням рівня трансформу ючої активності в
сироватці крові, яке позитивно корелювало із суттєвим покращанням стану їх здоров'я. Для
вивчення ролі транеформуючих факторів росту в модулюванні цитопатичного ефекту ВІЛ-
інфекції було використано лінію МТ-4 Т-лімфобластоїдних клітин, інфікованих BRU-штамом
ВІЛ-J (модель гострої літичної інфекції) або ІІІВ-штамом цього вірусу (модель хронічної
інфекції). Цитопатичні ефекти ВІЛ визначали, підраховуючи відсоток мертвих клітин та
кількість клітинних синцитіїв. Крім того, встановлювали вміст білка р24. Показано, що
трансформуючий фактор росту $ таї або епідермальний фактор росту (аналог трансформуючого
фактора росту а) збільшували негативні впливи ВІЛ-1 в експериментальній моделі гострої
інфекції. Впчив цих факторів не був таким однозначним, коли аналізували результати дослід
ження клітинної моделі хронічної інфекції. Отже, ВІЛ-інфекція супроводжується зростанням
трансформу ючої активності факторів росту в сироватці крові хворих на СНІД, і ці фактори
росту можуть бути відповідальними за цитопатичні ефекти, які спостерігаються у хворих на
СНІД
Вступ, Відомо, що полігіептидні фактори росту
відіграють важливу роль у регуляції проліферації
та диференціації клітин у тварин та людини [1 ].
Отримано дані стосовно того, що вміст окремих
факторів росту та їх співвідношення у тканинах та
біологічних рідинах можуть помітно змінюватися
під час різних патологічних процесів [2 ] . Є під
стави вважати, що деякі фактори росту беруть
участь у регуляції біохімічних процесів протягом
розвитку ВІЛ-інфекції [ 3 ] . Нез'ясованими залиша
ються молекулярні механізми, які забезпечують
© Р С С Т О Й К А , І. А. Я К И М О В И Ч , С. В. А Н Т О Н Е Н К О ,
О В. Б А Р Б А Ш Е В А , А. Л. В О Р О Н Ц О В А . К>. Й. К У Д Р Я В Е Ц Ь ,
О. О. Ф І Л Ь Ч Е Н К О В , 1997
високу частоту появи онкологічних захворювань у
хворих на СНІД. У цьому зв'язку необхідно від
значити, що деякі фактори росту мають здатність
індукувати фенотипову трансформацію клітин [4 ] ,
а трансформуючий фактор росту (ТФР) /3 має
імуносупресивну активність [5 ] .
Виходячи з наведених даних метою роботи
було дослідження можливої ролі ТФР у сироватці
крові хворих на СНІД та на саркому Капоші
(СНІД-асоційоване онкологічне захворювання
[6]) . Зокрема, вивчали, як змінюється активність
ТФР у сироватці крові хворих на саркому Капоші
під час їх успішного лікування лафероном (ре
комбінантний а2Ь-інтерферон). Крім того, дослід-
497
С Т О Й К А Р. С. ТА IH.
жували, як впливають окремі ТФР на цитопатич-
ний ефект ВІЛ у клітинних моделях гострої та
хронічної ВІЛ-інфекції.
Матеріали та методи. Фактори росту. Епі
дермальний фактор росту (ЕФР) очищали з під
щелепних слинних залоз миші за допомогою гідро
фобної хроматографії [ 7 ] . ТФР-/3 очищали зі сві-
жовиділених тромбоцитів крові свині [8 ] .
Клітини та їх культивування. Нормальні фіб
робласти лінії NIH-3T3 з ембріонів миші було
отримано з колекції клітинних культур Інституту
цитології РАН (Санкт-Петербург). Клітини виро
щували у середовищі Ігла, модифікованому Даль-
бекко (DMEM) («Flow Lab.», Велика Британія), з
додаванням 10 % сироватки крові ембріонів вели
кої рогатої худоби («ДИАЛЕК», Білорусь). Клі
тинні культури інкубували при 37 °С в атмосфері
5 % С 0 2 / 9 5 % повітря при 100 % вологості.
Колонієутворення клітин в агаризованому се
редовищі. Рівень фенотипової трансформації клітин
лінії NIH-3T3 визначали за інтенсивністю їх суб-
стратнезалежної проліферації. Для цього у пласти
кові чашки Петрі (діаметр 40 мм, Завод медичних
полімерів, Санкт-Петербург, Росія) заливали 1 мл
середовища для культивування (DMEM, 10% емб
ріональної сироватки крові), що містило 0,5 %
агару («Difco», США), На цю підкладку у кожну
чашку вносили 1 мл суспензії клітин (10 4 ) , яку
готували у середовищі для культивування, що мі
стило 0,33 % агару і 10 % тестованої сироватки
крові. Чашки з клітинами витримували протягом
14 діб в атмосфері 5 % С 0 2 і 95 % повітря при
37 °С і 100 % вологості. Після завершення інку
бації підраховували кількість клітинних колоній,
що мали у діаметрі понад 50 мкм. У кожній пробі
використовували 3—4 чашки Петрі з клітинами.
