Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав
Из триптического гидролизата малеилированной каталазы гриба P. vitale методами гель-фильтрования, экстракции, высокоэффективной жидкостной хроматографии, высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге выделен 51 пептид, насчитывающий в сумме 850 остатков аминокислот. З триптичного гідроліза...
Збережено в:
| Опубліковано в: : | Биополимеры и клетка |
|---|---|
| Дата: | 1993 |
| Автори: | , , , , , |
| Формат: | Стаття |
| Мова: | Russian |
| Опубліковано: |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
1993
|
| Теми: | |
| Онлайн доступ: | https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156261 |
| Теги: |
Додати тег
Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
|
| Назва журналу: | Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| Цитувати: | Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав / Т.Л. Левитина, О.С. Мирошниченко, Л.В. Гудкова, М.Т. Бобровская, Н.В. Латышко, Э,А. Козлов // Биополимеры и клетка. — 1993. — Т. 9, № 2. — С. 3-8. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. |
Репозитарії
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine| id |
nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156261 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
Левитина, Т.Л. Мирошниченко, О.С. Гудкова, Л.В. Бобровская, М.Т. Латышко, Н.В. Козлов, Э.А. 2019-06-18T10:26:57Z 2019-06-18T10:26:57Z 1993 Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав / Т.Л. Левитина, О.С. Мирошниченко, Л.В. Гудкова, М.Т. Бобровская, Н.В. Латышко, Э,А. Козлов // Биополимеры и клетка. — 1993. — Т. 9, № 2. — С. 3-8. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000350 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156261 577.112.5 Из триптического гидролизата малеилированной каталазы гриба P. vitale методами гель-фильтрования, экстракции, высокоэффективной жидкостной хроматографии, высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге выделен 51 пептид, насчитывающий в сумме 850 остатков аминокислот. З триптичного гідролізату малеїльованої каталази гриба P. vitale методами гель-фільтрування, екстракції, високоефективної рідинної хроматографії, високовольтного електрофорезу і хроматографії на папері виділено 51 пептид, який в сумі нараховує 850 залишків амінокислот. 51 peptides containing 850 amino acid residues were isolated from P. vitale male-catalase tryptic hydrolizate by gel-filtration, extraction, HPLC, paper highe-voltage electrophoresis and chromatography. ru Інститут молекулярної біології і генетики НАН України Биополимеры и клетка Структура и функции биополимеров Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав Ериптичні пептиди Малеїл-каталази гриба Penicillium vitale . 1. Виділення та амінокислотний склад Tryptic peptides of Penicillium vitale maleyl-catalase. 1. Isolation and amino acid composition Article published earlier |
| institution |
Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine |
| collection |
DSpace DC |
| title |
Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав |
| spellingShingle |
Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав Левитина, Т.Л. Мирошниченко, О.С. Гудкова, Л.В. Бобровская, М.Т. Латышко, Н.В. Козлов, Э.А. Структура и функции биополимеров |
| title_short |
Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав |
| title_full |
Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав |
| title_fullStr |
Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав |
| title_full_unstemmed |
Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав |
| title_sort |
триптические пептиды малеил-каталазы гриба penicillium vitale. 1. выделение и аминокислотный состав |
| author |
Левитина, Т.Л. Мирошниченко, О.С. Гудкова, Л.В. Бобровская, М.Т. Латышко, Н.В. Козлов, Э.А. |
| author_facet |
Левитина, Т.Л. Мирошниченко, О.С. Гудкова, Л.В. Бобровская, М.Т. Латышко, Н.В. Козлов, Э.А. |
| topic |
Структура и функции биополимеров |
| topic_facet |
Структура и функции биополимеров |
| publishDate |
1993 |
| language |
Russian |
| container_title |
Биополимеры и клетка |
| publisher |
Інститут молекулярної біології і генетики НАН України |
| format |
Article |
| title_alt |
Ериптичні пептиди Малеїл-каталази гриба Penicillium vitale . 1. Виділення та амінокислотний склад Tryptic peptides of Penicillium vitale maleyl-catalase. 1. Isolation and amino acid composition |
| description |
Из триптического гидролизата малеилированной каталазы гриба P. vitale методами гель-фильтрования, экстракции, высокоэффективной жидкостной хроматографии, высоковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге выделен 51 пептид, насчитывающий в сумме 850 остатков аминокислот.
