Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов
Синтезированы алкилирующие производные олигонуклеотидил-(Р→N)-пептидов, которые могут быть использованы как реагенты для специфической модификации нуклеиновых кислот. Синтезовані алкілуючі похідні олігонуклеотіділ- (Р → N) -пептідов, які можуть бути використані як реагенти для специфічної модифікаці...
Saved in:
| Published in: | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Date: | 1993 |
| Main Authors: | , , , , , |
| Format: | Article |
| Language: | Russian |
| Published: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1993
|
| Subjects: | |
| Online Access: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156214 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Journal Title: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Cite this: | Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов / С.Н. Ярмолюк, Е.М. Иванова, М.Н. Овандер, И.В. Алексеева, А.С. Шаламай, В.Ф. Зарытова // Биополимеры и клетка. — 1993. — Т. 9, № 3. — С. 34-38. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. |
Institution
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156214 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Ярмолюк, С.Н. Иванова, Е.М. Овандер, М.Н. Алексеева, И.В. Шаламай, А.С. Зарытова, В.Ф. 2019-06-18T10:04:56Z 2019-06-18T10:04:56Z 1993 Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов / С.Н. Ярмолюк, Е.М. Иванова, М.Н. Овандер, И.В. Алексеева, А.С. Шаламай, В.Ф. Зарытова // Биополимеры и клетка. — 1993. — Т. 9, № 3. — С. 34-38. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000359 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156214 547.9G3.32.057+547.92 Синтезированы алкилирующие производные олигонуклеотидил-(Р→N)-пептидов, которые могут быть использованы как реагенты для специфической модификации нуклеиновых кислот. Синтезовані алкілуючі похідні олігонуклеотіділ- (Р → N) -пептідов, які можуть бути використані як реагенти для специфічної модифікації нуклеїнових кислот. Alkylating derivatives of oligonucleotidyl-(P→N)-peptides have been synthesized. These alkylating derivatives of oligonucleopeptides can be used as reagents for specific modification of nucleic acids. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов Олігонуклеопептіди. IV. синтез алкилирующих похідних олігонуклеотіділ- (P →N) -пептідов Oligonucleopeptides. IV. synthesis of alkylating derivatives of oligonucleotidyl-(P→N)-peptides Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов |
| spellingShingle |
Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов Ярмолюк, С.Н. Иванова, Е.М. Овандер, М.Н. Алексеева, И.В. Шаламай, А.С. Зарытова, В.Ф. Структура и функции биополимеров |
| title_short |
Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов |
| title_full |
Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов |
| title_fullStr |
Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов |
| title_full_unstemmed |
Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов |
| title_sort |
олигонуклеопептиды. iv. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(p→n)-пептидов |
| author |
Ярмолюк, С.Н. Иванова, Е.М. Овандер, М.Н. Алексеева, И.В. Шаламай, А.С. Зарытова, В.Ф. |
| author_facet |
Ярмолюк, С.Н. Иванова, Е.М. Овандер, М.Н. Алексеева, И.В. Шаламай, А.С. Зарытова, В.Ф. |
| topic |
Структура и функции биополимеров |
| topic_facet |
Структура и функции биополимеров |
| publishDate |
1993 |
| language |
Russian |
| container_title |
Биополимеры и клетка |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Олігонуклеопептіди. IV. синтез алкилирующих похідних олігонуклеотіділ- (P →N) -пептідов Oligonucleopeptides. IV. synthesis of alkylating derivatives of oligonucleotidyl-(P→N)-peptides |
| description |
Синтезированы алкилирующие производные олигонуклеотидил-(Р→N)-пептидов, которые могут быть использованы как реагенты для специфической модификации нуклеиновых кислот.
Синтезовані алкілуючі похідні олігонуклеотіділ- (Р → N) -пептідов, які можуть бути використані як реагенти для специфічної модифікації нуклеїнових кислот.
