Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis

Изучены основные характеристики ряда новых штаммов В. thuringiensis, выделенных на территории Украины и проявляющих токсичность по отношению к Lepidoptera и Coleoptera (личинкам колорадского жука). Определен их плазмидный составу а также молекулярные массы кристаллических инсектицидных белков, про...

Повний опис

Збережено в:

Бібліографічні деталі
Дата:	1999
Автори:	Исакова, И.А., Рымарь, С.Е., Кузнецова, Л.Н., Кордюм, В.А.
Формат:	Стаття
Мова:	Russian
Опубліковано:	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України 1999
Назва видання:	Биополимеры и клетка
Теми:	Генно-инженерная биотехнология
Онлайн доступ:	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156328
Теги:	Додати тег Немає тегів, Будьте першим, хто поставить тег для цього запису!
Назва журналу:	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
Цитувати:	Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis / И.А. Исакова, С.Е. Рымарь, Л.Н. Кузнецова, В.А. Кордюм // Биополимеры и клетка. — 1999. — Т. 15, № 2. — С. 163-167. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.

Репозитарії

Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine

id	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-156328
record_format	dspace
spelling	nasplib_isofts_kiev_ua-123456789-1563282025-02-23T19:15:34Z Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis Порівняльний аналіз спектра крісталічних білків та плазмід ряду нових штамів Bacillus thuringinsis Comparative analysis of the spectrum of crystal proteins and Bacillus thuringiensis of new plasmids strains Исакова, И.А. Рымарь, С.Е. Кузнецова, Л.Н. Кордюм, В.А. Генно-инженерная биотехнология Изучены основные характеристики ряда новых штаммов В. thuringiensis, выделенных на территории Украины и проявляющих токсичность по отношению к Lepidoptera и Coleoptera (личинкам колорадского жука). Определен их плазмидный составу а также молекулярные массы кристаллических инсектицидных белков, продуцируемых этими штаммами во время спекуляции. Вивчено основні характеристики ряду нових штамів В. thuringieasis, виділених на території України, які проявляють токсичність по відношенню до Lepidoptera та Coleoptera (личинкам колорадського жука). Визначено їхній плазмідний склад, а також мопекулярні маси кристалічних інсектицидних білків, що продукуються цими штамами під час споруляції The spectrum of insecticidal crystal proteins produced by 9 new B. thuringiensis strains isolated in Ukraine was studied. These strains demonstrated high toxicity to Lepidoptera and lower toxicity to Coleoptera (Colorado potato beettle larvae) in biological tests. It was shown that 5 strains produce high molecular weight proteins (137–164 kD), 3 strains produce 76.5 kD proteins, and one produce two proteins (96.5 kD and 77 kD). All the studied strains contain the spectrum of plasmids of both low molecular weight (less than 10 MD) and high molecular weight (more than 30 MD). The strains producing crystal proteins of similar molecular weight differ by plasmid composition. 1999 Article Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis / И.А. Исакова, С.Е. Рымарь, Л.Н. Кузнецова, В.А. Кордюм // Биополимеры и клетка. — 1999. — Т. 15, № 2. — С. 163-167. — Бібліогр.: 13 назв. — рос. 0233-7657 DOI: http://dx.doi.org/10.7124/bc.000515 https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156328 577.212 ru Биополимеры и клетка application/pdf Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
institution	Digital Library of Periodicals of National Academy of Sciences of Ukraine
collection	DSpace DC
language	Russian
topic	Генно-инженерная биотехнология Генно-инженерная биотехнология
spellingShingle	Генно-инженерная биотехнология Генно-инженерная биотехнология Исакова, И.А. Рымарь, С.Е. Кузнецова, Л.Н. Кордюм, В.А. Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis Биополимеры и клетка
description	Изучены основные характеристики ряда новых штаммов В. thuringiensis, выделенных на территории Украины и проявляющих токсичность по отношению к Lepidoptera и Coleoptera (личинкам колорадского жука). Определен их плазмидный составу а также молекулярные массы кристаллических инсектицидных белков, продуцируемых этими штаммами во время спекуляции.
format	Article
author	Исакова, И.А. Рымарь, С.Е. Кузнецова, Л.Н. Кордюм, В.А.
author_facet	Исакова, И.А. Рымарь, С.Е. Кузнецова, Л.Н. Кордюм, В.А.
author_sort	Исакова, И.А.
