Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном
Показано частичное коррегирующее действие витамина E на структурно-функциональную организацию ядерного хроматина печени крыс, нарушенную в условиях интоксикации тетрахлорметаном. Оно опосредуется, прежде всего, антиоксидантным действием α-токоферола, что выражается в нормализации течения реакций спо...
Gespeichert in:
| Veröffentlicht in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Datum: | 1993 |
| Hauptverfasser: | , , , , , , , |
| Format: | Artikel |
| Sprache: | Russisch |
| Veröffentlicht: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1993
|
| Schlagworte: | |
| Online Zugang: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156213 |
| Tags: |
Tag hinzufügen
Keine Tags, Fügen Sie den ersten Tag hinzu!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Zitieren: | Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном / Ю.И. Губский, Е.Л. Левицкий, Р.Г. Примак, А.Г. Горюшко, Л.К. Ленчевкая, В.А. Матюшкин, И.Е. Вистунова, Л.Г. Саченко // Биополимеры и клетка. — 1993. — Т. 9, № 3. — С. 27-34. — Бібліогр.: 14 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| _version_ | 1859796296935669760 |
|---|---|
| author | Губский, Ю.И. Левицкий, Е.Л. Примак, Р.Г. Горюшко, А.Г. Ленчевская, Л.К. Матюшкин, В.А. Вистунова, И.Е. Саченко, Л.Г. |
| author_facet | Губский, Ю.И. Левицкий, Е.Л. Примак, Р.Г. Горюшко, А.Г. Ленчевская, Л.К. Матюшкин, В.А. Вистунова, И.Е. Саченко, Л.Г. |
| citation_txt | Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном / Ю.И. Губский, Е.Л. Левицкий, Р.Г. Примак, А.Г. Горюшко, Л.К. Ленчевкая, В.А. Матюшкин, И.Е. Вистунова, Л.Г. Саченко // Биополимеры и клетка. — 1993. — Т. 9, № 3. — С. 27-34. — Бібліогр.: 14 назв. — рос. |
| collection | DSpace DC |
| container_title | Биополимеры и клетка |
| description | Показано частичное коррегирующее действие витамина E на структурно-функциональную организацию ядерного хроматина печени крыс, нарушенную в условиях интоксикации тетрахлорметаном. Оно опосредуется, прежде всего, антиоксидантным действием α-токоферола, что выражается в нормализации течения реакций спонтанного и индуцированного переокисления липидов в активной и низкоактивной фракциях хроматина. Введение витамина E приводит также к частичной нормализации активности эндогенных РНК-полимераз, ДНК-полимеразы β и к стимуляции активности репликативной ДНК-полимеразы а в активной фракции хроматина. Описан процесс взаимодействия α-токоферола с фракциями хроматина in vitro. Интоксикация тетрахлорметаном мало влияет на способность репрессированного хроматина к комплексообразованию с витамином Е, но усиливает связывание его с активной фракцией хроматина. Выявлены различия в природе химического взаимодействия активной и низкоактивной фракций хроматина с α-токоферолом in vitro, свидетельствующие о различной локализации витамина E в хроматине. Взаимодействие витамина E с хроматином, частично восстанавливает его структуру, нарушенную в результате интоксикации, что наряду с антиоксидантным эффектом является одним из возможных механизмов его генопротекторного действия.
Показано часткову корегуючу дію вітаміну E на структурно-функціональну організацію ядерного хроматину печінки щурів, порушену в умовах інтоксикації тетрахлорметаном. Вона опосередковується, насамперед, антиоксидантну дію α -токоферолу, що виражається в нормалізації перебігу реакцій спонтанного та індукованого переокиснення ліпідів в активній і низькоактивної фракціях хроматину. Введення вітаміну E приводить також до часткової нормалізації активності ендогенних РНК-полімерази, ДНК-полімерази β і до стимуляції активності репликативной ДНК-полімерази а в активній фракції хроматину. Описано процес взаємодії α -токоферолу з фракціями хроматину in vitro . Інтоксикація тетрахлорметаном мало впливає на здатність репресованого хроматину до комплексоутворення з вітаміном Е, але посилює зв'язування його з активною фракцією хроматину. Виявлено відмінності в природі хімічної взаємодії активної і низькоактивної фракцій хроматину з α -токоферол in vitro , що свідчать про різної локалізації вітаміну E в хроматині. Взаємодія вітаміну E з хроматином, частково відновлює його структуру, порушену в результаті інтоксикації, що поряд з антиоксидантною ефектом є одним з можливих механізмів його генопротекторного дії.
Partial corrective influence of vitamin E introduction on structural and functional liver nuclear chromatin organization which was damaged during tetra-chloromethane intoxication was shown. This one is depended on α-tocopherol antioxidant effects that displais as normalization of spontaneous and inducted lipid peroxidation reactions in active and repressed chromatin fractions. Introduction of vitamin E leads also to partial normalization of endogenous DNA polymerase β and RNA polymerases as well as stimulation of replicative DNA polymerase a activity in active chromatin fraction. In vitro interaction process of α-tocopherol with chromatin fractions has written. Tetrachloromethane intoxication has little influence on repressed chromatin ability to form complexes with vitamine E, but increases its binding to active chromatin fraction. Differences between in vitro chemical interaction of active and repressed chromatin fractions with α-tocopherol were revealed. These ones indicate to various localization of vitamin E in chromatin. Interaction of vitamin E with chromatin leads to partial repair of its structure damaged during intoxication. This effect of vitamin E together with its antioxidant action is one of the possible mechanism of α-tocopherol.
|
| first_indexed | 2025-12-02T13:45:43Z |
| format | Article |
| fulltext |
the number of initiation centers which allows to some poly(C) molecules
to remain unused. We think that this may be the effect of σ subunit de-
ί і с і en су in definite lots of enzyme [9] but addit ional invest igat ion is
needed in order to confirm this assumption.
The authors are gra teful to Dr. Ё. A. Glazunov for his helpful assis-
tance in the synthesis of polynucleotides and to Prof. E. N. Kazbekov for
criIical read ing of the manuscr ipt .