Дослідження цитопатичного ефекту ВІЛ у
інфікованих клітинах. Використовували клітини
лінії МТ-4 людини (Т-лімфобластоїдна лінія). Клі
тини інфікували різними лабораторними штамами
вірусу — BRU (отриманий з лабораторії L. Моп-
tagnier, Франція) та ШВ (з лабораторії R. Gallo,
США). Згідно з результатами порівняльного до
слідження, клітинна система M T - 4 / B R U вважа
ється експериментальною моделлю гострої літичної
інфекції ВІЛ, а клітинна система МТ-4/ІІІВ —
моделлю хронічної інфекції Т-лімфоїдних клітин.
Клітини культивували у вигляді суспензії
( (0 ,3—1,0) -10 ь клітин в 1 мл) у середовищі RPMI-
1640 (Інститут поліомієліту та вірусних енцефа
літів РАМН, Москва) з додаванням 10 % сироватки
крові ембріонів великої рогатої худоби («ВіоМагк»,
Львів), L-глутаміну (300 мкг/мл) та гентаміцину
(100 мкг/мл).
Клітини лінії МТ-4 інфікували внесенням ВІЛ-
вмісного культурального середовища, отриманого
від постійно інфікованих клітинних систем МТ-
4 /BRU чи МТ-4/ІІІВ. Кількість рідини для ін
фікування складала 0,2 мл/1 млн клітин, а вміст у
ній вірусного білка р24 становив 20—25 нг/мл.
Клітини інкубували в присутності вірусу при 37 °С
протягом 1 год. Після цього їх промивали свіжим
культуральним середовищем, і 2 мл суспензії клі
тин у такому середовищі (0,5-10° клітин/мл) помі
щали в лунки 24-лункового пластикового планшета
(«Costar», США). Клітини інкубували протягом 1,
5, 10 та 15 діб в С0 2 - інкубаторі (37 °С, 5 % С 0 2 ,
100 % вологості).
Для вивчення впливу ТФР на деякі біологічні
властивості вищезгаданих клітинних моделей ці
фактори росту (ЕФР — структурно-функціональ
ний аналог ТФР-а та ТФР~/3) додавали до тестова
них клітин у кінцевій концентрації 10 нг/мл клі
тинної суспензії.
Цитопатичний ефект інфікування клітин ВІЛ
оцінювали за кількістю утворених клітинами син-
цитіїв, підраховуючи їх у кожній лунці під інвер
тованим світловим мікроскопом. Розрахунок здій
снювали за кількістю синцитіїв на 1000 живих
клітин. Питомий вміст живих чи мертвих клітин у
культурі визначали в камері Горяєва після забарв
лення клітин 0,2 % розчином трипанового синього.
Дослідження експресії білка р24 ВІЛ. Вивчення
активності реплікації ВІЛ у клітинних культурах
здійснювали, визначаючи рівень продукції вірус
ного білка р24. Вміст останнього в культуральному
середовищі знаходили, використовуючи набір фір
ми «Vironostica» (США).
Лікування лафероном хворих на саркому Ка
поші. З метою лікування використовували лафе-
рон — а2Ь-інтерферон (рекомбінантний), отрима
ний в Інституті молекулярної біології та генетики
НАН України і дозволений фармакологічним комі
тетом для клінічного застосування. Схема ліку
вання була наступною [10] : спочатку проводили
курс хіміотерапії цитостатиком проспідином у ра
зовій дозі 150 м г / м 2 щоденно дом'язово протягом 7
днів (сумарна доза становить 1050 м г / м 2 ) ; після
цього підшкірно вводили лаферон у дозі 2 млн
о д / м 2 щоденно протягом 10 днів (сумарна доза 20
млн о д / м 2 ) . Описаний курс лікування повторювали
у повному обсязі через місяць. Після досягнення
ремісії захворювання проводили підтримуючі курси
лаферонотерапії (4 введення по 1 млн од.) протя
гом місяця. У хворих забирали кров, отримували з
неї сироватку і визначали в ній активність ТФР, як
описано раніше.