title	Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis
title_short	Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis
title_full	Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis
title_fullStr	Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis
title_full_unstemmed	Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis
title_sort	сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов bacillus thuringiensis
publisher	Інститут молекулярної біології і генетики НАН України
publishDate	1999
topic_facet	Генно-инженерная биотехнология
url	https://nasplib.isofts.kiev.ua/handle/123456789/156328
citation_txt	Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis / И.А. Исакова, С.Е. Рымарь, Л.Н. Кузнецова, В.А. Кордюм // Биополимеры и клетка. — 1999. — Т. 15, № 2. — С. 163-167. — Бібліогр.: 13 назв. — рос.
series	Биополимеры и клетка
work_keys_str_mv	AT isakovaia sravnitelʹnyjanalizspektrakristalličeskihbelkoviplazmidrâdanovyhštammovbacillusthuringiensis AT rymarʹse sravnitelʹnyjanalizspektrakristalličeskihbelkoviplazmidrâdanovyhštammovbacillusthuringiensis AT kuznecovaln sravnitelʹnyjanalizspektrakristalličeskihbelkoviplazmidrâdanovyhštammovbacillusthuringiensis AT kordûmva sravnitelʹnyjanalizspektrakristalličeskihbelkoviplazmidrâdanovyhštammovbacillusthuringiensis AT isakovaia porívnâlʹnijanalízspektrakrístalíčnihbílkívtaplazmídrâdunovihštamívbacillusthuringinsis AT rymarʹse porívnâlʹnijanalízspektrakrístalíčnihbílkívtaplazmídrâdunovihštamívbacillusthuringinsis AT kuznecovaln porívnâlʹnijanalízspektrakrístalíčnihbílkívtaplazmídrâdunovihštamívbacillusthuringinsis AT kordûmva porívnâlʹnijanalízspektrakrístalíčnihbílkívtaplazmídrâdunovihštamívbacillusthuringinsis AT isakovaia comparativeanalysisofthespectrumofcrystalproteinsandbacillusthuringiensisofnewplasmidsstrains AT rymarʹse comparativeanalysisofthespectrumofcrystalproteinsandbacillusthuringiensisofnewplasmidsstrains AT kuznecovaln comparativeanalysisofthespectrumofcrystalproteinsandbacillusthuringiensisofnewplasmidsstrains AT kordûmva comparativeanalysisofthespectrumofcrystalproteinsandbacillusthuringiensisofnewplasmidsstrains
first_indexed	2025-11-24T15:18:52Z
last_indexed	2025-11-24T15:18:52Z
_version_	1849685476220338176
fulltext	ISSN 0233-7657. Биополимеры и «летка. 1999. Т. 15. № 2 ГЕНОИНЖЕНЕРНАЯ БИОТЕХНОЛОГИЯ Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis И. А. Исакова, С. Е. Рымарь, JI. Н. Кузнецова1, В. А. Кордюм Институт молекулярной биологии и генетики HAH Украины Ул. Академика Заболотного, 150, Киев, 252143, Украина Крымский филиал отдела почвенной микробиологии Института сельскохозяйственной микробиологии AAII Украины Ул. Карла Маркса, 107, Симферополь, 334080, Украина Изучены основные характеристики ряда новых штаммов В. thuringiensis, выделенных на террито- рии Украины и проявляющих токсичность по отношению к Lepidoptera и Coleoptera (личинкам колорадского жука). Определен их плазмидный состав, а также молекулярные массы кристалли- ческих инсектицидных белков, продуцируемых этими штаммами во время спопуляции. Введение. Bacillus thuringiensis, спорообразующий почвенный микроорганизм, наиболее известен своей способностью продуцировать кристалличе- ские включения, состоящие из белков, которые называются Cry белками (кристаллическими бел- ками, или дельта-ендотоксинами). Эти белки обла- дают токсическими свойствами по отношению к различным насекомым, являющимся либо вредите- лями сельскохозяйственных культур, либо перенос- чиками некоторых заболеваний (малярия, тропиче- ская лихорадка и др.) [1, 2]. Обнаружены штаммы В. thuringiensis, продуцирующие белки, токсичные для нематод [3 ]. Преимущества кристаллических белков В. thuringiensis заключается