Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.)

Методом соматической гибридизации гипокотильных протопластов В. napus и мезофильных В. nigra с применением двойной инактивации получены три клона растенийрегенерантов, объединяющих в себе три генома Brassica (А, В, С). Гибридность ядра подтверждается биохимическим (множественные молекулярные формы а...

Ausführliche Beschreibung

Gespeichert in:
Bibliographische Detailangaben
Datum:1991
Hauptverfasser: Сахно, Л.А., Череп, Н.Н., Скаржинская, М.В., Глеба, Ю.Ю.
Format: Artikel
Sprache:Russian
Veröffentlicht: Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1991
Schriftenreihe:Биополимеры и клетка
Schlagworte:
Online Zugang:https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155835
Tags: Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
Назва журналу:Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Zitieren:Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.) / Л.А. Сахно, Н.Н. Череп, М.В. Скаржинская, Ю.Ю. Глеба // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 5. — С. 62-65. — Бібліогр.: 16 назв. — рос.

Institution

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
id nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-155835
record_format dspace
spelling nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1558352025-02-09T13:51:33Z Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.) Соматична гібридизація в роді Brassica: одержання гібридів між рапсом (Brassica napus L.) і гірчицею чорною (Brassica nigra L.) Somatic hybridization in genus Brassica: hybrids between rapeseed (Brassica napus L.) and black mustard (Brassica nigra L.) Сахно, Л.А. Череп, Н.Н. Скаржинская, М.В. Глеба, Ю.Ю. Клеточная биология Методом соматической гибридизации гипокотильных протопластов В. napus и мезофильных В. nigra с применением двойной инактивации получены три клона растенийрегенерантов, объединяющих в себе три генома Brassica (А, В, С). Гибридность ядра подтверждается биохимическим (множественные молекулярные формы амилаз эстераз и аспартатаминотрансфераз) и морфолого-физиологическим анализами. Исследование рестриктов хлоропластной ДНК показало наличие у клонов растений пластома рапса. Полученные гибриды рапс + горчица представляют интерес в плане изучения межгеномного взаимодействия в пределах рода Brassica, а также имеют практическую ценность как исходный материал для селекции. Методом соматичної гібридизації гіпокотильних протопластів В. napus і мезофільних В. nigra із застосуванням подвійної інактивації одержано три клони рослин-регенерантів, що об'єднують в собі три геноми Brassica (A, B, С). Гібридність ядра підтверджується біохімічним (множинні молекулярні форми амілаз, естераз і аспартатамінотрансфераз) та морфолого-фізіологчним аналізами. Дослідження рестриктів хлоропластної ДНК виявило наявність у клонів рослин пластому ріпака. Одержані гібриди ріпак + гірчиця викликають інтерес в плані вивчення міжгеномної взаємодії в межах роду Brassica, а також мають практичну цінність як вихідний матеріал для селекції. By using of the method of somatic hybridization with double inactivation of hypocotyl protoplasts of B. napus and mesophyll protoplasts of B. nigra were obtained 3 clones of hybrid plants. Genetic novelity of regenerants was shown by study of morphology, physiology, isozymes (esterase, amylase, aspartataminotransferase), chloroplast DNAs. Obtained hybrid plants may be treated by practical selection. 1991 Article Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.) / Л.А. Сахно, Н.Н. Череп, М.В. Скаржинская, Ю.Ю. Глеба // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 5. — С. 62-65. — Бібліогр.: 16 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.0002F4 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155835 575.143 ru Биополимеры и клетка application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection DSpace DC
language Russian
topic Клеточная биология
Клеточная биология
spellingShingle Клеточная биология
Клеточная биология
Сахно, Л.А.
Череп, Н.Н.
Скаржинская, М.В.
Глеба, Ю.Ю.
Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.)
Биополимеры и клетка
description Методом соматической гибридизации гипокотильных протопластов В. napus и мезофильных В. nigra с применением двойной инактивации получены три клона растенийрегенерантов, объединяющих в себе три генома Brassica (А, В, С). Гибридность ядра подтверждается биохимическим (множественные молекулярные формы амилаз эстераз и аспартатаминотрансфераз) и морфолого-физиологическим анализами. Исследование рестриктов хлоропластной ДНК показало наличие у клонов растений пластома рапса. Полученные гибриды рапс + горчица представляют интерес в плане изучения межгеномного взаимодействия в пределах рода Brassica, а также имеют практическую ценность как исходный материал для селекции.
format Article
author Сахно, Л.А.