Статистичний аналіз. Для встановлення ста-
498
тистичної вірогідності змін рівня активності ТФР
використовували ґ-критерій Стьюдента,
Результати та обговорення. Порівняння транс-
формуючої активності факторів росту у сироватці
крові здорових донорів та хворих на СНІД і сарко
му Капоті засвідчило, що обидва захворювання
супроводжуються суттєвим зростанням рівня ак
тивності ТФР у сироватці крові [9] . У середньому
активність ТФР у сироватці крові хворих на СНІД
була у 15 разів, а у хворих на саркому Капоші —
у 16,5 разів вищою за таку у сироватці крові
здорових донорів.
Для того щоб встановити, чи дійсно рівень
активності ТФР у сироватці крові хворих на сарко
му Капоші (СНІД-асоційоване захворювання) ко
релює зі станом здоров'я пацієнтів, цю активність
було визначено до і після курсу лікування хворих
лафероном (рекомбінантний а2Ь-інтерферон). Схе
ма лікування описана в [10] . З даних, наведених у
таблиці, видно, що ефективне лікування лаферо
ном у комплексі з проспідином хворих на саркому
Капоші супроводжується нормалізацією рівня ак
тивності ТФР у сироватці їхньої крові.
Оскільки рівень активності ТФР у сироватці
крові хворих на СНІД є також суттєво підви
щеним, можна припустити, що і в цьому випадку
ефективність лікування може оцінюватися на під
ставі даних про його зміну.
Після з'ясування того, що у хворих на СНІД
має місце значно підвищений рівень активності
ТФР у сироватці крові, закономірно постало пи
тання про те, як впливають окремі ТФР на цито-
патичний ефект ВІЛ та на рівень експресії ВІЛ в
інфікованих клітинах. Існують два основні типи
ТФР — а та /З [11—13] , Раніше [14] показано, що
Д О С Л І Д Ж Е Н Н Я Р О Л І Т Ф Р У Х В О Р И Х НА С Н І Д ТА С А Р К О М У К А П О Ш І
максимальне зростання рівня колонієутворення
нормальних мишачих фібробластів лінії NIH-3T3
спостерігається при одночасній дії на них ТФР-/? та
ЕФР (структурно-функціональний аналог ТФР-а
[15]) . Сам ТФР-/? не мав такого впливу.
З метою дослідження ролі окремих ТФР у
модуляції ефекту ВІЛ ми використали дві клітинні
системи, що вважаються експериментальними мо
делями гострої літичної інфекції та хронічної ін
фекції. Встановлено, що Т-лімфобластоїдні клітини
лінії MT-4 /BRU (модель гострої інфекції) характе
ризуються максимальним рівнем експресії вірус
ного антигена р24 (рис. 1, а) та утворенням клітин
них синцитіїв (рис. 1, б) на 5-ту добу інфікування
клітин ВІЛ з наступним зниженням величини цих
показників на 10—15-ту добу розвитку інфекції.
Протягом усього цього періоду мали місце цитоде-
структивні процеси, причому на 15-ту добу ін
фекції кількість життєздатних клітин суттєво зни
жувалася (рис 1, в).
ЕФР та ТФР-/? слабо впливають на рівень
вірусного білка р24 (див. рис. 1, а) та синци-
тієутворення (рис. 1, б) на стадії активної репро
дукції ВІЛ (5-та доба інфекції). Проте на 15-ту
добу експерименту спостерігається тенденція до
сповільнення зниження величини цитопатичних
показників в інфікованих клітинах, які піддавалися
дії ТФР. Необхідно також відзначити, що у присут
ності ТФР, особливо ТФР-/?, призупиняється від
мирання клітин, інфікованих ВІЛ (рис 1, в).
З даних, наведених на рис. 2, видно, що
Т-лімфобластоїдні клітини лінії МТ-4/ІІІВ (модель
хронічної інфекції) характеризуються хвилеподіб
ним розвитком інфекції з максимальним рівнем
експресії вірусного антигена р24 (рис 2, а) та
Ефективність лікування лафероном у комплексі з проспідином хворих на саркому Капоші
+
К і л ь к і с т ь к о л о н і й к л і т и н , щ о і н д у к у ю т ь с я т е с т о в а н о ю с и р о в а т к о ю крові в 4 0 м м ч а ш ц і П е т р і .
499
С Т О Й К А Р С. ТА Ш .