Alkylating derivatives of oligonucleotidyl-(P→N)-peptides have been synthesized. These alkylating derivatives of oligonucleopeptides can be used as reagents for specific modification of nucleic acids.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156214 |
| citation_txt |
Олигонуклеопептиды. IV. синтез алкилирующих производных олигонуклеотидил-(P→N)-пептидов / С.Н. Ярмолюк, Е.М. Иванова, М.Н. Овандер, И.В. Алексеева, А.С. Шаламай, В.Ф. Зарытова // Биополимеры и клетка. — 1993. — Т. 9, № 3. — С. 34-38. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT ârmolûksn oligonukleopeptidyivsintezalkiliruûŝihproizvodnyholigonukleotidilpnpeptidov AT ivanovaem oligonukleopeptidyivsintezalkiliruûŝihproizvodnyholigonukleotidilpnpeptidov AT ovandermn oligonukleopeptidyivsintezalkiliruûŝihproizvodnyholigonukleotidilpnpeptidov AT alekseevaiv oligonukleopeptidyivsintezalkiliruûŝihproizvodnyholigonukleotidilpnpeptidov AT šalamaias oligonukleopeptidyivsintezalkiliruûŝihproizvodnyholigonukleotidilpnpeptidov AT zarytovavf oligonukleopeptidyivsintezalkiliruûŝihproizvodnyholigonukleotidilpnpeptidov AT ârmolûksn olígonukleopeptídiivsintezalkiliruûŝihpohídniholígonukleotídílpnpeptídov AT ivanovaem olígonukleopeptídiivsintezalkiliruûŝihpohídniholígonukleotídílpnpeptídov AT ovandermn olígonukleopeptídiivsintezalkiliruûŝihpohídniholígonukleotídílpnpeptídov AT alekseevaiv olígonukleopeptídiivsintezalkiliruûŝihpohídniholígonukleotídílpnpeptídov AT šalamaias olígonukleopeptídiivsintezalkiliruûŝihpohídniholígonukleotídílpnpeptídov AT zarytovavf olígonukleopeptídiivsintezalkiliruûŝihpohídniholígonukleotídílpnpeptídov AT ârmolûksn oligonucleopeptidesivsynthesisofalkylatingderivativesofoligonucleotidylpnpeptides AT ivanovaem oligonucleopeptidesivsynthesisofalkylatingderivativesofoligonucleotidylpnpeptides AT ovandermn oligonucleopeptidesivsynthesisofalkylatingderivativesofoligonucleotidylpnpeptides AT alekseevaiv oligonucleopeptidesivsynthesisofalkylatingderivativesofoligonucleotidylpnpeptides AT šalamaias oligonucleopeptidesivsynthesisofalkylatingderivativesofoligonucleotidylpnpeptides AT zarytovavf oligonucleopeptidesivsynthesisofalkylatingderivativesofoligonucleotidylpnpeptides |
| first_indexed |
2025-11-25T22:45:10Z |
| last_indexed |
2025-11-25T22:45:10Z |
| _version_ |
1850570691604119552 |
| fulltext |
С П И С О К Л И Т Е Р А Т У Р Ы
1. Халмурадов А. Г., Тонкий В. И., Чаговец Р. В. Транспорт жирорастворимых вита-
минов.— Киев : Наук, думка, 1980.— 216 с.
2. Губский 10. И., Левицкий Е. JI., Чабанный Н. В. и др. Изменения белкового, ли-
пидного состава, Д Н К - и РНК-полимеразной активности фракции хроматина и
ядерного матрикса печени крыс в условиях Е-гиповитамипоза // Укр. биохим.
жури,— 1990.— 62, №> 6,— С. 22—30.
3. Губский IO. П., Левицкий Е. Л., Примак Р. Г., Величко А. Н. Изменение струк-
турного состояния фракционированного хроматина печени при активации перепис-
ного окисления липидов // Биополимеры и клетка.— 1991.— 7, Nb 3.— С. 89—94.
4. Донченко Г. В., Петрова Г. В., Капралов А. А. и др. О возможной роли а -токо-
феоола в функционировании хроматина и ядепного матрикса печени крыс // Докл .
АН УССР. Сер. Б,— 1 9 9 0 , — № 3 ,—С. 60—62.
5. Губский Ю. И., Левицкий Е. ЛГольдштейн Н. Б. и др. Функциональная актив-
ность фракционированного хроматина печени крыс при однократном введении
тетрахлорметана // Вопр. мед. химии.— 1989.— 35, № 4.— С. 119—1'24.