в том,- что они специфически действуют на определенных насеко- мых, нетоксичны для позвоночных, не представля- ют опасности для окружающей среды. Эти свойства сделали Cry белки В. thuringiensis реальной альтер- нативой химическим инсектицидам, и использова- ние биопрепаратов на основе В. thuringiensis в качестве биоинсектицида возрастает. Применение генетических и геноинженерных методов исследования В. thuringiensis стало новым этапом в борьбе с вредными насекомыми, в частно- сти, появилась возможность обойти проблемы, свя- © И. А. ИСАКОВА, с . В. РЫМАРЬ, Л. Н. КУЗНЕЦОВА, В А. КОРДЮМ, 1990 занные с быстрой инактивацией кристаллических белков под влиянием ультрафиолета, а также с недоступностью препаратов на основе В. thurin- giensis для насекомых, повреждающих корневую систему и внутренние части растений. Эти пробле- мы решаются за счет переноса генов В. thurin- giensis, отвечающих за синтез Cry белков, в геном других организмов (вирусов, бактерий, растений) [4—6]. В связи с этим во всем мире интенсивно проводятся исследования, связанные с поиском и изучением новых изолятов В. thuringiensis, чтобы расширить круг генов Cry разной специфичности, которые можно использовать для борьбы с насеко- мыми-вредителями. Помимо этого, наличие широ- кого выбора изученных Cry генов В. thuringiensis поможет в решении проблемы устойчивости вреди- телей к Cry белкам В. thuringiensis, которая, хотя и намного медленнее, чем к химическим пестици- дам, все же возникает. Цель данной работы состояла в изучении ос- новных характеристик (спектр продуцируемых белков и плазмидный состав) ряда новых штаммов В. thuringiensis, выделенных на территории Украи- ны, которые являются важными при оценке перс- пективности этих штаммов использования в био- технологии В. thuringiensis. Материалы и методы. Бактериальные штам- мы В. thuringiensis и условияих их выращивания. В 163 ИСАКОВА И. А. И ДР. работе использовали девять штаммов В. thurin- giensis, выделенных на территории Украины (Крымский филиал отдела почвенной микробиоло- гии Института сельскохозяйственной микробиоло- гии AAH Украины, Симферополь) и отобранных по признаку двойной токсичности: высокой — к Lepi- doptera и более низкой — к Coleoptera (личинкам колорадского жука). Для получения кристалличе- ских белков культуры В. thuringiensis выращивали в среде С2 [7 ], содержащей 1 % глюкозы, 0,2 % пептона, 0,5 % казаминокислот («Difco», США), 0,2 % дрожжевого экстракта, 15 мМ (NH4)2SO4, 23 мМ KH2PO4, 27 мМ K2HPO4, 1 мМ MgSO4 χ 7Н20, 0,6 мМ CaCl2, 0,25 мМ MnCl2, 0,017 мМ ZnSO4 χ χ 7Н20, 0,017 мМ CuSO4 х 5Н20, 0,002 мМ FeSO4 χ χ 7Н20. Культуры В. thuringiensis выращивали в условиях аэрации при 30 °С до завершения споро- образования (как правило, 4 сут). Для выделения плазмидной ДНК клетки В. thuringiensis выращивали в условиях аэрации в течение ночи на среде, содержащей 0,75 % пепто- на, 1 % глюкозы; 10 мМ трис-HCl, рН 7,6. Анализ кристаллических белков. Споры и кри- сталлы собирали центрифугированием, дважды от- мывали 1 M NaCl и дважды — стерильной деиони- зованной водой. Осадки ресуспендировали, концен- трируя в 25 раз, в стерильной деионизованной воде, содержащей 1 мМ PMSF (фенилметилсульфо- нилфлюорид), разливали по 0,025—0,050 мл и хранили при -70 °С. Кристаллические белки для электрофореза го- товили следующим образом [8]: порцию (0,010— 0,015 мл) препарата, содержащего споры и кри- сталлы, ресуспендировали в двукратном буфере для нанесения образцов (0,125 M трис-HCl, рН 6,8, 5 % SDS, 5 % 2-меркаптоэтанола, 10 % сахарозы, 0,005 % бромфенолового синего), кипятили в тече- ние 10 мин на водяной бане, центрифугировали при 14 000 об/мин (10 мин), после чего образцы анализировали электрофорезом в 10 %-м ПААГ- SDS