R E F E R E N C E S
1. Суржик Μ. Φ., Вильнер JI. Af., Качурин A. JI., Тимковский Α. Л. Матричный син-
тез комплекса поли (Г) -поли (Ц) с помощью ДНК-зависимой Р В К - п о л и м е р а з ы
Escherichia coli. Исследование физико-химических свойств и биологической актив-
ности продукта реакции.— JI., 1989.— С. 1 I - 1 8 , — (Препринт / АН СССР. Ин-т
ядер, физики; № 1555).
2. Вильнер JI. M., Тимковский A. JI.. Тихомирова-Сидорова Н. С. Биологическая
активность и структурные особенности полинуклеотидных интерфероногенов //
Итоги науки и техники —Al. : В И Н И Т И , 1977 — С . 114—159.— (Сер. Вирусоло-
гия; Т. 7) .
3. Глазунов Ε. А., Чсрнаенко В. М. Новый способ иммобилизации ферментов па сили-
катных носителях // Направленный транспорт и иммобилизация биологически
активных препаратов для клинической практики.— Киев : Наук . думка, <1984.—
С. 11—Ί2.
4. Гилмор С. Транскрипция хроматина // Транскрипция и трансляция. Методы.— M . :
Мир, 1987,—С. 160—185.
5. Тимковский A. JI., Аксенов О. А., Бреслер С. Е. и др. Молекулярно-весовые харак-
теристики комплекса п о л и ( Г ) - п о л и ( Ц ) и их связь с антивирусной и интерфероно-
пенной активностью // Вопр. вирусологии.— 1973.— 18, № 3.— С. 350—355.
G. Brabec V., Timkovsky A. L. Elect rochemist ry of double-s t randed complexes of synthe-
tic polynucleot ides hav ing in te r fe ronogenic and ant ivira l act ivi ty // Gen. Physiol .
Biophys.— 1983.— 2, N 4 , — P . 487—497.
7. Суржик Μ. Α., Дятлова Η. П., Глазунов Ε. А. и др. Устойчивость природных и
синтетических полирибонуклеотидных индукторов интерферона к рибонуклеазам че-
ловеческой крови // Антибиотики и химиотерапия.— 1992.— 37.— № 1.— С. 38—45.
8. Colby С., Stoltar В. D., Simon Μ. I. In te r fe ron induct ion: DNA-RNA hybrid or
double-s t randed RNA? // Na tu re New Biol.— 1971.—229.— P. 172—174.
9. Niyoai S., Stevens A. Studied of the ribonucleic acid po lymerase f rom Escherichia
coli // J. Biol. C h e m . - 1 9 6 5 . — 2 4 0 . — P . 2587—2596.
P e t e r s b u r g ins t i tu te of Nuclear Physics , 28.09.92
Academy of Sciences of Russia
УДК 615.357.631:577.157
Ю. И. Губский, Ε. Л. Левицкий, Р. Г. Примак, А. Г. Горюшко,
Л. К. Ленчевская, В. А. Матюшкин, И. Е. Вистунова, Л. Г. Саченко
ВЛИЯНИЕ ВИТАМИНА E НА СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ
ОРГАНИЗАЦИЮ ХРОМАТИНА ПЕЧЕНИ В УСЛОВИЯХ
ПОВРЕЖДЕНИЯ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОМ
Π оказанί частичное коррегирующее действие витамина E на структурно-функциональ-
ную организацию ядерного хроматина печени крыс, нарушенную в условиях интокси-
кации тетрахлорметаном. Оно опосредуется, прежде всего, антиоксидантным действием
а-токоферола, что выражается в нормализации течения реакций спонтанного и ин-
дуцированного переокисления липидов в активной и низкоактивной фракциях хрома-
тина. Введение витамина E приводит также к частичной нормализации активности
эндогенных РНК-полимераз, ДНК-полимеразы β и к стимуляции активности реплика-
тивной ДНК-полимеразы а в активной фракции хроматина. Описан процесс взаимо-
действия а-токоферола с фракциями хроматина in vitro. Интоксикация тетрахлорме-
таном мало влияет на способность репрессированного хроматина к комплексообразо-
ванию с витамином Е, но усиливает связывание его с активной фракцией хроматина.
Выявлены различия в природе химического взаимодействия активной и низкоактивной
фракций хроматина с α-токоферолом in vitro, свидетельствующие о различной локали-
зации витамина E в хроматине. Взаимодействие витамина E с хроматином, частично
восстанавливает его структуру, нарушенную в результате интоксикации, что наряду
с антиоксидантным эффектом является одним из возможных механизмов его гено-
протекторного действия.
Ct Ю. И. Губский, Е. JT. Левицкий, Р. Г. Примак, А. Г. Горюшко, JI. К. Ленчевская,
В. А. Матюшкин, И. Е. Вистунова, Л. Г. Саченко, 1993
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 3 3-3-541 27
Введение. Известно, что значительная часть внутриклеточного и-
токоферола сосредоточена в ядре, в частности, определенное количество
этого витамина связано с негистоновыми белками хроматина [ I j . Ра-
нее показано нарушение структуры и функции хроматина при отсутст-
вии в пище животных витамина E [2, 3],. Добавление α-токоферола к
препаратам изолированного ядерного матрикса вызывало значительную
стимуляцию активности эндогенных Д Н К - и РНК-полимераз [2, 4] . Bcc
это позволяет предположить наличие определенных генопротекторных
свойств у внутриклеточного α-токоферола, что может выражаться в
поддержании шггактных структуры и функции хроматина при действии
различных повреждающих факторов, в частности тетрахлорметана
(TXM), вызывающего нарушение структурно-функциональной органи-
зации хроматина [5]. Можно полагать, что генопротекторное действие
α-токоферол а обусловлено как его антиоксидантным эффектом по от-
ношению к процессам перекисного окисления липидов (ПОЛ) в хро-
матине [2], так и способностью его к взаимодействию с компонентами
хроматика, следствием чего является восстановление нарушенной струк-
турно-функциональной организации последнего. В соответствии с этим
цель настоящей работы состояла в изучении влияния витамина E на
структурно-функциональную организацию хроматина печени крыс (in
vivo и in vitro) в условиях интоксикации тетрахлорметаном.