6. Губский Ю. И., Левицкий Е. Л., Примак Р. Г. и др. Конформационные характе-
ристики и характер упаковки эндогенных липидов фракций транскрипционпо
активного и репрессированного хроматина // Укр. биохим. журн.— 199Ί.— 63,
№ 2,— С. 83—89.
7. Свердлова О. В. Электронные спектры в органической химии.— Л. : Химия, 4985.—
248 с.
8. Королюк Μ. А., Иванова Л. И., Майорова И. Г. и др. Метод определения актив-
ности каталазы // Лаб . дело.— 1988.— JVb 1.— С. 16—18.
9. Ашмарин И. П., Васильев Н. П., Амбросов В. А. Быстрые методы статистической
обработки и планирование экспериментов.— Л. : Изд-во ЛГУ, 1975.— 78 с.
10. Губский IO. И., Левицкий Е. Л., Гольдштейн И. В., Литошенко А. Я. Перекисное
окисление липидов и эндогенная Д Н К - п о л и м е р а з н а я активность фракций изоли-
рованного хроматина печени крыс // Бюл. эксперим. биологии и медицины.—
1989,— 52, No 3.— С. 29(6—298.
11. Казначеев Ю. С., Кулагина Т. П., Маркевич Л. Н. и др. О метаболизме липидов
хроматина печени и тимуса крыс // Молекуляр. биология.—1984.— 18, .№> 3.—
С. 607—612.
12. Демченко А. П. Ультрафиолетовая спектроскопия и структура белков.— К и е в :
Наук , думка, 1981,— 208 с.
13. Сиволоб А. В., Храпунов С. Н. Флюоресцентная спектроскопия в исследованиях
белково-нуклеиновых взаимодействий в хроматине // Биополимеры и клетка.—
1992,—8, .Nb 1,—С. 89—100.
14. Губский IO. И., Болдескул A. E., Примак Р. Г., Задорина О. В. Влияние а -токо-
ферола и ионола на физическую структуру мембран микросом печени крыс в
условиях антиоксидантної! недостаточности // Укр. биохим. журн.— 1989.—61,
№ 4 — С. 94—99.
Укр. Н И И фармакологии и токсикологии М З Украины, Киев Получено 21.09.92
УДК 547.9G3.32.057+547.92
С. Н. Ярмолюк, Ε. М. Иванова, Μ. Н. Овандер,
И. В. Алексеева, А. С. Шаламай, В. Ф. Зарытова
ОЛИГОНУКЛЕОПЕПТИДЫ. IV. СИНТЕЗ АЛКИЛИРУЮЩИХ
ПРОИЗВОДНЫХ ОЛИГОНУКЛЕОТИДИЛ-(P->N)-ПЕПТИДОВ *
Синтезированы алкилирующие производные олигонуклеотидил-(Р-+Ы)-пептидов, ко-
торые могут быть использованы как реагенты для специфической модификации нукле-
иновых кислот.
Введение. Ковалентные конъюгаты антисмысловых олигонуклеотидов с
липидамп [1] пли основными полипептидами [2] применяют для улуч-
шения их проникновения через цитоплазматическую мембрану клетки.
* Использованы обозначения, рекомендованные номенклатурной комиссией
I U P A C - I U B , префикс d в обозначениях олигонуклеотидов пропущен; Ahx — ε-амино-
капроповая кислота; DCC — дициклогексилкарОодинмид; TEA — триэтиламин; DCM —
дихлорметан; DMFA — диметилформамид: DMAP — 4,4 ' -диметиламинопиридин;
Py 2 S 2 — дипиридилдисульфид: Ph 3 P - - трнфеннлфосфин; Melm — N-метилимидазол;
EDTA — этилендкаминотетрауксусная кислота; Ac2O — ангидрид уксусной кислоты;
TFA •— трифторуксусная кислота.
© С. Н. Ярмолюк, Ε. М. Иванова, Μ. Н. Овандер, И. В. Алексеева, А. С. Шаламай,
В. Ф. Зарытова, 1993
34 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. Jtt 5
Эффективность такого подхода оценивается по косвенным признакам,
и их числе снижение титра синтезируемого в клетке вируса, ингибиро-
вание синтеза вирусспецифических белков. Однако прямых доказа-
тельств того, что основные полиаминокислоты (например Π О Л И Л ί і з и и)
действуют как своеобразные транспортные векторы, нет. Использова-
ние алкилирующих 4- (1М-метил-Н-2-хлорэтиламино) фенильных произ-
водных олигонуклеотидов позволяет отслеживать путь таких реагентов,
выделять продукты модификации мишеней — нуклеиновых кислот.