по Лэммли [9 ]. Окрашивание геля бриллиан- товым синим R-250 также проводили по Лэммли. Молекулярную массу белков определяли по калибровочным графикам, отражающим зависи- мость логарифма молекулярной массы маркерных белков (наборы HWM и LWM фирмы «Pharmacia», Швеция) от их относительной подвижности. Изучение динамики синтеза кристаллических белков В. thuringiensis. Культуры В. thuringiensis выращивали в среде С2 [7 ] в условиях аэрации при 30 °С. Через определенные промежутки времени (6 ч, 1 сут, 3 сут) отбирали равные порции бакте- риальных культур. Белки готовили и изучали в 10 % ΠΑΑΓ-SDS, как описано выше. Выделение плазмидной ДНК В. thuringiensis. Клетки В. thuringiensis, выращенные в течение ночи в условиях аэрации при 30 °С, собирали центрифугированием, дважды отмывали ТЕ-буфе- ром (50 мМ трис-HCl, рН 8,0, 20 мМ ЭДТА). Клетки лизировали инкубацией с лизоцимом (10 мг/мл) в течение 20 мин при 37 °С, после чего их обрабатывали проназой [10] (0,5 мг/мл) в течение 30 мин при 34 °С в присутствии 1 % SDS. Далее ДНК выделяли щелочным методом \|11 ]. Плазмиды В. thuringiensis изучали методом электрофореза в 0,7 %-м геле агарозы в ТАЕ-бу- фере (0,04 M трис-ацетат, 0,002 M ЭДТА) с последующим окрашиванием геля бромистым эти- дием и визуализацией в ультрафиолетовом свете. Результаты и обсуждение. Изучение кристал- лических белков В. thuringiensis. Штаммы В thurin- giensis, выделенные на территории Украины, были отобраны по наличию токсичности их кристалличе- ских белков как к Lepidoptera, так и к личинкам колорадского жука. Белки, продуцируемые этими штаммами во время споруляции, были изучены методом электрофореза в 10 %-м ПААГ (рис. 1). Как видно, пять штаммов из девяти продуцируют кристаллические белки с молекулярной массой вы- ше 130 к Да. Штаммы В. thuringiensis 85 и 888 продуцируют два высокомолекулярных белка с близкой молекулярной массой — 137 и 146 кДа (таблица). Три штамма В. thuringiensis 014, 836, и 021 продуцируют белки с молекулярной массой 76,5 кДа. Однако В. thuringiensis 014 является более эффективным продуцентом этого белка, тог- да как эффективность синтеза такого белка В. thuringiensis 836 и 021 на всех использованных Молекулярная масса кристаллических белков изученных штаммов В. thuringiensis Молекулярная масса, кДя 820 164,0±4; 18.0+2 949 164,0±4; 18,0±2 834 144,5±4 85 146,0±4; 137,0±4; 18,0+2 888 146,0±4; 137,0+4; 18,0+2 014 76,5±2; 18,0±2 076 96,5+2; 77,0±2 836 76,5±2 021 76,5±2 164 Рис. 2. Динамика синтеза кри- сталлических белков различными штаммами В. thuringiensis: S, 6, 10, 13 — 6 ч культура В. I. 014, В. t. 834, В. t. 949. В. t. 820 соответственно; 2, 5. 9. 12 — су- точная культура В. t. 014, В. t. 834, В. t." 949. В. t 820. /. 4, 8, I l — 3-сут культура В. I. 014, В t. 834. В. t. 949. В. 1. 820 АНАЛИЗ СПЕКТРА БЕЛКОВ И ПЛАЯМИД ШТАММОВ В THlIRlNOrKNSIS Рис. I - Анализ кристаллических белков В. thuringietisis методом электрофореза в 1С) %-м полиакриламидном геле: а — В. t. 014 ( /); В. t. 076 (2); БС'А и его димер как маркеры молекулярной массы (J); В. t. 949 <4); В. t. 820 (J); 834 (б), б — маркеры молекулярной массы: фосфори- лаза В (94 кДа), ЬС'А (67 кДа), овальбу- мин (43 кДа) ( / ); В. t 85 (2); В. t. 836 (J); В. t. 021 (4)\ В. !. 