Череп, Н.Н.
Скаржинская, М.В.
Глеба, Ю.Ю.
author_facet Сахно, Л.А.
Череп, Н.Н.
Скаржинская, М.В.
Глеба, Ю.Ю.
author_sort Сахно, Л.А.
title Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.)
title_short Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.)
title_full Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.)
title_fullStr Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.)
title_full_unstemmed Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.)
title_sort соматическая гибридизация в роде brassica: получение гибридов между рапсом (brassica napus l.) и горчицей черной (brassica nigra l.)
publisher Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate 1991
topic_facet Клеточная биология
url https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/155835
citation_txt Соматическая гибридизация в роде Brassica: получение гибридов между рапсом (Brassica napus L.) и горчицей черной (Brassica nigra L.) / Л.А. Сахно, Н.Н. Череп, М.В. Скаржинская, Ю.Ю. Глеба // Биополимеры и клетка. — 1991. — Т. 7, № 5. — С. 62-65. — Бібліогр.: 16 назв. — рос.
series Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv AT sahnola somatičeskaâgibridizaciâvrodebrassicapolučeniegibridovmeždurapsombrassicanapusligorčicejčernojbrassicanigral
AT čerepnn somatičeskaâgibridizaciâvrodebrassicapolučeniegibridovmeždurapsombrassicanapusligorčicejčernojbrassicanigral
AT skaržinskaâmv somatičeskaâgibridizaciâvrodebrassicapolučeniegibridovmeždurapsombrassicanapusligorčicejčernojbrassicanigral
AT glebaûû somatičeskaâgibridizaciâvrodebrassicapolučeniegibridovmeždurapsombrassicanapusligorčicejčernojbrassicanigral
AT sahnola somatičnagíbridizacíâvrodíbrassicaoderžannâgíbridívmížrapsombrassicanapuslígírčiceûčornoûbrassicanigral
AT čerepnn somatičnagíbridizacíâvrodíbrassicaoderžannâgíbridívmížrapsombrassicanapuslígírčiceûčornoûbrassicanigral
AT skaržinskaâmv somatičnagíbridizacíâvrodíbrassicaoderžannâgíbridívmížrapsombrassicanapuslígírčiceûčornoûbrassicanigral
AT glebaûû somatičnagíbridizacíâvrodíbrassicaoderžannâgíbridívmížrapsombrassicanapuslígírčiceûčornoûbrassicanigral
AT sahnola somatichybridizationingenusbrassicahybridsbetweenrapeseedbrassicanapuslandblackmustardbrassicanigral
AT čerepnn somatichybridizationingenusbrassicahybridsbetweenrapeseedbrassicanapuslandblackmustardbrassicanigral
AT skaržinskaâmv somatichybridizationingenusbrassicahybridsbetweenrapeseedbrassicanapuslandblackmustardbrassicanigral
AT glebaûû somatichybridizationingenusbrassicahybridsbetweenrapeseedbrassicanapuslandblackmustardbrassicanigral
first_indexed 2025-11-26T11:52:35Z
last_indexed 2025-11-26T11:52:35Z
_version_ 1849853697974075392
fulltext 12. Genetic a n a l y s i s of r e v e r t a n t s fo r the n i t r a t e r e d u c t a s e f u n c t i o n of Nicotiana plum- baginifolia / R Dirks, U N e g r u t i u , M. He inde ryck , M. J a c o b s / / М о ї . and Gen. Ge- n e t . — 1 9 8 6 . — 2 0 2 , N 2 . — P . 309—311. 13. Negrutiu /., Dirks RJacobs M. R e g e n e r a t i o n of f u l l y n i t r a t e r e d u c t a s e de f i c i en t m u t a n t s f r o m p r o t o p l a s t s c u l t u r e of Nicotiana plutnbaginifolia (Viviani) 11 Theor . a n d App 1. Gene t .— 1983.— 66, N 4 . — P . 341—347. 14. Fusion of p l a n t p r o t o p l a s t s : A s t u d y u s i n g auxo t roph ic m u t a n t s of Nicoii na plum- baginifolia / I. N e g r u t i u , D. de B r o w e r , S. W. W a t t s et a l . / / I b i d . — 1 9 8 6 . — 72, N 2 .— P . 279—286. 15. Nitrate r e d u c t a s e def ic ien t cell l ines f r o m h a p l o i d p r o t o p l a s t c u l t u r e s of Nicotiana plumbaginifolia / L. M a r t o n , Τ. M. D u n g , R. R. Mende l , P . M a l i g a / / MoL a n d G e n . Gene t .