Р и с . 1. В п л и в Т Ф Р н а ц и т о п а т и ч н и й е ф е к т та н а р е п р о д у к ц і ю В І Л у к л і т и н н і й м о д е л і г о с т р о ї в і р у с н о ї і н ф е к ц і ї ( Т - л і м ф о б л а с т о ї д н а
л ін ія к л і т и н л ю д и н и , і н ф і к о в а н а В І Л - 1 , ш т а м B R U ) : а — р і в е н ь е к с п р е с і ї в і р у с н о г о а н т и г е н а р 2 4 ( п о осі о р д и н а т — у м о в н і о д и н и ц і
( о п т и ч н е п о г л и н а н н я п р и 4 5 0 н м ) ) ; б— і н т е н с и в н і с т ь с и н ц и т і є у т в о р е н н я ( п о ос і о р д и н а т — к ільк ість с и н ц и т і ї в н а 1 0 0 0 к л і т и н ) ; в —
ц и т о п а т и ч н и й е ф е к т ( п о ос і о р д и н а т — % ж и в и х к л і т и н ) ; 1 — к о н т р о л ь ; 2 — Т Ф Р - / ? ( 1 0 н г / м л ) ; З — Е Ф Р ( 1 0 н г / м л )
Р и с . 2 . В п л и в Т Ф Р н а ц и т о п а т и ч н и й е ф е к т т а р е п р о д у к ц і ю В І Л у к л і т и н н і й м о д е л і х р о н і ч н о ї в і р у с н о ї і н ф е к ц і ї ( Т - л і м ф о б л а с т о ї д н а
л ін ія к л і т и н л ю д и н и , і н ф і к о в а н а В І Л - 1 , ш т а м Ш В ) . П о з н а ч е н н я , як н а р и с . 1
утворення клітинних синцитіїв (рис. 2, б) на 5-ту і
15-ту доби інфікування клітин ВІЛ. Одночасно
спостерігається повільніше, ніж при гострій ін
фекції, зменшення кількості життєздатних клітин.
На 15-ту добу інфекції кількість живих клітин
становить приблизно 68 % (рис 2, в).
Впливи ЕФР та ТФР-/? у клітинній моделі
хронічної інфекції ВІЛ (див. рис. 2) не були такими
однозначними, як у клітинній моделі гострої ін
фекції ВІЛ (див. рис. 1). Так, ЕФР підсилював дію
ВІЛ на рівень вірусного антигена р24 (рис 2, а) та
утворення клітинних синцитіїв (рис 2, б) на 10-ту
500
Д О С Л І Д Ж Е Н Н Я РОЛІ Т Ф Р У Х В О Р И Х НА С Н І Д ТА С А Р К О М У К А П О Ш І
добу інфікування клітин. Проте на 1—5-ту добу та
15-ту добу інфікування клітин ефект ЕФР на
експресію антигена р24, навпаки, був інгібуючим
(рис. 2, а) . Крім того, цей фактор росту при
гнічував утворення клітинних сінцитіїв на 15-ту
добу інфікування (рис. 2, б). Що стосується ТФР-/3,
то він не так суттєво впливав на цитопатичяий
ефект ВІЛ у випадку моделі хронічної інфекції
(див. рис. 2) .
Наведені вище дані щодо особливостей біо
логічної дії ЕФР та ТФР-/? у клітинних моделях
гострої та хронічної інфекції ВІЛ становлять ін
терес для вірусології СНІДу. Остаточне з'ясування
молекулярних механізмів цієї дії вимагає прове
дення додаткових досліджень. Проте вже зараз
можна вважати, що за умов гострої інфекції експ
ресія ТФР посилює негативний вплив ВІЛ в ор
ганізмі, тоді як за умов хронічної інфекції вплив
ТФР суттєво залежить від фази розвитку інфекції.
Робота підтримувалася грантом N 9 3 / 3 0 На
ціонального Комітету по боротьбі з захворюванням
на СНІД при Президентові України.
Р. С. Стойка, И. А. Якимович, С. В. Антонепко,
О. В. Барбаиіева, А. Л. Воронцова, Ю. И. Кудрявец,
А. А. Фильченков
И с с л е д о в а н и е р о л и т р а н с ф о р м и р у ю щ и х ф а к т о р о в р о с т а
у б о л ь н ы х С П И Д о м и с а р к о м о й К а л о ш и
Р е з ю м е
Ранее мы обнаружили, что трансформирующая активность
факторов роста в сыворотке крови больных СПИДом и
саркомой Капоиш значительно выше, чем. в сыворотке крови
здоровых доноров. Эту активность оценивали по способности
сывороток индуцировать субстратнезависимый рост нор
мальных мышиных фибробластов линии N/И-ЗТЗ в полужид
кой среде, содержащей 0,33 % агара. В данной работе показа
но, что лечение больных саркомой Капоши лафероном (реком-
бинантный а2Ь-интерферон) сопровождалось значительным
снижением уровня трансформирующей активности в сыво
ротке крови, положительно коррелировавшим с существенным
улучшением состояния их здоровья. Дш изучения роли транс
формирующих факторов роста в модулировании цитопатиче-
ского эффекта инфекции ВИЧ была использована MT-4-линия
Т-лимфобласпюидных клеток, инфицированных либо BRU-
штаммом ВИЧ-J (модель острой литической инфекции), либо
ШВ-штаммом этого вируса (модель хронической инфекции).