Эффективность действия модифицированных олигонуклеотидов в
значительной мере определяется транспортом подобных производных
в клерку, а также их устойчивостью к действию клеточных нуклеаз. Су-
щественное повышение устойчивости к ферментам достигается за счет
введения в 5'- или З'-положення последовательности наряду с алкили-
рующим фрагментом группировок, обладающих гидрофобными (холе-
стериновые) или интеркалирующими (феназиниевые) свойствами [3]
Цель нашей работы заключалась в разработке подходов к синтезу
олигонуклеопептидов (ОНИ) фосфамидного типа, содержащих на сво-
их концевых участках остаток пептида и 4-(Ы-метил-ГЧ-2-хлорэтилами-
по) фенильную группировку. Предполагалось, что использование пепти-
дов различной природы (основных, гидрофобных, а также имеющих
сродство к определенным клеточным рецепторам, например, фрагмент
Pro-Arg-Va!-, присутствующий в токсине змеиного яда [4]) позволит
подобрать определенные структуры О Н П для улучшения захвата их
клеткой. С другой стороны, можно ожидать, что наличие ковалентно
присоединенных пептидных остатков будет способствовать существен-
ному увеличению устойчивости алкилирующих производных олигонук-
леотидов к действию нуклеаз.
Материалы и методы. Производные L-аминокпслот, необходи?уіьіе
при синтезе, получены согласно [5]. Гомогенность всех пептидов и их
производных определяли при помощи обращенно-фазовой хроматогра-
фии (ОФХ) на колонке Lichrosorb RP-18 (4,6X120 мм, «LKB», Шве-
ция) в градиенте концентрации ацетонитрила в 0,1 %-й TFA.
В работе использовали /г-хлорфениловые эфиры, 2-цианэтиловые
эфкры дитимидилатов и диаденилатов (НИБХ СО Р А Н ) , MeIrn («Ega»?
Ф Р Г ) , 2,2 /-дипиридилдисульфид («Fluka», Швейцария) , трифенилфос-
фин («Chemapol», Ч С Ф Р ) .
Кривые плавления комплементарных комплексов определяли в бу-
ферном растворе (0,1 M трис-НС1, 5 - Ю - 5 M EDTA, рН 7,0). Изменение
оптической плотности олигонуклеотидов регистрировали на спектрофо-
тометре «Specord UV VIS» (ГДР) при 260 нм. Материалы нагревали
в термостатированной ячейке со скоростью 0,25°С/мпн. Температуру
плавления комплементарных комплексов определяли в точке, соответ-
ствующей половине максимального гиперхромного эффекта.
^oc-Ahx-Trp-Trp-Trp-Gly — полимер Меррифилда. Вос-гліщил-ио-
лимер получали по методу [6] из хлорэтилированного стиролдивинил-
бензольного сополимера фирмы «Reanal» (Венгрия) (содержание хло-
ридов 7 ,1—9,2%) . Защищенный пептидил-полимер синтезировали из
2 г Boc-Gly-полимера (0,35 ммоль Gly на 1 г полимера) , используя
последовательность операции для каждого синтетического цикла, при-
веденную в таблице.
Симметричный ангидрид защищенной аминокислоты получали из
3 экв. ^ос-аминокислоты и 1,5 экв. DCC в 20 мл 5 0 % - г о DMFA в
DCM при 0°С. После перемешивания в течение 30 мин выпавшую ди-
циклогексилмочевину отфильтровывали, раствор использовали для про-
ведения реакции конденсации. Полноту протекания реакции контроли-
ровали с помощью пингидринового теста.
Ahx-Trp-Trp-Trp-Trp-Gly-OMe. Пептид отщепляли от полимера с
помощью реакции переэтерификации. Пептидилполимер кипятили в
смеси 45 мл абсолютного метанола и 6 мл TEA в течение 6—8 ч. Полу-
ченный продукт очищали хроматографией на силикагеле (Kieselgel 60,
«Мегск») в градиенте концентрации метанола в хлороформе. Вос-груп-
2 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. Jtt 5
пу снимали 9 9 , 7 % - й муравьиной кислотой (15 мл, 3 ч). Гомогенность
пептида определяли по данным высокоэффективной жидкостной хрома-
тографии ( В Э Ж Х ) . Аминокислотный состав Ahx (1,00); Gly (1,03);
Trp (3,12). Выход 56 %.