Материалы и методы. В работе использовали крыс-самок линии
Впстар 3-месячного возраста (150—200 г) . TXM вводили внутрибрю-
шинно в дозе 0,175 мл/100 г массы тела. Длительность интоксикации
составляла 2 ч — период, после которого наблюдается пик генотокси-
ческих изменений в хроматине [5]. Д л я изучения влияния витамина E
на структурно-функциональную организацию хроматина животным вво-
дили это вещество внутрибрюшинно за 30 мин до TXMi в дозе 5 мг/
/100 г массы тела. Декапитацию осуществляли в утренние часы под
легким эфирным наркозом. Методы выделения фракций транскрипції-
опію активного (TAX) и репрессированного (PX) хроматина и анализа
их структурно-функциональной организации, а также процессов П О Л
описаны нами ранее [2, 5, 6] . Собственную флюоресценцию препаратов
хроматина изучали в диапазоне 300—450 нм, регистрируя интенсив-
ность спектральной линии в области 310 нм. Состояние липидного ком-
понента в хроматине оценивали с помощью флюоресцентного зонда пи-
рсна («Serva», ФРГ, 5 - Ю - 3 М) по степени его эксимеризацпи — соот-
ношению интенсивности флюоресценции эксимерной (470 нм) и моно-
мерной (393 нм) форм. Флюоресцентные измерения проводили на спек-
трофлюориметре «Hitachi MPF-4» (Япония) при температуре 20 0C.
Спектры поглощения хроматина анализировали в области 200—350 им
с помощью спектрофотометра «Perkin-Elmer-412» (Швеция) при 20 °С
в кювете с длиной оптического пути 1 см.
Д л я изучения влияния витамина E на структурно-функциональную
организацию хроматина в условиях in vitro использовали методы спек-
трофотометрического титрования (при концентрации экзогенного сх-то-
кофсрола 2,5 мкМ и изменении концентрации хроматина по белку в
диапазоне 0—0,4 мг/мл) и микрокалориметрии. В первом случае поми-
мо регистрации зависимости AOx=f (C6) —изменение оптической плот-
ности хроматина при 210 и 258 нм в зависимости от его концентрации
в растворе (по белку) — рассчитывали также величины кажущихся
констант равновесия К р
к (по белку) и число мест связывания N ос-то-
коферола с хроматином графическим методом [7]. Тепловой эффект
регистрировали с помощью микрокалориметра «LKB-2107» (Швеция)
при 26 °С в режиме смешения 4 мл раствора хроматина (16,6 мкг бел-
ка/мл) и 2,0 мл раствора сс-токоферола (0,4 мкг/мл) в 0,01 X S S C , учи-
тывая тепловые эффекты разбавления и трения жидкости о стенки
сосуда. Активность кагалазы во фракциях хроматина определяли по
методу [8].
Результаты экспериментов обрабатывали методами непараметриче-
ской статистики [9].
28 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 3 3-3-541 28
Результаты и обсуждение. При исследовании интенсивности реак-
ций ПОЛ во фракциях хроматина в условиях интоксикации TXM и при
введении витамина E обнаружено, что отравление вызывает значитель-
ную модификацию спонтанного и индуцированного Н А Д Ф Н и аскор-
батом П О Л в обеих фракциях хроматина (табл. 1). Рост интенсивнос-
т и спонтанного ПОЛ (оцениваемой по содержанию диеновых конъю-
гатов) обусловлен, главным образом, переокислением фосфолипидов
(изопропанольный слой липидиого экстракта) . Модификация тетра-
хлорметаном переокисления нейтральных липидов (гептановый слой ли-
пидиого экстракта) заключается в росте ПОЛ в PX и снижении в TAX.
i I t o касается индуцированного ПОЛ, то интоксикация приводит к сни-
жению НАДФН-индуцированного П О Л в PX и TAX и повышению
аскорбат-зависимого П О Л в PX. Введение витамина E оказывает вы-
раженное антиоксидантное действие на процессы П О Л во фракциях
хроматина. При этом существенно нормализуется течение реакций как
спонтанного ПОЛ (за исключением нейтральных липидов в PX и фос-
фолипидов в TAX), так и (в особенности) индуцированного ПОЛ. Бо-
лее того, введение витамина E снижает величины НАДФН-зависимого
ПОЛ во фракции TAX, не измененного в условиях данной патологии.
Одним из механизмов антиоксидантного действия витамина E мо-
жет быть нормализация в условиях интоксикации TXM активности од-
ного из ключевых ферментов антиоксидаитной защиты клетки — ката-
лазы. При определении активности этого фермента во фракциях хрома-
тина оказалось, что в условиях ТХМ-интоксикации эта величина досто-
верно ( р < 0 , 0 5 ) уменьшается и частично восстанавливается под дейст-
вием витамина E (контроль — 21,8; T X M — 9 , 7 ; Т Х М + в и т а м и н E —
16,3 мкат/мл на 1 мг белка хроматина) в низкоактивной фракции хро-
матина. В активной фракции достоверных изменений активности этого
фермента при интоксикации TXM и введении витамина E обнаружено
не было (контроль — 33,0; T X M — 3 9 , 8 ; Т Х М + в и т а м и н E — 38,4 мкат/
/мл на 1 мг белка) .