З триптичного гідролізату малеїльованої каталази гриба P. vitale методами гель-фільтрування, екстракції, високоефективної рідинної хроматографії, високовольтного електрофорезу і хроматографії на папері виділено 51 пептид, який в сумі нараховує 850 залишків амінокислот.
51 peptides containing 850 amino acid residues were isolated from P. vitale male-catalase tryptic hydrolizate by gel-filtration, extraction, HPLC, paper highe-voltage electrophoresis and chromatography.
|
| issn |
0233-7657 |
| url |
https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156261 |
| citation_txt |
Триптические пептиды малеил-каталазы гриба Penicillium vitale. 1. Выделение и аминокислотный состав / Т.Л. Левитина, О.С. Мирошниченко, Л.В. Гудкова, М.Т. Бобровская, Н.В. Латышко, Э,А. Козлов // Биополимеры и клетка. — 1993. — Т. 9, № 2. — С. 3-8. — Бібліогр.: 11 назв. — рос. |
| work_keys_str_mv |
AT levitinatl triptičeskiepeptidymaleilkatalazygribapenicilliumvitale1vydelenieiaminokislotnyisostav AT mirošničenkoos triptičeskiepeptidymaleilkatalazygribapenicilliumvitale1vydelenieiaminokislotnyisostav AT gudkovalv triptičeskiepeptidymaleilkatalazygribapenicilliumvitale1vydelenieiaminokislotnyisostav AT bobrovskaâmt triptičeskiepeptidymaleilkatalazygribapenicilliumvitale1vydelenieiaminokislotnyisostav AT latyškonv triptičeskiepeptidymaleilkatalazygribapenicilliumvitale1vydelenieiaminokislotnyisostav AT kozlovéa triptičeskiepeptidymaleilkatalazygribapenicilliumvitale1vydelenieiaminokislotnyisostav AT levitinatl eriptičnípeptidimaleílkatalazigribapenicilliumvitale1vidílennâtaamínokislotniisklad AT mirošničenkoos eriptičnípeptidimaleílkatalazigribapenicilliumvitale1vidílennâtaamínokislotniisklad AT gudkovalv eriptičnípeptidimaleílkatalazigribapenicilliumvitale1vidílennâtaamínokislotniisklad AT bobrovskaâmt eriptičnípeptidimaleílkatalazigribapenicilliumvitale1vidílennâtaamínokislotniisklad AT latyškonv eriptičnípeptidimaleílkatalazigribapenicilliumvitale1vidílennâtaamínokislotniisklad AT kozlovéa eriptičnípeptidimaleílkatalazigribapenicilliumvitale1vidílennâtaamínokislotniisklad AT levitinatl trypticpeptidesofpenicilliumvitalemaleylcatalase1isolationandaminoacidcomposition AT mirošničenkoos trypticpeptidesofpenicilliumvitalemaleylcatalase1isolationandaminoacidcomposition AT gudkovalv trypticpeptidesofpenicilliumvitalemaleylcatalase1isolationandaminoacidcomposition AT bobrovskaâmt trypticpeptidesofpenicilliumvitalemaleylcatalase1isolationandaminoacidcomposition AT latyškonv trypticpeptidesofpenicilliumvitalemaleylcatalase1isolationandaminoacidcomposition AT kozlovéa trypticpeptidesofpenicilliumvitalemaleylcatalase1isolationandaminoacidcomposition |
| first_indexed |
2025-11-26T22:59:58Z |
| last_indexed |
2025-11-26T22:59:58Z |
| _version_ |
1850779398966345728 |
| fulltext |
Структура
и функция
биополимеров
УДК 577.112.5
Т. Л. Левитина, О. С. Мирошниченко,
Л. В. Гудкова, Μ. Т. Бобровская, Н. В. Латышко, Э. А. Козлов
ТРИПТИЧЕСКИЕ ПЕПТИДЫ
МАЛЕИЛ-КАТАЛАЗЫ ГРИБА PENICILLIUM VITALE.
