Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms homodimers via its C-terminus
Aim. Previously we have identified a novel isoform of endocytic adaptor protein ITSN1 designated as ITSN1-
 22a. Western blot revealed two immunoreactive bands of 120 and 250 kDa that corresponded to ITSN1-22a. The
 goal of this study was to investigate the possibility of dimer forma...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Вiopolymers and Cell |
|---|---|
| Дата: | 2011 |
| Автори: | , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Англійська |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
2011
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156042 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms
 homodimers via its C-terminus / M.V. Dergai, O.V. Dergai, L.O. Tsyba, O.V. Novokhatska, I.Ya. Skrypkina, A.V. Rynditch // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 4. — С. 306-309. — Бібліогр.: 14 назв. — англ. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1862590348733186048 |
|---|---|
| author | Dergai, M.V. Dergai, O.V. Tsyba, L.O. Novokhatska, O.V. Skrypkina, I.Ya. Rynditch, A.V. |
| author_facet | Dergai, M.V. Dergai, O.V. Tsyba, L.O. Novokhatska, O.V. Skrypkina, I.Ya. Rynditch, A.V. |
| citation_txt | Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms
 homodimers via its C-terminus / M.V. Dergai, O.V. Dergai, L.O. Tsyba, O.V. Novokhatska, I.Ya. Skrypkina, A.V. Rynditch // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 4. — С. 306-309. — Бібліогр.: 14 назв. — англ. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Вiopolymers and Cell |
| description | Aim. Previously we have identified a novel isoform of endocytic adaptor protein ITSN1 designated as ITSN1-
22a. Western blot revealed two immunoreactive bands of 120 and 250 kDa that corresponded to ITSN1-22a. The
goal of this study was to investigate the possibility of dimer formation by the novel isoform. Methods. Dimerization ability of ITSN1-22a was tested by immunoprecipitation and subsequent Western blot analysis. To
specify the region responsible for dimerization, site-directed mutagenesis and truncation analysis were carried
out. Inhibition of endocytosis by potassium depletion and EGF stimulation of HEK293 were performed. Results.
We have found that ITSN1-22a forms dimers in HEK293 cells. The dimerization of ITSN1-22a was mediated by
C-terminal domain. We showed that cysteines C1016 and C1019 were involved in homodimerization. Inhibition
of clathrin-mediated endocytosis and mitogen stimulation did not affect ITSN1-22a dimer formation. Conclusions. ITSN1-22a is the only one known ITSN1 isoform, which is capable to form homodimers via disulphide
bonds. This could be important for the formation of protein complexes containing ITSN1 molecules.
Keywords: intersectin 1, isoform, homodimer.
Мета. Раніше нами ідентифіковано нову ізоформу адаптерного
білка ITSN1, названу ITSN1-22a. Вестерн-блот аналіз виявив наявність двох імунореактивних смуг 120 і 250 кДа, що відповідають ITSN1-22a. Мета цієї роботи полягала у вивченні здатності
нової ізоформи формувати димери. Методи. Імунопреципітацію і Вестерн-блот аналіз використано для дослідження здатності ізоформи до димеризації. Ідентифікацію ділянки, що відповідає за формування димерів, здійснювали за допомогою сайтспрямованого мутагенезу та делеційного аналізу. Інгібування ендоцитозу індукували дефіцитом іонів калію. Для мітогенної стимуляції клітин HEK293 застосовано епідермальний фактор росту. Результати. Нами виявлено, що надекспресована в клітинах
НЕК293 ізоформа ITSN1-22a формує димери. Димеризація обумовлена специфічним для цієї ізоформи С-кінцевим доменом. Нами показано, що цистеїни С1016 і С1019 залучені до процесу гомодимеризації. Інгібування клатрин-опосередкованого ендоцитозу та стимуляція клітин мітогеном не впливають на формування
димерів ізоформою ITSN1-22a. Висновки. ITSN1-22a – це єдина
відома на сьогодні ізоформа ITSN1, здатна утворювати гомодимери за допомогою дисульфідних зв’язків, що може бути важливим для формування ITSN1-вмісних білкових комплексів.
Ключові слова: інтерсектин 1, ізоформа, гомодимер.