Цитопатические эффекты ВИЧ определяли, подсчитывая про
цент мертвых клеток и количество клеточных синцитиев.
Кроме того, определяли содержание вирусного белка р24. По
казано, что трансформирующий фактор роста f$ и/или эпи-
дермальныи факпюр роста (аналог трансформирующего фак
тора роста а) усиливали отрицательные влияния ВИЧ-J в
экспериментальной модели острой инфекции. Действие этих
факторов не было столь однозначным при анализе результа
тов исследования клеточной модели хронической инфекции.
Таким образом, ВИЧ-инфекция сопровождается увеличением
трансформирующей активности факторов роста в сыворотке
крови больных СПИДом, что может вызывать цитопатиче
ские эффекты, наблюдаемые у больных СПИДом.
R. S. Stoika, I. A. Yakymovych, S. V. Antonenko,
О. V. Barbasheva, A. L. Vorontsova, Yu- I. Kudryavets,
A. A. Phylchenkov
S t u d y of t r a n s f o r m i n g g r o w t h f a c t o r s r o l e in A I D S a n d
K a p o s i ' s s a r c o m a p a t i e n t s
S u m m a r y
Earlier we found that the transforming activity of growth factors in
blood serum of AIDS and Kaposi's sarcoma patients was consider
ably higher than that in healthy donors' blood serum. This activity
was estimated by studying the ability of serum to induce anchorage-
independent growth of NJH-3T3 mouse fibroblasts in the semisolid
culture medium supplemented with 0.33 % agar. Here we showed
that the treatment of Kaposi's sarcoma patients with laferon
(recombinant a2b-interferon) caused a significant decrease in tfie
level of transforming activity in blood serum of all treated patients
and this decrease positively correlated with a substantial im
provement of their health state. Two cellular models were used for
the study of the role of transforming growth factors in the
modulation of cytopathogenic effects of HIV-1 infection - MT-4 line
of T-lymplwblastoid cells infected with BRU strain of HIV-1 (model
of acute lytical infection) and the same cells infected with IIIB virus
strain (model of chronic infection). Cytopathogenic virus effects
were estimated by counting the part of dead cells and the number of
giant cells. The amount of p24 virus protein was also determined.
It was found that transforming growth factor beta and I or epidermal
growth factor (transforming growth factor alpha analogue) increased
the negative HIV-1 effects in tlie experimental model of acute
infection. The action of these cytokines was not so uniform in і/ге
case when the cellular model of chronic infection was use in the
study. Thus, HIV-1 infection is accompanied by the increased
transforming activity of growth factors in blood serum of AIDS and
Kaposi's sarcoma patients and these growth factors could be
responsible for cytopathogenic effects observed in AIDS patients.
This could partially explain why the successful treatment of Kaposi's
sarcoma patients with a2b-interferon is accompanied by an decrease
of the transforming growth factors activity in blood serum of the
treated patients.
С П И С О К Л І Т Е Р А Т У Р И
1. Кусень С. Й., Стойка Р. С. М о л е к у л я р н ы е м е х а н и з м ы в
д е й с т в и и п о л и п е п т и д н ы х ф а к т о р о в р о с т а . — M . : Н а у к а ,
1 9 8 5 . — 2 3 6 с.
2 . Goustin A. S., LeofE. В., Shipley G. D., Moses И. L. G r o w t h
f a c t o r s a n d c a n c e r / / C a n c e r R e s . — 1 9 8 6 . — 4 3 . — P . 1 0 1 5 —
1 0 2 9 .
3 . Lazdis J. K, Klimkait Т., Woods-Cook К et al In vitro e f f ec t
o f t r a n s f o r m i n g g r o w t h f a c t o r f$ o n p r o g r e s s i o n of H I V - 1
i n f e c t i o n in p r i m a r y m o n o n u c l e a r p h a g o c y t e s / / J. I m m u n o l . —
1 9 9 1 . — 1 4 7 . — P . 1 — 1 4 .
4 . Kim S.-J., Kehrl J. H.t Burton J. et al T r a n s a c t i v a t i o n of the
t r a n s f o r m i n g g r o w t h f a c t o r f$\ ( T G F - / 2 1 ) g e n e b y h u m a n T
l y m p h o t r o p i c v irus t y p e 1 tax : A p o t e n t i a l m e c h a n i s m i n c r e a s e d
p r o d u c t i o n of T G F / И in a d u l t T ce l l l e u k e m i a / / J . E x p .
M e d . — 1 9 9 0 . — 1 7 2 . — P . 1 2 1 — 1 2 9 .