1. ВЫДЕЛЕНИЕ И АМИНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ
Из триптического гидролизата малеилированной каталазы гриба P. vitale методами
гель-фильтрования, экстракции, высокоэффективной жидкостной хроматографии, высо-
ковольтного электрофореза и хроматографии на бумаге выделен 51 пептид, насчитываю-
щий в сумме 850 остатков аминокислот.
Введение. Настоящая публикация продолжает серию работ по выясне-
нию первичной структуры каталазы. Ранее были опубликованы рабо-
ты по исследованию триптических пептидов немодифицированной ката-
лазы [1—4] и бромциановых фрагментов [5]. В настоящем сообщении
описаны методы разделения триптического гидролизата каталазы, моди-
фицированной малеиновым ангидридом по остаткам лизина, способы
выделения индивидуальных пептидов и определение их аминокислот-
ных составов.
Материалы и методы. Каталазу, полученную ранее описанными ме-
тодами [6], обрабатывали малеиновым ангидридом [7]. 20 ммоль бел-
ка растворяли в 200 мл 0,1 н. NaHCCb, содержащего 6 моль гуанидин-
хлорида. Добавляли 3 г малеинового ангидрида, растворенного в 18 мл
диоксана (50 M на 1 M аминогруппы). Величину рН 8,5 поддерживали
на автотитраторе с помощью 4 н. NaOH. Снятие защитных малеил-
групп осуществляли добавлением ледяной CH3COOH до рН 3,6 и вы-
держивали смесь при 40 °С в течение 40 ч. Гидролизат лиофилизи-
ровали.
Гель-фильтрование проводили с использованием TSK-гелей Toyo-
pearl HW50 и HW40 («Toyo-Soda», Япония). Детали метода описаны в
подписях к соответствующим рисункам в разделе «Результаты и об-
суждение».
Для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) при-
меняли систему HPLC («Pharmacia», Швеция) с колонкой Ultra sphe-
re С18 («Вескшап», США) 10x250 мм, градиент концентрации ацето-
нитрила 5 ->-80 % в 0,1 %-ной трифторуксусной кислоте, скорость элю-
ции 2 мл/ч.
Пептиды экстрагировали следующим образом. К лиофильно высу-
шенной фракции пептидов добавляли пиридин-ацетатный буфер с рН
6,5 (пиридин: уксусная кислота: вода— 1 0 0 : 4 : 8 9 6 ) . Образовавшую-
ся при встряхивании суспензию центрифугировали при 6 000 об/мин в
течение 20 мйн. Надосадочную жидкость лиофилизировали.
Высоковольтный (в/в) электрофорез и хроматографию осуществля-
ли на бумаге Filtrak FN17 (Германия) по методике работ [5, 8] .
© Т. л . ЛЕВИТИНА, о . С. МИРОШНИЧЕНКО, Л. В. ГУДКОВА, Μ. Т. БОБРОВСКАЯ.
Н. В. ЛАТЫШКО, Э. А. КОЗЛОВ, 1993
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 2 7
Рис. 1. Гель-фильтрование через TSK-гель Toyo-pearl HW50 фракции P (а) и фракции
H (б) триптического гидролизата каталазы P. vitale. Штриховой линией обозначено
повторное гель-фильтрование материала пика I. Растворитель — 0,2 н. NH4HCO3 для
фракции Р и с добавкой 6 M гуанидин-хлорида — для фракции Н, колонка 2 χ ΐ 0 0 см,
скорость элюции 20 мл/ч
Рис. 2. Гель-фильтрование через TSK-гель Toyo-pearl HW40 материалов пиков II (а),
ΙΓ (б), III (β), IV (г) рис. 1, а. Растворитель — 0,2 н. NH4HCO3, колонка 2X100 см,
скорость элюции 12 мл/ч
E230
2,0
Рис. 3. Гель-фильтрование через TSK-
гель Toyo-pearl HW40 материала
пика I (а) и пика II (б) рис. 1, б.