Цель. Ранее мы идентифицировали новую изоформу адаптерного
эндоцитозного белка ITSN1, названную ITSN1-22a. Вестерн-блот
анализ выявил наличие двух иммунореактивных полос 120 и 250
кДа, соответствующих ITSN1-22a. Цель этой работы состояла
в изучении возможности формирования димеров изоформой
ITSN1-22a. Методы. Иммунопреципитация и Вестерн-блот анализ использованы для исследования возможности димеризации
изоформы. Идентификацию участка, отвечающего за димеризацию, осуществляли с помощью сайт-направленного мутагенеза и
делеционного анализа. Ингибирование эндоцитоза индуцировали
дефицитом ионов калия. Для митогенной стимуляции клеток применен эпидермальный фактор роста. Результаты. Нами обнаружено, что сверхэкспрессированная в клетках НЕК293 изоформа ITSN1-22a формирует димеры. Димеризация изоформы обусловлена ее специфическим С-концевым доменом. Нами показано,
что цистеины С1016 и С1019 вовлечены в процесс гомодимеризации. Ингибирование клатрин-опосредованного эндоцитоза и митогенная стимуляция клеток не влияют на формирование димеров изоформой ITSN1-22a. Выводы. ITSN1-22a – это единственная на сегодня изоформа ITSN1, способная образовывать гомодимеры посредством дисульфидных связей, что может быть важно для формирования ITSN1-содержащих белковых комплексов.
Ключевые слова: интерсектин 1, изоформа, гомодимер.
|
| first_indexed | 2025-11-27T04:32:39Z |
| format | Article |
| fulltext | |
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156042 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | English |
| last_indexed | 2025-11-27T04:32:39Z |
| publishDate | 2011 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Dergai, M.V. Dergai, O.V. Tsyba, L.O. Novokhatska, O.V. Skrypkina, I.Ya. Rynditch, A.V. 2019-06-17T19:23:09Z 2019-06-17T19:23:09Z 2011 Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms
 homodimers via its C-terminus / M.V. Dergai, O.V. Dergai, L.O. Tsyba, O.V. Novokhatska, I.Ya. Skrypkina, A.V. Rynditch // Вiopolymers and Cell. — 2011. — Т. 27, № 4. — С. 306-309. — Бібліогр.: 14 назв. — англ. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000110 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156042 577.22 Aim. Previously we have identified a novel isoform of endocytic adaptor protein ITSN1 designated as ITSN1-
 22a. Western blot revealed two immunoreactive bands of 120 and 250 kDa that corresponded to ITSN1-22a. The
 goal of this study was to investigate the possibility of dimer formation by the novel isoform. Methods. Dimerization ability of ITSN1-22a was tested by immunoprecipitation and subsequent Western blot analysis. To
 specify the region responsible for dimerization, site-directed mutagenesis and truncation analysis were carried
 out. Inhibition of endocytosis by potassium depletion and EGF stimulation of HEK293 were performed. Results.
 We have found that ITSN1-22a forms dimers in HEK293 cells. The dimerization of ITSN1-22a was mediated by
 C-terminal domain. We showed that cysteines C1016 and C1019 were involved in homodimerization. Inhibition
 of clathrin-mediated endocytosis and mitogen stimulation did not affect ITSN1-22a dimer formation. Conclusions. ITSN1-22a is the only one known ITSN1 isoform, which is capable to form homodimers via disulphide
 bonds. This could be important for the formation of protein complexes containing ITSN1 molecules.
 Keywords: intersectin 1, isoform, homodimer. Мета. Раніше нами ідентифіковано нову ізоформу адаптерного
 білка ITSN1, названу ITSN1-22a. Вестерн-блот аналіз виявив наявність двох імунореактивних смуг 120 і 250 кДа, що відповідають ITSN1-22a. Мета цієї роботи полягала у вивченні здатності
 нової ізоформи формувати димери. Методи. Імунопреципітацію і Вестерн-блот аналіз використано для дослідження здатності ізоформи до димеризації. Ідентифікацію ділянки, що відповідає за формування димерів, здійснювали за допомогою сайтспрямованого мутагенезу та делеційного аналізу. Інгібування ендоцитозу індукували дефіцитом іонів калію. Для мітогенної стимуляції клітин HEK293 застосовано епідермальний фактор росту. Результати. Нами виявлено, що надекспресована в клітинах
 НЕК293 ізоформа ITSN1-22a формує димери. Димеризація обумовлена специфічним для цієї ізоформи С-кінцевим доменом. Нами показано, що цистеїни С1016 і С1019 залучені до процесу гомодимеризації. Інгібування клатрин-опосередкованого ендоцитозу та стимуляція клітин мітогеном не впливають на формування
 димерів ізоформою ITSN1-22a. Висновки. ITSN1-22a – це єдина
 відома на сьогодні ізоформа ITSN1, здатна утворювати гомодимери за допомогою дисульфідних зв’язків, що може бути важливим для формування ITSN1-вмісних білкових комплексів.