5 . Sasaki H., Pollard R. В., Schmitt D., Suzuki F. T r a n s f o r m i n g
g r o w t h factor- /? in t h e r e g u l a t i o n of t h e i m m u n e r e s p o n s e / /
C l i n . I m m u n o l , a n d I m m u n o p a t h o l . — 1 9 9 2 . — 6 5 , N 1 . — P . 1 —
9 .
6 . Roth W. K, Brandstetter H., Sturzi M. C e l l u l a r a n d m o l e c u l a r
features o f HIV-associated Kaposi's sarcoma / / A I D S . —
1 9 9 2 . — 6 . — P . 8 9 5 — 9 1 3 .
7. Фильченков А. А., Иващенко Ю. Д., Кулик Г. А.
501
С Т О Й К А Р. С ТА IH.
П о л у ч е н и е э п и д е р м а л ь н о г о ф а к т о р а р о с т а с п о м о щ ь ю г и д
р о ф о б н о й х р о м а т о г р а ф и и / / Э к с п е р и м . о н к о л о г и я . —
1 9 9 1 . — 1 3 , № 5 . — С . 7 1 — 7 4 .
8. Стойка Р. С, Сушельницкий С. И., Кусень С. И. В л и я н и е
т р а н с ф о р м и р у ю щ е г о ф а к т о р а р о с т а э п и д е р м а л ь н о г о
ф а к т о р а р о с т а и и н с у л и н а н а б и о с и н т е з Д Н К в м ы ш и н ы х
ф и б р о б л а с т а х л и н и и S w i s s - 3 T 3 п р и н и з к о й и в ы с о к о й
п л о т н о с т и к л е т о к в м о н о с л о й н о й к у л ь т у р е / / Б и о п о л и м е р ы
и к л е т к а . — 1 9 9 2 . — 8 , № 4 . — С . 3 9 — 4 3 .
9. Stoika R. S.t Yakimovych I. A , Antonenko S. V. et al
T r a n s f o r m i n g act iv i ty of g r o w t h f a c t o r s in b l o o d s e r u m of A I D S
a n d K a p o s i ' s s a r c o m a p a t i e n t s / / E x p . O n c o l . — 1 9 9 5 . — 1 7 . —
P . 3 — 9 .
10 . Коровин С. И., Воронцова А. Л., Толстопятое В. А. и др.
Л а ф е р о н как э ф ф е к т и в н о е с р е д с т в о в л е ч е н и и с а р к о м ы
К а п о ш и / / Л а ф е р о н в л і к у в а н н і о н к о л о г і ч н и х т а і н
ф е к ц і й н и х з а х в о р ю в а н ь . — Р і в н е , 1 9 9 6 . — С . 7 4 — 7 7 .
1 1 . Фильченков А. А., Стойка Р. С , Быкорез А. И. Т р а н с
ф о р м и р у ю щ и е ф а к т о р ы р о с т а . — К и е в : Н а у к , д у м к а ,
1 9 9 4 — 2 9 2 с .
1 2 . Roberts А. В.у Sporn М. В. T r a n s f o r m i n g g r o w t h fac tors / /
C a n c e r S u r v e y s . — 1 9 8 5 . — 4 , N 4 . — P . 6 8 3 — 7 0 5 .
1 3 . Стойка P. C, Кусень С. И. Т р а н с ф о р м и р у ю щ и е ф а к т о р ы
р о с т а / / У с п е х и с о в р е м , б и о л о г и и . — 1 9 8 8 . — 1 0 6 , № 1 ( 4 ) . —
С . 6 9 — 8 4 .
1 4 . Сушельницкий С. И., Стойка Р. С , Гарасько С. И. и др.
В л и я н и е т р а н с ф о р м и р у ю щ е г о ф а к т о р а р о с т а / 5 - т и п а и е г о
к о м б и н а ц и й с э п и д е р м а л ь н ы м ф а к т о р о м р о с т а и и н с у
л и н о м н а с у б с т р а т н е з а в и с и м у ю п р о л и ф е р а ц и ю н о р м а л ь
н ы х и о п у х о л е в ы х к л е т о к / / Ц и т о л о г и я . — 1 9 8 9 . — 3 1 ,
№ 7 . — С . 7 6 7 — 7 7 4 .
1 5 . Phylchenkov A. A. T r a n s f o r m i n g g r o w t h fac tor a in o n c o l o g y :
c u r r e n t s t a t u s a n d f u t u r e p r o s p e c t s / / E x p . O n c o l . — 1 9 9 3 . —
1 5 , N 4 . — P . 3 — 1 9 .