Растворитель—0,2 н. NH4HCO3, ко-
лонка 2X100 см, скорость элюции
12 мл/ч
Рис. 4. ВЭЖХ после снятия защитных
трупп (фракция «о») материала пи-
ка 2 рис. 2, а (а), пиков 1—3 рис. 2,
в (б), пика 1 рис. 3 (в). Условия
ВЭЖХ см. в разделе «Материалы и
методы»
Определение IN-концевых остатков и аминокислотного состава опи-
сано ранее [9, 10].
Результаты и обсуждение. После триптической переварки катала-
зы, модифицированной по остаткам лизина, образовался осадок, кото-
рый удаляли центрифугированием (нерастворимая фракция, Н) . Рас-
творимую фракцию (P) предварительно разделяли гель-фильтровани-
1 Фракция P t
Рис. 5. Схема разделения фракции P триптического гидролизата малеил-каталазы. Рим-
ские и арабские цифры после операций гель-фильтрования и ВЭЖХ указывают номе-
ра пиков. Цифры против операции в/в электрофореза — число полученных фракций;
«о» — осадок, «н» — надосадочная жидкость. Подчеркнуты фракции, исследование ко-
торых далее не проводилось. Внизу — номера триптических пептидов, получаемых в
результате разделения
ем (рис. 1, а). Материал перзого пика (I)
рации. На рис. 1, б, показаны результаты
H в том же растворителе, но с добавкой 6
риал пика II после повторной операции,
пиков II—IV— после предварительного
гель-фильтрования фракции P и пиков I—
II фракции H подвергали дальнейшему раз-
делению гель-фильтрованием (рис. 2, 3 со-
ответственно). У всех полученных фракций
пептидов снимали защитные группы. В не-
которых случаях после снятия защитных
групп образовывались осадки (о) и надоса-
дочная жидкость (н), которые далее раз-
Рис. 6. Схема разделения фракции H триптическою
гидролизата малеил-каталазы. Все обозначения опи-
ганы в подписи к рис. .5
подвергали повторной опе-
гель-фильтрования фракции
M гуанидинхлорида. Мате-
деляли отдельно. Осадки из фракций Ρ1.ΙΙ.2.0, Ρ.ΙΙΙ.1—З.о и H.l.o раз-
деляли с помощью ВЭЖХ (рис. 4).
Таким образом, были получены 24 фракции, в дальнейшем раз-
деленные различными комбинациями в/в электрофореза и хроматогра-
фии на бумаге. Две из этих фракций предварительно обрабатывали
экстракцией. Полная схема разделения пептидов представлена на
рис. 5 и 6.
В результате всеми методами разделения были получены 210
фракций. Гомогенность их проверяли определением N-концевого остат-
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 2 7