 Ключові слова: інтерсектин 1, ізоформа, гомодимер. Цель. Ранее мы идентифицировали новую изоформу адаптерного
 эндоцитозного белка ITSN1, названную ITSN1-22a. Вестерн-блот
 анализ выявил наличие двух иммунореактивных полос 120 и 250
 кДа, соответствующих ITSN1-22a. Цель этой работы состояла
 в изучении возможности формирования димеров изоформой
 ITSN1-22a. Методы. Иммунопреципитация и Вестерн-блот анализ использованы для исследования возможности димеризации
 изоформы. Идентификацию участка, отвечающего за димеризацию, осуществляли с помощью сайт-направленного мутагенеза и
 делеционного анализа. Ингибирование эндоцитоза индуцировали
 дефицитом ионов калия. Для митогенной стимуляции клеток применен эпидермальный фактор роста. Результаты. Нами обнаружено, что сверхэкспрессированная в клетках НЕК293 изоформа ITSN1-22a формирует димеры. Димеризация изоформы обусловлена ее специфическим С-концевым доменом. Нами показано,
 что цистеины С1016 и С1019 вовлечены в процесс гомодимеризации. Ингибирование клатрин-опосредованного эндоцитоза и митогенная стимуляция клеток не влияют на формирование димеров изоформой ITSN1-22a. Выводы. ITSN1-22a – это единственная на сегодня изоформа ITSN1, способная образовывать гомодимеры посредством дисульфидных связей, что может быть важно для формирования ITSN1-содержащих белковых комплексов.
 Ключевые слова: интерсектин 1, изоформа, гомодимер. en Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Вiopolymers and Cell Short Communications Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms homodimers via its C-terminus Нова ізоформа адаптерного білка ITSN1 формує гомодимери за посередництвом власного С-кінцевого домену Новая изоформа адаптерного белка ITSN1 формирует гомодимеры посредством своего С-концевого домена Article published earlier |
| spellingShingle | Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms homodimers via its C-terminus Dergai, M.V. Dergai, O.V. Tsyba, L.O. Novokhatska, O.V. Skrypkina, I.Ya. Rynditch, A.V. Short Communications |
| title | Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms homodimers via its C-terminus |
| title_alt | Нова ізоформа адаптерного білка ITSN1 формує гомодимери за посередництвом власного С-кінцевого домену Новая изоформа адаптерного белка ITSN1 формирует гомодимеры посредством своего С-концевого домена |
| title_full | Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms homodimers via its C-terminus |
| title_fullStr | Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms homodimers via its C-terminus |
| title_full_unstemmed | Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms homodimers via its C-terminus |
| title_short | Novel isoform of adaptor protein ITSN1 forms homodimers via its C-terminus |
| title_sort | novel isoform of adaptor protein itsn1 forms homodimers via its c-terminus |
| topic | Short Communications |
| topic_facet | Short Communications |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156042 |
| work_keys_str_mv | AT dergaimv novelisoformofadaptorproteinitsn1formshomodimersviaitscterminus AT dergaiov novelisoformofadaptorproteinitsn1formshomodimersviaitscterminus AT tsybalo novelisoformofadaptorproteinitsn1formshomodimersviaitscterminus AT novokhatskaov novelisoformofadaptorproteinitsn1formshomodimersviaitscterminus AT skrypkinaiya novelisoformofadaptorproteinitsn1formshomodimersviaitscterminus AT rynditchav novelisoformofadaptorproteinitsn1formshomodimersviaitscterminus AT dergaimv novaízoformaadapternogobílkaitsn1formuêgomodimerizaposerednictvomvlasnogoskíncevogodomenu AT dergaiov novaízoformaadapternogobílkaitsn1formuêgomodimerizaposerednictvomvlasnogoskíncevogodomenu AT tsybalo novaízoformaadapternogobílkaitsn1formuêgomodimerizaposerednictvomvlasnogoskíncevogodomenu AT novokhatskaov novaízoformaadapternogobílkaitsn1formuêgomodimerizaposerednictvomvlasnogoskíncevogodomenu AT skrypkinaiya novaízoformaadapternogobílkaitsn1formuêgomodimerizaposerednictvomvlasnogoskíncevogodomenu AT rynditchav novaízoformaadapternogobílkaitsn1formuêgomodimerizaposerednictvomvlasnogoskíncevogodomenu AT dergaimv novaâizoformaadapternogobelkaitsn1formiruetgomodimeryposredstvomsvoegoskoncevogodomena AT dergaiov novaâizoformaadapternogobelkaitsn1formiruetgomodimeryposredstvomsvoegoskoncevogodomena AT tsybalo novaâizoformaadapternogobelkaitsn1formiruetgomodimeryposredstvomsvoegoskoncevogodomena AT novokhatskaov novaâizoformaadapternogobelkaitsn1formiruetgomodimeryposredstvomsvoegoskoncevogodomena AT skrypkinaiya novaâizoformaadapternogobelkaitsn1formiruetgomodimeryposredstvomsvoegoskoncevogodomena AT rynditchav novaâizoformaadapternogobelkaitsn1formiruetgomodimeryposredstvomsvoegoskoncevogodomena |