— 1982,— 182, N 2 , — P . 301—304. 16 A. BatnHI f a m i l y of h i g h l y r epea t ed D N A sequences of Nicoiiana tabacum / B. K o u - ka lova , J. Reich, R. M a t y a s e k et a l . / / T h e o r . and Appl . G e n e t . — 1 9 8 9 . — 78, N 1.— P. 77—80. 17. Dellaporta S. L., Wood J., Hicks J. B. A p l a n t D N A m i n i p r e p a r a t i o n : Ve r s ion I I / / P l a n t Мої . Biol . Rep t s .— 1983 .—4, N 1 . — P . 19—21. 18. Southern Ε. M. Detec t ion of specif ic sequences a m o n g DNA f r a g m e n t s s e p a r a t e d by gel e l e c t r o p h o r e s i s / / J . Мої . Biol .— 1975,— 98, N 1 , — P . 503—518. 19. Intrageneric a s y m m e t r i c h y b r i d s be tween Nicotiana plutnbaginifolia and Nicotiana sylvestris o b t a i n e d by « g a m m a - f u s i o n » / I. F a m e l a e r , Y. Y. Gleba , V. A. S i d o r o v et a l . / / P l a n t S c i . - 1 9 8 9 . — 6 1 , N 1 , — P . 105—117. 20. Asymmetric h y b r i d i z a t i o n in Nicotiana by « g a m m a - f u s i o n » and p r o g e n y a n a l y s i s of se l f - f e r t i l e h y b r i d s / I. F a m e l a e r , I. N e g r u t i u , A. M o u r a s et a l . / / T h e o r . and Appl . Gene t .— 1990 ,—79, N 4 . — P . 513—520. Ин-т клеточ. биологии и генет. инженерии А Н УССР, Получено 14.01.91 Киев УДК 575.143 Л. А. Сахно, Н. Н. Череп, М. В. Скаржинская, Ю. Ю. Глеба СОМАТИЧЕСКАЯ ГИБРИДИЗАЦИЯ В РОДЕ BRASSICA: ПОЛУЧЕНИЕ ГИБРИДОВ МЕЖДУ РАПСОМ (BRASSICA NAPUS L.) И ГОРЧИЦЕЙ ЧЕРНОЙ (BRASSICA NIGRA L.) Методом соматической гибридизации гипокотильных протопластов В. napus и мезо- фильных В. nigra с применением двойной инактивации получены три клона растений- регенерантов, объединяющих в себе три генома Brassica (А, В, С). Гибридность ядра подтверждается биохимическим (множественные молекулярные формы амилаз эсте- раз и аспартатаминотрансфераз) и морфолого-физиологическим анализами. Исследова- ние рестриктов хлоропластной ДНК показало наличие у клонов растений пластома рапса. Полученные гибриды рапс +горчица представляют интерес в плане изучения межгеномного взаимодействия в пределах рода Brassica, а также имеют практическую ценность как исходный материал для селекции. Введение. Семейство Brassicaceae объединяет более 3000 видов расте- ний, среди них такие ценные сельскохозяйственные культуры, как ріапс В. napus и горчица черная В. nigra. Род Brassiea характеризуется на- личием трех типов геномов — A1 B1 С, причем В. napus имеет геном AC1 В. nigra — геном В [1]. Объединение трех геномов в одном расте- нии интересно с точки зрения межгеномного взаимодействия. Кроме того, у горчицы черной обнаружена полная устойчивость к широко распространенному заболеванию черная ножка, вызываемому Phoma Iingam [2]. Поэтому гибридные растения могут оказаться полезными и с практической точки зрения, что и подтверждено исследованиями Сакристан с соавт. [3] и Шедин и Глимелиус [4]. В данной работе предпринята попытка получения соматических гибридов В. napus и В. nigra на основе некоторых сортов рапса отечественной селекции. Материалы и методы. В качестве исходного материала использо- вали семена рапса сорта Марьяновский (Украинская сельскохозяйст- венная академия) и горчицы черной К-2656 (Канада). Гипокотильные <С) л . А. САХНО, Η. Н. Ч Е Р Е П , М. В. С К А Р Ж И Н С К А Я , Ю. Ю. ГЛЕБА, 1991 62 ISSN 023-3-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 5- протопласты получали из 3—5-дневных этиолированных проростков В. riapus по методике, принятой в нашей лаборатории [5]. Мезофильные протопласты выделяли при ферментировании листьев асептически вы- ращиваемых растений В. nigra [6]. Перед слиянием проводили двой- ную инактивацию протопластов [7]: гипокотильные обрабатывали 10 мМ раствором йодацетамида 20 мин при 4 °С, мезофильные — гам- ма-облучением дозой 500 Г.