Аминокислотный состав триптических пептидов малеил-каталазы
Аминокислота Tm 1 Tm 2 Tm 3 Tm 4 Tm 5 Tm 6 Tm 7 Tm 8 Tm 9 Tm 10
Lys 8,5(9) 6,7(7) 2,0(2) 1,0(1) 1,0(1)
His 4,2(4) 1,8(3) 0,6(1)
1,0(1)
Arg 1,7(2) 1,0(1) 1,0(1)
0,6(1)
1,0(1) 1,0(1) 1,0(1)
Asp 10,0(10) 7,8(8) 2,1(2) 1,2(1) 2,2(2) 2,0(2) 1,0(1) 1,8(2) 4,5(5)
Thr 4,3(5) 3,2(4) 0,7(1) 3,1(3) 0,8(1) 0,8(1) 0,9(1) 0,9(1)
Ser 6,7(8) 7,5(8) 1,8(2) 3,3(4) 3,6(4) 2,6(3)
Glu 8,8(9) 7,1(7) 1,1(1) 2,9(3) 1,7(2) 2,0(2) 1,0(1) 1,1(1) 9,2(9)
Pro 9,0(9) 5,8(6) 2,0(2)
1,7(2)
1,0(1) 1,0(1) 1,9(2)
Gly 9,3(9) 7,9(8) 1,2(1) 1,7(2) 3,7(4) 1,9(2) 1,2(1) 1,2.(1) 3,0(3)
Ala
1 /9 Γ ν ς
12,2(12) 12,1(12) 1,0(1) 1,0(1) 3,5(4)
1,9(2)
0,8(1) 1,0(1)
1,2.(1)
1,2(1)
Val 10,0(11) 6,8(8) 1,1(1) 0,9(1) 0,7(1) 1,9(2)
Met
1,1(1) 0,7(1)
0,6(1)
lie 5,3(6) 3,6(4) 0,8(1) 2,0(2)
Leu 9,0(10) 3,5(7) 0,8(1) 3,1(3) 2,0(2) 0,7(1) 3,2(3)
Tyr 1,7(2) 2,2(2) 0,9(1)
0,8(1)
0,8(1)
2,0(2)
0,7(1)
Phe 5,0(5) 4,2(4) 1,8(2) 0,8(1) 1,1(1) 1,7(2) 2,6(3)
Trp
Val
+ (1)
0,8(1)
+ (1)
N-конец Val Val Gly Gly GIy Gly Phe Gly Leu Phe
Всего 111 89 13 14 28 13 5 8 7 38
Аминокислота Tm И Tm 12 Tm 13 Tm 14 Tm 15 Tm 16 Tm 17 Tm 18 Tm 19 Tm 20 Tm 21
Lys 2,0(2)
His
2,0(2)
Arg 1,0(1)
Asp 2,0(2) 1,9(2) 3,6(4)
Thr
2,0(2)
2,0(2)
Ser 0,7(1) 0,5(1) 2,5(3)
Glu 2,1(2) 2,2(2) 1,2(1)
Pro
2,1(2)
2,0(2)
Gly 1,2(1) 1,3(1) 0,8(1)
Ala 0,9(1) 1,0(1) 2,2(2)
l/2Cys
Val 1,0(1) 1,0(1)
Met
lie 1,0(1)
Leu 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1)
Tyr
1,0(1)
0,4(1) 0,7(1)
Phe 0,6(1) 0,8(1)
Trp + ( D + ί 1 ) ^ N-конец Asn Tyr Gly
Всего 11 12 21
1,0(1) 1,0(1) 0,9(1) 0,9(1) 1,1(1)
1,0(1) 1,0(1)
1,2(1) 3,1(3) 0,9(1)
0,8(1) 0,9(1)
0,7(1)
5,2(5) 5,0(5) 1,2(1) 2,2(2)
1,0(1) 1,0(1)
1,2(1) 2 ,2 (2 )
1,2(2) 1,4(2) 1,0(1)
0,5(1) 0,7(1)
1,3(2) 1,5(2) 1,1(1)
1,7(2) 4,0(4)
0,8(1) 2,5(3) 1,1(1)
Phe Phe Phe Gln
16 26 8 5
0,9(1) 1,0(1) 0,9(1) 1,0(1) 1,0(1)
1,0(1)
0,8(1)
1,0(1) 1,8(2)
1,0(1) 1,0(1)
1,0(1)
1,0(1)
1,4(2)
1,0(1) 1,1(1)
0,9(1)
Lys Thr Ser
5 8 5
Glu
2
Аминокислота Tm 22 Tm 23 Tm 24 Tm 25 Tm 26 Tm 27 Tm 28 Tm 29 Tm 30 Tm 31 Tm 32
Lys 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1)
His 0,9(1) 0,6(1) 1,0(1)
Arg 1,0(1) 1,0(1) 2,0(2) 1,0(1) 2,0(2) 0,9(1) 1,0(1)
Asp 1,0(1) 2,0(2) 2,3(2) 1,1(1) 4,7(5) 3,1(3) 2,0(2) 1,0(1) 2,0(2)
Thr 1,0(1) 0,8(1) 1,0(1) 0,9(1) 0,8(1)
Ser 1,0(1) 0,8(1) 2,3(3) 0,7(1) 0,8(1) 0,6(1)
Glu
1,0(1)