Антиоксидантные эффекты витамина E могут лежать в основе час-
тичной нормализации этим веществом биохимических свойств фракций
хроматина (табл. 2) . Интоксикация TXM вызывает резкое повышение
доли TAX, сопровождающееся некоторым ростом эндогенной РНК-по-
лимеразной активности. Введение же витамина E способствует сниже-
Т а б л и ц а 1
Интенсивность реакций ПОЛ во фракциях хроматина печени крыс
при интоксикации TXiM и введении витамина Е(п=10—12)
Показатель ПОЛ
PX TAX
Показатель ПОЛ
Контроль TXM
тхм-ь
-f-вита-
мин E
Контроль TXM
тхм.-ь
-[-вита-
мин E
Диеновые конъюгаты
(π моль/м г белка)
Гептановый слой 10,0 15,6* 23,4* 18,0 8,9* 22,9
Изопропанольны й
18,0 8,9*
ело π 68,4 146,1* 75,6 33,1 68,5* 7 КО*
M з л о н о в ы й д и а л ь д е -
гид (накопление,
мі-/мл за 2 ч)
Ii 311 1920,1 2791,2 2426,3 550,5 440,2 246,9**
Н З П , Δ 178,1 42,5** 136,9 106,7 25,1** 30,7
A3 II 721,4 1062,6** 646,3 111,8 108,1 205,5
Неипицинроваиный
205,5
контроль 530,8 758,8 760,8 133,5 86,2 90,1
II ρ і: :,і о ч а π π е. Н З П — индуцированное Н А Д Ф Н П О Л ; Н З П , Δ — его составляю-
щая, зависимая от нагревания; АЗГІ — индуцированное аскорбатом П О Л ; значения
индуцированного П О Л получены вычитанием от соответствующих величин значений
неинициированного контроля.
* р < 0 , 0 5 ; * * р < 0 , 0 1 (по сравнению с контролем).
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 3 3-3-541 29
нию этого показателя до уровня контрольных значений, а также час-
тичной нормализации первого показателя. Эффект действия витамина
заключается также в значительном росте активности репликативного
фермента ДНК-полимеразы а , что соответствует результатам, полу-
ченным в опытах in vitro [2, 4] . Изложенные данные подтверждают
обнаруженную нами ранее обратно пропорциональную зависимость
между интенсивностями реакций П О Л и эндогенным синтезом Д Н К
в хроматине [10]. Введение витамина E также частично нормализует
сниженную под влиянием TXM активность репаративной ДНК-полиме-
разы β во фракциях TAX.
Изменение структурно-функциональной организации фракций хро-
матина при интоксикации TXM и введении витамина E следует также
из данных УФ- и флюоресцентной спектроскопии. В спектрах поглоще-
ния хроматина в ближней УФ-области (рис. 1) наблюдаются полосы,
обусловленные энергетическими переходами белковых (210 нм) и
ДНК-хромофоров (260 нм), а также хромофоров липидов (количество
которых в хроматине относительно мало по сравнению с мембранами
[11] ). Большая относительная интенсивность коротковолновой компо-
ненты в спектре TAX по сравнению с PX обусловлена большим отно-
шением белок /ДНК в TAX [2, 5]. В условиях ТХМ-интоксикации на-
блюдаемые изменения в спектрах PX и TAX различны. Д л я TAX ха-
рактерен гипохромный эффект в области поглощения белка и Д Н К , что
может быть как результатом гидролиза этих компонентов хроматина,
так и структурных изменений их конформации под влиянием ТХМ„
Красный сдвиг, типичный для п0 ->- я*-переходов [12] в спектре TAX,
указывает на уменьшение полярности окружения под воздействием
ТХМ. Введение in vivo витамина E приводит к смещению положения
максимума поглощения в спектрах TAX по отношению к контролю.
В спектрах образцов PX при интоксикации TXM увеличение оптиче-
ской плотности в области 220 и 260 нм, по-видимому, свидетельствует
о разрыве полипептидных и полинуклеотидных цепей. О гидролизе на-
тивного белка [12] можно судить по снижению относительной интен-
сивности полосы поглощения D2Wy которое отмечалось при введении ви-
тамина Е. Вероятной причиной этого может быть связывание ви-
тамина E с азотистыми основаниями Д Н К (рис. 1, б, кривая 3).
В табл. 3 приведены данные по исследованию флюоресцентных
свойств фракций хроматина при интоксикации TXM и введении вита-
мина Е. Видно, что в результате указанных воздействий претерпеваю!
заметные изменения как белковый компонент фракций (характеризу-
ющийся интенсивностью собственной флюоресценции), так и липидный
Т а б л и ц а 2
Интенсивность реакций ПОЛ во фракциях хроматина печени крыс
при интоксикации TXM и введении витамина Е(п=--10—12)
Показатель
PX TAX
Показатель
Контроль TXM
T X M +
+вита-
мин E
Контроль TXM
T X M +
+вита-
мин E
Д о л я фракции ( % ) 84,5 76,6** 79,2* 15,5 23,4** 20,8*
Б е л о к / Д Н К 1,40 1,29 1,36 10,6 12,0** 10,2
Активность эндогенных
ферментов (раси. /мин
на 1 мг Д Н К )
Тотальная Д Н К -
полпмеразная 644973 671956 484413 422966 362659 625165
Д Н К - п о л и м е р а з ы а 265541 373350 297080 230180 231885 469490*
Д Н К - п о л и м е р а з ы β 273639 196838 187332 211200 124888* 151677
Тотальная PITK-
полимеразная 179367 209825 172782 608236 975876* 574079
РНК-полимеразы I 43466 62628 64215 315331 330640 386488
РНК-полимеразы II 134713 125006 129763 346506 437623 355561
* р < 0 , 0 5 ; * * р < 0 , 0 1 (по сравнению с контролем) .
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 3 3-3-541 30
(отличающийся степенью эксимеризадии пирена) . Действительно, воз -
горание белковой флюоресценции фракций хроматина при интоксика-
ции животных TXM может свидетельствовать о релаксации белково-
го компонента в соответствии с высказанными ранее предположениями
о взаимосвязи собственной флюоресценции фракций с их структурой
[6, 13]. Как можно видеть,
введение витамина E стимули-
рует дальнейшее возгорание
флюоресценции обеих фрак-
ций хроматина, возможно,
связанное с открытием допол-
нительных хромофоров в ре-
зультате связывания витами-
на с белками хроматина [1].
Увеличение степени эксимери-
задии пирена в обеих фракци-
ях хроматина при воздействии
TXM указывает на «разжиже-
ние» липидного компонента.