р (источник — Со60, 0,1 Гр/с) . Слияние осу- ществляли по методике Менделя с соавт. [8]. Продукты слияния куль- тивировали в условиях, близких для изолированных гипокотильных протопластов [5]. Регенерацию достигали на среде NB2 [9]. Растения- регенеранты выращивали на безгормональной среде MS [10], затем в почве в условиях теплицы. У полу- ченных регенерантов анализирова- ли морфологию, изоферментный состав (множественные молекуляр- ные формы амилаз, эстераз и ас- партатаминотрансфераз) и рестрик- ты хлДНК. Белки подвергали элек- трофоретическому фракционирова- нию в 75 %-ном полиакриламидном геле (ПААГ) [11]. Ферменты вы- являли общепринятым методом [12]. Анализ хлДНК проводили по ранее описанной методике [13] с небольшими модификациями. Результаты и обсуждение. При отборе продуктов слияния В. riapus и В. nigra использовали двойную инактивацию родительских про- топластов. Иодацетамид подавлял деление гипокотильных протоплас- тов рапса, оставляя их жизнеспособными в течение 24—36 ч, тогда как в норме они активно делились уже в первые сутки культивирования. Мезофильные протопласты В. nigra в используемой среде демонстри- ровали единичные деления, для их инактивации применяли гамма-об- лучение. В ходе экспериментов получены 138 каллусных клонов, шесть из которых регенерировали. Растения-регенеранты были морфологиче- ски нормальными, хорошо укоренялись и были высажены в почву в ус- ловиях теплицы. Фенотипически они либо близки к В. napus (линии 6Bngll, 6Bng23, 6Bng27)1 либо занимали промежуточное положение (i6Bng4, 6Bng6, 6Bngl9). Листовая пластинка горчицы черной в куль- туре имеет ланцетовидную форму, гладкий край, характерные прили- стники. Лист рапса округлой формы, зубчатый, без прилистников, лис- товая пластинка в 2—3 раза крупнее по сравнению с таковой у горчи- цы. Регенерировавшие растения имели листья, по величине соразмер- ные с рапсом, однако форма стала более близкой к В. nigra, появи- лись прилистники, зубчатость края сохранилась, хотя значительно меньше выраженная. Морфология листовой пластинки родительских форм и линии 6Bng4 представлена на рис. 1. Следует отметить, что все регенеранты проявляли ярко выраженные гетерозисные свойства: ус- коренный и мощный рост, более интенсивную зеленую окраску листь- ев по сравнению с исходными формами, что может быть обусловлено' как их гибридной природой, так и условиями культивирования in vit- ro. При асептическом выращивании растения горчицы цвели при 16-ч фотопериоде, растения рапса и гибридные не зацветали. Высаженные в почву регенеранты цвели, образовывали фертильную пыльцу и дали семена при самоопылении. Для характеристики полученных растений-регенерантов исследова- ли их изоферментную активность. На рис. 2 приведены результаты анализа множественных молекулярных форм ферментов растений, по- лученных после слияния протопластов, и их родительских форм (а — амилазы; б — эстеразы; β — аспартатаминотрансферазы; Bn — В. na- pus; Bng — В. nigra; цифры — исследуемые клоны). Три линии — 63 ISSN 023-3-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 5- 6Bng4, 6Bng6 и 6Bngl9 обладали формами исследуемых ферментов, ха- рактерными для обоих родительских видов. Подобные результаты по- лучены в работах по гибридизации В. oleracea и В. campestris [14, 19 Впд Bn 23 11 В 4 Рис . 