1,0(1) 1,0(1) 10,2(10) 1,7(2) 1,2(1) 3,1(1) 3,8(4)
Pro 2,0(2) 1,9(2) 1,0(1) 3,0(3) 1,0(1) 2,0(2)
Gly 1,1(1) 1,8(2) 2,0(2) 2,8(3) 1,8(2) 3,7(4) 1,2(1) 3,2(3)
Ala 1,8(2) 1,2(1) 1,0(1) 1,0(1) 1.1(1) 1,0(1) 3,2(3) 1,7(2) 3,1(3)
l/2Cys
1.1(1)
Val 1,7(2) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1)
Met 0,8(1) 0,6(1) 0,8(1)
1,0(1)
0,9(1)
lie 1,0(1) 1,0(1) 1,7(2) 1,0(1) 0,8(1) 1,0(1)
Leu 1,2(1) 1,0(1) 4,2(4) 0,6(1) 2,0(2) 1,0(1)
Tyr 2·£ ( 1 ) 0,7(1)
Phe 0,9(1) 2.6(3) 0,8(1) 1,0(1) 0,9(1) 2,0(2)
Trp
0,9(1)
+ ( 1 ) + (1) + (1)
N-конец Gly l ie Asp Asp Phe Ala His Phe Gly Ala Asp
Всего 7 8 12 6 41 8 15 5 15 12 24
Продолжение таблицы
Аминокислота Tm 33 Tm 34 Tm 35 Tm 36 Tm 37 Tm 38 Tm 39 Tm 40 Tm 41 Tm 42
Lys 2,0(2) 0,9(1) 1,0(1) 1,0(1), 1,0(1) 0,9(1) 0,8(1)
His 0,8(1) 0,7(1) I 0,6(1)
2,0(2)
0,6(1)
Arg 2,0(2) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 2,0(2) 1,2(1)
Asp 2,1(2) 1,1(1) 1,2(1) 1,8(2) 1,9(2) 3,0(3) 3,1(3) 6,6(7)
Thr 2,8(3) 0,8(1) 0,9(1) 0,8(1)
Ser 3,4(4) 0,6(1) 2,6(3) 0,7(1) 2,6(3)
0,8(1)
Glu 1,9(2) 3,8(4) 1,0(1) 1,0(1)
1,0(1)
2,9(3) 3,8(4) 2,9(3)
Pro 0,9(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 2,7(3)
Gly 4,1(4) 0,8(1) 0,7(1) 1,2(1) 1,9(2) 0,9(1) 2,3(2)
Ala 4,0(4) 0,8(1) 0,8(1) 3,0(3) 1,8(2)
l /2Cys 0,3(1)
1,8(2)
Val 0,6(1) 2,8(3) 1,0(1) 2,3(3) 3,0(3) 3,2(4)
Met
0,6(1)
1,2(2) 0,8(1)
lie 1,2(2) 2,5(3) 1,2(2) 4,6(5)
Leu 3,0(3) 1,9(2) 2,0(2) 2,0(2) 2,6(3) 2,0(2)
Tyr 0,9(1) 0,6(1)
Phe 2,1(2) 2,3(2) 0,7(1) 1,8(2) 3,0(3) 3,0(3) 3,9(4)
Trp + (D +(D
Phe
+ (1) + (D
N-конец Gly Gln Phe Val Gly Phe Leu Leu Phe
Всего 29 19 13 4 8 10 26 31 39
1Д(1)
1,1(1)
2Д (2)
1,0(1)
0,9(1)
А
б
Аминокислота Tm 43 Tm 44 Tm 45 Tm 46 Tm 47 Tm 48 Tm 49 Tm 50 Tm 51 Tm 52-f-Tm 53
Lys 14,5
His 0,9(1) 0,8(1) 0,8(1) 1,4
Arg 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 1,0(1) 2,3
Asp 0,9(1) 0,8(1) 4,0(4) 2,0(2) 1,0(1) 1,8(2) 13,0
Thr 0,7(1) 1,7(2) 0,8(1) 0,8(1) 6,2
Ser 0,7(1) 0,7(1)
0,8(1)
0,7(1) 3,8
Glu 2,2(2) 1,2(1) 15,3
Pro 2,2
Gly 0,9(1) 0,9(1) 9,0
Ala 1,2(1) 2,1(2) 1,2(1) 2,1(2) 1,1(1) 7,8
l/2Cys
1,1(1) 1,0(1) Val 1,0(1) 1,1(1) 1,0(1) 5,3
Met 2,0
lie 1,8(2) 1,7
Leu 1,1(1) 3,2(4) 3,2(3) 7,6
Tyr 1,0(1) 1,2
Phe 0,9(1) 1,0(1) 3,0(3) 0,8(1) 1,0(1) 0,9(1) 1,0(1) 6,2
Trp +
N-конец Phe Asp Ale Asn Gly Phe Thr Ala Leu Leu, 'Ait
Всего 4 8 5 9 19 3 3 4 11
* Состав выражен в моль/%.