P r o - A r g - V a l - O M e , A h x - A r g - O M e , A h x - A r g - A r g - O M e с и н т е з и р о в а н ы
нами ранее [7, 8] .
Олигонуклеотиды A10, U - ( 5 ' - ^ 5 ' ) - P ( T p ) 9 T p 5 P ( T p ) 9 U получены фос-
фотрнэфирным методом из защищенных динуклеотндов [9] . Все олиго-
нуклеотиды и их пептидные и алкилирующие производные выделены с
помощью хроматографа «АИех-232» (США) на колонках 1 0 x 2 5 0 мм.
Д л я ионообменной хроматографии использовали носитель Par t i s i l 10
SAX («Whatman» , Англия) , для Ό Φ Χ — Lichrosorb RP-18 («Мегск»,
Ф Р Г ) .
Олигонуклеотидил-(Р N) -пептиды синтезированы по разработан-
ной нами методике [10]. Присоединение пептидного остатка к олиго-
нуклеотиду подтверждали ОФХ продуктов частичного кислотного и ще-
лочного гидролизов, аминокислотным анализом продуктов полного кис-
лотного гидролиза на анализаторе «Biotronic 5001» ( Ф Р Г ) .
Результаты и обсуждение. Один из этапов наших исследований со-
стоял в разработке методического подхода к получению гидрофобных
пептидов методом твердофазного синтеза (см. таблицу) . Из протокола
синтеза модельного пептида Ahx-Trp-Trp-Trp-Gly-OMe следует, что
обычно двухкратной обработки пептидилполимера симметричным ан-
гидридом Вос-аминокислоты достаточно для практически количествен-
ного образования пептидной связи. Необходимо т а к ж е отметить, что
реакция переэтерификации для отщепления гидрофобных пептидов от
полимера оказалась технически простой и удобной процедурой при по-
лучении кислотолабильного триптофансодержащего пептида. Учитывая
гидрофобные свойства полностью защищенного пептида, для его очист-
ки была применена колоночная хроматография на силикагеле.
А Б
U - ( S - S x ) - P ( T p ) 9 T p р( Tp I9Lf
( I ) (V)
Psp1 Py2 S 2 / рь3р , Meim J c i r c h o
5 ' - 5 ' ) - р C T p J3Tp-Pep1 ρ (Tp)9U >CHRCl
(U) J (VJ)
KIaIO4
Нами осуществлен синтез О Н П (схема) , содержащих 4-(Ы-метил-
N-2-хлорэтнламино) фенильную группировку как по З'-концевому рибоз-
вену, так и по 5'-концевому фосфату олигоиуклеотида (схема) . В пер-
вом варианте (А) к синтезированному О Н П присоединяют алкилиру-
ющую группировку на заключительном этапе, в другом случае (Б) —
сначала получают алкилирующее производное олигоиуклеотида, кото-
рое затем вводят в реакцию с пептидом.
36 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И К Л Е Т К А . 1993. Т. 9. Jtt 5
Согласно предложенной нами ранее методике [10], О Н П (II) син-
тезировали с выходом 74 %. Однако его окисление периодатом натрия
с последующим удалением 5'-концевого уридина сопровождается побоч-
ной реакцией гидролиза фосфамидной связи в олигонуклеотидил-(3'-
N)-пептиде с образованием ρ (Tp)9Tp. Поэтому выход (III) нестабилен
и колеблется в пределах 40—60 %. Присоединение [4-(N-2-хлорэтил) -
N-метиламинобензил] амина к 5'-фосфату О Н П осуществляли, как опи-
сано в работе [12]. Алкилирующее производное О Н П получено с вы-
ходом 5 3 % . Производное (IV) очищали при помощи ОФХ и анализи-
ровали гель-электрофорезом в 20/%-м полиакриламидном геле.