2 15]. Три линии растений-регенерантов ( 6 B n g l l , 6Bng23, 6Btig27) по исследуемым характеристикам напоминали исходный рапс, но отлича- лись от него интенсивностью полос изоферментов, что может являться следствием сомаклональной вариабельности в культуре in vivo [16] либо результатом облу- чения родительских протопластов горчицы [15]. Исследование хлДНК выявило наличие у исследуемых клонов растений хлДНК, ха- рактерной для В. napus (рис. 3: рестриктный анализ хлДНК ферментом BamHI растений, полученных в результате слияния протоплас- тов, и их родительских форм; обозначения, как на рис. 2). Шедин и Глимелиус предпо- ложили, что подобный результат может быть вызван несовместимостью цитоплазматичес- ких генетических детерминант, вследствие че- го происходит селективная сегрегация пласто- ма одного из родителей. Нельзя исключить и влияния на этот процесс условий культиви- рования, при которых протопласты партнера- «сегреганта» не делятся. Полученные результаты позволяют сде- лать вывод о· том, что по крайней мере три из проанализированных клонов растений-ре- генерантов (6Bng4, 6Bng6, 6Bngl9) являются соматическими гибрида- ми между В. napus и В. nigra, несущими геномы (или части их) обоих родителей, гены цитоплазмы у гибридных растений происходят от рап- са. Таким образом, синтезированные методами клеточной инженерии растения имеют комбинации генов, которые невозможно получить с по- мощью полового скрещивания. Такие растения могут представлять практическую ценность и являются исходным материалом для селекции. Р и с . З 6 4 ISSN 023-3-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 5- Р е з ю м е М е т о д о м соматичної г ібридизаці ї г іпокотильних протопласт ів В. napus і мезофільних В. nigra із з а с т о с у в а н н я м подвійної інактиваці ї о д е р ж а н о три клони рослин-регене- рантів , щ о об ' єднують в собі три геноми Brassica (A, Bi С). Г ібридність я д р а під- т в е р д ж у є т ь с я біохімічним (множинні молекулярн і ф о р м и амілаз , естераз і а с п а р т а т а - м і н о т р а н с ф е р а з ) та морфолого-ф і з іолог чним а н а л і з а м и . Д о с л і д ж е н н я рестрикт ів хло- ропластно ї Д Н К в и я в и л о наявн ість у клонів рослин п л а с т о м у р іпака . О д е р ж а н і гіб- риди р і п а к + г і р ч и ц я в и к л и к а ю т ь інтерес в плані вивчення м і ж г е н о м н о ї в заємод і ї в ме- ж а х р о д у Brassica, а т а к о ж м а ю т ь практичну цінність як вихідний м а т е р і а л д л я селекці ї . S u m m а г у By u s i n g of the m e t h o d of s o m a t i c h y b r i d i z a t i o n w i t h doub le i n a c t i v a t i o n of hypoco ty l p r o t o p l a s t s of B. napus a n d mesophy l l p r o t o p l a s t s of B. n i g r a w e r e o b t a i n e d 3 c lones of h y b r i d p l a n t s . Gene t ic n o v e l t y of r e g e n e r a n t s w a s s h o w n by s t u d y of m o r p h o l o g y , phys io logy , i sozymes (es te rase , a m y l a s e , a s p a r t a t a m i n o t r a n s f e r a s e ) , c h l o r o p l a s t D N A s . O b t a i n e d h y b r i d p l a n t s m a y be t r e a t e d by p rac t i ca l se lec t ion . С П И С О К Л И Т Е Р А Т У Р Ы 1. UN. G e n o m e a n a l y s i s in Brassica w i th spec ia l r e f e r e n c e to the e x p e r i m e n t a l fo r - m a t i o n of B. napus a n d pecu l i a r m o d e to f e r t i l i z a t i o n / / J a p . J . Bo t .— 1935.— 7, N 3,— P. 389—452. 2. Sjodin C., Glimelius K. S c r e e n i n g fo r r e s i s t a n c e to b l a c k l e g Phoma lingam (Tode ex Fr.) Desm. w i t h i n Brassieaeeae / / J . P h y t o p a t h o l . — 1988.— 123, N 3 . — P . 322—332. 