ка и аминокислотным анализом. В итоге выделен 51 пептид и одна
фракция, содержащая два пептида (таблица). 51 пептид содержит 850
остатков аминокислот. По данным рентгеноструктурного анализа, ката-
лаза гриба P. vitale насчитывает 670 остатков [ И ] . Ясно, что среди
полученных пептидов имеются пептиды с перекрывающимися последо-
вательностями.
S u m m a r y . 51 peptides containing 850 amino acid residues were isolated from
P. vitale male-catalase tryptic hydrolizate by gel-filtration, extraction, HPLC, paper
highe-voltage electrophoresis and chromatography.
ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 2 7
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Козлов Э. А., Кириленко M. Т., Левитина Т. Л. и др. Триптические пептиды катала-
зы гриба Penicillium vitale. 1. Разделение и аминокислотный состав растворимых
пептидов//Биополимеры и клетка.— 1987.— 3, № 5.— С. 240—245.
2. Кириленко М. Т., Левитина Т. Л., Гудкова Л. В. и др. Триптические пептиды ката-
лазы гриба PenicilUum vitale. 2. Разделение и аминокислотный состав нераствори-
мых пептидов / / Т а м же.— № 6.— С. 318—324.
3'. Гусак Н. M., Левитина T. Л., Атепалихина С. А. и др. Триптические пептиды катала-
зы гриба Penicillium vitale. 3. Строение некоторых пептидов//Там же.— 1989.— 5,
№ 1.— С. 45—51.
4. Козлов Э. АГудкова Л. В., Левитина Т. Л. и др. Дополнительное исследование
триптических пептидов каталазы гриба Penicillium vitale // Там же.— 1993.— 9,
№ 1.—С. 22—25.
5. Левитина Т. ЛГусак Н. M., Роднин Н. В. и.др. Бромциановые фрагменты катала-
зы гриба Penicillium vitale // Там же.— 1989.— 5, № 5.— С. 55—64.
6. Гудкова Л. В., Кириленко М. Т., Левитина Т. JI., Козлов Э. А. Исследование субъе-
диничной структуры каталазы гриба Penicillium vitale / / Укр. биохим. журн.—
1985.— 57, No 4.— С. 29—33.
7. Butler В. J. G., Hartley В. S. Maleylation of amino groups // Meth. Enzymol—1972.—
25.—P. 101—202.
8. Кавсан В. M., Мороз Л. В., Серебряный С. Б. Приспособление для горизонтального
электрофореза на бумаге упрощенной конструкции//Укр. биохим. журн.— 1968.—
40, № 1.— С. 104—106.
9. Gray W. R. Sequence degradation plus dansi lat ion/ /Meth. Enzymol.— 1967.— 11.—
P. 469—475.
10. Козлов Э. Α., Левитина Т. Л., Кацман М. С. и др. Триптические фрагменты малеили-
рованного белка тел включений вируса ядерного полиэдроза тутового шелкопряда.
II. Аминокислотная последовательность фрагментов/ /Биоорг. химия.— 1978.— 4,
No. 8:— С. 1036—1047.
11. Vainshtein В. К., Melik-Adamyan W. R., Barynin V .V. et al. Three-dimensional stru-
cture of catalase from Penicillium vitale of 2 A resolut ion/ /J . Мої. Biol.— 1986.— 188,
N 1.—P. 49—61.
Ин-т молекуляр. биологии и генетики АН Украины, Киев Получено 24.07.92
Ин-т биохимии им. А. В. Палладина АН Украины, Киев
8 ISSN 0233-7657. БИОПОЛИМЕРЫ И КЛЕТКА. 1993. Т. 9. № 2 7
|