4- (1Ч-метил-Ы-2-хлорэтиламино) бензилиденовое производное (VI)
синтезировали согласно методике, описанной ранее [13]. Д л я исклю-
чения побочных реакций, связанных с гидролизом алкилирующего ос-
татка, присоединение пептидов к IV проводили с большими предосто-
рожностями. Хроматографию продуктов реакции вели при охлаждении
(4 °С). Алкилирующие производные О Н П (VII) — (IX) анализировали
с помощью ОФХ. Выходы соединений (VII) — (IX) составляли
50—60 %.
На наш взгляд, оптимальным вариантом получения алкилирующих
производных О Н П является способ Б, который при меньшем количест-
ве стадий позволяет синтезировать целевые продукты с удовлетвори-
тельными выходами.
Взаимодействие алкилирующего остатка с пептидным фрагментом
О Н П при физиологических значениях рН среды, по-видимому, малове-
роятно ввиду того, что гуанидиновая группировка аргинина протониро-
вана, а триптофан крайне трудно алкилируется. Подтверждением это-
му служат данные гель-электрофореза, исключающие присутствие ди-
мерных структур алкилирующих производных О Н П .
Ранее нами показано [8], что присоединение пептида к олигоиук-
леотиду с помощью спейсера (Ahx) практически не оказывает влияния
на комплексообразующие свойства ОНП. Отсутствие аналогичного
спейсера в структуре P(Tp)9Tp-S r-Pro-Arg-Val-OMe также не сказыва-
ется на термической устойчивости образуемого дуплекса. Температура
плавления комплекса A i 6 с олигонуклеотидил-(З'-N) -пептидом
P (Tp)9Tp-S7-Pro-Arg-Val-OMe была 23,6 °С, тогда как A16 с
ρ ( T p ) 9 T p - 2 3 , 2 °С.
Таким образом, в данной работе впервые осуществлен синтез алки-
лирующих производных ОНП, сайт-специфические свойства которых
Протокол твердофазного синтеза Ahx-Trp-Trp-Trp-Gly-OMe
Операция Объем, мл
Количество
Время, мин повторов
50 %-я TFA в DCM 25 2 1
(1 %-й дитиотреитол)
50 %-я TFA в DCM 25 25 1
(1 %-й дитиотреитол)
Промывка DCM 25 2 5
Промывка хлороформом 25 2 3
Промывка 10 %-м TEA в хлороформе 25 2 1
Промывка 10 %-м TEA в хлороформе 25 7 1
Промывка хлороформом 25 2 3
Промывка 50 %-м DMFA в DCM 25 2 і
Добавление 3-кратного избытка симметричного анги-
дрида Boc-аминокислоты в 50 %-м DMFA в DCM 20 360 1
Промывка 50 %-м DMFA в DCM 25 2 I
Добавление 1,5-кратного избытка симметричного
ангидрида /іос-аминокислотьі в 50 %-м DMFA в DCM 20 3G0 1
Промывка 50 %-м DMFA в DCM 25 2 2
Промывка Ac2O в DCM 25 2 T
Промывка Ac 2 O в DCM (1 %-й DMAP) 25 30 1
Промывка DCM 25 2 3
ISSN 0233-7G57. Б И О П О Л И М Е Р Ы II КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 3 37
будут изучены в различных тест-системах. Результаты исследования
эффективности проникновения в клетки алкилирующих производных
О Н П и модификации ими биополимеров будут опубликованы отдельно.
S u m m a r y . Alkylating derivatives of oligonucleotidvl-(P-N)-peptides have been
synthes ized . These a lky la t ing der ivat ives of ol igonucleopept ides can be used as r eagen t s
for specific modif ica t ion of nucleic acids.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Shea Regan G., Marsters J. C., Bischofberger N. Synthesis , hybr idizat ion propert ies
and ant iv i ra l act ivi ty of l ipid-ol igodeoxynucleot ide con juga t e s / / Nucl. Acids. Res.—
1990.— 18, N 13 ,—P. 3777—3783.
2. Leonetti J. P., Degols G., Milhaud P. et al. Antiviral activity ant i sense ol igonucle-
ot ides linked to poly (L-Iys ine) : t a r g e t s on genomic RNA and/or m R N A of vesi-
cular s tomat i t i s v i rus / / Nucleosides and Nucleotides.— 1989.—8, N 5 6 . — P . 825—
828.