Н а д і й ш л а д о р е д а к ц і ї 2 6 . 0 6 . 9 6
502
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155691 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Ukrainian |
| last_indexed | 2025-12-07T16:33:39Z |
| publishDate | 1997 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Стойка, Р.С. Якимович, І.А. Антоненко, С.В. Барбашева, О.В. Воронцова, А.Л. Кудрявець, Ю.Й. Фільченков, О.О. 2019-06-17T10:28:37Z 2019-06-17T10:28:37Z 1997 Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші / Р.С. Стойка, І.А. Якимович, С.В. Антоненко, О.В. Барбашева, А.Л. Воронцова, Ю.Й. Кудрявець, О.О. Фільченков // Биополимеры и клетка. — 1997. — Т. 13, № 6. — С. 497-502. — Бібліогр.: 15 назв. — укр. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0004AD https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155691 Раніше ми виявили, що трансформуюча. активність факторів росту в сироватці крові хворих на СНІД і саркому Капоші є значно вищою, ніж у сироватці крові здорових донорів. Цю активність оцінювали за здатністю сироватки індукувати субстратнезалежний ріст нормальних фібробластів миші лінії NIH-3T3 у напіврідкому культу рольному середовищі, що містило 0,33 % агару. У цій роботі показано, що лікування хворих на саркому Капоші лафероном (рекомбінантний α2b-інтерферон) супроводжувалося значним зниженням рівня трансформуючої активності в сироватці крові, яке позитивно корелювало із суттєвим покращанням стану їх здоров'я. Для вивчення ролі транеформуючих факторів росту в модулюванні цитопатичного ефекту ВІЛ-інфекції було використано лінію МТ-4 Т-лімфобластоїдних клітин, інфікованих BRU-штамом ВІЛ-I (модель гострої літичної інфекції) або ІІІВ-штамом цього вірусу (модель хронічної інфекції). Цитопатичні ефекти ВІЛ визначали, підраховуючи відсоток мертвих клітин та кількість клітинних синцитіїв. Крім того, встановлювали вміст білка р24. Показано, що трансформуючий фактор росту β та/або епідермальний фактор росту (аналог трансформуючого фактора росту α) збільшували негативні впливи ВІЛ-1 в експериментальній моделі гострої інфекції. Впчив цих факторів не був таким однозначним, коли аналізували результати дослідження клітинної моделі хронічної інфекції. Отже, ВІЛ-інфекція супроводжується зростанням трансформуючої активності факторів росту в сироватці крові хворих на СНІД, і ці фактори росту можуть бути відповідальними за цитопатичні ефекти, які спостерігаються у хворих на СНІД Ранее мы обнаружили, что трансформирующая активность факторов роста в сыворотке крови больных СПИДом и саркомой Капоиш значительно выше, чем. в сыворотке крови здоровых доноров. Эту активность оценивали по способности сывороток индуцировать субстратнезависимый рост нормальных мышиных фибробластов линии N/И-ЗТЗ в полужидкой среде, содержащей 0,33 % агара. В данной работе показано, что лечение больных саркомой Капоши лафероном (рекомбинантный α2b-интерферон) сопровождалось значительным снижением уровня трансформирующей активности в сыворотке крови, положительно коррелировавшим с существенным улучшением состояния их здоровья. Дш изучения роли трансформирующих факторов роста в модулировании цитопатического эффекта инфекции ВИЧ была использована MT-4-линия Т-лимфобласпюидных клеток, инфицированных либо BRU-штаммом ВИЧ-I (модель острой литической инфекции), либо IIIВ-штаммом этого вируса (модель хронической инфекции). Цитопатические эффекты ВИЧ определяли, подсчитывая процент мертвых клеток и количество клеточных синцитиев. Кроме того, определяли содержание вирусного белка р24. Показано, что трансформирующий фактор роста β и/или эпидермальныи факпюр роста (аналог трансформирующего фактора роста α) усиливали отрицательные влияния ВИЧ-I в экспериментальной модели острой инфекции. Действие этих факторов не было столь однозначным при анализе результатов исследования клеточной модели хронической инфекции. Таким образом, ВИЧ-инфекция сопровождается увеличением трансформирующей активности факторов роста в сыворотке крови больных СПИДом, что может вызывать цитопатические эффекты, наблюдаемые у больных СПИДом. Earlier we found that the transforming activity of growth factors in blood serum of AIDS and Kaposi's sarcoma patients was considerably higher than that in healthy donors' blood serum. This activity was estimated by studying the ability of serum to induce anchorage-independent growth of NIH-3T3 mouse fibroblasts in the semisolid culture medium supplemented with 0.33 % agar. Here we showed that the treatment of Kaposi's sarcoma patients with laferon (recombinant α2b-interferon) caused a significant decrease in the level of transforming activity in blood serum of all treated patients and this decrease