888 (5) средах невелика. Кроме высокомолекулярных бел- ков, ряд штаммов В. thuringiensis 820, 949, 014, 85, 888) продуцируют низкомолекулярный белок (при- близительно 18 кДа). Все описанные белки являют- ся кристаллическими, продуцируются во время спорообразования и не обнаруживаются в вегета- тивных культурах (рис. 2). Плазмиды новых штаммов В. thuringiensis. Известно, что практически все изоляты содержат сложный комплекс экстрахромосомных элементов как кольцевых, так и линейных [12\|. Выделение полного набора плазмидных ДНК В. thuringiensis представляет собой отдельную задачу, поскольку, кроме обычных трудностей, связанных с выделени- ем ДНК высокомолекулярных плазмид, существует зависимость между условиями роста культуры, со- 1 6 5 ИСАКОВА И. А И ДР ставом срсд, в которой она выращивается, стадией роста и тем, ДНК каких плазмид выделяется. На рис. 3 представлены результаты электрофореза в 0,7 %-м геле агарозы суммарного препарата ДНК различных штаммов В. thuringiensis, полученных из вегетативных бактериальных клеток, выращен- ных на специальной среде для выделения ДНК. Эти условия, как правило, приводили к эффектив- ному выделению большого набора плазмидных ДНК. Как видно, все изученные штаммы В. thurin- giensis также содержат сложный комплекс экстра- хромосомных элементов как высокомолекулярных (более 30 МДа), так и низкомолекулярных (менее 10 МДа). Один из штаммов — В. thuringiensis 834 —имеет отличающийся от других набор плаз- мид. Он не содержит низкомолекулярных плазмид, чья подвижность в геле ниже, чем подвижность сохранившейся после щелочной обработки хромо- сомной ДНК (приблизительно 30 МДа). Кроме этого, он содержит две пары высокомоле кулярных плазмид с близкой молекулярноймассой внутри каждой пары. Все штаммы В. thuringiensis содержат несколько плазмид с молекулярной массой выше 63 МДа (F' фактор Escherichia coli). Наиболее высокомолекулярные плазмиды обладают меньшей подвижностью, чем ДНК pTiC58 Agrobacterium tumefaciens (рис. 3), т. е. имеют молекулярную массу больше 120 МДа. По плазмидному составу наиболее близки В. thuringiensis 836 и 021. Только эти два штамма содержат плазмиды с молекуляр- ной массой меньше 1,7 МДа. Выделяемые препара- ты плазмидной ДНК изученных штаммов В. thurin- giensis представляют собой достаточно сложный набор ДНК высокомолекулярных плазмид, на ко- торых, как известно (131, чаще всего локализованы гены, ответственные за синтез кристаллических инсектицидных белков. Практически все ДНК с подвижностью более высокой, чем хромосомная ДНК, посте окрашивания бромистым этидием и облучением ультрафиолетовым светом демонстри- руют расщепление на 2—3 полосы. Это свидетель- ствует о том, что они представляют собой плазмид- ные ДНК (ссс-формы). Таким образом, ряд новых штаммов В. thurin- giensis, выделенных на территории Украины и де- монстрирующих токсичность к представителям двух отрядов насекомых — Lepidoptera и Coleop- tera, изучен по спектру продуцируемых ими кри- сталлических белков и по набору плазмидных ДНК. Дальнейшее исследование специфичности ге- нов, кодирующих кристаллические белки, и опре- 1 2 3 4 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Рис. 3. Электрофорез в 0,7 %-м геле агарозы плазмидных ДНК различных штаммов Н. thuringiensis: а — pTiC58 (120 МДа) /); В. t. 834 (2)\ В. t. 85 (3); B t- 888 (4): 6— В. I. 820 (Л; В. 1. 949 (2), В. t. 834 (J): ДНК F фактора Е. coli <63 МДа) (•*); В. t. 836 (.5); рАр 2034 К. coli (6); В. t. 014 (7); В. t. 021 (Й); В. t. 076 (9) 1 6 6 АНАЛИЗ СПЕКТРА БЕЛКОВ И ПЛАЗМИД ШТАММОВ В. THURINGIENSIS деление их локализации позволит выбрать наибо- лее перспективные штаммы В. thuringiensis для дальнейшего их использования при биологическом контроле насекомых. І. А. Ісакова, С Ю. Римар, Л. М. Кузнецова, В. А. Кордюм Порівняльний аналіз спектра крісталічних білків та плазмід ряду нових штамів Bacillus thuringinsis Резюме Вивчено основні характеристики ряду нових штамів В. thurin- giensis, виділених на території України, які проявляють ток- сичніть по відношенню до Lepidoptera та Coleoptera (личинкам холорадського жука). Визначено їхній плазмідний склад, а також молекулярні маси кристалічних інсектицидних білків, що продукуються цими штамами