Действие витамина E в этом
случае вызывает дальнейшее
уменьшение микровязкости ли-
пидного компонента в PX и
ее возрастание (в сторону нор-
мализации) в TAX. Эти фак-
ты требуют дальнейшего уг-
лубленного исследования и
могут быть одним из звеньев
в цепи молекулярных преобра-
Рис. 1. УФ-спектры поглощения ра-
створов TAX (а) и PX (б) в SSC-
буфере: 1 — контроль; 2 — TXM; 3—
ТХМ + витамин E
зовапий структурно-функциональной организации ядерного хроматина
под влиянием витамина Е.
Д л я выяснения природы взаимодействия витамина E с фракциями
хроматина были выполнены эксперименты in vitro. Можно предполо-
жить, что изменение функциональной организаци фракционированного
хроматина при интоксикации TXM обусловлено структурной модифика-
цией, определяющей его физико-химические, в частности комплексооб-
разующие, свойства при взаимодействии с экзогенным α-токоферолом.
На рис. 2 представлены данные спектрофотометрического титрования
PX и TAX в 0,01 X S S C в присутствии а-токоферола (2,5 мкМ): изме-
Т а б л и ц а 3
Физико-химические характеристики фракций хроматина при интоксикации TXM
и введении витамина Е(п = 6)
Длина волны
возбуждения,
Отношение величины спектрального показателя к
контрольному значению
Спектральный показатель
Длина волны
возбуждения, PX TAX
нм
TXM ТХМ+витамин
E TXM ТХМ+витамин
E
Интенсивность белковой
флюоресценции
Степень ексимеризации
пирена (F470/F394)
280
340
1,12
1,20*
1,35*
1,56*
1,12*
1,24*
1,23*
1,08
* р < 0 , 0 5 (по сравнению с контролем) .
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 3 3-3-541 31
иенне оптической плотности хроматина ^ D 7 = D i — D 2 , где D 1 — оптиче-
ская плотность смеси хроматина с α-токоферолом; D2 — оптическая
плотность самого хроматина при длине волны 258 и 210 нм в зависи-
мости от его концентрации в растворе (по белку) . Как можно видеть,
характер изменения зависимости ΔDa = / ( C 6 ) отличается для PX и
TAX, что свидетельствует о различных механизмах их взаимодействия
с экзогенным α-токоферолом. В случае PX наблюдается гипохромный
эффект, в то время как для TAX имеет место возрастание AD1 (гипер-
хромный эффект) в области концентраций белка 0,2—0,3 мг/мл с даль-
нейшим насыщением и затем уменьшением ΔDk при более высоких
/
о
-1
-г
- J
•4
Рис. 3. Кинетические кривые взаи-
модействия TAX (1) и PX (2) с
α-токоферолом. По вертикали — Q,
усл. ед.; по горизонтали — мин <
Рис. 2. Изменение оптической плот-
ности хроматина Λ£>λ в зависимости
от его концентрации (по белку) в
присутствии а -токоферола (2,5 м к М ) :
1 — контроль; 2 — TXAl; 3 —
T X M + витамин E — TAX; Г , 2', 3 ' —
то же для PX (а — при λ = 258 нм;
б — п р и λ = 210 нм)
концентрациях белка хроматина. При этом насыщение ΔDλ достига-
ется при наименьших концентрациях в случае фракций хроматина из
интоксицированных животных и при более высоких концентрациях для
интактных либо для крыс, которым вводили витамин Е. Это может
указывать на более эффективное межмолекулярное взаимодействие
α-токоферола с хроматином' в условиях интоксикации TXM по сравне-
нию с интактными животными, получившими витамин Е. Вероятно,
подобный факт может быть обусловлен «освобождением» (либо демас-
кированием) в условиях интоксикации мест связывания экзогенного
α-токоферола с фракциями хроматина вследствие истощения запасов
эндогенного токоферола в хроматине.
Последнее предположение подтверждают данные, представленные
в табл. 4. Как можно видеть, при интоксикации TXM наблюдается воз-
растание Крк и количества мест связывания N. Это может происходить
в результате «разрыхления» поверхности хроматина (особенно для
фракции TAX).. Фракция TAX после инъекции животным витамина E
взаимодействует с экзогенным α-токоферолом менее эффективно. Бо-
лее высокие значения /Ср
к в случае TAX могут зависеть также от воз-
растания подвижности зон эндогенных липидов (контролируемый диф-
фузией процесс) для данной фракции хроматина по сравнению с PX
[6]. Эти результаты согласуются с таковыми для PX и TAX, получен-
ными методом флюоресцентного зондирования пиреном (см. табл. 3).
Увеличение степени эксимеризации пирена может свидетельствовать о
«разжижении» липидного компонента хроматина.
Д л я выяснения природы взаимодействия α-токоферола с фракци-
ями хроматина проведено микрокалориметрическое исследование
(рис. 3) . Полученные в условиях эксперимента термограммы демонст-
рируют эндотермический эффект взаимодействия, больший для PX по
сравнению с TAX. (Эффект, связанный с поглощением тепла, может
указывать на наличие гидрофобных либо «стекинг»-взаимодействий,
обусловливающих комплементарное встраивание молекул а-токоферо-
32 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 3 3-3-541 32
Условия эксперимента
Kk
Кр,
г - 1 . л N
Условия эксперимента
PX I TAX PX I TAX
Контроль 1,0 8,0 1,0 3,0
TXM 1,8 12,0 1,5 12,0*
Т Х М + в и т а м и н E 1,9 2,5* 2,0* 8,0*
ла на поверхности хроматина, либо «стекинг»-взаимодействий парал-
лельно ориентированных систем сопряженных π-электронов.) Мень-
шая величина эндоэффекта для TAX по сравнению с PX, возможно,
связана с тем, что определенный вклад в наблюдаемый суммарный эф-
фект вносит взаимодействие α-токоферол а с липидной составляющей
хроматина, как было показано на примере микросом печени и липосом
из яичного лецитина [14], из-за большего содержания липидов в ак-
тивной фракции хроматина [6]. Не исключено, что более выраженный
эндоэффект в случае PX ^ ^
J Т а б л и ц а 4
может определяться ,
^ , г Величины кажущихся констант равновесия Kpk
ООЛЬШИМ содержанием и числа мест связывания N при взаимодействии
Д Н К В ЭТОЙ фракции in vitro а-токоферола с фракциями хроматина
хроматина [2, 5].