positively correlated with a substantial improvement of their health state. Two cellular models were used for the study of the role of transforming growth factors in the modulation of cytopathogenic effects of HIV-1 infection - MT-4 line of T-lymplwblastoid cells infected with BRU strain of HIV-l (model of acute lytical infection) and the same cells infected with IIIB virus strain (model of chronic infection). Cytopathogenic virus effects were estimated by counting the part of dead cells and the number of giant cells. The amount of p24 virus protein was also determined. It was found that transforming growth factor beta and I or epidermal growth factor (transforming growth factor alpha analogue) increased the negative HIV-l effects in the experimental model of acute infection. The action of these cytokines was not so uniform in the case when the cellular model of chronic infection was use in the study. Thus, HIV-I infection is accompanied by the increased transforming activity of growth factors in blood serum of AIDS and Kaposi's sarcoma patients and these growth factors could be responsible for cytopathogenic effects observed in AIDS patients. This could partially explain why the successful treatment of Kaposi's sarcoma patients with α2b-interferon is accompanied by an decrease of the transforming growth factors activity in blood serum of the treated patients. Робота підтримувалася грантом N93/30 Національного Комітету по боротьбі з захворюванням на СНІД при Президентові України. uk Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Вирусы и клетка Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші Исследование роли трансформирующих факторов роста у больных СПИДом и саркомой Капоши Study of transforming growth factors role in AIDS and Kaposi's sarcoma patients Article published earlier |
| spellingShingle | Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші Стойка, Р.С. Якимович, І.А. Антоненко, С.В. Барбашева, О.В. Воронцова, А.Л. Кудрявець, Ю.Й. Фільченков, О.О. Вирусы и клетка |
| title | Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші |
| title_alt | Исследование роли трансформирующих факторов роста у больных СПИДом и саркомой Капоши Study of transforming growth factors role in AIDS and Kaposi's sarcoma patients |
| title_full | Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші |
| title_fullStr | Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші |
| title_full_unstemmed | Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші |
| title_short | Дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на СНІД та саркому Капоші |
| title_sort | дослідження ролі транеформуючих факторів росту у хворих на снід та саркому капоші |
| topic | Вирусы и клетка |
| topic_facet | Вирусы и клетка |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155691 |
| work_keys_str_mv | AT stoikars doslídžennârolítraneformuûčihfaktorívrostuuhvorihnasnídtasarkomukapoší AT âkimovičía doslídžennârolítraneformuûčihfaktorívrostuuhvorihnasnídtasarkomukapoší AT antonenkosv doslídžennârolítraneformuûčihfaktorívrostuuhvorihnasnídtasarkomukapoší AT barbaševaov doslídžennârolítraneformuûčihfaktorívrostuuhvorihnasnídtasarkomukapoší AT voroncovaal doslídžennârolítraneformuûčihfaktorívrostuuhvorihnasnídtasarkomukapoší AT kudrâvecʹûi doslídžennârolítraneformuûčihfaktorívrostuuhvorihnasnídtasarkomukapoší AT fílʹčenkovoo doslídžennârolítraneformuûčihfaktorívrostuuhvorihnasnídtasarkomukapoší AT stoikars issledovanierolitransformiruûŝihfaktorovrostaubolʹnyhspidomisarkomoikapoši AT âkimovičía issledovanierolitransformiruûŝihfaktorovrostaubolʹnyhspidomisarkomoikapoši AT antonenkosv issledovanierolitransformiruûŝihfaktorovrostaubolʹnyhspidomisarkomoikapoši AT barbaševaov issledovanierolitransformiruûŝihfaktorovrostaubolʹnyhspidomisarkomoikapoši AT voroncovaal issledovanierolitransformiruûŝihfaktorovrostaubolʹnyhspidomisarkomoikapoši AT kudrâvecʹûi issledovanierolitransformiruûŝihfaktorovrostaubolʹnyhspidomisarkomoikapoši AT fílʹčenkovoo issledovanierolitransformiruûŝihfaktorovrostaubolʹnyhspidomisarkomoikapoši AT stoikars studyoftransforminggrowthfactorsroleinaidsandkaposissarcomapatients AT âkimovičía studyoftransforminggrowthfactorsroleinaidsandkaposissarcomapatients AT antonenkosv studyoftransforminggrowthfactorsroleinaidsandkaposissarcomapatients AT barbaševaov studyoftransforminggrowthfactorsroleinaidsandkaposissarcomapatients AT voroncovaal studyoftransforminggrowthfactorsroleinaidsandkaposissarcomapatients AT kudrâvecʹûi studyoftransforminggrowthfactorsroleinaidsandkaposissarcomapatients AT fílʹčenkovoo studyoftransforminggrowthfactorsroleinaidsandkaposissarcomapatients |