3. Абрамова T. В., Власов В. ВЗарытова В. Ф. и др. Влияние модификации кон-
цевых звеньев олигонуклеотидов на их стабильность в культуре клеток // Моле-
куляр. биология,— 19-91—25, № 3 .—С. 624—631.
4. Чипенс Г. П., Полевая JI. КВеретенникова Н. И., Крикис А. Ю. Структура и
функции низкомолекулярных пептидов.— Рига : Зинатне, 1980.— 327 с.
5. Г ершкович А. А., Кибирев В. К. Синтез пептидов. Реагенты и методы.— Киев :
Наук , думка, 19&7.— 264 с.
6. Куликов С. В., Соколова Н. IO., Леонова Е. Б., Самарцев М. А. Присоединение
гр^г-бутилоксикарбониламинокислот к хлорметилированному сополимеру стирола
с дивинилбензолом в условиях межфазного катализа // Биоорг. химия,— 1989.—
15, JVb 3 . — С . 3-4&-ЗБЗ
7. Зарытова В. Ф., Иванова Ε. MЯрмолюк С. И., Алексеева И. В. Синтез олиго-
нуклеотидил- (5 ' -N) -пептидов , содержащих аргинин // Биополимеры и клетка.—
1989.—4, JMb 4 . — С . 220—222.
8. Ярмолюк С. MІванова Є. M., Кондратюк /. В. та ін. Олігонуклеотиди. III . Син-
тез і вивчення аргиніновмісних олігонуклеотидил-(P-N)-пептидів / / Там же.—
1992.—8, N9 6 , — С . 95— <100.
9. Зарытова В. ΦИванова Ε. M., Романенко В. П. Синтез олигонуклеотидов в хло-
роформе триэфирным методом // Биоорг. химия.— 1983.— 9, № 4 — С. 516—521.
10. Ярмолюк С. M., Король JI. С., Алексеева /. В., Шаламай А. С. Олігонуклеотиди.
II. Синтез олігонуклеотидил-(P-N)-пептидів з допомогою окисно-відновного реа-
г е н т у — трифенілфосфіну і 2 ,2 ' -дипіридилдисульфіду // Биополимеры и клетка.—
1992.—8, № 5 . — С . 16—20.
12. Годовикова Т. С., Зарытова В. Ф., Халимская JI. М. Реакционноспосбные фосфа-
миды моно- и динуклеотидов // Биоорг. химия.— 1986.— 12, Λ1» 4.— С. 475—48,1.
13. Райт А. К·, Карпова Г. Г., Гринева Н. И. Конформация 2 \ 3 / - 0 - [ 4 ^ - 2 - х л о р э т и л ^ -
метиламино)бензилиден] олигоцитидилатов и свойства их комплексов с полиино-
зиновой кислотой / / Биоорг. химия.— 1977.— 3, № 1.— С. 31 — 38-
Ин-т молекуляр. биологии и генетики АН Украины, Киев Получено 28.09.92
Ин-т биоорг. химии СО РАН, Новосибирск
УДК 577.112.5
Н. В. Латышко, Т. JI. Левитина,
О. С. Мирошниченко, Л. В. Гудкова, Э. А. Козлов
В Ы Д Е Л Е Н И Е И АМИНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ ПЕПТИДОВ,
ОБРАЗОВАВШИХСЯ ПРИ РАСЩЕПЛЕНИИ КАТАЛАЗЫ ГРИБА
PenicilHum vitale СТАФИЛОКОККОВОЙ ПРОТЕИНАЗОЙ
Из гидролизата, полученного при расщеплении каталазы гриба Penicillium vitale ста-
филококковой протеиназой, методами гель-фильтрования, ионообменной хроматогра-
фии. высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге выделены 38 пепти-
дов и определен их аминокислотный состав и N-концевые остатки. 38 пептидов
насчитывают в сумме 578 остатков аминокислот.
Введение. Настоящее сообщение продолжает серию публикаций, посвя-
щенных исследованию первичной структуры к а т а л а з ы P. vitale. Р а н е е
были опубликованы работы по выяснению строения триптических пеп-
Н. В. Латышко, т . Л. Левитина, О. С. Мирошниченко, Л. В. Гудкова, Э. А. Козлов, 1993
38 ISSN 0233-7657. Б И О П О Л И М Е Р Ы И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. Jtt 5
|