Полученные данные
микрокалориметрии со-
гласуются с результата-
ми спектрофотометриче-
ского анализа взаимодей-
ствия α-токоферола с
фракциями хроматина,
указывающими на раз-
личную химическую при- *р<0,05 (по сравнению с контролем) ,
роду их взаимодействия.
Таким образом, исследования in vitro связывания экзогенного а-то-
коферола с фракциями хроматина явились дополнительным подтверж-
дением изменения структурных свойств фракций хроматина при инток-
сикации TXM и введения витамина Е. Они показали, что, кроме белко-
вого компонента [1], в процесс взаимодействия α-токоферола с хро-
матином вовлечены также Д Н К и липиды. Наличие определенных ге-
нопротекторных свойств у витамина E согласуется с уменьшением гиб-
нущих животных в данных условиях эксперимента с 38,2 до 20,5 % под
влиянием профилактического введения этого вещества ( р < 0 , 0 5 ) .
Таким образом, в результате проведенных исследований установ-
лено частичное коррегирующее действие витамина E на структурно-
функциональную организацию хроматина печени крыс в условиях ин-
токсикации ТХМ. Наиболее вероятным механизмом генопротекторного
действия α-токоферола может быть его «встраивание» в структуру хро-
матина, в результате чего наблюдается ее релаксация, облегчающая ан-
тиоксидантное воздействие витамина E на модифицированные в усло-
виях интоксикации TXM реакции ПОЛ в хроматине. Нормализация
свободнорадикальных процессов может, в свою очередь, быть одним из
важнейших звеньев в цепи молекулярных событий, ведущих к корре-
гирующей стабилизации структуры и функций ядерного хроматина в
условиях химического повреждения.
S u m m а г у . Par t ia l corrective inf luence of v i tamin E in t roduct ion on s t ruc tu ra l
and funct ional liver nuclear chromat in o rgan iza t ion which was d a m a g e d d u r i n g te t ra -
ch loromethane intoxication w a s shown. This one is depended on α- tocopherol antioxi-
d a n t effects tha t displais as normal iza t ion of spon taneous and inducted lipid peroxida-
tion react ions in active and repressed chromat in f rac t ions . In t roduct ion of v i tamin E
leads also to par t ia l normal iza t ion of endogenous DNA polymerase β and RNA poly-
merases as well as s t imula t ion of repl icat ive DNA polymerase a activity in act ive
chromat in f rac t ion . In vitro in teract ion process of oc-tocopherol with chromat in f rac t ions
has wri t ten. Te t rach loromethane intoxication has little inf luence on repressed chromat in
abil i ty to form complexes with vitarnine E, but increases its b inding to active chromat in
f rac t ion . Differences between in vitro chemical interact ion of active and repressed chro-
mat in f rac t ions with α-tocopherol were revealed. These ones indicate to var ious locali-
zat ion of v i tamin E in chromatin , in terac t ion of v i tamin E with chromat in leads to
par t ia l repair of its s t ruc ture d a m a g e d dur ing intoxication. This effect of v i tamin E
together with its an t ioxidant action is one of the possible mechanism of α-tocopherol
genonrotect ive influence.
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 3 3 - 3 - 5 4 1 3 3
С П И С О К Л И Т Е Р А Т У Р Ы
1. Халмурадов А. Г., Тонкий В. И., Чаговец Р. В. Транспорт жирорастворимых вита-
минов.— Киев : Наук, думка, 1980.— 216 с.
2. Губский IO. И., Левицкий Е. Л., Чабанный Ii. В. и др. Изменения белкового, ли-
пидного состава, Д Н К - и РНК-полимеразной активности фракции хроматина и
ядерного матрикса печени крыс в условиях Е-гиповитамииоза // Укр. биохим.
жури,— 1990.— 62, №> 6,— С. 22—30.
3. Губский IO. И., Левицкий Е. Л., Примак Р. Г., Величко А. Н. Изменение струк-
турного состояния фракционированного хроматина печени при активации перепис-
ного окисления липидов // Биополимеры и клетка.— 1991.— 7, Nb 3.— С. 89—94.
4. Донченко Г. В., Петрова Г. В., Капралов А. А. и др. О возможной роли а-токо-
феоола в функционировании хроматина и ядепного матрикса печени крыс // Докл.
АН УССР. Сер. Б,— 1990,—№ 3,—С. 60—62.
5. Губский Ю. И., Левицкий Е. Л., Гольдіитейн II. Б. и др. Функциональная актив-
ность фракционированного хроматина печени крыс при однократном введении
тетрахлорметана // Вопр. мед. химии.— 1989.— 35, № 4.— С. 119—1'24.
6. Губский Ю. И., Левицкий Е. Л., Примак Р. Г. и др. Конформационные характе-
ристики и характер упаковки эндогенных липидов фракций транскрипционпо
активного и репрессированного хроматина // Укр. биохим. журн.— 1991.— 63,
№ 2,— С. 83—89.
7. Свердлова О. В. Электронные спектры в органической химии.— Л. : Химия, Ί985.—
248 с.
8. Королюк Μ. А., Иванова Л. И., Майорова И. Г. и др. Метод определения актив-
ности каталазы // Лаб. дело.— 1988.— JVb 1.— С. 16—18.
9. Ашмарин И. П., Васильев П. П., Амбросов В. А. Быстрые методы статистической
обработки и планирование экспериментов.— Л. : Изд-во ЛГУ, 1975.— 78 с.
10. Губский IO. И., Левицкий Е. Л., Гольдіитейн Η. В., Литошенко А. Я. Перекисное
окисление липидов и эндогенная ДНК-полимеразная активность фракций изоли-
рованного хроматина печени крыс // Бюл. эксперим. биологии и медицины.—
1989,— 52, No 3.— С. 29(6—298.