під час споруляції. I. A Jsakova, S. Е. Rimar, L. N. Kuznetsova, V. A. Kordyum Comparative analysis of the spectrum of crystal proteins and Bacillus thuringiensis of new pilasmids strains Summary The spectrum of insecticidal crystal proteins produced by 9 new B. thuringiensis strains isolated in Ukraine was studied. These strains demonstrated high toxicity to Lepidoptera and lower toxicity to Coleoptera (Colorado potato beettle larvae) in biological tests. It was shown that 5 strains produce high molecular weight proteins (137—164 kD), 3 strains produce 76.5 kD proteins, and one produce two proteins (96.5 kD and 77 kD). All the studied strains contain the spectrum of plasmids of both low molecular weight (less than 10 MD) and high molecular weight (more than 30 MD). The strains producing crystal proteins of similar molecular weight differ by plasmid composition. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Hofte H., Whiteley Η. R. Insecticidal crystal proteins of Bacillus thuringiensis Il Microbiol. Rev.—1989.—53.— P. 242—255. 2. Schnepf E., Crickmore N. J., Van Rie, Lereclus D., Baum J., Feitelson J., Zeigler D. R., Dean D. II. Bacillus thuringiensis and its pesticidal crystal proteins / / Microbiol. Мої. Biol. Rev.—1998.—62, N 3.—P. 775—806. 3. Feitelson J. S., Payne J., Kim L Bacillus thuringiensis, insects and beyond / / Bio/Technology.—1992,—10—P. 271—275. 4. Obukovicz M'. G., Perlak F. J., Kusano-Kretzmer K., Mayer E. /., Watrub L S. Integration of the delta-endotoxin gene of Bacillus thuringiensis Into the chromosome of the root-coloni- zing strains; of pseudomeliads using Tn5 I l Gene.—1986.— 45.—P. 3 2 7 - 3 3 1 . 5. Iuimpel J. S., Canter G- L, Dimock M. S., Kelly J. L, Anderson J. /., Uratani В. B., Foulke J. S., Turner J. T. Integrative cloning, expression and stability of cry lA(c) gene from Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki in recombinant strain of Clavibacter xyli subsp. cynodonitis Il Appl. Envir. Microbiol. — 1994.—60.—P. 501 —508. 6. Estruch J. J., Carozzi N. B., Desai N., Duck N. B., Wwren G. W., Koziel H. G. Transgenic plants: an emerging approach to pest control / / Nat. Biotechnol.-1997 —15.—P. 137—141. 7. Malvar T., Gawron-Burke C., Baum J A. Overexpressioti of fif. thuringiensis H kti A, a histicline protein kinasa homology, bypasses early spomutation, that result in crylllA Il J. Bacteriol.-1994,—176, N 15.—P. 4742—4749. 8. Ixcadet M M., Chaufaux J., Ribier J., Lereclus D. Construc- tion of novel Bacillus thuringiensis strains with different insecticidal activities by transduction and transformation 11 Appl. Envir. Microbiol —1992.—58 —P. 840—849. 9. Іметтіі U. К. Cleavage of structural proteins during the assembly of head of bacteriophage T4 H Nature.—1970.— 227,—P. 680—685. 10. Zaenen I., N. van Iutrebeko, Teuchy H., van Montagu M., Schell J. Supercoiled circular DNA in crown-gall inducing Agrobacterium strains I / J. Мої. Biol.—1974.—86.—P. 109— 127. 11. Casse F., Boucher C., Julliot J. S., Michel M., Denarie J. Identification and characterization large plasmids in Rhizobium meliloti using agarose gel electrophoresis II J. Gen. Micro- biol.—1979.—113.—P. 229—242. 12. Carlson C. R-, Caugant D. A., Koisto A. B. Genotypic diversity among Bacillus cereus and Bacillus thuringiensis strains / / Appl. Environ. Microbiol.—1994.—60.— P. 1711J- 1725. 13. Kronstad J W., Schnept U. R., Whitely U. R. Diversity of localization for Bacillus thuringiensis crystal protein genes 11 J. Bacteriol —1983.—154.—P. 419—428. УДК 577.212 Поступила в редакцию 18.02.99 167

Сравнительный анализ спектра кристаллических белков и плазмид ряда новых штаммов Bacillus thuringiensis

Репозитарії

Схожі ресурси