3. Sacristan M. D., Gerdemann-Knorck M., Schieder 0. I n c o r p o r a t i o n of h y d r o m y c i n r e s i s t a n c e in Brassica nigra a n d i ts t r a n s f e r to B. napus t h r o u g h a s y m m e t r i c p ro to - p l a s t f u s i o n / / T h e o r . and Appl . Gene t .— 1989 .—78, N 2 . — P . 194—200. 4. Sjodin C., Glimelius K. Brassica naponigra, a s o m a t i c h y b r i d r e s i s t a n t to Phoma lingam 11 I b i d . — 7 7 , N 5 . — P . 651—656. 5. Сахно JI. А., Скаржинская Μ. В. Р е г е н е р а ц и я растений из и з о л и р о в а н н ы х про- топластов Brassica J/ФИЗИОЛОГИЯ растений.— 1990.— 37, № 1.— С. 188—192. 6. Kohlenbach Н. W., Wenzel G., Hoffmann F. R e g e n e r a t i o n of Brassica napus p l a n t - lets in c u l t u r e s f r o m i so la ted p r o t o p l a s t s of h a p l o i d s t e m e m b r y o s as c o m p a r e d w i th leaf p r o t o p l a s t s / / Z . P f l a n z e n p h y s i o l . — 1982.— 105, N 2 . — P . 131—142. 7. Chloroplast t r a n s f e r in Nicotiana b a s e d on me tabo l i c c o m p l e m e n t a t i o n b e t w e e n ir- r a d i a t e d a n d i o d a c e t a t e t r e a t e d p r o t o p l a s t s / V. A. S ido rov , L. Mencze l , F. N a g y , P . M a l i g a / / P i a n t a . — 1981.— 152, N 2 . — P . 341—345. 8. Effect of r a d i a t i o n d o s a g e on e f f i c i ency of c h l o r o p l a s t t r a n s f e r by p r o t o p l a s t f i b s ion in Nicotiana / L. Mencze l , G. Ga l iba , F. N a g y , P . M a l i g a / / Gene t i cs .— 1982.— 1 0 0 . — P . 487—495. 9. Toriyama K., Hinata K., Karneya T. P r o d u c t i o n s o m a t i c h y b r i d p l a n t s «Brassicomo- ricandia» t h r o u g h p r o t o p l a s t f u s i o n b e t w e e n Moricandia arvensis and Brassica ole- racea / / P l a n t S c i . - 1987,— 48, N 2 , — P . 123—128. 10. Murashige Ύ., Skoog F. A rev i sed m e d i u m fo r r a p i d g r o w t h a n d b i o a s s a y s w i t h tobacco t i s sue c u l t u r e s / / P h y s i o l . P l a n t . — 1962.— 15, N 2 . — P . 473—479. 11. Maurer H. R. Disk e l ec t rophores i s and r e l a t ed t echn iques of p o l y a c r y l a m i d e gel e l ec t rophores i s .— Ber l in : W a l t e r de Gruy t e r , 1976.— 187 p. 12. Brewer G. Y. An i n t r o d u c t i o n to i sozyme t echn iques .— N e w York : Acad , p ress , 1970.— 230 p. 13. Bookjans G., Stummann B. M., Hennitigsen K. W. P r e p a r a t i o n of c h l o r o p l a s t D N A f r o m pea o l a s t i d s i so la ted in a m e d i u m of h igh ionic s t r e n g h t / / Ana l . B iochem.— 1984.— 141, N 2 . — P . 244—247. 14. Somatic h y b r i d s b e t w e e n Brassica oleracea a n d B. campestris: se lec t ion by the use of i o d o a c e t a m i d e i nac t i va t i on and r e g e n e r a t i o n a b i l i t y / R . T e r a d a , J . Y a m a s h i t a , S. N i sh ibayash i , K- S h i m a m o t o / / T h e o r . a n d Appl . Gene t .— 1987 .—73 , N 3.— P . 379—384. 15. Asymmetric s o m a t i c h y b r i d s of Brassica: p a r t i a l t r a n s f e r of B. campestris g e n o m e in to B. oleracea by cell f u s i o n / Y . Y a m a s h i t a , R. T e r a d a , S. N i s h i b a y a s h i , K. Shi- m a m o t o / / I b i d . — 1989 .—77, N 2 . — P . 189—194. 16. Larkin P. J., Scowcroft W. R. S o m a c l o n a l v a r i a t i o n — a nove l sou rce of v a r i a b i l i t y f r o m cell c u l t u r e s fo r p l a n t i m p r o v e m e n t / / I b i d . — 1981 .—60, N 1 . — P . 197—214. Ин-т клеточ. биологии и генет. инженерии А Н У С С Р , П о л у ч е н о 14.01.91 Киев 65 ISSN 023-3-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1991. Т. 7. № 5-