11. Казначеев Ю. С., Кулагина Т. П., Маркевич Л. Н. и др. О метаболизме липидов
хроматина печени и тимуса крыс // Молекуляр. биология.—1984.— 18, .Nb 3.—
С. 607—612.
12. Демченко А. П. Ультрафиолетовая спектроскопия и структура белков.— К и е в :
Наук, думка, 1981,— 208 с.
13. Сиволоб А. В., Храпунов С. Н. Флюоресцентная спектроскопия в исследованиях
белково-нуклеиновых взаимодействий в хроматине // Биополимеры и клетка.—
1992,—8, .Nb 1,—С. 89—100.
14. Губский IO. И., Болдескул A. E., Примак Р. Г., Задорина О. В. Влияние а-токо-
ферола и ионола на физическую структуру мембран микросом печени крыс в
условиях антиоксидантної! недостаточности // Укр. биохим. журн.—1989.·—61,
№ 4 — С. 94—99.
Укр. Н И И фармакологии и токсикологии М З Украины, Киев Получено 21.09.92
УДК 547.9G3.32.057+547.92
С. Н. Ярмолюк, Ε. М. Иванова, Μ. Н. Овандер,
И. В. Алексеева, А. С. Шаламай, В. Ф. Зарытова
ОЛИГОНУКЛЕОПЕПТИДЫ. IV. СИНТЕЗ АЛКИЛИРУЮЩИХ
ПРОИЗВОДНЫХ ОЛИГОНУКЛЕОТИДИЛ-(P-^N)-ПЕПТИДОВ *
Синтезированы алкилирующие производные олигонуклеотидил-(Р-+Ы)-пептидов, ко-
торые могут быть использованы как реагенты для специфической модификации нукле-
иновых кислот.
Введение. Ковалентные конъюгаты антисмысловых олигонуклеотидов с
липидамп [1] пли основными полипептидами [2] применяют для улуч-
шения их проникновения через цитоплазматическую мембрану клетки.
* Использованы обозначения, рекомендованные номенклатурной комиссией
IUPAC-IUB, префикс d в обозначениях олигонуклеотидов пропущен; Ahx — ε-амино-
капроповая кислота; DCC — дициклогексилкарОодинмид; TEA — триэтиламин; DCM —
дихлорметан; DMFA — диметилформамид: DMAP — 4,4 ' -диметиламинопиридин;
Py 2S 2 — дипиридилдисульфид: Ph 3 P ----- трнфеннлфосфин; Melm — N-метилимидазол;
EDTA — этилендкаминотетрауксусная кислота; Ac2O — ангидрид уксусной кислоты;
TFA •— трифторуксусная кислота.
© С. Н. Ярмолюк, Ε. М. Иванова, Μ. Н. Овандер, И. В. Алексеева, А. С. Шаламай,
В. Ф. Зарытова, 1993
34 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. Ne 5
|
| id | nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156213 |
| institution | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| issn | 0233-7657 |
| language | Russian |
| last_indexed | 2025-12-02T13:45:43Z |
| publishDate | 1993 |
| publisher | Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| record_format | dspace |
| spelling | Губский, Ю.И. Левицкий, Е.Л. Примак, Р.Г. Горюшко, А.Г. Ленчевская, Л.К. Матюшкин, В.А. Вистунова, И.Е. Саченко, Л.Г. 2019-06-18T10:04:36Z 2019-06-18T10:04:36Z 1993 Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном / Ю.И. Губский, Е.Л. Левицкий, Р.Г. Примак, А.Г. Горюшко, Л.К. Ленчевкая, В.А. Матюшкин, И.Е. Вистунова, Л.Г. Саченко // Биополимеры и клетка. — 1993. — Т. 9, № 3. — С. 27-34. — Бібліогр.: 14 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000358 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156213 615.357.631:577.157 Показано частичное коррегирующее действие витамина E на структурно-функциональную организацию ядерного хроматина печени крыс, нарушенную в условиях интоксикации тетрахлорметаном. Оно опосредуется, прежде всего, антиоксидантным действием α-токоферола, что выражается в нормализации течения реакций спонтанного и индуцированного переокисления липидов в активной и низкоактивной фракциях хроматина. Введение витамина E приводит также к частичной нормализации активности эндогенных РНК-полимераз, ДНК-полимеразы β и к стимуляции активности репликативной ДНК-полимеразы а в активной фракции хроматина. Описан процесс взаимодействия α-токоферола с фракциями хроматина in vitro. Интоксикация тетрахлорметаном мало влияет на способность репрессированного хроматина к комплексообразованию с витамином Е, но усиливает связывание его с активной фракцией хроматина. Выявлены различия в природе химического взаимодействия активной и низкоактивной фракций хроматина с α-токоферолом in vitro, свидетельствующие о различной локализации витамина E в хроматине. Взаимодействие витамина E с хроматином, частично восстанавливает его структуру, нарушенную в результате интоксикации, что наряду с антиоксидантным эффектом является одним из возможных механизмов его генопротекторного действия. Показано часткову корегуючу дію вітаміну E на структурно-функціональну організацію ядерного хроматину печінки щурів, порушену в умовах інтоксикації тетрахлорметаном. Вона опосередковується, насамперед, антиоксидантну дію α -токоферолу, що виражається в нормалізації перебігу реакцій спонтанного та індукованого переокиснення ліпідів в активній і низькоактивної фракціях хроматину. Введення вітаміну E приводить також до часткової нормалізації активності ендогенних РНК-полімерази, ДНК-полімерази β і до стимуляції активності репликативной ДНК-полімерази а в активній фракції хроматину. Описано процес взаємодії α -токоферолу з фракціями хроматину in vitro . Інтоксикація тетрахлорметаном мало впливає на здатність репресованого хроматину до комплексоутворення з вітаміном Е, але посилює зв'язування його з активною фракцією хроматину. Виявлено відмінності в природі хімічної взаємодії активної і низькоактивної фракцій хроматину з α -токоферол in vitro , що свідчать про різної локалізації вітаміну E в хроматині. Взаємодія вітаміну E з хроматином, частково відновлює його структуру, порушену в результаті інтоксикації, що поряд з антиоксидантною ефектом є одним з можливих механізмів його генопротекторного дії. Partial corrective influence of vitamin E introduction on structural and functional liver nuclear chromatin organization which was damaged during tetra-chloromethane intoxication was shown. This one is depended on α-tocopherol antioxidant effects that displais as normalization of spontaneous and inducted lipid peroxidation reactions in active and repressed chromatin fractions. Introduction of vitamin E leads also to partial normalization of endogenous DNA polymerase β and RNA polymerases as well as stimulation of replicative DNA polymerase a activity in active chromatin fraction. In vitro interaction process of α-tocopherol with chromatin fractions has written. Tetrachloromethane intoxication has little influence on repressed chromatin ability to form complexes with vitamine E, but increases its binding to active chromatin fraction. Differences between in vitro chemical interaction of active and repressed chromatin fractions with α-tocopherol were revealed. These ones indicate to various localization of vitamin E in chromatin. Interaction of vitamin E with chromatin leads to partial repair of its structure damaged during intoxication. This effect of vitamin E together with its antioxidant action is one of the possible mechanism of α-tocopherol. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном Вплив вітаміну E на структурно-функціональну організацію хроматину печінки в умовах пошкодження тетрахлорметаном Influence of vitamin E on structural and functional liver chromatin organization during tetrachloromethane damage Article published earlier |
| spellingShingle | Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном Губский, Ю.И. Левицкий, Е.Л. Примак, Р.Г. Горюшко, А.Г. Ленчевская, Л.К. Матюшкин, В.А. Вистунова, И.Е. Саченко, Л.Г. Структура и функции биополимеров |
| title | Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном |
| title_alt | Вплив вітаміну E на структурно-функціональну організацію хроматину печінки в умовах пошкодження тетрахлорметаном Influence of vitamin E on structural and functional liver chromatin organization during tetrachloromethane damage |
| title_full | Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном |
| title_fullStr | Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном |
| title_full_unstemmed | Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном |
| title_short | Влияние витамина E на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном |
| title_sort | влияние витамина e на структурно-функциональную организацию хроматина печени в условиях повреждения тетрахлорметаном |
| topic | Структура и функции биополимеров |
| topic_facet | Структура и функции биополимеров |
| url | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156213 |
| work_keys_str_mv | AT gubskiiûi vliânievitaminaenastrukturnofunkcionalʹnuûorganizaciûhromatinapečenivusloviâhpovreždeniâtetrahlormetanom AT levickiiel vliânievitaminaenastrukturnofunkcionalʹnuûorganizaciûhromatinapečenivusloviâhpovreždeniâtetrahlormetanom AT primakrg vliânievitaminaenastrukturnofunkcionalʹnuûorganizaciûhromatinapečenivusloviâhpovreždeniâtetrahlormetanom AT gorûškoag vliânievitaminaenastrukturnofunkcionalʹnuûorganizaciûhromatinapečenivusloviâhpovreždeniâtetrahlormetanom AT lenčevskaâlk vliânievitaminaenastrukturnofunkcionalʹnuûorganizaciûhromatinapečenivusloviâhpovreždeniâtetrahlormetanom AT matûškinva vliânievitaminaenastrukturnofunkcionalʹnuûorganizaciûhromatinapečenivusloviâhpovreždeniâtetrahlormetanom AT vistunovaie vliânievitaminaenastrukturnofunkcionalʹnuûorganizaciûhromatinapečenivusloviâhpovreždeniâtetrahlormetanom AT sačenkolg vliânievitaminaenastrukturnofunkcionalʹnuûorganizaciûhromatinapečenivusloviâhpovreždeniâtetrahlormetanom AT gubskiiûi vplivvítamínuenastrukturnofunkcíonalʹnuorganízacíûhromatinupečínkivumovahpoškodžennâtetrahlormetanom AT levickiiel vplivvítamínuenastrukturnofunkcíonalʹnuorganízacíûhromatinupečínkivumovahpoškodžennâtetrahlormetanom AT primakrg vplivvítamínuenastrukturnofunkcíonalʹnuorganízacíûhromatinupečínkivumovahpoškodžennâtetrahlormetanom AT gorûškoag vplivvítamínuenastrukturnofunkcíonalʹnuorganízacíûhromatinupečínkivumovahpoškodžennâtetrahlormetanom AT lenčevskaâlk vplivvítamínuenastrukturnofunkcíonalʹnuorganízacíûhromatinupečínkivumovahpoškodžennâtetrahlormetanom AT matûškinva vplivvítamínuenastrukturnofunkcíonalʹnuorganízacíûhromatinupečínkivumovahpoškodžennâtetrahlormetanom AT vistunovaie vplivvítamínuenastrukturnofunkcíonalʹnuorganízacíûhromatinupečínkivumovahpoškodžennâtetrahlormetanom AT sačenkolg vplivvítamínuenastrukturnofunkcíonalʹnuorganízacíûhromatinupečínkivumovahpoškodžennâtetrahlormetanom AT gubskiiûi influenceofvitamineonstructuralandfunctionalliverchromatinorganizationduringtetrachloromethanedamage AT levickiiel influenceofvitamineonstructuralandfunctionalliverchromatinorganizationduringtetrachloromethanedamage AT primakrg influenceofvitamineonstructuralandfunctionalliverchromatinorganizationduringtetrachloromethanedamage AT gorûškoag influenceofvitamineonstructuralandfunctionalliverchromatinorganizationduringtetrachloromethanedamage AT lenčevskaâlk influenceofvitamineonstructuralandfunctionalliverchromatinorganizationduringtetrachloromethanedamage AT matûškinva influenceofvitamineonstructuralandfunctionalliverchromatinorganizationduringtetrachloromethanedamage AT vistunovaie influenceofvitamineonstructuralandfunctionalliverchromatinorganizationduringtetrachloromethanedamage AT sačenkolg influenceofvitamineonstructuralandfunctionalliverchromatinorganizationduringtetrachloromethanedamage |